Nanoperlas de puntos cuánticos

I. Descripción del producto
Las microesferas de poliestireno de puntos cuánticos (HQD) se preparan mediante polimerización en microemulsión de puntos cuánticos de CdSe/ZnS de alto brillo y poliestireno. La superficie de las microesferas se modifica con grupos funcionales carboxilo para facilitar el acoplamiento de anticuerpos. La amplificación de la señal de fluorescencia de los puntos cuánticos mediante un recubrimiento de nanoesferas puede mejorar significativamente la sensibilidad de la detección inmune. La sonda fluorescente tiene las características de señal de fluorescencia estable, excelente estabilidad coloidal y alta biocompatibilidad, y es especialmente adecuada para el desarrollo de reactivos de diagnóstico in vitro fluorescentes. . Este producto también se puede utilizar para medir el flujo sanguíneo, biomarcadores, imágenes in vivo y calibración de citómetros de flujo. Las microperlas modificadas por carboxilación tienen una alta densidad de ácidos carboxílicos libres en su superficie, lo que las hace adecuadas para el acoplamiento covalente de proteínas y otras biomoléculas que contienen aminas mediante reactivos a base de imina solubles en agua, como la carbodiimida (EDAC).
II. Datos físicos
1. Material: Microesferas de poliestireno recubiertas de puntos cuánticos.
2. Índice de refracción: 1,59 a 589 nm, 25 ℃
3. Densidad: 1,05 g/cm3
4. Características: color fluorescente
III. Instrucciones de análisis
1. Contenido de sólidos: 1% (10 mg/ml)
2. Tamaño de partícula: 100 nm
3. Uniformidad: CV<5%
4. Longitud de onda de emisión: 610 nm+10 nm
5. Longitud de onda de excitación: <580 nm, se recomienda 365 nm-450 nm
6. Medio de dispersión: agua desionizada y trazas de tensioactivo
7. Estabilidad: 2 años desde la fecha de fábrica.
IV. Uso de microesferas
La superficie de las nanoesferas de puntos cuánticos de nuestra empresa (HQD610-10) es rica en grupos funcionales carboxilo, que pueden acoplarse covalentemente con biomoléculas que contienen amino, como anticuerpos, péptidos, ácidos nucleicos, etc. Los grupos carboxilo en la superficie de la Las microesferas se encuentran en el activador 1-(Bajo la acción del clorhidrato de 3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (EDC), reacciona con grupos amino para formar enlaces amida estables, fijando así covalentemente biomoléculas en la superficie de las nanoesferas.
Precauciones de uso:
○1 Agite y mezcle los QDNB antes de usarlos. Una pequeña cantidad de precipitación provocada por un descanso prolongado es normal y no afecta el uso del producto.
○2 Para lograr un mejor efecto de acoplamiento, la concentración de proteína debe ser de 0,5 a 4 mg/ml, la concentración de ácido nucleico debe ser de 20 a 100 μM y no debe haber grupos amino libres en el tampón. En particular, no se pueden utilizar tampones Tris, glicina, ácido acético y ácido cítrico.
materiales necesitados:
○1 nanoesfera de punto cuántico (10 mg/ml).
○2 Tampón de reacción (para activación): pH 4-6
○3 Activador: EDC·HCl.
○4 Solución de bloqueo: 1-2% BSA o caseína.
○5 Solución de conservación (pH 7,0-7,5): ácido bórico o Tris 20-100 mM, NaCl 0,91 TP3T, BSA 0,5-11 TP3T, NaN3 0,091 TP3T.
Esquema de acoplamiento de referencia
○1 Tome aproximadamente 50 µl de suspensión de QDNB, dispérselos en 450 µl de tampón de reacción, centrifugue a 12000-15000 rpm durante 10-30 minutos, retire el sobrenadante y disperse los QDNB en 500 µl de tampón de reacción.
○2 Agregue 100-50 μl de agente de acoplamiento EDC (10 mM), mezcle a temperatura ambiente (25-37 grados) e incube durante 0,5-1 h.
○31 Centrifugar a 2000-15000 rpm durante 10-30 minutos para eliminar el exceso de agente de acoplamiento, etc., luego dispersar en 500 μl de tampón de reacción y dispersar con ultrasonido;
○4 Luego agregue aproximadamente 100 μg de anticuerpo (la proporción de anticuerpo a microesferas debe optimizarse), mezcle a temperatura ambiente (25-37 grados) e incube durante 0,5-1 h.
○51 Centrifugar a 2000-15000 rpm durante 10-30 minutos para eliminar los anticuerpos libres, etc.;
○6 Agregue 500 μl de solución de bloqueo, disperse con ultrasonido (potencia 10-20%) durante aproximadamente 10 segundos, mezcle a temperatura ambiente (25-37 grados) e incube durante 0,5-1 hora.
○7 Centrifugar, retirar la solución bloqueadora y dispersar en 200 μl de solución conservante para su uso posterior.
Este protocolo es solo como referencia en las primeras etapas de la investigación. Se pide a los investigadores que optimicen las condiciones experimentales específicas según sus propios proyectos.