Cuentas magnéticas de níquel

1 Descripción general del producto
Las perlas magnéticas de níquel SHBC combinan microesferas magnéticas tradicionales y medios de cromatografía de níquel. Las perlas magnéticas de níquel son una nueva generación de perlas magnéticas funcionales diseñadas y desarrolladas para la separación rápida de proteínas con etiquetas de histidina. Las perlas magnéticas están basadas en agarosa, que es eléctricamente neutra, hidrófila y tiene buena biocompatibilidad, evitando la adsorción no específica de proteínas por carga o hidrofobicidad.
En comparación con los medios de cromatografía de níquel tradicionales, las perlas magnéticas de níquel se utilizan para separar y purificar proteínas con etiquetas de histidina. No es necesario realizar ninguna operación con la proteína cruda (los cuerpos de inclusión deben desnaturalizarse) y no se requiere equipo de cromatografía en columna. Es fácil de operar y tiene un mejor rendimiento de costos.
2 características del producto
Baja adsorción no específica
Buen efecto de purificación para muestras de pequeño volumen.
Fácil de realizar experimentos de detección y altamente reproducible.
Fácil de aumentar o reducir la escala de purificación de proteínas
Alta capacidad de carga de proteínas y alta pureza de proteínas después de la purificación
3 Ámbito de aplicación
Aislar o purificar proteínas con etiquetas de histidina
4 parámetros del producto

5 Cómo utilizar (se puede ajustar según la situación real)
Las perlas magnéticas se unen a las proteínas.
Coloque una cantidad adecuada de perlas magnéticas en un tubo de centrífuga, lávelas tres veces con Binding Buffer y vuelva a dispersarlas con Binding Buffer. Mezclar el líquido bacteriano roto y lisado con las perlas magnéticas y mezclar en una batidora durante 30 minutos.
Lavar cuentas magnéticas
Después de 30 minutos, coloque el tubo de centrífuga en un separador magnético para separar las perlas magnéticas y retire el sobrenadante para su detección. Agregue el tampón de lavado a las perlas magnéticas, déles la vuelta varias veces para resuspender las perlas magnéticas, sepárelos magnéticamente y saque el tampón de lavado para su detección.
Agregue tampón de lavado para resuspender las perlas magnéticas y transfiera las perlas magnéticas a un nuevo tubo de centrífuga (para evitar la contaminación de proteínas). Separación magnética, sacar y fusionar el Tampón de Lavado.
Elución de proteínas objetivo
Los usuarios pueden cambiar el volumen de elución para ajustar la concentración de la proteína objetivo según sea necesario. Agregue el tampón de elución, voltee suavemente el tubo de centrífuga para suspender las perlas magnéticas y recoja el eluido en un nuevo tubo de centrífuga, que es la proteína objetivo purificada. Repita varias veces para asegurar la elución completa de la proteína objetivo.
Regeneración de perlas magnéticas
Después de usar perlas magnéticas tres veces, la capacidad puede reducirse significativamente y se recomienda regenerarlas. Si necesitas regenerar cuentas magnéticas, puedes hacer lo siguiente:
a) Dispersar las perlas magnéticas en tampón fosfato (20 mM, pH 7,4) que contenga EDTA 0,1 M, agitar a temperatura ambiente durante 10 minutos, desechar el sobrenadante mediante succión magnética y repetir una vez.
b) Lave las perlas magnéticas con agua de alta pureza varias veces para asegurarse de que no haya EDTA en la solución.
c) Lavar las perlas magnéticas con solución de NaOH 0,5 M y NaCl 2 M, agitar a temperatura ambiente durante 5 minutos, absorber magnéticamente, desechar el sobrenadante y lavar las perlas magnéticas con agua de alta pureza hasta que la solución de lavado se vuelva neutra.
d) Utilice una solución de NiSO4 0,1 M para dispersar las perlas magnéticas y agite a temperatura ambiente durante 10 minutos. Deseche el sobrenadante mediante succión magnética y lave las perlas magnéticas varias veces con agua de alta pureza hasta que no queden iones de Ni en la solución. Guarde las perlas magnéticas en etanol 20%.
6 cosas a tener en cuenta
Las cuentas magnéticas tienen una alta densidad y se hundirán fácilmente si se dejan en reposo durante mucho tiempo. Por lo tanto, agite bien antes de usar para obtener una suspensión uniforme de perlas magnéticas.
Apéndice (Tabla de tolerancia de solventes)