Никелевые магнитные бусины

1 Обзор продукта
Никелевые магнитные шарики SHBC сочетают в себе традиционные магнитные микросферы и никелевые хроматографические среды. Никелевые магнитные шарики — это новое поколение функциональных магнитных шариков, предназначенных и разработанных для быстрого разделения белков с гистидиновыми метками. Магнитные шарики основаны на агарозе, которая электрически нейтральна, гидрофильна и обладает хорошей биосовместимостью, что позволяет избежать неспецифической адсорбции белков из-за заряда или гидрофобности.
По сравнению с традиционными никелевыми хроматографическими средами, никелевые магнитные шарики используются для разделения и очистки белков с помощью гистидиновых меток. Нет необходимости проводить какие-либо операции с сырым белком (необходимо денатурировать тельца включения) и не требуется никакого оборудования для колоночной хроматографии. Он прост в эксплуатации и имеет лучшую экономическую эффективность.
2 особенности продукта
Низкая неспецифическая адсорбция
Хороший эффект очистки для проб небольшого объема
Простота проведения скрининговых экспериментов и высокая воспроизводимость
Легко увеличивать или уменьшать масштаб очистки белка
Высокая емкость загрузки белка и высокая чистота белка после очистки
3 Область применения
Изолировать или очищать белки с помощью гистидиновых меток
4 параметра продукта

5 Как использовать (можно настроить в соответствии с реальной ситуацией)
Магнитные шарики связываются с белками
Поместите необходимое количество магнитных шариков в центрифужную пробирку, трижды промойте их связывающим буфером и повторно диспергируйте с помощью связывающего буфера. Смешайте разрушенную и лизированную бактериальную жидкость с магнитными шариками и перемешивайте миксером в течение 30 минут.
Стирайте магнитные шарики
Через 30 минут поместите центрифужную пробирку на магнитный сепаратор, чтобы отделить магнитные шарики и удалить супернатант для обнаружения. Добавьте промывочный буфер к магнитным шарикам, переверните несколько раз, чтобы ресуспендировать магнитные шарики, отделите магнитным способом и выньте промывочный буфер для обнаружения.
Добавьте промывочный буфер, чтобы ресуспендировать магнитные шарики, и перенесите магнитные шарики в новую центрифужную пробирку (во избежание загрязнения белком). Магнитная сепарация, вынимаем и сливаем промывочный буфер.
Элюция целевого белка
Пользователи могут изменять объем элюирования, чтобы при необходимости регулировать концентрацию целевого белка. Добавьте буфер для элюирования, осторожно переверните центрифужную пробирку, чтобы суспендировать магнитные шарики, и соберите элюат в новую центрифужную пробирку, которая представляет собой очищенный целевой белок. Повторите несколько раз, чтобы обеспечить полное элюирование целевого белка.
Регенерация магнитных шариков
После трехкратного использования магнитных шариков емкость может значительно снизиться, и рекомендуется их регенерировать. Если вам необходимо регенерировать магнитные шарики, вы можете сделать следующее:
а) Диспергируют магнитные шарики в фосфатном буфере (20 мМ, pH 7,4), содержащем 0,1 М ЭДТА, встряхивают при комнатной температуре в течение 10 минут, удаляют надосадочную жидкость с помощью магнитной аспирации и повторяют один раз.
б) Промойте магнитные шарики несколько раз особо чистой водой, чтобы убедиться в отсутствии в растворе ЭДТА.
в) Промывают магнитные шарики раствором 0,5 М NaOH и 2 М NaCl, встряхивают при комнатной температуре в течение 5 минут, абсорбируют магнитом, отбрасывают надосадочную жидкость и промывают магнитные шарики водой высокой чистоты до тех пор, пока промывной раствор не станет нейтральным.
г) Используйте 0,1 М раствор NiSO4 для диспергирования магнитных шариков и встряхивайте при комнатной температуре в течение 10 минут. Удалить надосадочную жидкость с помощью магнитного отсасывания и несколько раз промыть магнитные шарики водой высокой чистоты, пока в растворе не исчезнут ионы Ni. Храните магнитные шарики в этаноле 20%.
6 вещей, на которые стоит обратить внимание
Магнитные бусины имеют высокую плотность и легко утонут, если их оставить на долгое время. Поэтому перед использованием хорошо встряхните, чтобы получить однородную суспензию магнитных шариков.
Приложение (Таблица допусков к растворителям)