10um ストレプトアビジン磁気ビーズ MSA10UM-10 1%

10μm ストレプトアビジン磁性ビーズ MSA10UM-10

MSA10UM-10 は、固形分 1% で供給される 10µm ストレプトアビジン機能性磁気ビーズ懸濁液です。

固形分濃度が体積あたりの重量として表される場合、1% は懸濁液 1 ミリリットルあたり約 10 mg の磁気ビーズに相当します。

この製品は、ビオチン化抗体、抗原、タンパク質、ペプチド、アプタマー、オリゴヌクレオチド、およびその他のビオチン標識生体分子の捕捉および固定化のために開発されました。

MSA10UM-10 は、イムノアッセイ試薬開発、化学発光イムノアッセイ研究、ターゲット濃縮、サンプル前処理、アフィニティーキャプチャ、プロセススケールアップおよびバッチ試薬製造における大粒子磁性固相として評価できます。

磁気ビーズ表面に固定化されたストレプトアビジンは、エンドユーザーが EDC、NHS、グルタルアルデヒドまたは他の化学活性化試薬を使用してビーズを活性化する必要がなく、ビオチン化リガンドに結合します。

選択したビオチン化捕捉分子をロードした後、機能化磁気ビーズをターゲット捕捉、磁気収集、繰り返しの洗浄、および下流シグナル検出に使用できます。

MSA10UM-10 は、研究室での評価、パイロット生産、バルク供給用に定義された 10µm ストレプトアビジン磁性ビーズ原料を必要とするバイオテクノロジー企業、イムノアッセイ開発者、研究機関、および試薬メーカーを対象としています。

10µm は分析用磁性ビーズとしては比較的大きな粒子サイズであるため、完成した試薬は、目的のリガンド、サンプルマトリックス、磁気分離器、混合方法、洗浄プログラム、シグナルケミストリーおよびアナライザーを使用して検証する必要があります。

製品概要

ストレプトアビジン – ビオチン システムは、さまざまなビオチン化生体分子を共通の磁性固相に固定化するための柔軟な方法を提供します。

正確に 10µm のストレプトアビジン磁気ビーズ製品は固形分 1% で市販されており、ビオチンの捕捉、検出アッセイ、免疫診断研究、免疫沈降、核酸精製および生物学的分離に使用されます。

MSA10UM-10 は以下をサポートするように設計されています。

• ビオチン化抗体の固定化。

• ビオチン化抗原の固定化。

• 磁気サンドイッチイムノアッセイ;

• 抗体検出アッセイ;

• 競合的イムノアッセイ;

• 化学発光イムノアッセイの開発。

• 電気化学発光アッセイの研究;

• サンプルの前処理;

• 免疫磁気濃縮;

• アフィニティキャプチャ。

• ビオチン化ペプチドの捕捉。

• 核酸とアプタマーの捕捉。

• パイロットスケールの製造。

• バッチ生産。

MSA10UM-10は研究試薬開発原料として供給されています。完成した診断試薬としては提供されません。

MSA10UM-10 製品仕様

以下の製品固有のパラメーターは、該当する技術データシートおよびロット固有の分析証明書を通じて確認する必要があります。

• 粒度分布;

• ストレプトアビジンの負荷;

• ストレプトアビジン活性。

• 遊離ビオチン結合能。

• ビオチン化抗体のローディング能力。

• ビオチン化オリゴヌクレオチドのローディング能力。

• 非特異的結合。

• 磁気収集性能。

• サスペンションバッファー。

• ブロッキング配合。

• 防腐剤系;

• 保管条件;

• 貯蔵寿命;

• ロットリリース基準。

市販の 10µm 製品ごとに、異なる粒子マトリックス、磁性材料の含有量、ストレプトアビジンの固定化方法、および容量テストが使用されます。したがって、競合他社の値は、MSA10UM-10 の仕様としてではなく、ベンチマークのみに使用する必要があります。

ストレプトアビジン磁気ビーズはどのように機能しますか?

磁気ビーズ表面に固定化されたストレプトアビジンは、ビオチンに対する高親和性結合部位を提供します。

ビオチン化された抗体、抗原、タンパク質、ペプチド、またはオリゴヌクレオチドを MSA10UM-10 とインキュベートすると、ビオチン基が粒子表面のストレプトアビジンに結合します。

結果として得られる複合体は次のように表すことができます。

磁気ビーズ – ストレプトアビジン – ビオチン – リガンド

ビオチン化リガンドはターゲットの生物学的認識を提供し、磁気ビーズは収集、洗浄、および試薬の取り扱いのための固相を提供します。

ストレプトアビジンでコーティングされた磁性粒子は、ビオチン化タンパク質、免疫グロブリン、核酸を分離するためのマトリックスとして広く使用されています。

ビオチン化捕捉抗体を使用した例

磁気サンドイッチイムノアッセイには次の手順が含まれる場合があります。

1. ビオチン化捕捉抗体を準備します。

2. 抗体をMSA10UM-10とインキュベートします。

3. ビオチン グループが表面ストレプトアビジンに結合できるようにします。

4. 抗体をロードしたビーズを磁気的に収集します。

5. 未結合の抗体を除去します。

6. 選択した試薬配合物にビーズを再懸濁します。

7. ビーズをサンプルとインキュベートします。

8. 標的抗原を捕捉します。

9. 標識された検出抗体を追加します。

10. 免疫複合体を磁気的に収集して洗浄します。

11. 選択したシグナル試薬を追加またはトリガーします。

12. 分析信号を測定します。

ビオチン化抗原を使用した例

抗体検出アッセイの場合:

1. ビオチン化抗原を準備します。

2. 抗原をMSA10UM-10にロードします。

3. 未結合の抗原を除去します。

4. 抗原をロードしたビーズをサンプルとインキュベートします。

5. ターゲット特異的な抗体を捕捉します。

6. 標識二次抗体を追加します。

7. 磁気回収と洗浄を行います。

8. 結果として得られる分析信号を測定します。

ビオチン化オリゴヌクレオチドを使用した例

ビオチン化オリゴヌクレオチドは、次の目的で固定化できます。

• 核酸の捕捉。

• ハイブリダイゼーションアッセイ;

• アプタマーベースの検出。

• ターゲットの強化。

• プローブの固定化。

• 分子診断研究;

• プルダウン実験。

• 増幅前のサンプル準備。

ビオチン化の位置と程度は、ハイブリダイゼーションまたは標的認識活性を維持するように選択する必要があります。

MSA10UM-10の主な特長

10μmの粒子サイズを定義

MSA10UM-10 は、幅広いマイクロメートルスケール範囲ではなく、定義された 10µm 粒子フォーマットを提供します。

粒子サイズは以下に影響を与える可能性があります。

• 単位質量あたりの粒子数。

• 利用可能な幾何学的表面積。

• リガンドへのアクセス可能性。

• 重力による沈降。

• 磁気収集;

• 収集ゾーンの形成。

• 洗浄効率。

• 再分散;

• 自動化された液体ハンドリング。

粒度分布が制御された正確な 10 µm のストレプトアビジン磁性粒子が市販されていますが、個々の製品のマトリックスと磁性材料の含有量は異なります。

ストレプトアビジン機能性表面

ビーズ表面は、ビオチン化リガンドに対する親和性結合部位を提供します。

潜在的なリガンドには次のものがあります。

• ビオチン化モノクローナル抗体。

• ビオチン化ポリクローナル抗体。

• ビオチン化組換え抗原;

• ビオチン化天然タンパク質。

• ビオチン化ペプチド;

• ビオチン化酵素;

• ビオチン化アプタマー;

• ビオチン化 DNA プローブ;

• ビオチン化 RNA プローブ;

• ビオチン化ハプテン。

• 他のビオチン標識認識分子。

固形分1%配合

w/v で表すと、1% 固形分懸濁液は約 10mg/mL に相当します。

おおよそのビーズ質量の計算は次のとおりです。

• 10µL には約 0.1mg のビーズが含まれます。

• 50μLには約0.5mgのビーズが含まれています。

• 100µL には約 1mg のビーズが含まれます。

• 500μLには約5mgのビーズが含まれます。

• 1mL中に約10mgのビーズが含まれます。

これらの計算は、記載されている 1% 濃度が w/v で表されていることを確認した後にのみ使用してください。

Sigma-Aldrich と KBsphere は両方とも、正確な 10µm のストレプトアビジン磁性粒子を固形分 1% または 10mg/mL でリストしており、これは競合比較やメソッド開発の開始濃度としてよく知られています。

追加のビーズのアクティベーションは必要ありません

適切にビオチン化されたリガンドは、通常、EDC/NHS または別の共有結合試薬を使用して磁気ビーズ表面を活性化することなくロードできます。

これにより、同じビーズプラットフォームを使用して複数のビオチン化捕捉分子を比較できるため、アッセイ開発を簡素化できます。

はっきりと観察できる磁気コレクション

適合する磁場の下では、より大きなマイクロメートルスケールの粒子が、はっきりと見える収集ゾーンを形成する可能性があります。

これは、研究者が以下を監視するのに役立ちます。

• 磁気収集が完了しているかどうか。

• 吸引中に粒子が失われるかどうか。

• 集約が発生したかどうか。

• 洗いが安定しているかどうか。

• 捕集した粒子が完全に再分散されているかどうか。

実際の磁気収集は、磁性材料の含有量、磁石の強さ、ビーズの濃度、容器の形状、サンプル量、液体の粘度によって異なります。

研究から生産までの供給

MSA10UM-10 は以下をサポートできます。

• 初期の実現可能性評価。

• ビオチン化リガンドのスクリーニング;

• イムノアッセイの最適化。

• サンプル前処理の開発。

• 自動アナライザー評価。

• 安定性の研究;

• パイロット製造。

• ロットの一貫性評価。

• 原材料の一括調達。

10µm ストレプトアビジン磁気ビーズを選択する理由

正確な 10µm 製品の位置決め

MSA10UM-10 は、開発プロジェクト、原材料仕様、または既存のワークフローに公称 10µm のストレプトアビジン磁性キャリアが必要なお客様向けに位置付けられています。

確立されたサプライヤーは、正確に 10µm のストレプトアビジンでコーティングされた磁性粒子を提供しており、これがビオチンの捕捉および分離用途で認められた商用フォーマットであることを確認しています。

便利なマニュアル観察

より小さい磁気ビーズと比較して、10µm の粒子は手動現像時に観察しやすい場合があります。

これにより、以下が簡素化される場合があります。

• 磁気回復評価;

• 上清の除去。

• 繰り返しの洗濯。

• 集計検査;

• ビード損失のトラブルシューティング;

• 再分散評価。

サンプルの前処理での使用の可能性

リガンドをロードした MSA10UM-10 は、下流分析の前にターゲットを捕捉または濃縮するために評価できます。

潜在的なターゲットには次のようなものがあります。

• タンパク質;

• 抗原;

• 抗体;

• 細胞;

• 微生物;

• 生体粒子。

• 核酸;

• その他の親和性が認められた素材。

市販の 10µm ストレプトアビジン システムは、タンパク質精製、免疫沈降、核酸精製、細胞または細胞小器官の単離に使用されます。

実用的な繰り返し洗濯

MSA10UM-10 は、以下を必要とするワークフローで評価できます。

• 再現可能な磁気回復。

• 上澄みの除去を制御。

• 粒子損失が少ない。

• 一貫した洗浄。

• 完全な再分散。

• 定義された残留液体量。

重要な表面積のトレードオフ

同様の材質と密度を持つ球形粒子の場合、粒子直径が大きくなると、単位質量あたりに利用できる粒子の数と幾何学的表面積が減少します。

したがって、1µm または 3µm ビーズを使用して開発されたプロトコルは、再最適化せずに 10µm ビーズに直接転送しないでください。

• ビーズの投与量;

• リガンド対ビーズの比。

• ロード時間。

• 混合条件；

• サンプルのインキュベーション時間。

• 洗濯条件

• 最終的なビーズ濃度。

自動化には特定の検証が必要です

MSA10UM-10 は自動または半自動磁気免疫測定装置用に評価できますが、互換性を想定すべきではありません。

Thermo Fisher は、自動化プラットフォームに適した磁性ビーズ製品と主に手動処理を目的とした製品を区別し、自動化の互換性が磁性だけではなく粒子システムと機器に依存することを実証しています。

重要なアナライザー パラメーターには次のものがあります。

• 試薬とリザーバーの混合。

• スタンバイ中の粒子の沈降。

• ピペットチップ内径;

• チューブの寸法;

• ビーズの分注精度。

• 反応容器の形状。

• 磁石の位置。

• 磁気収集時間。

• 吸引高さ;

• 洗浄量。

• 再分散;

• 持ち越す;

• 流体が詰まる危険性があります。

10µm 対 5µm、3µm、および 1µm ストレプトアビジン ビーズ

公称粒径のみを評価すべきではありません。その他の重要な違いは次のとおりです。

• 粒度分布;

• 磁性材料の含有量;

• 表面マトリックス;

• ストレプトアビジンの負荷;

• 活性なビオチン結合能力。

• ブロッキング配合。

• 非特異的結合。

• サスペンションバッファー。

• ビーズの凝集。

• 機能アッセイのパフォーマンス。

望ましい製品は、目的のアッセイでの並列テストを通じて選択する必要があります。

免疫測定試薬開発への応用

MSA10UM-10 は次の点で評価できます。

• 磁気サンドイッチイムノアッセイ;

• 抗体検出アッセイ;

• 競合的イムノアッセイ;

• 化学発光イムノアッセイの開発。

• 電気化学発光の研究;

• 免疫磁気標的の濃縮。

• サンプルの前処理;

• アフィニティキャプチャ。

• 免疫沈降研究;

• タンパク質相互作用の研究;

• ビオチン化核酸の捕捉。

• 細胞または微生物の分離。

10µm 粒子フォーマットの適合性は、ターゲット、サンプルマトリックス、反応容器、磁気分離器、および下流の検出システムによって異なります。

化学発光免疫測定法への応用

磁気サンドイッチ免疫測定法

ビオチン化捕捉抗体をMSA10UM-10にロードできます。

抗体をロードした磁気ビーズがサンプルから標的抗原を捕捉します。標識された検出抗体はサンドイッチ免疫複合体を形成します。

磁気収集および洗浄後、検出ラベルは化学発光シグナルを生成します。

重要な開発変数には次のものがあります。

• 磁気ビーズの投与量;

• 捕捉抗体のロード。

• 抗体のビオチン化の程度。

• サンプル量;

• キャプチャ時間。

• 検出抗体濃度;

• 洗浄効率。

• 化学発光基質。

• シグナル対バックグラウンドの比。

抗体検出アッセイ

ビオチン化抗原を MSA10UM-10 に固定化し、研究サンプルから標的抗体を捕捉できます。

潜在的な用途には次のようなものがあります。

• 感染症の抗体研究。

• 自己抗体研究;

• ワクチン反応研究;

• 組換え抗原の評価;

• 抗体反応のモニタリング。

競合免疫測定法

ビオチン化抗原、ハプテン、または低分子コンジュゲートは、競合イムノアッセイの開発のために固定化できます。

このフォーマットは、標的分析物が従来の 2 抗体サンドイッチ構造をサポートできない場合に評価できます。

電気化学発光の研究

MSA10UM-10 は、電気化学発光イムノアッセイ研究で評価される可能性があります。

互換性は次のようにして確認する必要があります。

• 磁気位置決めモジュール;

• 電極構成；

• 電気化学発光標識。

• 反応バッファー。

• 反応容器；

• 流体経路。

• 洗浄順序。

• 信号読み取りプログラム。

免疫磁気の強化

MSA10UM-10 にロードされたビオチン化アフィニティー リガンドは、以下の濃縮について評価できます。

• タンパク質;

• 抗原;

• 細胞;

• 微生物;

• 生体粒子。

• その他の親和性が認識されるターゲット。

核酸およびアプタマーの捕捉

ビオチン化された DNA、RNA、またはアプタマー プローブは、以下のために固定化できます。

• ハイブリダイゼーションアッセイ;

• 核酸の濃縮。

• 増幅前のターゲット捕捉。

• アプタマーベースの検出。

• バイオセンサーの開発。

• 分子診断研究;

• DNA とタンパク質の相互作用の研究。

ストレプトアビジン磁性粒子は、ビオチン化タンパク質、免疫グロブリン、および核酸を分離するための確立されたマトリックスです。

適合するビオチン化抗体および生体分子

ビオチン化抗体

重要な抗体変数には次のものがあります。

• 抗体の純度。

• 抗体濃度;

• ビオチン化化学;

• ビオチン化の程度;

• ビオチンの位置;

• 抗体の凝集。

• 抗原結合活性の保持。

• オリジナル配合バッファー。

過剰なビオチン化により、抗体活性が低下したり、固定化後に好ましくない配向が生じたりする可能性があります。

ビオチン化が不十分であると、ビーズのローディングが減少する可能性があります。

ビオチン化抗原

ビオチン化抗原は抗体検出アッセイに使用できます。

開発者は、ビオチン化によって重要な抗原エピトープが修飾されたりブロックされたりしないことを確認する必要があります。

ビオチン化ペプチド

潜在的な用途には次のようなものがあります。

• 抗体スクリーニング;

• エピトープ分析;

• 競合的イムノアッセイ;

• タンパク質相互作用の研究;

• アフィニティキャプチャ。

ビオチン化オリゴヌクレオチド

ビオチンは、5' 末端、3' 末端、またはその他の検証された位置に導入できます。

修飾位置は、固定化後にハイブリダイゼーション、標的認識、またはアプタマー活性を維持する必要があります。

ビオチン化タンパク質と酵素

ビオチン化された組換えタンパク質または酵素は、以下について評価できます。

• タンパク質相互作用の研究;

• 酵素アッセイ;

• アフィニティの強化。

• バイオセンサーの開発。

• 校正材料の準備。

推奨されるビオチン化リガンドのロードワークフロー

次のワークフローは、一般的な開発フレームワークです。これは、検証された製品固有のプロトコルではありません。

ステップ 1: ビオチン化リガンドの特性評価

記録：

• リガンドの正体。

• 分子量;

• 集中;

• 純度;

• オリジナル配合。

• ビオチン化法;

• ビオチン化の推定程度。

• 生物活動;

• 集計ステータス。

• 安定化添加剤。

ステップ 2: 過剰な遊離ビオチンを除去する

遊離ビオチンまたは未反応の小さなビオチン化化合物は、目的の抗体、抗原、またはプローブがロードされる前に、利用可能なストレプトアビジン結合部位を占有する可能性があります。

分子サイズとビオチン化手順は実際の結合能力に影響を与えるため、Spherotech では、過剰な遊離ビオチン化プライマーを除去し、ビーズ量を最適化することを推奨しています。

考えられる精製方法には次のものがあります。

• 脱塩;

• 透析;

• サイズ排除クロマトグラフィー;

• 限外濾過;

• 必要に応じて HPLC または FPLC;

• 別の検証済みの精製方法。

ステップ 3: MSA10UM-10 を完全に再懸濁します。

サンプリングする前に、元のビーズ懸濁液を均一になるまで混合します。

考えられる方法は次のとおりです。

• 穏やかな反転。

• ローラー混合。

• エンドオーバーエンド回転。

• 制御された渦流。

• 別の検証済みの混合方法。

10µm の粒子が保管中やプロセス保持中に沈降する可能性があるため、複数のアリコートを調製する場合は適切な混合を維持してください。

過度の泡立ちは避けてください。

ステップ 4: 必要なビーズ質量を計算する

濃度が 10mg/mL であると仮定すると、次のようになります。

ビーズ質量 = 懸濁液量 × 10mg/mL

1 つの条件だけをテストするのではなく、複数のビーズ投与グループを準備します。

ステップ 5: ビーズを洗浄または平衡化する

互換性のある磁気分離器を使用して粒子を収集します。

必要に応じて元の懸濁液を除去し、検証済みのリガンドローディングバッファーでビーズを平衡化します。

磁気ビーズを乾燥させないでください。

ステップ 6: ビオチン化リガンドの追加

いくつかのリガンド対ビーズの比率を評価します。

考えられる実験グループは次のとおりです。

• リガンド負荷が低い。

• 中程度のリガンド負荷。

• 高いリガンド負荷。

• 異なるインキュベーション時間。

• 異なる温度。

• さまざまな緩衝液配合。

ステップ 7: 穏やかな混合を維持する

生物学的リガンドを損傷することなく均一なビーズとリガンドの接触を維持するには、十分な混合を行ってください。

10µm ビーズの場合、混合によりリガンドのローディング中の不均一な沈降を防ぐ必要があります。

ステップ 8: ロードされたビーズを磁気的に収集する

標準化:

• マグネット式。

• 容器;

• 反応量；

• ビーズ濃度;

• 収集時間。

• 収集位置。

• 残液量。

ステップ 9: 上清を保持する

リガンドのローディング効率を測定する必要がある場合は、ローディング後の上清を保持してください。

ステップ 10: ロードされたビーズを洗浄する

取り除く：

• 未結合のビオチン化リガンド。

• 残留遊離ビオチン。

• 不要な配合成分。

• その他の未結合マテリアル。

ステップ 11: 最終バッファーでの再懸濁

考えられる配合成分には次のものがあります。

• バッファ;

• 塩;

• タンパク質安定剤;

• 合成ポリマー;

• 界面活性剤;

• 防腐剤;

• 砂糖またはポリオール。

• ブロックコンポーネント。

ステップ 12: 機能パフォーマンスを評価する

推奨されるテストは次のとおりです。

• リガンドローディング効率。

• 標的捕獲能力。

• ブランク信号。

• ポジティブなシグナル。

• シグナル対バックグラウンド比。

• 磁気回復;

• ビーズの再分散。

• 精度;

• 加速された安定性。

• リアルタイムの安定性。

イムノアッセイで MSA10UM-10 を最適化する方法

ビーズの投与量を最適化する

完全なアッセイでいくつかのビーズの量を比較します。

ビーズが少なすぎると、ターゲットの捕捉が制限される可能性があります。

ビーズが多すぎると増加する可能性があります。

• 試薬の消費量;

• ブランク信号。

• 非特異的吸着;

• 洗濯要件;

• 残留ビード干渉。

• 楽器の持ち越し。

ビオチン化リガンドのローディングを最適化

ビーズ 1 ミリグラムあたりの数量のビオチン化抗体または抗原を評価します。

最も高いリガンド負荷条件が必ずしも最良の分析条件であるとは限りません。

過度の負荷は次の原因となる可能性があります。

• 立体的な混雑。

• ターゲットへのアクセス可能性の低下。

• より高い非特異的結合。

• 機能的活動の低下。

• 保存安定性が劣ります。

ビオチン化の程度を最適化する

異なるビオチン化レベルのリガンドを比較します。

評価する：

• ビーズ充填効率。

• 生物活性の保持。

• ターゲット捕捉パフォーマンス。

• ブランク信号。

• ポジティブなシグナル。

• 精度;

• 安定性。

混合の最適化

10µm の粒子はインキュベーション中に沈降する可能性があるため、以下を評価します。

• 連続混合と断続混合。

• 回転速度;

• 振盪速度;

• 混合時間。

• 反応容器の形状。

• ビードの均一性。

• 泡の形成。

• リガンドの安定性。

磁気分離を最適化

評価する：

• 磁石の強さ。

• 磁石の位置。

• 収集時間。

• 反応容器の形状。

• ビーズ濃度;

• 緩衝液の粘度。

• 残留液体。

• 吸引中のビーズの損失。

洗浄を最適化する

比較する：

• 洗浄緩衝液組成物；

• 界面活性剤の濃度。

• 洗浄量。

• 洗濯サイクルの数。

• 洗濯中の混合。

• 磁気収集時間。

• 残留洗浄量。

洗浄が不十分であると、アッセイのバックグラウンドが増加する可能性があります。過剰な洗浄はビーズの回収率を低下させたり、敏感なアッセイ成分に影響を与えたりする可能性があります。

ブロッキングとストレージの配合を最適化

潜在的な配合変数には次のものがあります。

• プロテインブロッカー;

• 合成ブロッキングポリマー;

• 非イオン性界面活性剤;

• イオン強度;

• 砂糖;

• ポリオール;

• 防腐剤。

最終的な製剤は、粒子の分散、低バックグラウンド、ストレプトアビジン活性、およびリガンドの安定性をサポートする必要があります。

自動アナライザーのパラメーターを最適化する

自動イムノアッセイ開発の場合、以下を評価します。

• 試薬とリザーバーの混合頻度。

• スタンバイ中のビーズの沈降。

• ビーズの分注精度。

• チップとチューブの寸法。

• インキュベーション混合。

• 磁気収集時間。

• 吸引高さ;

• 洗濯サイクル。

• 残存量;

• ビーズの再分散。

• 持ち越す;

• 流体閉塞のリスク。

ビオチン結合性能を評価する方法

総ビオチン結合能

標識ビオチン試薬を使用して、利用可能なストレプトアビジン結合部位を推定できます。

市販の正確な 10µm 製品は、異なる粒子、試験分子、ビーズ濃度ベース、および分析方法を使用しているため、実質的に異なる容量値を報告します。

したがって、MSA10UM-10 には、独自の検証済みのテスト方法と内部許容範囲が必要です。

ビオチン化抗体のローディング

ロード前後の抗体量を測定します。

おおよその計算は次のとおりです。

ロードされた抗体 = 初期抗体 − 未結合抗体

考えられる分析方法には次のものがあります。

• 紫外線吸光度;

• BCA アッセイ。

• ブラッドフォードアッセイ;

• 蛍光測定;

• エリサ;

• 別の検証済みタンパク質アッセイ。

機能的なターゲット捕捉能力

化学的リガンドの負荷は、抗体または抗原が生物学的に活性を維持していることを証明するものではありません。

機能テストでは、代表的なアッセイ条件下で実際のターゲット捕捉を測定する必要があります。

非特異的結合

比較する：

• アンロードされたストレプトアビジンビーズ。

• リガンドをロードしたビーズ。

• ブロックされたビーズ;

• 陰性サンプル;

• 陽性サンプル;

• 代表的な干渉物質。

磁気回復

磁気収集と洗浄を繰り返した後のビーズの回収率を測定します。

イムノアッセイのパフォーマンス

評価する：

• ブランク信号。

• 負のサンプル信号。

• 低陽性シグナル。

• 高陽性シグナル。

• シグナル対バックグラウンド比。

• 精度;

• 回復;

• 直線性。

• 特異性;

• フック効果。

• 安定性。

研究およびバッチ生産のための品質管理

外観と分散

検査:

• サスペンションの外観。

• 目に見える集約。

• 沈降挙動;

• 混合後の均一性。

• 再分散が容易。

• プロセス中の安定性が保持されます。

粒子サイズと分布

適切な検証済みの方法を使用して、公称 10µm の粒子サイズを確認します。

バッチ製造の場合は、平均粒子サイズと粒子サイズ分布の両方を監視します。

固形分含有量

固形分濃度は以下に影響を与えるため、確認してください。

• ビーズ質量の計算;

• リガンドローディング計算;

• アッセイ製剤；

• 充填精度;

• 生産収量。

ストレプトアビジン活性

標準化されたビオチン結合テストを使用して、ビーズ表面の機能的なストレプトアビジン活性を評価します。

ビオチン結合能

検証されたテスト方法と内部許容範囲を確立します。

競合他社の値は、MSA10UM-10 の仕様としてではなく、ベンチマーク情報としてのみ使用してください。

ビオチン化抗体のローディング

代表的なビオチン化抗体を使用して、実際のリガンドローディングパフォーマンスを評価します。

磁気収集性能

標準化:

• 磁石;

• 容器;

• サンプル量;

• バッファ;

• ビーズ濃度;

• 温度;

• 収集時間。

非特異的結合

代表的なタンパク質、抗体、サンプルマトリックスを使用してバックグラウンドを評価します。

機能的免疫測定のパフォーマンス

推奨されるテストは次のとおりです。

• ブランク信号。

• 負のサンプル信号。

• 正のサンプル信号。

• シグナル対バックグラウンド比。

• 分析感度。

• 精度;

• 回復;

• 直線性。

• 特異性;

• 安定性。

ロット間の一貫性

日常的な製造では、次の許容範囲を確立します。

• 粒子サイズ;

• 粒度分布;

• 固形分含有量。

• ストレプトアビジン活性。

• ビオチン結合能。

• 磁気収集;

• 分散;

• 非特異的結合。

• 機能的イムノアッセイのパフォーマンス。

原材料の最終的な承認は、完全なアッセイシステムでの性能に基づいて行う必要があります。

免疫アッセイメーカー向けのスケールアップと大量供給

評価段階

評価サンプルは以下のスクリーニングをサポートできます。

• ビオチン化捕捉抗体。

• ビオチン化抗原;

• ビーズの投与量;

• リガンド負荷レベル。

• ブロッキング配合。

• 磁気分離。

• ターゲット捕捉効率。

• アッセイ感度。

• バックグラウンド信号。

パイロットスケールステージ

パイロット数量は以下をサポートできます。

• リガンドローディングプロセスの確認。

• 試薬の配合;

• アナライザーの互換性テスト。

• 安定性の研究;

• 充填プロセスの評価。

• 初期のロット一貫性テスト。

バッチ生産段階

バルク供給計画には次のものが含まれる場合があります。

• 年間需要。

• 購買予測;

• 梱包体積。

• 品質仕様。

• 技術文書。

• 高品質のドキュメント。

• 予約済みロットの要件。

• 変更管理への期待。

• 安全在庫計画。

商用の正確な 10µm 製品は、実験室用パッケージおよびシリーズベースの産業用供給形式で提供されており、このカテゴリではパッケージングの拡張性と品質文書が重要な購入要素であることがわかります。

スケールアップに関する考慮事項

実験室でのリガンドローディング手順は、試薬量を増やすだけで拡大するべきではありません。

再検証：

• 容器の形状。

• 混合効率。

• ビーズ懸濁液の均一性。

• リガンド付加シーケンス。

• インキュベーション時間。

• 温度均一性。

• 磁気収集;

• 洗浄効率。

• プロセス保持時間。

• 最終充填の均一性。

リガンドのローディング、保管、充填中に均一な懸濁液を維持することは、10µm ビーズの場合特に重要です。

カスタムストレプトアビジン磁気ビーズサービス

SHBC は、バイオテクノロジー企業、研究機関、イムノアッセイメーカー向けにカスタマイズされたストレプトアビジン磁気ビーズ要件を評価できます。

考えられるカスタマイズ オプションには次のものがあります。

• 代替粒子サイズ;

• カスタマイズされた固形分含有量。

• ストレプトアビジンの負荷を調整。

• 顧客固有のビオチン結合ターゲット。

• 代替ブロッキング システム。

• カスタマイズされたサスペンションバッファー;

• 代替防腐剤システム;

• 顧客指定の pH。

• 特殊な梱包体積。

• パイロットスケールの製造。

• 大量生産;

• OEM パッケージ。

• プライベートブランドサービス。

• 顧客固有の品質テスト。

カスタマイズの実現可能性は、要求された仕様、対象用途、検証要件、注文数量によって異なります。

保管と取り扱いに関する推奨事項

MSA10UM-10 は、製品ラベル、技術データシート、およびロット固有の分析証明書に従って保管してください。

一般的な取り扱いに関する推奨事項は次のとおりです。

• サンプリング前に十分に混合してください。

• 分注中に懸濁液の均一性を維持します。

• 清潔で校正された機器を使用してください。

• 磁気ビーズを乾燥させないようにしてください。

• 微生物や化学物質の汚染を防ぎます。

• 特に検証されない限り、凍結は避けてください。

• 極端な温度への不必要な暴露を避けてください。

• バッファ交換前にバッファの互換性を確認してください。

• 遊離ビオチンによる汚染を防ぎます。

• 製品のロット番号を記録します。

• リガンドをロードしたビーズの安定性を個別に評価します。

スフェロテックは、ストレプトアビジン粒子を液体中に維持し、乾燥や凍結を避け、取り扱い中は均一な懸濁液を使用することを推奨しています。 KBsphere はまた、マイクロメートルスケールの磁気ビーズは保管中に沈殿する可能性があるため、使用前に混合する必要があると述べています。

よくある質問

MSA10UM-10とは何ですか？

MSA10UM-10 は、イムノアッセイ研究、サンプル前処理およびバッチ試薬製造においてビオチン化生体分子を捕捉するために固形分 1% で供給される 10 µm ストレプトアビジン機能性磁気ビーズ懸濁液です。

固形分1%ってどういう意味ですか？

w/v で表すと、1% 固形分は懸濁液 1 ミリリットルあたり約 10 mg の磁気ビーズに相当します。

MSA10UM-10 はどの分子を捕捉できますか?

MSA10UM-10 は、ビオチン化抗体、抗原、タンパク質、ペプチド、アプタマー、DNA、RNA、およびその他のビオチン標識分子への結合について評価できます。

拘束原則とは何ですか?

選択されたリガンド上のビオチンは、磁気ビーズ表面に固定化されたストレプトアビジンに結合します。

MSA10UM-10 には EDC または NHS のアクティベーションが必要ですか?

通常、適切にビオチン化されたリガンドをロードするために追加の EDC/NHS ビーズ活性化は必要ありません。

捕捉抗体は含まれていますか?

No.MSA10UM-10はストレプトアビジン磁性ビーズ原料として供給されます。お客様は、必要なビオチン化捕捉リガンドを選択して準備します。

1% 懸濁液はそのまま使用できますか?

必ずしもそうとは限りません。最適な使用濃度は、リガンド、ターゲット濃度、サンプル量、アッセイ形式、分析装置によって異なります。

なぜ 10µm の粒子サイズを選択するのでしょうか?

10µm フォーマットは、プロジェクトでより大きな磁性固相、明確に観察できる磁気収集、繰り返しの洗浄、サンプルの前処理、または既存の 10µm 原材料仕様との互換性が必要な場合に評価できます。

10µm ビーズと 5µm ビーズの違いは何ですか?

同様の材料の 5μm 粒子と比較して、10μm 粒子は一般に個々のビーズの数が少なく、単位質量あたりの幾何学的表面積が小さくなりますが、より顕著な沈降と異なる磁気収集挙動を示します。

10µm ビーズと 1µm ビーズの違いは何ですか?

一般に、1µm 形式では、単位質量あたりの粒子の数が増え、幾何学的表面積が大きくなります。 10µm フォーマットでは目視観察が容易ですが、沈降、混合、自動液体処理には細心の注意が必要です。

10μmの磁性ビーズは沈降しますか?

マイクロメートルスケールの磁性粒子は、保管、インキュベーション、および一時的なプロセス保持中に沈降する可能性があります。懸濁液はサンプリング前に混合し、処理中は適切な混合状態を維持する必要があります。

MSA10UM-10 は化学発光イムノアッセイに使用できますか?

MSA10UM-10はCLIA開発における磁性固相として評価可能です。完全な試薬システムおよび分析装置との互換性を検証する必要があります。

電気化学発光アッセイで評価できますか?

この製品は ECL 研究で評価される場合があります。電極、磁気位置決めシステム、流体経路および信号化学との適合性を実験的に確認する必要があります。

MSA10UM-10は自動分析装置で使用できますか?

自動または半自動システムについて評価される場合があります。分注、混合、磁気収集、吸引、洗浄、再分散、および流体経路の適合性は、特定の分析装置で検証する必要があります。

どれくらいの量のビオチン化抗体をロードする必要がありますか?

最適な量は、検証された結合能力、抗体分子量、ビオチン化の程度、およびアッセイ要件によって異なります。いくつかの負荷レベルを比較する必要があります。

抗体を増やすと常に感度が向上しますか?

いいえ、過剰なリガンドの負荷は立体混雑を引き起こし、ターゲットへのアクセス性を低下させ、非特異的結合を増加させる可能性があります。

遊離ビオチンはローディングを妨げることがありますか?

はい。遊離ビオチンは利用可能なストレプトアビジン結合部位を占有し、目的のビオチン化抗体、抗原、またはプローブの負荷を軽減することができます。

リガンドのローディング効率はどのように測定できますか?

最初のリガンドの量とロード後の上清に残っている量を比較します。機能的な標的捕捉活性も測定する必要があります。

非ビオチン化抗体は特異的に結合できますか?

非ビオチン化抗体は、ストレプトアビジンとビオチンの相互作用を通じて特異的に結合するとは考えられません。観察された結合は、非特異的吸着に起因する可能性があります。

MSA10UM-10はどのように混合すればよいですか？

懸濁液が均一になるまで、反転、ローラー混合、上下回転、または制御されたボルテックスなどの検証された方法を使用して混合します。

磁気収集が不完全な場合は何を確認する必要がありますか?

チェック：

• 磁石の強さ。

• 収集時間。

• ビーズ濃度;

• 緩衝液の粘度。

• 粒子の凝集。

• 容器の形状。

• サンプル量。

リガンドの負荷が低い場合は何を確認する必要がありますか?

評価する：

• ビオチン化の程度;

• ビオチン汚染なし。

• リガンド濃度;

• ビーズの量;

• ロード時間。

• バッファの互換性。

• リガンドの凝集。

アッセイのバックグラウンドが高い場合は何を確認する必要がありますか?

評価する：

• ブロッキング配合。

• ビーズの投与量;

• リガンド充填密度。

• 洗浄効率。

• サンプルマトリックス;

• 非特異的吸着;

• 検出試薬の濃度。

MSA10UM-10は完成した診断薬ですか？

No.MSA10UM-10は研究および試薬開発の原料として供給されます。お客様は、完成した試薬、製造プロセス、および意図された用途を検証する責任を負います。

評価サンプルはありますか?

評価サンプルについては、用途、ビオチン化リガンド、必要な検査量に応じてご相談させていただきます。

大量供給は可能ですか?

適格な研究、開発、製造プロジェクト向けに、パイロットスケールおよびバルク供給を手配できます。

濃度、緩衝液、パッケージングは​​カスタマイズできますか?

プロジェクトの要件に応じて、カスタマイズされた固形分、ストレプトアビジンの充填量、懸濁バッファー、ブロッキング システム、およびパッケージング形式を評価できます。

サンプルまたは一括見積もりをリクエストする

MSA10UM-10 10µm ストレプトアビジン磁気ビーズの評価サンプル、技術情報、または一括見積をリクエストするには、SHBC にお問い合わせください。

以下を提供してください:

• 意図されたイムノアッセイ用途;

• ビオチン化された抗体、抗原、またはその他のリガンド。

• リガンドの分子量;

• ビオチン化法;

• ビオチン化の推定程度。

• サンプルマトリックス;

• 必要な評価数量。

• 推定パイロット数量。

• 予想される年間需要。

• 望ましい包装体積。

• 必要な技術文書。

• 必要な品質文書。

• 目標開発スケジュール。

• カスタム仕様の要件。

SHBC は、初期のリガンド充填評価およびイムノアッセイの最適化からパイロット生産およびバルク製造に至るまで、ストレプトアビジン磁気ビーズ プロジェクトをサポートします。