كرات البوليسترين الدقيقة ذات النقاط الكمومية

I. Description of Quantum Dot Polystyrene Microspheres

Quantum dot polystyrene microspheres (HQD) are prepared by microemulsion polymerization of high-brightness CdSe/ZnS quantum dots and polystyrene. The surface of the microspheres is modified with carboxyl functional groups to facilitate antibody coupling. Amplifying the fluorescence signal of quantum dots through nanosphere coating can significantly improve the sensitivity of immune detection.

The fluorescent probe has the characteristics of stable fluorescence signal, excellent colloidal stability, and high biocompatibility, and is especially suitable for the development of fluorescent in vitro diagnostic reagents. . This product can also be used for blood flow measurement, biomarkers, in vivo imaging and calibration of flow cytometers.

Carboxylation-modified microbeads have a high density of free carboxylic acids on their surface, making them suitable for covalent coupling of proteins and other amine-containing biomolecules via water-soluble imine-based reagents such as carbodiimide (EDAC).

ثانيا. بيانات فيزيائية

1. المادة: كريات مجهرية من البوليسترين مطلية بنقاط كمومية
2. معامل الانكسار: 1.59@589 نانومتر، 25 درجة مئوية
3. الكثافة: 1.05 جم/سم3
4. الميزات: لون الفلورسنت

ثالثا. تعليمات التحليل

1. المحتوى الصلب: 1% (10 ملغ/مل)
2. حجم الجسيمات: 100 نانومتر
3. التوحيد: السيرة الذاتية <5%
4. الطول الموجي للانبعاثات: 610nm+10nm
5. الطول الموجي للإثارة: <580 نانومتر، يوصى بـ 365 نانومتر - 450 نانومتر
6. وسط التشتت: الماء منزوع الأيونات وكميات ضئيلة من الفاعل بالسطح
7. الاستقرار: سنتان من تاريخ المصنع

IV. Use of Quantum Dot Polystyrene Microspheres

إن سطح الكربوكسيل النانوي النقطي (HQD610-10) الخاص بشركتنا غني بمجموعات الكربوكسيل الوظيفية، والتي يمكن أن تقترن تساهميًا مع الجزيئات الحيوية المحتوية على الأمينات، مثل الأجسام المضادة والببتيدات والأحماض النووية، وما إلى ذلك. مجموعات الكربوكسيل الموجودة على سطح توجد الكرات المجهرية في المنشط 1- (تحت تأثير 3-ثنائي ميثيل أمينوبروبيل) -3-إيثيل كاربوديميد هيدروكلوريد (EDC)، فإنه يتفاعل مع المجموعات الأمينية لتكوين روابط أميد مستقرة، وبالتالي تثبيت الجزيئات الحيوية تساهميًا على سطح الكرات النانوية.

الاحتياطات اللازمة للأستخدام:

○1 يرجى التدوير وخلط QDNBs قبل الاستخدام. يعد وجود كمية صغيرة من الترسيب الناتج عن الراحة طويلة الأمد أمرًا طبيعيًا ولا يؤثر على استخدام المنتج.

○2 من أجل تحقيق تأثير اقتران أفضل، يجب أن يكون تركيز البروتين 0.5-4 مجم/مل، ويجب أن يكون تركيز الحمض النووي 20-100 ميكرومتر، ويجب ألا تكون هناك مجموعات أمينية حرة في المخزن المؤقت. على وجه الخصوص، لا يمكن استخدام المخازن المؤقتة لحمض تريس، والجليسين، وحمض الأسيتيك، وحامض الستريك.

المواد المطلوبة:

○ 1 كرة نانوية ذات نقطة كمومية (10 ملجم/مل).

○2 عازلة التفاعل (للتنشيط): الرقم الهيدروجيني 4-6

○3 المنشط: EDC · حمض الهيدروكلوريك.

○4 محلول مانع: 1-2% BSA أو الكازين.

○5 محلول حفظ (pH7.0-7.5): 20-100 ملي مولار من حمض البوريك أو تريس، 0.9% NaCl، 0.5-1% BSA، 0.09% NaN3.

مخطط اقتران المرجعية

○1 خذ حوالي 50 ميكرولتر من معلق QDNBs، وقم بتوزيعه في 450 ميكرولتر من المخزن المؤقت للتفاعل، ثم جهاز الطرد المركزي عند 12000-15000 دورة في الدقيقة لمدة 10-30 دقيقة، ثم قم بإزالة الطاف، وقم بتفريق QDNBs في المخزن المؤقت للتفاعل سعة 500 ميكرولتر.

○2 أضف 100-50 ميكرولتر من عامل الاقتران EDC (10 ملم)، واخلطه في درجة حرارة الغرفة (25-37 درجة)، واحضنه لمدة 0.5-1 ساعة.

○3 Centrifuge at 2000-15000rpm for 10-30min to remove excess coupling agent, etc., then disperse in 500μl reaction buffer, and disperse with ultrasound;

○4 ثم أضف حوالي 100 ميكروغرام من الجسم المضاد (يجب تحسين نسبة الجسم المضاد إلى الكرات المجهرية)، واخلطه في درجة حرارة الغرفة (25-37 درجة)، واحتضنه لمدة 0.5-1 ساعة.

○ 51 جهاز طرد مركزي بسرعة 2000-15000 دورة في الدقيقة لمدة 10-30 دقيقة لإزالة الأجسام المضادة الحرة، وما إلى ذلك؛

○6 أضف 500 ميكرولتر من محلول الحجب، ووزعه بالموجات فوق الصوتية (الطاقة 10-20%) لمدة 10 ثوانٍ تقريبًا، واخلطه في درجة حرارة الغرفة (25-37 درجة)، واحتضنه لمدة 0.5-1 ساعة.

○7 جهاز طرد مركزي، قم بإزالة محلول الحجب، ثم قم بتوزيعه في محلول حفظ سعة 200 ميكرولتر لاستخدامه لاحقًا.
هذا البروتوكول هو للإشارة فقط في المراحل الأولى من البحث. يُطلب من الباحثين تحسين الظروف التجريبية المحددة وفقًا لمشاريعهم الخاصة.