Nanoesferas de pontos quânticos

I. Descrição do produto
Microesferas de poliestireno de ponto quântico (HQD) são preparadas por polimerização por microemulsão de pontos quânticos de CdSe/ZnS de alto brilho e poliestireno. A superfície das microesferas é modificada com grupos funcionais carboxila para facilitar o acoplamento do anticorpo. Amplificar o sinal de fluorescência de pontos quânticos através do revestimento de nanoesferas pode melhorar significativamente a sensibilidade da detecção imunológica. A sonda fluorescente possui características de sinal de fluorescência estável, excelente estabilidade coloidal e alta biocompatibilidade, e é especialmente adequada para o desenvolvimento de reagentes fluorescentes de diagnóstico in vitro. . Este produto também pode ser usado para medição de fluxo sanguíneo, biomarcadores, imagens in vivo e calibração de citômetros de fluxo. As microesferas modificadas por carboxilação têm uma alta densidade de ácidos carboxílicos livres em sua superfície, tornando-as adequadas para o acoplamento covalente de proteínas e outras biomoléculas contendo amina através de reagentes à base de imina solúveis em água, como a carbodiimida (EDAC).
II. Dados físicos
1. Material: Pontos quânticos revestidos com microesferas de poliestireno
2. Índice de refração: 1,59 @ 589 nm, 25 ℃
3. Densidade: 1,05g/cm3
4. Características: Cor fluorescente
III. Instruções de análise
1. Conteúdo sólido: 1% (10mg/ml)
2. Tamanho de partícula: 100nm
3. Uniformidade: CV<5%
4. Comprimento de onda de emissão: 610nm+10nm
5. Comprimento de onda de excitação: <580nm, 365nm-450nm é recomendado
6. Meio de dispersão: água desionizada e vestígios de surfactante
7. Estabilidade: 2 anos a partir da data de fábrica
4. Uso de microesferas
A superfície das nanoesferas de pontos quânticos da nossa empresa (HQD610-10) é rica em grupos funcionais carboxila, que podem ser acoplados covalentemente a biomoléculas contendo aminoácidos, como anticorpos, peptídeos, ácidos nucléicos, etc. as microesferas estão no ativador 1- (sob a ação do cloridrato de 3-dimetilaminopropil) -3-etilcarbodiimida (EDC), ele reage com grupos amino para formar ligações amida estáveis, fixando assim covalentemente biomoléculas na superfície das nanoesferas.
Precauções para uso:
○1 Agite no vórtex e misture os QDNBs antes de usar. Uma pequena quantidade de precipitação causada por repouso prolongado é normal e não afeta o uso do produto.
○2 Para obter um melhor efeito de acoplamento, a concentração de proteína deve ser de 0,5-4mg/mL, a concentração de ácido nucleico deve ser de 20-100 μM e não deve haver grupos amino livres no tampão. Em particular, tampões Tris, glicina, ácido acético e ácido cítrico não podem ser usados.
materiais necessários:
○1 nanoesfera de ponto quântico (10mg/mL).
○2 Tampão de reação (para ativação): pH 4-6
○3 Ativador: EDC·HCl.
○4 Solução de bloqueio: 1-2% BSA ou caseína.
○5 Solução de preservação (pH 7,0-7,5): ácido bórico 20-100 mM ou Tris, 0,9% NaCl, 0,5-1% BSA, 0,09% NaN3.
Esquema de acoplamento de referência
○1 Pegue cerca de 50 μl de suspensão de QDNBs, disperse-a em 450 μl de tampão de reação, centrifugue a 12.000-15.000 rpm por 10-30 min, remova o sobrenadante e disperse QDNBs em 500 μl de tampão de reação.
○2 Adicione 100-50 μl de agente de acoplamento EDC (10mM), misture à temperatura ambiente (25-37 graus) e incube por 0,5-1 h.
○31 Centrifugar a 2.000-15.000 rpm por 10-30 minutos para remover o excesso de agente de acoplamento, etc., depois dispersar em 500 μl de tampão de reação e dispersar com ultrassom;
○4 Em seguida, adicione cerca de 100 μg de anticorpo (a proporção de anticorpo para microesferas precisa ser otimizada), misture à temperatura ambiente (25-37 graus) e incube por 0,5-1 h.
○51 Centrifugar a 2.000-15.000 rpm por 10-30 minutos para remover anticorpos livres, etc.;
○6 Adicione 500 μl de solução de bloqueio, disperse com ultrassom (potência 10-20%) por cerca de 10 segundos, misture à temperatura ambiente (25-37 graus) e incube por 0,5-1 hora.
○7 Centrifugar, remover a solução de bloqueio e dispersar em 200 μl de solução de preservação para uso posterior.
Este protocolo é para referência apenas nos estágios iniciais da pesquisa. Os pesquisadores são solicitados a otimizar as condições experimentais específicas de acordo com seus próprios projetos.