Нанобусины с квантовыми точками

I. Описание продукта
Полистирольные микросферы с квантовыми точками (HQD) получают путем микроэмульсионной полимеризации высокоярких квантовых точек CdSe/ZnS и полистирола. Поверхность микросфер модифицирована карбоксильными функциональными группами для облегчения связывания антител. Усиление сигнала флуоресценции квантовых точек посредством наносферного покрытия может значительно повысить чувствительность иммунного обнаружения. Флуоресцентный зонд обладает характеристиками стабильного сигнала флуоресценции, превосходной коллоидной стабильностью и высокой биосовместимостью и особенно подходит для разработки флуоресцентных диагностических реагентов in vitro. . Этот продукт также можно использовать для измерения кровотока, определения биомаркеров, визуализации in vivo и калибровки проточных цитометров. Микрошарики, модифицированные карбоксилированием, имеют высокую плотность свободных карбоновых кислот на своей поверхности, что делает их пригодными для ковалентного связывания белков и других аминосодержащих биомолекул с помощью водорастворимых реагентов на основе имина, таких как карбодиимид (EDAC).
II. Физические данные
1. Материал: полистироловые микросферы, покрытые квантовыми точками.
2. Показатель преломления: 1,59 при 589 нм, 25 ℃.
3. Плотность: 1,05 г/см3.
4. Особенности: флуоресцентный цвет.
III. Инструкции по анализу
1. Твердое содержание: 1% (10 мг/мл).
2. Размер частиц: 100 нм.
3. Однородность: CV<5%
4. Длина волны излучения: 610 нм+10 нм.
5. Длина волны возбуждения: <580 нм, рекомендуется 365-450 нм.
6. Дисперсионная среда: деионизированная вода и следовые количества ПАВ.
7. Стабильность: 2 года с даты завода.
IV. Использование микросфер
Поверхность наносфер с квантовыми точками нашей компании (HQD610-10) богата карбоксильными функциональными группами, которые могут быть ковалентно связаны с аминосодержащими биомолекулами, такими как антитела, пептиды, нуклеиновые кислоты и т. д. Карбоксильные группы на поверхности микросферы находятся в активаторе 1-( Под действием 3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (ЭДК) он реагирует с аминогруппами с образованием устойчивых амидных связей, тем самым ковалентно закрепляя биомолекулы на поверхности наносфер.
Меры предосторожности при использовании:
○1 Перед использованием перемешайте и перемешайте QDNB. Небольшое количество осадков, вызванное длительным отдыхом, является нормальным и не влияет на использование продукта.
○2 Для достижения лучшего эффекта связывания концентрация белка должна составлять 0,5–4 мг/мл, концентрация нуклеиновой кислоты — 20–100 мкМ, а в буфере не должно быть свободных аминогрупп. В частности, нельзя использовать буферы Трис, глицин, уксусную кислоту и лимонную кислоту.
необходимые материалы:
○1 наносфера с квантовыми точками (10 мг/мл).
○2 Реакционный буфер (для активации): pH 4–6.
○3 Активатор: EDC·HCl.
○4 Блокирующий раствор: 1-2% БСА или казеин.
○5 Консервационный раствор (pH 7,0–7,5): 20–100 мМ борная кислота или Трис, 0,9% NaCl, 0,5–1% BSA, 0,09% NaN3.
Эталонная схема сопряжения
○1 Возьмите около 50 мкл суспензии QDNB, диспергируйте ее в 450 мкл реакционного буфера, центрифугируйте при 12 000–15 000 об/мин в течение 10–30 мин, удалите супернатант и диспергируйте QDNB в 500 мкл реакционного буфера.
○2 Добавьте 100–50 мкл связующего агента EDC (10 мМ), перемешайте при комнатной температуре (25–37 градусов) и инкубируйте в течение 0,5–1 часа.
○31 Центрифугируйте при 2000–15 000 об/мин в течение 10–30 минут для удаления излишков связующего агента и т. д., затем диспергируйте в 500 мкл реакционного буфера и диспергируйте ультразвуком;
○4 Затем добавьте около 100 мкг антитела (необходимо оптимизировать соотношение антитела к микросферам), перемешайте при комнатной температуре (25–37 градусов) и инкубируйте в течение 0,5–1 часа.
○51 Центрифуга при 2000-15000 об/мин в течение 10-30 минут для удаления свободных антител и т.д.;
○6 Добавьте 500 мкл блокирующего раствора, диспергируйте ультразвуком (мощность 10-20%) около 10 секунд, перемешайте при комнатной температуре (25-37 градусов) и инкубируйте 0,5-1 час.
○7 Центрифугируйте, удалите блокирующий раствор и диспергируйте в 200 мкл консервационного раствора для дальнейшего использования.
Этот протокол предназначен только для справки только на ранних стадиях исследования. Исследователям предлагается оптимизировать конкретные условия эксперимента в соответствии с собственными проектами.