20 um Streptavidin-Mikrosphären SAPS20UM-10 1 %

20 µm Streptavidin-Mikrosphären für die biologische Forschung

SHBC SAPS20UM-10 Streptavidin-Mikrokügelchen sind 20 µm große oberflächenfunktionalisierte Mikrokügelchen, die für die Immobilisierung und das Einfangen von biotinylierten Antikörpern, Antigenen, Proteinen, Peptiden, Enzymen, Rezeptoren, Oligonukleotiden, DNA, RNA, Aptameren und anderen mit Biotin markierten Molekülen entwickelt wurden.

Das Produkt wird als Suspension mit 1 % Feststoffgehalt geliefert und ist für die biologische Forschung, die Entwicklung von perlenbasierten Immunoassays, Affinitätsinteraktionsstudien, die Erfassung von Nukleinsäuren, Mikroskopie, Mikrofluidik, Zell-Partikel-Interaktionsforschung, partikelbasierte Biosensoren und die Herstellung von Forschungsreagenzien konzipiert.

Der Partikeldurchmesser von 20 µm sorgt für eine große individuelle Mikrokugeloberfläche und eine deutlich sichtbare Partikelpopulation im Mikrometerbereich. Im Vergleich zu kleineren Mikrokügelchen lassen sich die Partikel leichter mikroskopisch beobachten, in partikelbasierten Analysesystemen identifizieren und mit einer entsprechend validierten Trennmethode zurückgewinnen.

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. unterstützt die Bewertung von Forschungsproben, die Entwicklung im Pilotmaßstab, die wiederholte Herstellung, OEM-Projekte, die Zusammenarbeit unter Handelsmarken und die Massenlieferung für Biotechnologieunternehmen, Universitäten, Forschungsinstitute, Reagenzhersteller, Instrumentenentwickler und biologische Forschungsorganisationen.

Schnelle Produktantwort

SAPS20UM-10 ist eine 20 µm große, mit Streptavidin beschichtete Mikrokügelchensuspension mit einem Feststoffgehalt von 1 %. Seine Streptavidin-funktionale Oberfläche fängt biotinylierte Biomoleküle für biologische Tests, Antikörper- und Proteinimmobilisierung, Nukleinsäureeinfang, Mikroskopie, Zellinteraktionsstudien, Affinitätsforschung und partikelbasierte Erkennungssystementwicklung ein.

Produkt-Highlights

• Produktname: 20 µm Streptavidin-Mikrosphären

• Katalognummer: SAPS20UM-10

• Marke: SHBC

• Hersteller: Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.

• Nomineller Partikeldurchmesser: 20 µm

• Oberflächenmodifikation: Streptavidin

• Feststoffgehalt: 1 %

• Bindungsprinzip: Streptavidin-Biotin-Affinität

• Physische Form: Wässrige Mikrokügelchen-Suspension

• Hauptanwendung: Biologische Forschung und Bead-basierte Assay-Entwicklung

• Lieferfähigkeit: Muster, Pilotchargen und Massenproduktion

• Individualisierung: Verfügbar je nach technischer Machbarkeit

• Verwendungszweck: Nur für Forschungszwecke

Was sind SAPS20UM-10 Streptavidin-Mikrosphären?

SAPS20UM-10 besteht aus 20 µm großen Mikrokügelchen mit auf der Partikeloberfläche immobilisiertem Streptavidin.

Die Streptavidin-Beschichtung stellt Bindungsstellen für biotinylierte Moleküle bereit. Ein biotinylierter Antikörper, ein Protein, ein Peptid, eine Nukleinsäuresonde, ein Rezeptor, ein Ligand oder ein anderes Biomolekül kann an die Mikrosphäre gebunden werden, ohne dass eine direkte Carbodiimid-Aktivierung der Partikeloberfläche durch den Endbenutzer erforderlich ist.

Nachdem das Fängermolekül immobilisiert wurde, können die vorbereiteten Mikrokügelchen als feste Phase fungieren für:

• Zielerfassung

• Immobilisierung von Biomolekülen

• Antikörper-Screening

• Proteininteraktionsanalyse

• Nukleinsäurehybridisierung

• Studien zur Zelloberflächenbindung

• Mikroskopiebasierte Assays

• Partikelbasierte Biosensoren

• Mikrofluidische Forschung

• Agglutinationsforschung

• Bead-basierte Immunoassays

• Studien zur Affinitätstrennung

Zu den potenziellen biotinylierten Fängermolekülen gehören:

• Monoklonale Antikörper

• Polyklonale Antikörper

• Rekombinante Antikörper

• Antikörperfragmente

• Antigene

• Rekombinante Proteine

• Peptide

• Enzyme

• Rezeptoren

• Lektine

• Wachstumsfaktoren

• Oligonukleotidsonden

• DNA-Sonden

• RNA-Sonden

• PCR-Produkte

• Aptamere

• Biotinylierte kleine Moleküle

Der Partikeldurchmesser von 20 µm ist deutlich größer als die Partikelgrößen, die üblicherweise für Immunoassays mit hoher Partikelzahl verwendet werden. Dadurch erhält jedes einzelne Mikrokügelchen eine relativ große physikalische Oberfläche, führt jedoch zu weniger Partikeln pro Masseneinheit als kleinere Mikrokügelchen aus demselben Material.

Das Produkt ist daher besonders geeignet, wenn der Forschungsschwerpunkt Folgendes umfasst:

• Große Oberfläche pro einzelnem Partikel

• Direkte mikroskopische Beobachtung

• Eindeutige Partikelidentifizierung

• Partikelmodellierung im Zellgrößenbereich

• Einzelpartikelanalyse

• Kontrollierte Partikelmanipulation

• Mikrofluidische Transportstudien

• Einfache visuelle Bestätigung der Genesung

• Größencodierte Partikelsysteme

SAPS20UM-10 wird als Forschungsrohstoff geliefert. Es sollte nicht automatisch als fertiges diagnostisches Reagenz, zertifizierter Partikelstandard, Absolutzählkügelchen, magnetisches Trennprodukt oder intern fluoreszierende Mikrosphäre dargestellt werden, es sei denn, diese Funktionen sind ausdrücklich in der endgültigen Spezifikation enthalten.

Technische Spezifikationen SAPS20UM-10

Die folgenden Parameter sollten anhand der endgültigen Produktspezifikation oder des chargenspezifischen Analysezertifikats bestätigt werden:

• Partikelmaterial

• Mittlerer Partikeldurchmesser

• Partikelgrößenbereich

• Partikelgrößenverteilung

• Variationskoeffizient der Partikelgröße

• Partikelmorphologie

• Partikeldichte

• Streptavidin-Beschichtungsniveau

• Biotin-Bindungskapazität

• Teilchenzahlkonzentration

• Aufhängepuffer

• Puffer-pH

• Stabilisator oder Tensid

• Konservierungsmittel

• Empfohlene Trennbedingungen

• Packungsgröße

• Haltbarkeit

• Lagerbedingungen

Die Biotin-Bindungskapazität sollte zusammen mit Folgendem angegeben werden:

• Die biotinylierte Testsonde

• Molekulargewicht der Sonde

• Anzahl der Biotingruppen

• Bindungspuffer

• Inkubationsbedingungen

• Waschvorgang

• Erkennungsmethode

• Berechnungsgrundlage

• Chargenspezifisches Ergebnis

Der Feststoffwert von 1 % allein kann nicht die Anzahl der Partikel pro Milliliter oder die Menge an biotinyliertem Liganden bestimmen, die immobilisiert werden kann.

Wie die Streptavidin-Biotin-Bindung funktioniert

Streptavidin ist ein Biotin-bindendes Protein, das eine stabile nichtkovalente Bindung biotinylierter Moleküle an die Oberfläche der Mikrokügelchen ermöglicht.

Wenn ein biotinylierter Ligand mit SAPS20UM-10 gemischt wird, bindet die Biotingruppe an verfügbare Streptavidinstellen auf dem Partikel.

Die allgemeine Struktur kann wie folgt dargestellt werden:

Mikrosphärenoberfläche – Streptavidin – Biotin – Fängermolekül

Für einen Antikörper-basierten Sandwich-Assay kann die Struktur wie folgt aussehen:

Mikrosphäre – Streptavidin – Biotinylierter Capture-Antikörper – Zielantigen – Erkennungsantikörper

Wenn der Nachweisantikörper eine fluoreszierende, enzymatische, kolorimetrische, chemilumineszierende oder andere messbare Markierung trägt, kann die Menge des mit den Partikeln verbundenen Ziels mithilfe einer kompatiblen Nachweismethode bewertet werden.

Vorteile der Streptavidin-Biotin-Immobilisierung

• Eine direkte EDC/NHS-Aktivierung ist normalerweise nicht erforderlich, wenn biotinylierte Liganden geladen werden.

• Eine Mikrosphärenplattform kann mit vielen verschiedenen biotinylierten Molekülen verwendet werden.

• Es können Antikörper, Proteine, Peptide, Oligonukleotide, DNA, RNA und Aptamere immobilisiert werden.

• Die Ligandenbeladung kann unter relativ milden wässrigen Bedingungen durchgeführt werden.

• Fängermoleküle können geändert werden, ohne dass die Basismikrosphäre neu gestaltet werden muss.

• Die Plattform unterstützt die modulare Assay-Entwicklung.

• Die Ligandenbeladung kann getrennt von der Zielerkennung optimiert werden.

• Die Mikrosphären können mit verschiedenen Reportersystemen verwendet werden.

• Die Plattform kann Einzelziel- und Multiplex-Forschung unterstützen.

Faktoren, die die Bindungsleistung beeinflussen

Die endgültige Ligandenbeladung und die Testleistung können beeinflusst werden durch:

• Streptavidin-Beschichtungsdichte

• Streptavidin-Aktivität

• Biotinylierungsgrad

• Lage der Biotingruppen

• Zugänglichkeit von Biotin

• Distanzstücklänge

• Molekulargröße des Liganden

• Ligandenreinheit

• Ligandenaggregation

• Überfüllung an der Oberfläche

• Pufferzusammensetzung

• Salzkonzentration

• Inkubationszeit

• Inkubationstemperatur

• Mischmethode

• Absetzen der Partikel

Freies Biotin und nicht umgesetzte biotinylierte Reagenzien können mit dem vorgesehenen Fängermolekül um verfügbare Streptavidin-Bindungsstellen konkurrieren. Daher kann die Entfernung von freiem Biotin oder überschüssigem biotinyliertem Primer vor der Ligandenimmobilisierung wichtig sein.

Warum sollten Sie sich für 20-µm-Streptavidin-Mikrosphären entscheiden?

Große Oberfläche pro einzelner Mikrosphäre

Eine 20-µm-Mikrokugel bietet eine größere physikalische Oberfläche pro einzelnem Partikel als 10-µm-, 5-µm-, 3-µm- oder 1-µm-Partikel.

Dies kann nützlich sein, wenn:

• Auf jedem einzelnen Partikel ist eine große Menge an Fängermolekülen erforderlich

• Eine starke Signalerzeugung pro Partikel ist erwünscht

• Einzelne Partikel werden mikroskopisch beobachtet

• Es ist eine Partikel-für-Partikel-Analyse erforderlich

• Es wird ein synthetisches Modell für den Zellgrößenbereich benötigt

• Es werden Oberflächenmuster oder lokale Bindungen untersucht

Ein größerer Partikel sorgt nicht zwangsläufig für eine höhere Gesamtoberfläche pro Milligramm. Kleinere Partikel bieten im Allgemeinen eine größere Anzahl von Partikeln und eine größere kollektive Oberfläche bei gleicher Massenkonzentration.

Einfache mikroskopische Beobachtung

Durch die Größe von 20 µm lassen sich einzelne Partikel mit geeigneter Hellfeld-, Phasenkontrast-, Fluoreszenz- oder Konfokalmikroskopie vergleichsweise einfach beobachten.

Mikroskopie kann unterstützen:

• Bewertung der Partikelmorphologie

• Aggregaterkennung

• Visualisierung der Ligandenbindung

• Studien zur Zell-Partikel-Interaktion

• Oberflächenfluoreszenzanalyse

• Partikellokalisierung

• Mikrofluidisches Tracking

• Bestätigung der Partikelwiederherstellung

Starke Partikelidentifizierung

Große Mikrokügelchen können in bildgebenden, mikrofluidischen, partikelzählenden und strömungsbasierten Analysesystemen klar von kleinen Trümmern und vielen Hintergrundpartikeln unterschieden werden.

Geeignet für die Erforschung von Zellgrößenbereichen

Der Durchmesser von 20 µm liegt innerhalb des breiten Größenbereichs vieler eukaryotischer Zellen und zellgroßer biologischer Strukturen.

SAPS20UM-10 kann bewertet werden für:

• Forschung an synthetischen Zellmodellen

• Partikeltransport in Zellgröße

• Studien zum Partikel-Zell-Kontakt

• Phagozytose oder Aufnahmeforschung

• Interaktion zwischen Zelloberflächenrezeptoren

• Mechanische Handhabung in mikrofluidischen Systemen

• Entwicklung von Bildgebungssystemen

Synthetische Mikrosphären reproduzieren nicht die vollständigen optischen, mechanischen, chemischen oder biologischen Eigenschaften lebender Zellen. Die Eignung als Zellmodell muss für jedes Projekt validiert werden.

Bequeme Wiederherstellung und Manipulation

Große Partikel können durch eine optimierte Zentrifugation, Filtration oder kontrollierte Sedimentationsmethode vergleichsweise einfach zurückgewonnen werden.

Die am besten geeignete Methode hängt ab von:

• Partikeldichte

• Partikelmaterial

• Verarbeitungsvolumen

• Zentrifugalkraft

• Zentrifugationszeit

• Porengröße filtern

• Rohrgeometrie

• Pufferviskosität

• Tensidkonzentration

• Erforderliche Wiederherstellungsrate

Geeignet für größencodierte Tests

Die 20-µm-Population kann in Forschungssystemen, die Partikel nach Größe unterscheiden, mit kleineren Mikrosphärenpopulationen kombiniert werden.

Größenbasierte Codierung kann nützlich sein in:

• Multiplex-Assays

• Multi-Analyten-Forschung

• Prozesskontrollen

• Bildbasierte Assays

• Mikrofluidische Sortierung

• Experimente zur Partikelverfolgung

Hauptmerkmale und Vorteile

20 µm nominaler Partikeldurchmesser

Die große Größe der Mikrokügelchen unterstützt die direkte Beobachtung, die Analyse einzelner Partikel, die größenbasierte Identifizierung, die biologische Modellierung und die Partikelmanipulation.

Streptavidin-funktionale Oberfläche

Die Oberfläche fängt biotinylierte Antikörper, Antigene, Proteine, Peptide, Enzyme, Oligonukleotide, DNA, RNA, Aptamere, Rezeptoren und andere biotinhaltige Moleküle ein.

1 % Feststoffsuspension

SAPS20UM-10 wird mit 1 % Feststoffgehalt geliefert und kann je nach erforderlicher Partikelanzahl, Reaktionsvolumen, Bindungskapazität und Nachweismethode verdünnt werden.

Einfache Capture-Liganden-Immobilisierung

Biotinylierte Fängermoleküle können ohne direkte chemische Aktivierung der Mikrosphärenoberfläche durch den Endbenutzer angebracht werden.

Große Oberfläche pro Partikel

Jede 20-µm-Mikrokugel bietet eine vergleichsweise große physikalische Oberfläche für die Ligandenimmobilisierung und Signalerzeugung.

Geeignet für mehrere Erkennungsplattformen

Die Partikel können ausgewertet werden mit:

• Optische Mikroskopie

• Fluoreszenzmikroskopie

• Konfokale Mikroskopie

• Durchflusszytometrie

• Bildgebende Durchflusszytometrie

• Mikrofluidische Systeme

• Plattenbasierte Assays

• Partikelzählsysteme

• Kolorimetrische Erkennung

• Fluoreszenzerkennung

Modulare Plattform für biologische Tests

Die gleiche Partikelplattform kann mit unterschiedlichen biotinylierten Fängermolekülen verwendet werden.

Fähigkeit zur Massenproduktion

SHBC unterstützt Muster, Pilotchargen, wiederholte Produktion, OEM-Kooperation, Private-Label-Projekte und Massenlieferungen.

Benutzerdefinierte Entwicklungsoptionen

Bei qualifizierten Projekten können Partikelgröße, Streptavidin-Beschichtungsgrad, Bindungskapazität, Konzentration, Puffer, Konservierungsmittel, Fluoreszenzkodierung, Farbkodierung, Verpackung und Qualitätsspezifikationen besprochen werden.

Anwendungen in der biologischen Forschung

Bead-basierte Immunoassay-Entwicklung

SAPS20UM-10 kann als feste Phase in Sandwich-, indirekten, kompetitiven oder agglutinationsbasierten Forschungstests verwendet werden.

Ein Sandwich-Assay kann Folgendes umfassen:

1. Immobilisierung eines biotinylierten Fängerantikörpers.

2. Sperrung unbesetzter Flächen.

3. Inkubation mit der Zielprobe.

4. Erfassung des Zielanalyten.

5. Zugabe eines markierten Nachweisantikörpers.

6. Entfernung ungebundener Reagenzien.

7. Detektion des partikelassoziierten Signals.

Mögliche Forschungsziele sind:

• Antikörper

• Antigene

• Zytokine

• Hormone

• Wachstumsfaktoren

• Enzyme

• Biomarker

• Pathogen-assoziierte Proteine

• Lebensmittelsicherheitsanalyten

• Umweltziele

• Veterinärmedizinische Forschungsziele

• Forschungsverbindungen

Kompetitive Bindungstests

Kompetitive Assay-Formate können ausgewertet werden für:

• Kleine Moleküle

• Haptene

• Drogen

• Giftstoffe

• Peptide

• Hormone

• Metaboliten

• Ziele mit begrenzten Bindungsstellen

Die Beziehung zwischen Zielkonzentration und gemessenem Signal hängt vom Assay-Design ab.

Antikörperimmobilisierung und -screening

Biotinylierte Antikörper können angebracht werden für:

• Antigennachweis

• Antikörper-Screening

• Hybridom-Screening

• Studien zur Antikörperspezifität

• Kreuzreaktivitätsbewertung

• Affinitätsvergleich

• Auswahl von Capture-Antikörpern

• Machbarkeitsprüfung von Assays

Protein- und Peptid-Wechselwirkungsforschung

Biotinylierte Proteine ​​oder Peptide können immobilisiert werden, um Folgendes zu untersuchen:

• Antikörper-Antigen-Wechselwirkungen

• Protein-Protein-Wechselwirkungen

• Rezeptor-Ligand-Bindung

• Epitoperkennung

• Enzym-Substrat-Wechselwirkungen

• Inhibitor-Screening

• Arzneimittelkandidatenbindung

• Vergleich der Proteinaffinität

Nukleinsäure-Erfassung

Biotinylierte Oligonukleotide, DNA, RNA, PCR-Produkte und Aptamere können an SAPS20UM-10 angehängt werden.

Mögliche Anwendungen sind:

• Sequenzspezifische Erfassung

• Entwicklung eines Hybridisierungsassays

• PCR-Produkterfassung

• Genotypisierungsforschung

• Mutationserkennungsforschung

• Aptamerbasierter Nachweis

• Studien zur DNA-Protein-Interaktion

• RNA-Bindungsforschung

• Entwicklung molekularer Assays

Zell-Partikel-Interaktionsforschung

Wenn die Partikel mit einem geeigneten biotinylierten Antikörper, Liganden, Rezeptor, Lektin oder Peptid funktionalisiert werden, können sie auf Interaktion mit Zellen untersucht werden.

Mögliche Forschungsrichtungen sind:

• Erkennung von Zelloberflächenrezeptoren

• Zelladhäsion

• Ligandenvermittelte Zellbindung

• Immun-Zell-Interaktion

• Partikelaufnahme

• Phagozytose

• Zelluläre Bildgebung

• Forschung zur Zellsortierung

• Forschung zu synthetischen Antigen-präsentierenden Partikeln

Zu den wichtigen Variablen gehören:

• Fängerligandendichte

• Partikel-zu-Zellen-Verhältnis

• Zellkonzentration

• Inkubationszeit

• Temperatur

• Mischmethode

• Waschbedingungen

• Lebensfähigkeit der Zellen

• Partikelaggregation

• Unspezifische Bindung

Mikroskopie und Bildgebung

Die 20-µm-Partikel können Folgendes unterstützen:

• Hellfeld-Bildgebung

• Fluoreszenzbildgebung

• Konfokale Mikroskopie

• High-Content-Bildgebung

• Partikellokalisierung

• Bildgebung der Zell-Partikel-Interaktion

• Oberflächenfluoreszenzanalyse

• Entwicklung bildbasierter Assays

Mikrofluidische Forschung

SAPS20UM-10 kann evaluiert werden in:

• Studien zum Partikeltransport

• Mikrokanal-Strömungsforschung

• Größenbasierte Trennung

• Partikeleinfang

• Hydrodynamische Fokussierung

• Bildgebung in mikrofluidischen Geräten

• Manipulation von Partikeln in Zellgröße

• Geräteleistungstests

Bestätigen Sie, dass die Abmessungen des Mikrokanals und der engste Strömungsweg mit 20-µm-Partikeln kompatibel sind.

Agglutinationsforschung

Große Streptavidin-Mikrokügelchen können in Partikelagglutinationsmethoden bewertet werden, wenn die Bindung eines Ziel- oder Brückenmoleküls eine messbare Partikelclusterung verursacht.

Agglutination kann beobachtet werden mit:

• Mikroskopie

• Optische Bildgebung

• Lichtstreuende Methoden

• Sedimentationsmuster

• Automatisierte Bildanalyse

Der Zusammenhang zwischen Aggregation und Zielkonzentration muss experimentell optimiert werden.

Affinitätserfassung und -trennung

Die Partikel können hinsichtlich der Affinitätserfassung biotinylierter Biomoleküle oder von immobilisierten Liganden erkannter Ziele bewertet werden.

SAPS20UM-10 ist nicht unbedingt magnetisch. Bei der Partikelrückgewinnung muss eine Methode angewendet werden, die mit dem bestätigten Partikelmaterial kompatibel ist.

Kompatible biotinylierte Biomoleküle

Biotinylierte Antikörper

Zu den möglichen Antikörperformaten gehören:

• IgG in voller Länge

• IgM

• Tolle Fragmente

• F(ab′)₂-Fragmente

• Rekombinante Antikörper

• Einkettige variable Fragmente

• Einzeldomänen-Antikörper

• Konstruierte Antikörperformate

Die Antikörperaktivität nach der Immobilisierung hängt ab von:

• Biotinylierungschemie

• Anzahl der Biotingruppen

• Lage der Biotingruppen

• Distanzstücklänge

• Proteinreinheit

• Antikörperaggregation

• Oberflächenbelastung

• Lagerbedingungen

Biotinylierte Proteine

Beispiele hierfür sind:

• Rekombinante Antigene

• Enzyme

• Zytokine

• Wachstumsfaktoren

• Rezeptoren

• Lektine

• Bindende Proteine

• Fusionsproteine

• Proteinstandards

Biotinylierte Peptide

Mögliche Anwendungen sind:

• Epitopkartierung

• Antikörper-Screening

• Rezeptorbindungsforschung

• Enzymstudien

• Studien zur Proteininteraktion

• Drogenscreening-Assays

Ein geeigneter Spacer zwischen Biotin und dem Peptid kann die Zugänglichkeit verbessern.

Biotinylierte Nukleinsäuren

Zu den kompatiblen Formaten können gehören:

• Einzelsträngige DNA

• Doppelsträngige DNA

• RNA

• Oligonukleotidsonden

• PCR-Amplikons

• Aptamere

• Modifizierte Nukleinsäuresonden

• Capture-Sequenzen

Biotinylierte kleine Moleküle

Kleine biotinylierte Verbindungen können immobilisiert werden, wenn die Biotingruppe zugänglich bleibt.

Bei der Methodenentwicklung sollten das Spacer-Design und die molekulare Ausrichtung berücksichtigt werden.

Empfohlenes Beladungsprotokoll für biotinylierte Liganden

Das folgende Verfahren ist ein allgemeiner Ausgangspunkt für die Entwicklung. Die Endbedingungen sollten für das tatsächliche Biomolekül und die Anwendung optimiert werden.

1. SAPS20UM-10 resuspendieren

Lassen Sie das Produkt die empfohlene Verarbeitungstemperatur erreichen.

Durch vorsichtiges Umdrehen, Drehen oder kontrolliertes Vortexen mischen, bis die Suspension homogen ist.

Da sich Partikel mit einer Größe von 20 µm schnell absetzen können, mischen Sie die Suspension unmittelbar vor der Entnahme jedes Aliquots.

Setzen Sie das vorsichtige Mischen während der wiederholten Probenahme fort, um Konzentrationsunterschiede zwischen Aliquots zu verringern.

2. Berechnen Sie die erforderliche Partikelmenge

Ermitteln Sie die benötigte Menge nach:

• Anzahl der Tests

• Pro Test erforderliche Partikel

• Benötigte Fläche pro Reaktion

• Reaktionsvolumen

• Erwartete Zielkonzentration

• Chargenspezifische Bindungskapazität

• Anzahl der Waschschritte

• Erwarteter Verarbeitungsverlust

Schätzen Sie die Ligandenbeladungskapazität nicht allein anhand der Feststoffkonzentration ab.

3. Übertragen Sie die Mikrosphären

Übertragen Sie die benötigte Menge in ein sauberes, wenig bindendes Röhrchen oder Verarbeitungsgefäß.

Verwenden Sie eine Pipettenspitze mit einer Öffnung, die für 20-µm-Partikel geeignet ist.

Vermeiden Sie sehr schmale Spitzen, die den Partikeltransfer behindern oder zu einer ungleichmäßigen Probenahme führen könnten.

4. Waschen Sie die Partikel

Waschen Sie die Mikrosphären mit einem Puffer, der mit Streptavidin und dem ausgewählten biotinylierten Liganden kompatibel ist.

Vermeiden Sie Puffer, die freies Biotin enthalten, während der Ligandenimmobilisierung.

Zu den möglichen Wiederherstellungsmethoden gehören:

• Zentrifugation mit niedriger oder mittlerer Geschwindigkeit

• Membranfiltration

• Kontrollierte Sedimentation

• Andere validierte Fest-Flüssig-Trennmethoden

Die richtige Methode sollte anhand des tatsächlichen Partikelmaterials, der Dichte, des Puffers, des Volumens und der Rückgewinnungsanforderungen bestimmt werden.

5. Bereiten Sie den biotinylierten Liganden vor

Verdünnen Sie den ausgewählten Liganden in einem kompatiblen Bindungspuffer.

Rezension:

• Ligandenkonzentration

• Biotinylierungsgrad

• Molekulare Reinheit

• Aggregatebene

• Kostenloser Biotingehalt

• Kostenloses biotinyliertes Reagenz

• Pufferzusätze

• Proteinstabilität

• Nukleinsäurestabilität

6. Fügen Sie den Liganden hinzu

Kombinieren Sie die gewaschenen Partikel mit dem biotinylierten Liganden.

Benutzen Sie sanftes Drehen, Schaukeln oder kontrolliertes Mischen, um die Partikel in der Schwebe zu halten.

Vermeiden Sie übermäßiges Vortexen, Schäumen, mechanische Beschädigung und Denaturierung von Biomolekülen.

7. Optimieren Sie die Inkubation

Auswerten:

• Partikelkonzentration

• Ligandenkonzentration

• Ligand-zu-Partikel-Verhältnis

• Inkubationszeit

• Temperatur

• Puffer-pH

• Salzkonzentration

• Mischgeschwindigkeit

• Reaktionsvolumen

Kontinuierliches sanftes Mischen ist besonders wichtig, da sich während der Inkubation Partikel mit einer Größe von 20 µm absetzen können.

8. Entfernen Sie den ungebundenen Liganden

Trennen und waschen Sie die Partikel, um ungebundene biotinylierte Moleküle zu entfernen.

Unzureichendes Waschen kann den Hintergrund erhöhen, während übermäßiges Waschen die Partikelrückgewinnung verringern kann.

9. Blockieren Sie die Mikrosphärenoberfläche

Inkubieren Sie die ligandenbeladenen Partikel mit einem anwendungskompatiblen Blockierungsreagenz.

Mögliche Blocker sind:

• Rinderserumalbumin

• Kasein

• Fischgelatine

• Nichtimmunes Immunglobulin

• Synthetische Blockpolymere

• Kommerzielle Mikrosphären-blockierende Puffer

Der Blocker sollte das Signal der negativen Probe reduzieren, ohne die zielspezifische Bindung wesentlich zu verringern.

10. Resuspendieren Sie die vorbereiteten Mikrosphären

Resuspendieren Sie die beschichteten und blockierten Partikel in einem geeigneten Test- oder Lagerpuffer.

Auswerten:

• Partikeldispersion

• Ligandenretention

• Bindungsaktivität

• Unspezifische Bindung

• Partikelrückgewinnung

• Setzverhalten

• Redispergierung

• Kurzfristige Stabilität

• Langzeitstabilität

• Mikrobielle Stabilität

Empfohlener Arbeitsablauf für biologische Tests

1. Bereiten Sie die Capture Microspheres vor

Laden Sie SAPS20UM-10 mit dem ausgewählten biotinylierten Fängermolekül.

Waschen und blockieren Sie die Partikel vor der Probenprüfung.

2. Bereiten Sie experimentelle Kontrollen vor

Zu den empfohlenen Kontrollen können gehören:

• Testpuffer-Leerwert

• Streptavidin-Mikrosphären ohne Fängerligand

• Mit Liganden beladene Partikel ohne Ziel einfangen

• Negative Probe

• Positive Probe

• Kontrolle nur für Reporter

• Isotypkontrolle

• Nicht relevante biotinylierte Ligandenkontrolle

• Unbeschriftete Zielkontrolle

• Einfarbige Kontrollen bei Verwendung von Fluoreszenz

3. Fügen Sie die Testprobe hinzu

Kombinieren Sie die vorbereiteten Partikel mit der Probe.

Optimieren:

• Probenvolumen

• Probenverdünnung

• Partikelkonzentration

• Partikel pro Reaktion

• Zielkonzentrationsbereich

• Inkubationszeit

• Inkubationstemperatur

• Mischmethode

• Beispielmatrix

Behalten Sie während der gesamten Inkubation ein sanftes Mischen bei.

4. Waschen Sie die Mikrosphären

Entfernen Sie ungebundene Probenbestandteile und sorgen Sie gleichzeitig für eine akzeptable Partikelrückgewinnung.

Aufzeichnen:

• Anzahl der Wäschen

• Waschpufferzusammensetzung

• Waschvolumen

• Trennmethode

• Restvolumen des Überstandes

• Mischvorgang

5. Fügen Sie das Nachweisreagenz hinzu

Fügen Sie ein fluoreszierendes, enzymatisches, kolorimetrisches, chemilumineszierendes oder anderes kompatibles Nachweisreagenz hinzu.

Das ausgewählte Detektionssystem muss zum vorgesehenen Instrument und Assayformat passen.

6. Inkubieren und waschen

Optimieren Sie die Reporterkonzentration und die Inkubationszeit.

Entfernen Sie ungebundenes Nachweisreagenz, um den Hintergrund zu reduzieren.

7. Zur Erkennung resuspendieren

Resuspendieren Sie die Partikel in einem sauberen Detektionspuffer.

Mischen Sie unmittelbar, bevor Sie die Probe in das Instrument oder die Bildgebungskammer übertragen.

8. Messen Sie das Signal

Mögliche analytische Ergebnisse sind:

• Mittlere oder mittlere Partikelfluoreszenz

• Prozentsatz positiver Partikel

• Signal-Hintergrund-Verhältnis

• Partikelassoziierte Enzymaktivität

• Farbintensität

• Agglutinationsgrad

• Änderungen der Partikelanzahl

• Dosis-Wirkungs-Kurve

• Assay-Präzision

• Erholung

• Spezifität

• Kreuzreaktivität

9. Analysieren Sie die Ergebnisse

Legen Sie mithilfe geeigneter Kontrollen positive und negative Schwellenwerte fest.

Definieren Sie kein positives Ergebnis anhand der Testprobe allein.

Handhabung, Mischen und Rückgewinnung von 20 µm Mikrosphären

Sich niederlassen

Die 20 µm großen Mikrokügelchen können sich schneller absetzen als kleinere Partikel.

Das Absetzen kann Folgendes verursachen:

• Ungleichmäßige Partikelkonzentration

• Variation zwischen Aliquots

• Inkonsistente Ligandenbeladung

• Unterschiedliche Partikelanzahlen zwischen Reaktionen

• Variable Assay-Signale

• Reduzierte Reproduzierbarkeit

Mischen Sie die Stammsuspension unmittelbar vor jedem Probenahmeschritt.

Aufrechterhaltung einer einheitlichen Federung

Geeignete Mischmethoden können sein:

• Sanfte Inversion

• End-über-End-Rotation

• Langsames orbitales Mischen

• Sanftes Schaukeln

• Kontrolliertes Vortexen vor Gebrauch

• Intermittierendes Pipettenmischen

Vermeiden Sie schnelles Mischen, das zu Schaumbildung oder Schäden an den Biomolekülen führt.

Pipettieren

Verwenden Sie eine geeignete Pipettenspitzenöffnung.

Bei wiederholter Probenahme:

1. Mischen Sie die Brühe.

2. Das erforderliche Volumen zeitnah absaugen.

3. Vollständig dosieren.

4. Vor dem nächsten Aliquot erneut mischen.

Zentrifugation

Die Partikel lassen sich möglicherweise mit einer geringeren Zentrifugalkraft oder kürzeren Zentrifugationszeiten als bei kleineren Mikrokügelchen gewinnen, die richtigen Bedingungen hängen jedoch vom Partikelmaterial und der Partikeldichte ab.

Bestimmen Sie die Mindestbedingungen, die Folgendes bieten:

• Akzeptable Partikelrückgewinnung

• Ein handliches Pellet

• Einfache Redispergierung

• Minimale Aggregation

• Minimaler Schaden an Biomolekülen

Filtration

Zur Rückgewinnung oder zum Waschen kann eine Membran mit geeigneter Porengröße verwendet werden.

Bestätigen:

• Partikelrückhaltung

• Biomolekülkompatibilität

• Geringe unspezifische Adsorption

• Akzeptable Erholung

• Einfache Partikelfreisetzung

• Kompatibilität mit Verarbeitungsvolumen

Kontrollierte Sedimentation

In einigen Arbeitsabläufen kann eine natürliche oder beschleunigte Sedimentation in Betracht gezogen werden.

Die auf Sedimentation basierende Rückgewinnung ist möglicherweise langsamer und variabler als die Zentrifugation, kann jedoch die mechanische Belastung verringern.

Mikroskopie, Durchflusszytometrie und mikrofluidische Detektion

Optische Mikroskopie

Die 20 µm großen Mikrokügelchen können im Allgemeinen durch standardmäßige optische Mikroskopie beobachtet werden.

Mögliche Einsatzmöglichkeiten sind:

• Bewertung der Morphologie

• Gesamtinspektion

• Partikelzählung

• Oberflächenbindende Visualisierung

• Bildgebung der Zell-Partikel-Interaktion

• Wiederherstellungsbewertung

Fluoreszenzmikroskopie

Wenn das Partikel einen fluoreszierenden Reporter, einen intern eingebauten Farbstoff oder ein fluoreszierend markiertes Ziel trägt, kann die Fluoreszenzmikroskopie verwendet werden, um Folgendes zu bewerten:

• Signallokalisierung

• Verbindliche Einheitlichkeit

• Positive und negative Partikel

• Zell-Partikel-Wechselwirkungen

• Multiplex-Partikelpopulationen

Durchflusszytometrie

SAPS20UM-10 kann mittels Durchflusszytometrie bewertet werden, wenn die Fluidik des Instruments mit 20-µm-Partikeln kompatibel ist.

Bestätigen Sie vor der Verwendung Folgendes:

• Probenschlauchdurchmesser

• Abmessungen der Durchflusszelle

• Düsen- oder Öffnungsgröße

• Probenflussrate

• Partikelkonzentration

• Aggregatebene

• Reichweite des Streudetektors

Die Partikel sollten wesentlich kleiner bleiben als der engste Fluidweg.

Bildgebende Durchflusszytometrie

Die große Partikelgröße kann für bildgebende Durchflusszytometriestudien nützlich sein, die partikelassoziierte Fluoreszenz mit morphologischer Bildgebung kombinieren.

Mikrofluidik

Bestätigen Sie, dass Mikrokanäle, Verengungen, Filter und Ventile 20-µm-Partikel ohne Verstopfung aufnehmen können.

Blockierung und unspezifische Bindungskontrolle

Eine unspezifische Adsorption kann den Hintergrund erhöhen und die Empfindlichkeit des Tests verringern.

Mögliche Ursachen sind:

• Unzureichende Blockierung

• Inkompatibles Blockierungsreagenz

• Überschüssiger Fängerligand

• Überschüssiges Nachweisreagenz

• Unzureichendes Waschen

• Aggregierte Antikörper

• Hydrophobe Probenbestandteile

• Hohe Probenproteinkonzentration

• Partikelaggregation

• Proben-Matrix-Interferenz

Screening mehrerer Blockierungsreagenzien

Vergleichen Sie mehrere blockierende Formulierungen.

Der bevorzugte Blocker sollte das Signal der negativen Probe reduzieren und gleichzeitig die zielspezifische Bindung aufrechterhalten.

Optimieren Sie die Beladung mit Capture-Liganden

Eine maximale Ligandenbeladung führt nicht immer zu einer maximalen Testleistung.

Übermäßige Belastung kann:

• Verursacht sterische Überfüllung

• Reduzieren Sie die Zugänglichkeit des Ziels

• Erhöhen Sie den Reagenzienverbrauch

• Erhöhen Sie unspezifische Interaktionen

• Erhöhen Sie die Assay-Variation

Titrieren Sie das Nachweisreagenz

Überschüssiges Nachweisreagenz kann den Hintergrund erhöhen.

Testen Sie mehrere Konzentrationen mit Positiv- und Negativkontrollen.

Optimieren Sie das Waschen

Auswerten:

• Anzahl der Wäschen

• Waschpufferzusammensetzung

• Waschvolumen

• Trennmethode

• Mischmethode

• Restlicher Überstand

• Partikelrückgewinnung

Bewerten Sie Reinigungsmittel sorgfältig

Eine kleine Menge eines kompatiblen Reinigungsmittels kann die Partikeldispersion verbessern und die unspezifische Adsorption verringern.

Zu viel Reinigungsmittel kann die Wechselwirkungen zwischen Biomolekülen oder Nachweisreagenzien beeinträchtigen.

Vergleich von 20 µm, 10 µm und 5 µm Mikrosphären

Wählen Sie SAPS20UM-10, wenn:

• Es ist eine große Einzelpartikeloberfläche erforderlich.

• Direkte Mikroskopie ist wichtig.

• Ein Partikelmodell mit Zellgrößenbereich wird bevorzugt.

• Es ist eine Einzelpartikelanalyse erforderlich.

• Es ist eine eindeutige größenbasierte Identifizierung erforderlich.

• Mikrofluidische Manipulation wird untersucht.

• Geplant ist die Erforschung der Agglutination großer Partikel.

• Eine starke visuelle Bestätigung der Partikelrückgewinnung ist hilfreich.

Wählen Sie SAPS10UM-10, wenn:

• Erwünscht ist ein Gleichgewicht zwischen großer Partikelgröße und einfacherer Fluidkompatibilität.

• Die konventionelle Durchflusszytometrie ist eine wichtige Nachweismethode.

• Eine starke Streuerkennung ist erforderlich.

• Eine geringere Sedimentation als bei Partikeln mit einer Größe von 20 µm wird bevorzugt.

Wählen Sie SAPS5UM-10, wenn:

• Es ist eine höhere Teilchenzahl pro Masseneinheit erforderlich.

• Eine geringere Sedimentation wird bevorzugt.

• Derzeit werden Standard-Flow-Assays auf Bead-Basis entwickelt.

• Es werden kleinere Reaktionsvolumina verwendet.

• Eine einfachere Flüssigkeitskompatibilität ist wichtig.

Die endgültige Auswahl sollte auf der beabsichtigten biologischen Anwendung, der Gerätefähigkeit, der erforderlichen Partikelanzahl, der Ligandenbeladung, dem Absetzverhalten, der Rückgewinnungsmethode und der Detektionsplattform basieren.

Qualitätskontrolle und Chargenkonsistenz

Zu den möglichen Qualitätskontrollparametern gehören:

• Mittlerer Partikeldurchmesser

• Partikelgrößenbereich

• Partikelgrößenverteilung

• Variationskoeffizient der Partikelgröße

• Partikelmorphologie

• Aussehen der Federung

• Feststoffgehalt

• Konsistenz der Streptavidin-Beschichtung

• Biotin-Bindungskapazität

• Partikeldispersion

• Aggregatebene

• Absetzrate

• Redispergierleistung

• Partikelrückgewinnung

• Hintergrundsignal

• Unspezifische Bindung

• Mikrobielle Kontrolle

• Verpackungsintegrität

• Lagerstabilität

• Konsistenz von Charge zu Charge

Partikelgrößenprüfung

Die Charakterisierung der Partikelgröße kann folgende Ergebnisse liefern:

• Mittlerer Durchmesser

• Mittlerer Durchmesser

• Größenbereich

• Größenverteilung

• Variationskoeffizient

• Ergebnisse der Mikroskopie

• Instrumentelle Partikelgrößendaten

Bei der Angabe der Partikelgrößenergebnisse sollte die Messmethode angegeben werden.

Biotin-Bindungskapazität

Die Bindungskapazität sollte mit einer definierten biotinylierten Sonde gemessen werden.

Das Messergebnis kann beeinflusst werden durch:

• Sondentyp

• Molekulare Größe

• Biotinylierungsgrad

• Reinheit der Sonde

• Inkubationsbedingungen

• Pufferzusammensetzung

• Erkennungsmethode

• Berechnungsgrundlage

Mit unterschiedlichen Sonden oder Methoden ermittelte Werte sind möglicherweise nicht direkt vergleichbar.

Funktionale Qualitätskontrolle

Ein funktioneller QC-Assay kann Folgendes bewerten:

• Bindung einer standardisierten biotinylierten Sonde

• Prozentsatz positiver Partikel

• Signalverteilung

• Hintergrundtrennung

• Partikelrückgewinnung

• Gesamtbevölkerung

• Wiederholbarkeit

• Redispergierung nach Lagerung

Chargenspezifische Dokumentation

Zu den verfügbaren Unterlagen können gehören:

• Analysezertifikat

• Produktspezifikation

• Ergebnisse zur Partikelgröße

• Ergebnisse zum Feststoffgehalt

• Ergebnisse zur Bindungskapazität

• Sicherheitsdatenblatt

• Handhabungshinweise

• Lagerungsempfehlungen

• Losnummer

• Produktionsdatum

Erforderliche Freigabetests und Abnahmekriterien sollten vor der Massenfertigung vereinbart werden.

Massenfertigung und kundenspezifische Anpassung

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. liefert SHBC-Streptavidin-Mikrosphären für Laborforschung, Pilotentwicklung, wiederholte Produktion und den Großeinkauf von Unternehmen.

Auswertung von Forschungsproben

Proben können ausgewertet werden auf:

• Partikelmorphologie

• Partikeldispersion

• Streptavidin-Aktivität

• Beladung mit biotinyliertem Liganden

• Unspezifische Bindung

• Partikelrückgewinnung

• Machbarkeit des Tests

• Mikroskopkompatibilität

• Kompatibilität mit Durchflusssystemen

• Absetzen und Redispergieren

Entwicklung im Pilotmaßstab

Pilotchargen können Folgendes unterstützen:

• Assay-Optimierung

• Überprüfung der Bindungskapazität

• Stabilitätsstudien

• Pufferauswahl

• Konservierungsbewertung

• Verpackungsbewertung

• Entwicklung der Qualitätskontrolle

• Kundenüberprüfung

• Prozessübertragung

Massenproduktion

Die Massenfertigung kann arrangiert werden, nachdem die technischen Anforderungen und Freigabespezifikationen bestätigt wurden.

Bitte geben Sie Folgendes an:

• Benötigte Menge

• Erwarteter Jahresbedarf

• Bevorzugte Packungsgröße

• Beabsichtigte biologische Anwendung

• Erforderlicher Partikeldurchmesser

• Erforderlicher Feststoffgehalt

• Erforderliche Bindungskapazität

• Biotinylierter Ligandentyp

• Pufferanforderungen

• Konservierungsbeschränkungen

• Anforderungen an die Qualitätskontrolle

• Dokumentationsanforderungen

• Lieferplan

• Lieferziel

Benutzerdefinierter Partikeldurchmesser

Alternative Partikelgrößen können je nach Anwendung und Herstellungsmöglichkeit besprochen werden.

Benutzerdefinierte Streptavidin-Beladung

Projektspezifische Streptavidin-Beschichtungsniveaus oder Bindungskapazitätsziele können bewertet werden.

Benutzerdefinierte Fluoreszenz- oder Farbcodierung

Für Bildgebungs- und Multiplex-Projekte können fluoreszierend kodierte oder sichtbar gefärbte Streptavidin-Mikrokügelchen diskutiert werden.

Mögliche Optionen können sein:

• Verschiedene Anregungswellenlängen

• Verschiedene Emissionswellenlängen

• Mehrere Fluoreszenzfarben

• Mehrere Fluoreszenzintensitäten

• Sichtbare Partikelfarben

• Kundenspezifische Codierungssysteme

Benutzerdefinierter Puffer und Konzentration

Alternative Feststoffkonzentrationen, Pufferformulierungen, Tenside, Konservierungssysteme und Verpackungsformate können bewertet werden.

OEM- und Private-Label-Lieferung

Mögliche Kooperationsformate können sein:

• OEM-Verpackung

• Kundenspezifische Etiketten

• Private-Label-Lieferung

• Kundenspezifische Katalognummern

• Massenlieferung von Rohstoffen

• Maßgeschneiderte technische Dokumente

• Kundenspezifische Release-Spezifikationen

Empfehlungen zur Lagerung und Stabilität

Befolgen Sie das endgültige Produktetikett, das technische Datenblatt und das chargenspezifische Analysezertifikat.

Zu den allgemeinen Empfehlungen gehören:

• Unter den angegebenen Kühlbedingungen lagern.

• Nicht einfrieren, es sei denn, die Gefrier-Tau-Stabilität wurde bestätigt.

• Halten Sie den Behälter fest verschlossen.

• Lagern Sie das Fläschchen aufrecht.

• Vor der Probenahme gründlich mischen.

• Halten Sie die Partikel während der Verarbeitung in Schwebe.

• Verwenden Sie saubere Pipettenspitzen und Röhrchen mit geringer Bindung.

• Vermeiden Sie eine Kontamination der Originalsuspension.

• Lassen Sie die Partikel nicht eintrocknen.

• Vermeiden Sie wiederholte unnötige Temperaturänderungen.

• Verdünntes Material nicht in den Originalbehälter zurückgeben.

• Notieren Sie die Chargennummer und das Öffnungsdatum des Produkts.

Mit Streptavidin beschichtete Partikel sollten während der Lagerung und Handhabung im Allgemeinen in Flüssigkeit bleiben. Trocknen oder Einfrieren kann die Leistung beeinträchtigen. eine reduzierte Leistung. citeturn146812search1turn146812search5

Absetzen und Resuspendieren

Da SAPS20UM-10 große Partikel enthält, kann es schnell zu Ablagerungen kommen.

Vor dem Gebrauch:

1. Lassen Sie die Durchstechflasche die empfohlene Handhabungstemperatur erreichen.

2. Drehen Sie das Fläschchen vorsichtig um oder drehen Sie es.

3. Bei Bedarf kontrolliert vortexen.

4. Stellen Sie sicher, dass die Suspension homogen ist.

5. Unmittelbar vor der Probenahme mischen.

6. Auf irreversible Aggregate prüfen.

Reversibles Absetzen bedeutet nicht zwangsläufig ein Produktversagen.

Trocknen vermeiden

Lassen Sie das Partikelpellet während des Waschens nicht trocknen.

Das Trocknen kann Folgendes verursachen:

• Irreversible Aggregation

• Reduzierte Streptavidin-Aktivität

• Schwierige Redispergierung

• Erhöhter Testhintergrund

• Reduzierte Partikelrückgewinnung

Vermeiden Sie Einfrieren

Einfrieren kann Folgendes verursachen:

• Partikelaggregation

• Änderungen der Federungsstabilität

• Reduzierte Proteinaktivität

• Reduzierte Partikelrückgewinnung

• Erhöhte Assay-Variabilität

Bewerten Sie die Stabilität der vorbereiteten Reagenzien

Ligandenbeladene und blockierte Mikrosphären können eine andere Stabilität als die ursprüngliche SAPS20UM-10-Suspension aufweisen.

Bewerten Sie das fertig zubereitete Reagenz unter den vorgesehenen Lager-, Transport- und Betriebsbedingungen.

Leitfaden zur Fehlerbehebung

Schwache biotinylierte Ligandenbindung

Mögliche Ursachen:

• Freies Biotin im Puffer

• Nicht entferntes biotinyliertes Reagenz

• Geringe Ligandenbiotinylierung

• Unzugängliche Biotingruppen

• Unzureichende Ligandenkonzentration

• Unzureichende Inkubationszeit

• Inaktives Streptavidin

• Inkompatibler Puffer

• Absetzen der Partikel während der Inkubation

Empfohlene Maßnahmen:

• Entfernen Sie freies Biotin.

• Reinigen Sie den biotinylierten Liganden.

• Überprüfen Sie die Biotinylierung.

• Bewerten Sie einen geeigneten Abstandshalter.

• Behalten Sie ein sanftes Mischen bei.

• Erhöhen Sie die Ligandenkonzentration schrittweise.

• Testen Sie einen biotinylierten Positivkontrollliganden.

Hohes Hintergrundsignal

Mögliche Ursachen:

• Unzureichende Blockierung

• Überschüssiges Nachweisreagenz

• Unzureichendes Waschen

• Unspezifische Reagenzadsorption

• Proben-Matrix-Interferenz

• Aggregierte Antikörper

• Übermäßige Beladung mit Fängerliganden

Empfohlene Maßnahmen:

• Vergleichen Sie verschiedene Blocker.

• Titrieren Sie das Nachweisreagenz.

• Waschen optimieren.

• Entfernen Sie gegebenenfalls Proteinaggregate.

• Verdünnen Sie die Probe.

• Reduzieren Sie die Beladung mit Fängerliganden.

Ungleiche Ergebnisse zwischen Aliquots

Mögliche Ursachen:

• Schnelles Absetzen der Partikel

• Unzureichende Stoffmischung

• Verzögerung zwischen Mischen und Probenahme

• Enge Pipettenspitzenöffnung

• Inkonsistente Übertragungstechnik

Empfohlene Maßnahmen:

• Unmittelbar vor jedem Aliquot mischen.

• Verwenden Sie eine geeignete Pipettenspitze.

• Behalten Sie bei wiederholter Abgabe ein langsames, kontinuierliches Mischen bei.

• Standardisieren Sie das Probenahmeintervall.

Partikelaggregation

Mögliche Ursachen:

• Inkompatibler Puffer

• Extremer pH-Wert

• Hohe Ionenstärke

• Einfrieren

• Trocknen

• Übermäßige Ligandenbeladung

• Unzureichender Stabilisator

• Mikrobielle Kontamination

Empfohlene Maßnahmen:

• Bewerten Sie die Pufferkompatibilität.

• Vermeiden Sie Einfrieren und Trocknen.

• Optimieren Sie die Ligandenbeladung.

• Verwenden Sie kontrolliertes, sanftes Mischen.

• Überprüfen Sie die Anforderungen an Stabilisatoren und Konservierungsmittel.

Geringe Partikelrückgewinnung

Mögliche Ursachen:

• Verlust beim Entfernen des Überstands

• Haftung an Rohren

• Falsche Filterporengröße

• Unvollständige Sedimentation

• Unvollständige Übertragung

• Übermäßiges Waschen

• Partikel setzen sich in Pipettenspitzen ab

Empfohlene Maßnahmen:

• Verwenden Sie Röhrchen mit geringer Bindung.

• Optimieren Sie die Trennbedingungen.

• Validieren Sie die Filtermembran.

• Vor jedem Transfer mischen.

• Reduzieren Sie unnötige Waschschritte.

• Lassen Sie ein kontrolliertes Restvolumen über dem Pellet.

Häufig gestellte Fragen

Was ist SAPS20UM-10?

SAPS20UM-10 ist eine 20 µm Streptavidin-beschichtete Mikrokügelchensuspension mit einem Feststoffgehalt von 1 % zum Einfangen biotinylierter Biomoleküle in der biologischen Forschung und in Kügelchen-basierten Tests.

Was ist die Marke SHBC?

SHBC ist die Marke für Mikrosphären und biotechnologische Materialien von Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.

Was ist der nominale Partikeldurchmesser?

Der nominale Partikeldurchmesser beträgt 20 µm.

Der gemessene Durchmesser, Größenbereich und die Partikelgrößenverteilung sollten anhand einer chargenspezifischen Dokumentation bestätigt werden.

Wie hoch ist der Feststoffgehalt?

SAPS20UM-10 wird mit 1 % Feststoffgehalt geliefert.

Sind SAPS20UM-10 Mikrokügelchen magnetisch?

Es sollte nicht davon ausgegangen werden, dass das Produkt magnetisch ist, es sei denn, die magnetischen Eigenschaften sind ausdrücklich in der Produktspezifikation angegeben.

Wählen Sie für die magnetische Trennung ein Produkt aus, das speziell als Streptavidin-Magnetkügelchen beschrieben wird.

Sind die Mikrokügelchen fluoreszierend?

Es sollte nicht davon ausgegangen werden, dass das Standardprodukt einen internen Fluoreszenzfarbstoff enthält, sofern die Fluoreszenz nicht ausdrücklich angegeben ist.

Eine fluoreszierend kodierte Version könnte als kundenspezifisches Produkt diskutiert werden.

Welche Moleküle können an SAPS20UM-10 binden?

Die Streptavidin-Oberfläche kann biotinylierte Antikörper, Antigene, Proteine, Peptide, Enzyme, Rezeptoren, Oligonukleotide, DNA, RNA, Aptamere und andere biotinhaltige Moleküle einfangen.

Kann ein unmodifizierter Antikörper direkt binden?

Ein unmodifizierter Antikörper bindet nicht spezifisch über die Streptavidin-Biotin-Wechselwirkung, es sei denn, er wird zuerst biotinyliert oder über ein anderes kompatibles Reagenz verbunden.

Ist eine EDC/NHS-Aktivierung erforderlich?

Eine EDC/NHS-Aktivierung ist normalerweise nicht erforderlich, wenn ein biotinyliertes Molekül auf Streptavidin-beschichtete Mikrosphären geladen wird.

Wie groß ist die Biotin-Bindungskapazität?

Die Bindungsfähigkeit sollte anhand der Produktspezifikation oder des chargenspezifischen Analysezertifikats bestätigt werden.

Sie sollte nicht allein anhand des Feststoffgehalts geschätzt werden.

Warum sollten Sie sich für 20-µm-Mikrokügelchen entscheiden?

Die 20-µm-Partikel bieten eine große Oberfläche pro einzelnem Partikel, klare mikroskopische Sichtbarkeit, Abmessungen im Zellgrößenbereich und eine bequeme Partikelidentifizierung.

Haben 20-µm-Mikrokügelchen eine größere Oberfläche als kleinere Partikel?

Jeder 20-µm-Partikel hat eine größere Oberfläche als jeder kleinere Partikel.

Kleinere Partikel liefern jedoch im Allgemeinen mehr Partikel und eine größere Gesamtoberfläche pro Masseneinheit.

Warum setzen sich die Partikel schnell ab?

Große Partikel setzen sich typischerweise schneller ab als kleinere Mikrokügelchen.

Mischen Sie die Brühe unmittelbar vor der Probenahme und sorgen Sie während der Inkubation für ein sanftes Mischen.

Kann SAPS20UM-10 in der Durchflusszytometrie verwendet werden?

Es kann in der Durchflusszytometrie ausgewertet werden, wenn die Fluidik des Instruments, die Durchflusszelle und der Probenweg mit 20-µm-Partikeln kompatibel sind.

Kann es für die Mikroskopie verwendet werden?

Ja. Die große Partikelgröße eignet sich für die Auswertung mittels optischer, Fluoreszenz- oder konfokaler Mikroskopie.

Kann SAPS20UM-10 als Zellmodell verwendet werden?

Die Größe von 20 µm kann für die Partikelforschung im Zellgrößenbereich nützlich sein.

Allerdings reproduzieren synthetische Mikrosphären nicht alle optischen, mechanischen, chemischen oder biologischen Eigenschaften lebender Zellen.

Können die Mikrosphären für Immunoassays verwendet werden?

Ja. Ein biotinylierter Fängerantikörper kann auf dem Partikel immobilisiert werden, gefolgt von der Zielerfassung und Detektion mit einem geeigneten Reporter.

Können die Partikel zum Einfangen von Nukleinsäuren verwendet werden?

Ja. Biotinylierte Oligonukleotide, DNA, RNA, PCR-Produkte und Aptamere können auf Immobilisierung und Zielerfassung untersucht werden.

Kann SAPS20UM-10 in Multiplex-Assays verwendet werden?

Ja, vorausgesetzt, dass die 20µm-Population von anderen Partikelpopulationen unterschieden werden kann.

Größenkodierung, Fluoreszenzkodierung oder Farbkodierung können in Betracht gezogen werden.

Wie sollen die Partikel gewaschen werden?

Die Waschmethode hängt vom Partikelmaterial, der Dichte, dem Puffer, dem Volumen und der erforderlichen Rückgewinnung ab.

Zentrifugation, Filtration oder kontrollierte Sedimentation können ausgewertet werden.

Wie kann unspezifische Bindung reduziert werden?

Optimieren Sie das Blockierungsreagenz, die Konzentration des Einfangliganden, die Konzentration des Nachweisreagenzes, die Waschbedingungen, den Waschmittelgehalt, die Probenverdünnung und die Inkubationszeit.

Können Puffer mit freiem Biotin verwendet werden?

Freies Biotin kann Streptavidin-Bindungsstellen besetzen und sollte während der Beladung mit Fängerliganden generell vermieden werden.

Sollte das Produkt vor der Anwendung verdünnt werden?

Ja. Bereiten Sie eine Arbeitskonzentration entsprechend der erforderlichen Partikelanzahl, dem Testvolumen und der Nachweismethode vor.

Kann SAPS20UM-10 eingefroren werden?

Das Einfrieren wird im Allgemeinen nicht empfohlen, es sei denn, die Gefrier-Tau-Stabilität wurde ausdrücklich validiert.

Kann die Konzentration individuell angepasst werden?

Alternative Feststoffkonzentrationen können je nach Projektanforderungen und Herstellungsmöglichkeit besprochen werden.

Kann die Bindungskapazität individuell angepasst werden?

Projektspezifische Streptavidin-Beschichtungsniveaus oder Bindungskapazitätsziele können bewertet werden.

Können fluoreszierende 20 µm große Streptavidin-Mikrokügelchen hergestellt werden?

Für qualifizierte Bildgebungs-, Mikrofluidik- und Multiplex-Projekte können fluoreszierend kodierte oder sichtbar gefärbte 20-µm-Streptavidin-Mikrokügelchen diskutiert werden.

Ist eine Massenproduktion möglich?

Ja. Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. unterstützt Muster, Pilotchargen, wiederholte Bestellungen, OEM-Projekte und Massenproduktion.

Welche Informationen werden für ein Angebot benötigt?

Bitte geben Sie Folgendes an:

• Katalognummer SAPS20UM-10

• Benötigte Menge

• Erwartetes jährliches Einkaufsvolumen

• Bevorzugte Packungsgröße

• Beabsichtigte biologische Anwendung

• Art des biotinylierten Liganden

• Erforderliche Bindungskapazität

• Erforderliche Anzahl an Partikeln pro Test

• Erkennungsmethode

• Pufferbeschränkungen

• Konservierungsbeschränkungen

• Anforderungen an die Qualitätskontrolle

• Dokumentationsanforderungen

• Lieferziel

Fordern Sie ein Muster- oder Massenangebot an

SHBC SAPS20UM-10 20 µm Streptavidin-Mikrosphären bieten eine große, klar identifizierbare Partikelplattform zur Immobilisierung biotinylierter Antikörper, Proteine, Peptide, Enzyme, Rezeptoren, Oligonukleotide, DNA, RNA, Aptamere und andere Biotin-markierte Moleküle.

Das Produkt ist geeignet für:

• Entwicklung biologischer Tests

• Bead-basierte Immunoassays

• Antikörperimmobilisierung

• Proteininteraktionsforschung

• Einfangen von Nukleinsäuren

• Hybridisierungstests

• Studien zur Zell-Partikel-Interaktion

• Mikroskopie und Bildgebung

• Mikrofluidische Forschung

• Agglutinationsforschung

• Größencodierte Multiplexsysteme

• Herstellung von Forschungsreagenzien

SAPS20UM-10 bietet:

• 20 µm nominaler Partikeldurchmesser

• Streptavidin-funktionale Oberfläche

• 1 % Feststoffsuspension

• Große Oberfläche pro einzelnem Partikel

• Klare mikroskopische Sicht

• Kompatibilität mit biotinylierten Biomolekülen

• Lieferung von Muster- und Pilotchargen

• Fähigkeit zur Massenfertigung

• OEM- und kundenspezifische Entwicklungsunterstützung

Geben Sie für die Probenbewertung oder den Großeinkauf die beabsichtigte Anwendung, die erforderliche Menge, den biotinylierten Liganden, die gewünschte Bindungskapazität, die Nachweisplattform, die Verpackungsanforderungen und die Qualitätskontrollspezifikationen an.

Produktname: 20 µm Streptavidin-Mikrosphären
Katalognummer: SAPS20UM-10
Marke: SHBC
Hersteller: Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.
Nomineller Partikeldurchmesser: 20 µm
Oberflächenmodifikation: Streptavidin
Feststoffgehalt: 1 %
Hauptanwendung: Biologische Forschung und Bead-basierte Assays
Lieferfähigkeit: Proben, Pilotchargen und Massenproduktion
Verwendungszweck: Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke.