镍磁珠

1.镍磁珠概述

SHBC镍磁珠将传统磁性微球与镍层析介质相结合，镍磁珠是针对带组氨酸标签的蛋白质快速分离而设计开发的新一代功能性磁珠，磁珠以琼脂糖为基质，琼脂糖电中性、亲水性好，生物相容性好，避免因电荷或疏水性而对蛋白质的非特异性吸附。

与传统镍层析介质相比，使用镍磁珠分离纯化带组氨酸标签的蛋白，无需对粗蛋白进行任何操作（包涵体需变性），不需要柱层析设备，操作简便，性价比更佳。

2.产品特点

低非特异性吸附
对小体积样品净化效果好
易于进行筛选实验，且具有高度的可重复性
易于扩大或缩小蛋白质纯化规模
蛋白负载量高，纯化后蛋白纯度高

3.适用范围

分离或纯化带有组氨酸标签的蛋白质

四、产品参数

5.使用方法（可根据实际情况调整）

磁珠与蛋白质结合

将适量磁珠放入离心管中，用Binding Buffer清洗3次，再用Binding Buffer重新分散，将破碎裂解后的菌液与磁珠混合，在搅拌器上混合30分钟。

清洗磁珠
30分钟后将离心管放在磁力分离器上，分离磁珠，取上清液进行检测。在磁珠上加入Washing Buffer，上下翻转数次使磁珠重新悬浮，磁性分离，取Washing Buffer进行检测。
加入Washing Buffer重悬磁珠，将磁珠转移至新的离心管中（避免蛋白污染）。磁分离，取出并合并Washing Buffer。

目标蛋白洗脱

用户可根据需要改变洗脱体积来调节目的蛋白的浓度。加入洗脱缓冲液，轻轻翻转离心管使磁珠悬浮，将洗脱液收集到新的离心管中，即为纯化的目的蛋白。重复多次，确保目的蛋白完全洗脱。

磁珠再生

磁珠使用三次后容量可能会明显降低，建议进行再生处理。如需再生磁珠，可按如下方法操作：

a) 将磁珠分散于含有0.1 M EDTA的磷酸盐缓冲液（20 mM，pH 7.4）中，室温振摇10分钟，磁力吸弃上清，重复1次。

b) 用高纯水清洗磁珠数次，确保溶液中不含EDTA。

c) 用0.5 M NaOH和2 M NaCl溶液洗涤磁珠，室温振摇5分钟，磁吸附，弃上清，用高纯水洗涤磁珠，直至洗液呈中性。

d) 用0.1 M NiSO4溶液分散磁珠，室温振摇10分钟，磁力吸去上清，用高纯水多次清洗磁珠，直至溶液中无Ni离子，将磁珠保存于20%乙醇中。

6.注意事项

磁珠密度较大，长时间放置容易下沉，因此使用前请充分摇匀，以获得均匀的磁珠悬浮液。
附录（溶剂耐受性表）