Microesferas de poliestireno de puntos cuánticos

I. Description of Quantum Dot Polystyrene Microspheres

Quantum dot polystyrene microspheres (HQD) are prepared by microemulsion polymerization of high-brightness CdSe/ZnS quantum dots and polystyrene. The surface of the microspheres is modified with carboxyl functional groups to facilitate antibody coupling. Amplifying the fluorescence signal of quantum dots through nanosphere coating can significantly improve the sensitivity of immune detection.

The fluorescent probe has the characteristics of stable fluorescence signal, excellent colloidal stability, and high biocompatibility, and is especially suitable for the development of fluorescent in vitro diagnostic reagents. . This product can also be used for blood flow measurement, biomarkers, in vivo imaging and calibration of flow cytometers.

Carboxylation-modified microbeads have a high density of free carboxylic acids on their surface, making them suitable for covalent coupling of proteins and other amine-containing biomolecules via water-soluble imine-based reagents such as carbodiimide (EDAC).

II. Datos físicos

1. Material: Microesferas de poliestireno recubiertas de puntos cuánticos.
2. Índice de refracción: 1,59 a 589 nm, 25 ℃
3. Densidad: 1,05 g/cm3
4. Características: color fluorescente

III. Instrucciones de análisis

1. Contenido de sólidos: 1% (10 mg/ml)
2. Tamaño de partícula: 100 nm
3. Uniformidad: CV<5%
4. Longitud de onda de emisión: 610 nm+10 nm
5. Longitud de onda de excitación: <580 nm, se recomienda 365 nm-450 nm
6. Medio de dispersión: agua desionizada y trazas de tensioactivo
7. Estabilidad: 2 años desde la fecha de fábrica.

IV. Use of Quantum Dot Polystyrene Microspheres

La superficie de las nanoesferas de puntos cuánticos de nuestra empresa (HQD610-10) es rica en grupos funcionales carboxilo, que pueden acoplarse covalentemente con biomoléculas que contienen amino, como anticuerpos, péptidos, ácidos nucleicos, etc. Los grupos carboxilo en la superficie de la Las microesferas se encuentran en el activador 1-(Bajo la acción del clorhidrato de 3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (EDC), reacciona con grupos amino para formar enlaces amida estables, fijando así covalentemente biomoléculas en la superficie de las nanoesferas.

Precauciones de uso:

○1 Agite y mezcle los QDNB antes de usarlos. Una pequeña cantidad de precipitación provocada por un descanso prolongado es normal y no afecta el uso del producto.

○2 Para lograr un mejor efecto de acoplamiento, la concentración de proteína debe ser de 0,5 a 4 mg/ml, la concentración de ácido nucleico debe ser de 20 a 100 μM y no debe haber grupos amino libres en el tampón. En particular, no se pueden utilizar tampones Tris, glicina, ácido acético y ácido cítrico.

materiales necesitados:

○1 nanoesfera de punto cuántico (10 mg/ml).

○2 Tampón de reacción (para activación): pH 4-6

○3 Activador: EDC·HCl.

○4 Solución de bloqueo: 1-2% BSA o caseína.

○5 Solución de conservación (pH 7,0-7,5): ácido bórico o Tris 20-100 mM, NaCl 0,91 TP3T, BSA 0,5-11 TP3T, NaN3 0,091 TP3T.

Esquema de acoplamiento de referencia

○1 Tome aproximadamente 50 µl de suspensión de QDNB, dispérselos en 450 µl de tampón de reacción, centrifugue a 12000-15000 rpm durante 10-30 minutos, retire el sobrenadante y disperse los QDNB en 500 µl de tampón de reacción.

○2 Agregue 100-50 μl de agente de acoplamiento EDC (10 mM), mezcle a temperatura ambiente (25-37 grados) e incube durante 0,5-1 h.

○3 Centrifuge at 2000-15000rpm for 10-30min to remove excess coupling agent, etc., then disperse in 500μl reaction buffer, and disperse with ultrasound;

○4 Luego agregue aproximadamente 100 μg de anticuerpo (la proporción de anticuerpo a microesferas debe optimizarse), mezcle a temperatura ambiente (25-37 grados) e incube durante 0,5-1 h.

○51 Centrifugar a 2000-15000 rpm durante 10-30 minutos para eliminar los anticuerpos libres, etc.;

○6 Agregue 500 μl de solución de bloqueo, disperse con ultrasonido (potencia 10-20%) durante aproximadamente 10 segundos, mezcle a temperatura ambiente (25-37 grados) e incube durante 0,5-1 hora.

○7 Centrifugar, retirar la solución bloqueadora y dispersar en 200 μl de solución conservante para su uso posterior.
Este protocolo es solo como referencia en las primeras etapas de la investigación. Se pide a los investigadores que optimicen las condiciones experimentales específicas según sus propios proyectos.