Prodotti
SHBC fornisce microsfere colorate, microsfere fluorescenti, sfere magnetiche, microsfere di silice, microsfere di impaccamento per cromatografia e reagenti biologici per lo sviluppo di test diagnostici, l'estrazione di acidi nucleici, la purificazione delle proteine e le applicazioni di separazione.
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MagNi3UM-10
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SHBC
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5%
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3 µm
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10 ml, 20 ml, 50 ml, 500 ml, 1000 ml
Perline magnetiche in nichel da 3 µm per la ricerca sui test immunologici
Le sfere magnetiche in nichel SHBC MNi3UM-10 sono particelle magnetiche da 3 µm con una superficie con funzione di nichel.
Sono sviluppati per la cattura, la purificazione e l'immobilizzazione delle proteine marcate con His.
Il prodotto viene fornito al 5% di solidi per la ricerca immunologica, l'immobilizzazione di antigeni ricombinanti, la cattura per affinità magnetica e la produzione di reagenti in massa.
Prodotto: Perline magnetiche in nichel da 3 µm
Numero di catalogo: MNi3UM-10
Marchio: SHBC
Produttore: Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.
Dimensione delle particelle: 3 µm
Superficie: Nichel funzionalizzato
Contenuto di solidi: 5%
Obiettivo primario: proteine con etichetta His
Applicazione principale: ricerca su immunodosaggi
Fornitura: campioni, lotti pilota e produzione di massa
Uso previsto: solo per uso di ricerca
Panoramica del prodotto
MNi3UM-10 fornisce una superficie di affinità magnetica per le biomolecole marcate con His.
Gli ioni nichel interagiscono con i residui di istidina esposti in un tag di poliistidina.
La proteina catturata può essere:
Separato magneticamente
Lavato
Concentrato
Utilizzato direttamente sulle perle
Eluito per la ricerca a valle
Le sfere magnetiche di nichel sono comunemente utilizzate per la purificazione e lo screening delle proteine ricombinanti con tag His. L'elaborazione magnetica elimina la necessità di colonne cromatografiche tradizionali in molti flussi di lavoro su piccola scala.
La dimensione delle particelle di 3 µm fornisce un equilibrio tra:
Recupero magnetico
Numero di particelle
Superficie per particella
Contatto di sospensione
Lavaggi ripetuti
Movimentazione automatizzata
MNi3UM-10 può anche essere utilizzato per immobilizzare antigeni marcati con His o catturare proteine per lo sviluppo di test immunologici magnetici.
Specifiche tecniche
Parametro | Specifica |
|---|---|
Nome del prodotto | Perline magnetiche in nichel |
Numero di catalogo | MNi3UM-10 |
Marca | SHBC |
Produttore | Shanghai SanYu Biotecnologia Co., Ltd. |
Diametro nominale | 3 µm |
Superficie | Nichel funzionalizzato |
Contenuto di solidi | 5% |
Forma fisica | Sospensione magnetica delle perle |
Metodo di separazione | Campo magnetico esterno |
Obiettivo vincolante principale | Proteine marcate con His |
Applicazione principale | Saggi immunologici e ricerca sull'affinità proteica |
Formato di fornitura | Campioni e fornitura all'ingrosso |
Destinazione d'uso | Solo per uso di ricerca |
I seguenti valori devono essere confermati dalla TDS finale o dal COA specifico del lotto:
Intervallo di dimensioni effettive delle particelle
CV granulometrico
Morfologia delle particelle
Materiale magnetico
Contenuto di materiale magnetico
Tempo di risposta magnetica
Caricamento del nichel
Perdita di nichel
Tipo di ligando chelante
Capacità di legame delle proteine His-tag
Concentrazione di particelle
Tampone di sospensione
Conservante
Dimensioni del pacchetto
Durata di conservazione
Temperatura di conservazione
L'esatto ligando chelante del nichel deve essere indicato nella specifica finale.
I possibili ligandi chelanti includono:
NTA
IDA
Altre strutture chelanti del nichel
Non descrivere MNi3UM-10 come Ni-NTA a meno che NTA non sia stato confermato.
Il contenuto solido del 5% da solo non può determinare la capacità di legame delle proteine o il tempo di risposta magnetica.
Vantaggi principali
Cattura rapida delle proteine His-Tag
La superficie con funzione nichel lega i residui di istidina accessibili nelle proteine marcate con His.
Ciò supporta la cattura rapida dell'affinità magnetica.
Non è richiesta la biotinilazione
Una proteina marcata con His può legarsi attraverso il suo tag di affinità.
Non sono necessarie la biotinilazione e la streptavidina.
Non è richiesta l'attivazione di EDC/NHS
Nichel: il legame con la sua etichetta si basa sulla coordinazione dell'affinità del metallo.
L'utente normalmente non ha bisogno di attivare gruppi carbossilici o eseguire l'accoppiamento covalente.
Legame proteico reversibile
Le proteine His catturate possono essere rilasciate utilizzando un tampone di eluizione competitivo compatibile.
L'imidazolo è comunemente usato per competere con i residui di istidina per i siti di legame del nichel.
Dimensione delle particelle di 3 µm
Il diametro di 3 µm fornisce una superficie maggiore su ciascuna perla rispetto alle particelle da 1 µm.
Può anche supportare una raccolta magnetica più semplice in condizioni adeguate.
Separazione magnetica
Un magnete esterno raccoglie le particelle.
Questo supporta:
Lavaggio
Scambio di buffer
Pulizia del campione
Concentrazione target
Elaborazione parallela
Movimentazione automatizzata
Adatto per la ricerca sui test immunologici
Gli antigeni ricombinanti marcati con His possono essere caricati sulle biglie magnetiche.
Le sfere caricate con l'antigene possono quindi essere valutate in test di rilevamento degli anticorpi.
Adatto per l'automazione
MNi3UM-10 può essere valutato in:
Flussi di lavoro magnetici manuali
Sistemi semiautomatici
Processori magnetici automatizzati
Flussi di lavoro per piastre multipozzetto
Screening ad alto rendimento
Sospensione di solidi al 5%.
Il formato concentrato supporta:
Test di laboratorio
Ottimizzazione dei processi
Produzione pilota
Preparazione ripetuta dei reagenti
Produzione di massa aziendale
Produzione in serie
SHBC supporta:
Campioni di ricerca
Lotti pilota
Ripeti gli ordini
Produzione OEM
Imballaggio con etichetta privata
Fornitura aziendale all'ingrosso
Come funziona la rilegatura di Nickel-His Tag
Le sfere magnetiche di nichel contengono ioni di nichel immobilizzati trattenuti da una superficie chelante.
Gli ioni nichel si coordinano con i residui di istidina in un tag di poliistidina.
La struttura semplificata è:
Perlina magnetica – Chelante – Ni²⁺ – Proteina con etichetta His
Un tag di affinità comune contiene sei residui di istidina ed è noto come tag 6×His.
L'etichetta His può essere posizionata all'estremità N o all'estremità C di una proteina ricombinante.
Legame
Mescolare la proteina His-tagged con perline magnetiche di nichel equilibrate.
Il tag dell'istidina esposto si lega ai siti di nichel disponibili.
Lavaggio
Lavare via i componenti del campione non legati e debolmente legati.
Una bassa concentrazione di imidazolo può aiutare a ridurre il legame proteico non specifico.
La concentrazione deve essere ottimizzata per la proteina bersaglio.
Eluizione
Una concentrazione più elevata di imidazolo può competere con l'His tag e rilasciare la proteina catturata.
Anche un pH più basso o una condizione chelante compatibile possono rilasciare la proteina, a seconda della chimica finale delle sfere.
Utilizzo su perlina
L'eluizione non è sempre necessaria.
La proteina marcata con His può rimanere sulle sfere per:
Sviluppo di test immunologici
Screening degli anticorpi
Ricerca sull'interazione delle proteine
Cattura del bersaglio
Ricerca sui biosensori
Applicazioni di test immunologici
Immobilizzazione dell'antigene His-Tagged
Un antigene ricombinante contenente un tag His può essere catturato su MNi3UM-10.
Le sfere caricate con l'antigene possono essere utilizzate per la ricerca sul rilevamento degli anticorpi.
Le potenziali applicazioni includono:
Sviluppo di test sierologici
Screening degli anticorpi
Screening dell'ibridoma
Ricerca sulla risposta ai vaccini
Ricerca sugli autoanticorpi
Ricerca sulle malattie infettive
Immobilizzazione della proteina di cattura con etichetta His
I recettori, gli antigeni e le proteine leganti marcati con His possono essere caricati sulle sfere.
Le sfere preparate possono catturare un analita target dal campione.
Ricerca sui test immunologici chemiluminescenti
MNi3UM-10 può essere valutato come fase solida magnetica nello sviluppo CLIA.
Un flusso di lavoro generale include:
Caricare una proteina di cattura con tag His.
Lavare le perline.
Aggiungere il campione di prova.
Cattura il bersaglio.
Eseguire il lavaggio magnetico.
Aggiungere il reagente di rilevamento etichettato.
Lavare di nuovo.
Aggiungere il substrato chemiluminescente.
Misurare il segnale.
La ritenzione del ligando, la stabilità del fondo e del segnale devono essere convalidate.
Saggi immunologici fluorescenti
Le sfere possono essere combinate con anticorpi o sonde fluorescenti.
Saggi immunoenzimatici
La fase solida magnetica può essere utilizzata con reagenti di rilevamento marcati con enzimi.
Screening degli anticorpi
Gli antigeni marcati con His possono essere immobilizzati per:
Screening degli anticorpi monoclonali
Test degli anticorpi policlonali
Studi sulla specificità degli anticorpi
Valutazione della reattività crociata
Confronto vincolante
Purificazione delle proteine ricombinanti
MNi3UM-10 può essere valutato per la purificazione delle proteine marcate con His da:
Lisati batterici
Campioni di espressione del lievito
Campioni di cellule di mammifero
Campioni di cellule di insetti
Sistemi di espressione senza cellule
Ricerca sull'interazione delle proteine
Le proteine dell'esca contrassegnate con His possono essere immobilizzate per:
Studi di interazione proteina-proteina
Screening dei ligandi
Ricerca sul legame dei recettori
Ricerca pull-down
Cattura dell'affinità
Molecole bersaglio adatte
MNi3UM-10 può essere valutato con:
6×Proteine marcate con His
Proteine marcate con poliistidina
Antigeni ricombinanti marcati con His
Anticorpi con la sua marcatura
Frammenti di anticorpi marcati con His
Enzimi con la sua etichetta
I suoi recettori marcati
Peptidi marcati con His
Ligandi di affinità ricchi di istidina
L'His tag deve rimanere accessibile dopo il ripiegamento delle proteine.
Un tag nascosto o bloccato stericamente può ridurre il legame.
Limitazione importante
Non si deve presumere che gli anticorpi standard senza etichetta His si leghino in modo specifico.
Per gli anticorpi non marcati con His, considerare:
Perline magnetiche carbossiliche
Perline magnetiche NHS
Perle magnetiche epossidiche
Perline magnetiche Tosyl
Perline magnetiche di proteine A/G
Sfere magnetiche di streptavidina con anticorpi biotinilati
Flusso di lavoro consigliato per il legame delle proteine
1. Risospendere le microsfere
Mescolare MNi3UM-10 fino ad ottenere un composto omogeneo.
Utilizzare un'inversione delicata o un vortex controllato.
Evitare una schiuma eccessiva.
2. Trasferisci l'importo richiesto
Calcolare la quantità di perline in base a:
Quantità di proteine
Capacità vincolante richiesta
Numero di test
Volume di reazione
Perdita di elaborazione prevista
3. Raccogli magneticamente le perline
Posizionare la provetta in un separatore magnetico compatibile.
Aspetta che le perle si siano raccolte.
Rimuovere la soluzione di conservazione.
4. Equilibrare le perline
Lavare le perline con un tampone legante compatibile.
Il buffer può contenere:
Fosfato o altro tampone compatibile
Cloruro di sodio
Imidazolo basso
Detergente non ionico compatibile
Utilizzare il protocollo SHBC finale come riferimento primario.
5. Preparare il campione proteico
Controllo:
Accessibilità del suo tag
Solubilità delle proteine
pH del campione
Concentrazione di sale
Concentrazione di imidazolo
Contenuto chelante
Contenuto di agenti riducenti
Compatibilità con i detergenti
6. Aggiungi il campione
Combinare il campione con le perline magnetiche equilibrate.
Mescolare delicatamente.
7. Incubare
Ottimizzare:
Tempo vincolante
Temperatura
Velocità di miscelazione
Rapporto sfere-proteine
pH tampone
Concentrazione di sale
Concentrazione di imidazolo
8. Lavare magneticamente
Raccogli le perline con una calamita.
Rimuovere il materiale non legato.
Ripetere il lavaggio secondo necessità.
9. Utilizzare o eluire la proteina
Utilizzare le sfere caricate con proteine direttamente nel test.
In alternativa, eluire la proteina utilizzando un tampone validato.
10. Valutare le prestazioni
Misura:
Recupero delle proteine
Purezza delle proteine
Capacità vincolante
Legame non specifico
Attività del ligando
Recupero magnetico
Aggregazione di perline
Flusso di lavoro del test immunologico magnetico
Caricare l'antigene con tag His o catturare la proteina.
Lavare le perle magnetiche.
Bloccare la superficie rimanente quando necessario.
Aggiungere il campione di prova.
Incubare per il legame del bersaglio.
Raccogli magneticamente le perline.
Lavare via il campione non legato.
Aggiungere il reagente di rilevamento etichettato.
Incubare nuovamente.
Eseguire il lavaggio magnetico finale.
Aggiungere il substrato di rilevamento.
Misurare il segnale.
I possibili sistemi di rilevamento includono:
Chemiluminescenza
Elettrochemiluminescenza
Fluorescenza
Colorimetria enzimatica
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Perché scegliere le perline magnetiche da 3 µm?
Superficie più grande per particella
Ciascuna perla da 3 µm fornisce una superficie fisica maggiore rispetto a ciascuna perla da 1 µm.
Ciò può supportare un carico di ligando più elevato per singola perla.
Recupero magnetico pratico
La dimensione delle particelle più grandi può supportare una raccolta magnetica più semplice.
Le prestazioni effettive dipendono da:
Contenuto di materiale magnetico
Forza del magnete
Volume del campione
Altezza del liquido
Viscosità del campione
Geometria della nave
Pallottola magnetica visibile
Una popolazione di sferette da 3 µm può formare un pellet magnetico più visibile rispetto alle particelle più piccole.
Ciò può semplificare lo sviluppo del processo manuale.
Lavaggi ripetuti
Le perle possono essere raccolte e ridisperse attraverso più cicli di lavaggio.
Dimensione delle particelle bilanciata
Rispetto alle sfere magnetiche da 1 µm, le sfere da 3 µm generalmente forniscono:
Superficie più grande per perla
Meno particelle per unità di massa
Osservazione microscopica più semplice
Raccolta magnetica potenzialmente più semplice
Decantazione più rapida
La dimensione finale delle particelle dovrebbe essere selezionata attraverso test diretti.
Nichel vs NHS e sfere magnetiche streptavidina
Superficie | Obiettivo vincolante | Vantaggio principale | Limitazione principale |
|---|---|---|---|
Nichel | Proteine marcate con His | Cattura per affinità rapida e reversibile | Il target richiede un tag His accessibile |
Sistema sanitario nazionale | Ammine primarie | Accoppiamento covalente diretto delle proteine | La superficie dell'NHS è sensibile all'idrolisi |
Carbossilico | Ammine primarie dopo l'attivazione | Accoppiamento covalente flessibile | Richiede l'attivazione dell'EDC/NHS |
Streptavidina | Molecole biotinilate | Caricamento modulare veloce | Il bersaglio deve essere biotinilato |
Proteina A/G | Regione Fc dell'anticorpo | Cattura diretta degli anticorpi | La compatibilità delle specie e degli isotipi varia |
Scegli le perle magnetiche in nichel quando:
La proteina bersaglio ha un tag His.
La rilegatura reversibile è utile.
È necessaria l'immobilizzazione dell'antigene ricombinante.
È necessaria la purificazione delle proteine con il suo tag.
È previsto lo screening proteico.
Scegli NHS o sfere carbossiliche quando:
Una proteina non marcata da His deve essere immobilizzata covalentemente.
È preferibile il fissaggio permanente del ligando.
Scegli le perle di streptavidina quando:
Il ligando è biotinilato.
È richiesto un caricamento modulare rapido.
Controllo qualità
Gli elementi consigliati per il controllo qualità includono:
Diametro medio delle particelle
Intervallo di dimensioni delle particelle
CV granulometrico
Morfologia delle particelle
Aspetto della sospensione
Contenuto di solidi
Contenuto di materiale magnetico
Risposta magnetica
Recupero magnetico
Ridispersione
Livello aggregato
Caricamento del nichel
Perdita di nichel
Capacità di legame delle proteine His-tag
Legame non specifico
Attività antigene funzionale
Consistenza del lotto
Capacità di legare le proteine
La capacità di legame deve essere misurata con una proteina marcata con His definita.
Il risultato dipende da:
Dimensione delle proteine
Posizione del suo tag
Accessibilità dei tag
Purezza delle proteine
Composizione del tampone
Tempo di incubazione
Metodo di prova
Non stimare la capacità legante solo dal contenuto di solidi.
Prestazioni magnetiche
Valutare:
Tempo di raccolta magnetica
Recupero del tallone
Perle residue nel surnatante
Ridispersione dopo la raccolta
Prestazioni nella nave prevista
Compatibilità con l'analizzatore previsto
Test immunologici funzionali
Un test modello può valutare:
Segnale positivo
Sfondo negativo
Rapporto segnale/fondo
Ritenzione del ligando
Prestazioni dose-risposta
Precisione
Efficienza di lavaggio
Coerenza da lotto a lotto
Produzione in serie e personalizzazione
Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. supporta:
Campioni di ricerca
Lotti pilota
Produzione in serie
Produzione OEM
Imballaggio con etichetta privata
Dimensioni del pacchetto personalizzate
Concentrazione di solidi personalizzata
Caricamento personalizzato del nichel
Risposta magnetica personalizzata
Standard di qualità specifici del cliente
Per la valutazione del progetto, fornire:
Quantità richiesta
Domanda annuale
Applicazione prevista
Tipo di proteina con etichetta His
Capacità vincolante richiesta
Quantità di sfere per test
Separatore o analizzatore magnetico
Dimensione del pacchetto preferita
Restrizioni del buffer
Restrizioni conservative
Requisiti di controllo della qualità
Manipolazione e stoccaggio
Seguire l'etichetta finale del prodotto SHBC, la TDS e il COA specifico del lotto.
Raccomandazioni generali:
Conservare nelle condizioni specificate.
Non congelare se non convalidato.
Tenere il contenitore ben chiuso.
Mescolare prima del campionamento.
Non lasciare asciugare le perle.
Utilizzare provette pulite e a basso legame.
Mantenere una miscelazione delicata durante la legatura.
Proteggere il prodotto dalla contaminazione.
Non rimettere il materiale usato nella bottiglia originale.
Compatibilità del buffer
Il legame per affinità con il nichel può essere influenzato da:
EDTA
Altri chelanti forti
Concentrazioni elevate di imidazolo
pH estremo
Alcuni agenti riducenti
La compatibilità dipende dal ligando chelante utilizzato su MNi3UM-10.
Non pubblicare una tabella di compatibilità esatta fino al completamento del test SHBC.
Evitare l'essiccazione
Non lasciare asciugare il pellet di perline.
L'essiccazione può causare:
Aggregazione
Scarsa ridispersione
Ridotto legame proteico
Recupero magnetico inferiore
Variazione del test più elevata
Domande frequenti
Cos'è MNi3UM-10?
MNi3UM-10 è una sospensione di sfere magnetiche con funzionalità nichel da 3 µm fornita al 5% di solidi.
Qual è il suo obiettivo principale?
È progettato principalmente per le proteine marcate con His.
Cos'è un tag His?
Un tag His è una breve sequenza contenente più residui di istidina.
Un formato comune è il tag 6×His.
Gli anticorpi comuni possono legarsi direttamente?
Non si deve presumere che gli anticorpi ordinari si leghino in modo specifico.
L'anticorpo deve contenere un tag His accessibile o una sequenza ricca di istidina compatibile.
Gli antigeni marcati con His possono essere immobilizzati?
SÌ.
Gli antigeni ricombinanti marcati con His possono essere catturati per la ricerca su test immunologici e sullo screening degli anticorpi.
Il legame è covalente?
NO.
Nichel: il legame con la sua etichetta è un'interazione reversibile di affinità metallica.
La proteina può essere eluita?
SÌ.
Le proteine marcate con His possono essere eluite utilizzando una condizione competitiva convalidata, che comunemente coinvolge l'imidazolo.
Le sfere caricate con proteine possono essere utilizzate direttamente?
SÌ.
Le sfere possono essere utilizzate direttamente in test immunologici, studi di cattura di target e di interazione con proteine.
MNi3UM-10 può essere utilizzato nella ricerca CLIA?
SÌ.
Gli antigeni marcati con His o le proteine di cattura possono essere caricati sulle sfere per lo sviluppo del CLIA magnetico.
Può essere utilizzato per la purificazione delle proteine?
SÌ.
Può essere valutato per la purificazione magnetica e lo screening delle proteine marcate con His.
Può essere utilizzato su strumenti automatizzati?
Sì, previa validazione di dispensazione, raccolta magnetica, lavaggio e ridispersione.
Qual è la capacità di legame delle proteine?
Utilizzare la specifica SHBC finale o il COA specifico del lotto.
Non stimarlo dal contenuto di solidi del 5%.
Il prodotto utilizza NTA?
L'esatto ligando chelante del nichel deve essere confermato nella scheda tecnica finale.
Non descrivere il prodotto come Ni-NTA a meno che NTA non venga confermato.
È possibile utilizzare l'EDTA?
L'EDTA può rimuovere o competere con gli ioni nichel in molti sistemi di affinità del nichel.
La compatibilità deve essere confermata per MNi3UM-10.
Le perle possono essere congelate?
Il congelamento è generalmente sconsigliato a meno che non sia convalidato.
È possibile lasciare asciugare il pellet di perline?
NO.
L'essiccazione può causare aggregazione e scarsa ridispersione.
È disponibile la produzione in serie?
SÌ.
SHBC supporta campioni, lotti pilota, progetti OEM e produzione di massa aziendale.
Richiedi un campione o un preventivo
SHBC MNi3UM-10 fornisce:
Dimensione nominale delle particelle di 3 µm
Superficie con funzione nichel
Contenuto di solidi 5%.
Cattura della proteina His-tag
Separazione magnetica
Immobilizzazione dell'antigene ricombinante
Compatibilità con la ricerca immunologica
Potenziale di sviluppo della CLIA
Fornitura di campioni e lotti pilota
Produzione di massa aziendale
Supporto OEM e personalizzazione
Nome del prodotto: Perline magnetiche in nichel da 3 µm
Numero di catalogo: MNi3UM-10
Marchio: SHBC
Produttore: Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.
Dimensioni delle particelle: 3 µm
Superficie: Nichel funzionalizzato
Contenuto di solidi: 5%
Obiettivo primario: Proteine con etichetta His
Applicazione: Test immunologico e ricerca sull'affinità proteica
Fornitura: Campioni, lotti pilota e produzione in serie
Uso previsto: Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico o terapeutico.