製品
SHBC は、診断アッセイ開発、核酸抽出、タンパク質精製および分離用途向けに、着色マイクロスフェア、蛍光マイクロスフェア、磁気ビーズ、シリカマイクロスフェア、クロマトグラフィー充填マイクロスフェアおよび生物学的試薬を提供しています。
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SAPS20UM-10
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SHBC
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1%
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20μm
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10ml、20ml、50ml、500ml、1000ml
生物学研究用 20µm ストレプトアビジン マイクロスフェア
SHBC SAPS20UM-10 ストレプトアビジン マイクロスフェアは、ビオチン化抗体、抗原、タンパク質、ペプチド、酵素、受容体、オリゴヌクレオチド、DNA、RNA、アプタマー、およびその他のビオチン標識分子の固定化および捕捉のために開発された 20µm の表面機能化ミクロスフェアです。
この製品は固形分 1% の懸濁液として提供され、生物学研究、ビーズベースのイムノアッセイ開発、親和性相互作用研究、核酸捕捉、顕微鏡検査、マイクロ流体工学、細胞粒子相互作用研究、粒子ベースのバイオセンサー、および研究試薬の製造向けに設計されています。
20μm の粒子直径により、個々の微小球の表面が大きくなり、ミクロンサイズの粒子集団がはっきりと見えるようになります。より小さなミクロスフェアと比較して、粒子は顕微鏡による観察、粒子ベースの分析システムでの識別、および適切に検証された分離方法を使用した回収が容易です。
Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. は、バイオテクノロジー企業、大学、研究機関、試薬メーカー、機器開発者、生物学研究機関向けに、研究サンプルの評価、パイロット規模の開発、反復製造、OEM プロジェクト、プライベート ラベルの協力、および大量供給をサポートしています。
製品に関するクイックアンサー
SAPS20UM-10 は、固形分 1% で供給される 20µm のストレプトアビジンでコーティングされたマイクロスフェア懸濁液です。そのストレプトアビジン機能性表面は、生物学的アッセイ、抗体およびタンパク質の固定化、核酸捕捉、顕微鏡検査、細胞相互作用研究、親和性研究、および粒子ベースの検出システム開発のためにビオチン化生体分子を捕捉します。
製品のハイライト
製品名: 20μm ストレプトアビジンマイクロスフェア
カタログ番号：SAPS20UM-10
ブランド: SHBC
メーカー：上海三友生物技術有限公司
公称粒径：20μm
表面修飾: ストレプトアビジン
固形分含有量: 1%
結合原理: ストレプトアビジン – ビオチンの親和性
物理的形状: 水性マイクロスフェア懸濁液
主な用途: 生物学的研究およびビーズベースのアッセイ開発
供給能力：サンプル、パイロットバッチ、バルク生産
カスタマイズ: 技術的な実現可能性に応じて利用可能
使用目的: 研究用途のみ
SAPS20UM-10 ストレプトアビジンマイクロスフェアとは何ですか?
SAPS20UM-10 は、粒子表面にストレプトアビジンが固定化された 20µm のマイクロスフェアで構成されています。
ストレプトアビジン コーティングは、ビオチン化分子の結合部位を提供します。エンドユーザーによる粒子表面の直接カルボジイミド活性化を必要とせずに、ビオチン化抗体、タンパク質、ペプチド、核酸プローブ、受容体、リガンド、または他の生体分子をミクロスフェアに結合させることができます。
捕捉分子が固定化された後、調製されたマイクロスフェアは次の目的で固相として機能します。
ターゲットの捕獲
生体分子の固定化
抗体スクリーニング
タンパク質相互作用解析
核酸ハイブリダイゼーション
細胞表面結合の研究
顕微鏡ベースのアッセイ
粒子ベースのバイオセンサー
マイクロ流体研究
凝集研究
ビーズベースのイムノアッセイ
アフィニティー分離研究
潜在的なビオチン化捕捉分子には次のものがあります。
モノクローナル抗体
ポリクローナル抗体
組換え抗体
抗体断片
抗原
組換えタンパク質
ペプチド
酵素
受容体
レクチン
成長因子
オリゴヌクレオチドプローブ
DNAプローブ
RNAプローブ
PCR産物
アプタマー
ビオチン化された小分子
20μm の粒子直径は、高粒子数イムノアッセイで一般的に使用される粒子サイズよりも大幅に大きいです。これにより、個々の微小球の物理的表面積は比較的大きくなりますが、同じ材料のより小さな微小球よりも単位質量あたりの粒子の数が少なくなります。
したがって、この製品は、研究の優先事項に以下が含まれる場合に特に適しています。
個々の粒子あたりの表面積が大きい
直接顕微鏡観察
明確な粒子の識別
セルサイズ範囲の粒子モデリング
個別粒子分析
制御された粒子操作
マイクロ流体輸送の研究
回復を目視で簡単に確認
サイズコード化された粒子システム
SAPS20UM-10は研究用原料として供給されます。これらの機能が最終仕様に具体的に含まれていない限り、完成した診断試薬、認定粒子標準、絶対計数ビーズ、磁気分離製品、または内部蛍光マイクロスフェアとして自動的に表現されるべきではありません。
SAPS20UM-10 技術仕様
パラメータ | 仕様 |
|---|---|
製品名 | 20µm ストレプトアビジンマイクロスフェア |
カタログ番号 | SAPS20UM-10 |
ブランド | SHBC |
メーカー | 上海三友生物技術有限公司 |
公称粒径 | 20μm |
表面改質 | ストレプトアビジンコーティング |
固形分含有量 | 1% |
物理的形態 | ミクロスフェア懸濁液 |
結合原理 | ストレプトアビジン – ビオチンの親和性 |
適合するリガンド | ビオチン化生体分子 |
一次用途 | 生物学的研究とビーズベースのアッセイ |
供給形態 | サンプル、パイロットバッチ、およびバルク数量 |
使用目的 | 研究用途のみ |
次のパラメータは、最終製品仕様またはロット固有の分析証明書を使用して確認する必要があります。
粒子材料
平均粒子径
粒子径範囲
粒度分布
粒径変動係数
粒子の形態
粒子密度
ストレプトアビジンコーティングレベル
ビオチン結合能
粒子数濃度
サスペンションバッファー
緩衝液のpH
安定剤または界面活性剤
防腐剤
推奨分離条件
パッケージサイズ
貯蔵寿命
保管条件
ビオチン結合能は以下とともに報告する必要があります。
ビオチン化テストプローブ
プローブの分子量
ビオチン基の数
バインディングバッファー
培養条件
洗浄手順
検出方法
算出根拠
ロット固有の結果
1% 固形分の値だけでは、1 ミリリットルあたりの粒子数や固定化できるビオチン化リガンドの量を決定することはできません。
ストレプトアビジンとビオチンの結合の仕組み
ストレプトアビジンは、ビオチン化分子のミクロスフェア表面への安定した非共有結合を可能にするビオチン結合タンパク質です。
ビオチン化リガンドを SAPS20UM-10 と混合すると、ビオチン基が粒子上の利用可能なストレプトアビジン サイトに結合します。
一般的な構造は次のように表すことができます。
ミクロスフェア表面 – ストレプトアビジン – ビオチン – 捕捉分子
抗体ベースのサンドイッチアッセイの場合、構造は次のようになります。
マイクロスフェア – ストレプトアビジン – ビオチン化捕捉抗体 – 標的抗原 – 検出抗体
検出抗体が蛍光、酵素、比色、化学発光、またはその他の測定可能な標識を担持している場合、粒子に関連する標的の量は、適合する検出方法を使用して評価できます。
ストレプトアビジン – ビオチン固定化の利点
ビオチン化リガンドをロードする場合、通常、直接 EDC/NHS 活性化は不要です。
1 つのマイクロスフェア プラットフォームを多くの異なるビオチン化分子とともに使用できます。
抗体、タンパク質、ペプチド、オリゴヌクレオチド、DNA、RNA、アプタマーを固定化できます。
リガンドのローディングは、比較的穏やかな水性条件下で実行できます。
捕捉分子は、ベースとなるミクロスフェアを再設計することなく変更できます。
このプラットフォームはモジュール式アッセイ開発をサポートします。
リガンドのローディングは、ターゲットの検出とは別に最適化できます。
ミクロスフェアは、さまざまなレポーター システムとともに使用できます。
このプラットフォームは、単一ターゲットおよび多重研究をサポートする場合があります。
結合性能に影響を与える要因
最終的なリガンドのローディングとアッセイのパフォーマンスは、以下の影響を受ける可能性があります。
ストレプトアビジンコーティング密度
ストレプトアビジン活性
ビオチン化レベル
ビオチン基の位置
ビオチンのアクセシビリティ
スペーサーの長さ
リガンドの分子サイズ
リガンドの純度
リガンドの凝集
表面の混雑
バッファー組成
塩分濃度
インキュベーション時間
インキュベーション温度
混合方法
粒子の沈降
遊離ビオチンおよび未反応のビオチン化試薬は、利用可能なストレプトアビジン結合部位をめぐって目的の捕捉分子と競合する可能性があります。したがって、リガンドを固定化する前に、遊離ビオチンまたは過剰なビオチン化プライマーを除去することが重要である可能性があります。
20µm ストレプトアビジン マイクロスフェアを選択する理由
個々の微小球あたりの大きな表面積
20μm のマイクロスフェアは、10μm、5μm、3μm、または 1μm の粒子よりも個々の粒子あたりの物理的表面積が大きくなります。
これは次のような場合に役立つ可能性があります。
個々の粒子には大量の捕捉分子が必要です
粒子ごとに強力な信号を生成することが望ましい
個々の粒子は顕微鏡で観察されます
粒子ごとの分析が必要です
セルサイズ範囲の合成モデルが必要です
表面パターンまたは局所的な結合を調査します
粒子が大きいほど、必ずしもミリグラムあたりの総表面積が大きくなるわけではありません。一般に、粒子が小さいほど、同じ質量濃度でより多くの粒子とより多くの集合表面積が得られます。
簡単に顕微鏡観察ができる
サイズが 20µm であるため、適切な明視野顕微鏡、位相差顕微鏡、蛍光顕微鏡、または共焦点顕微鏡を使用して個々の粒子を比較的簡単に観察できます。
顕微鏡は以下をサポートする可能性があります:
粒子形態評価
凝集体の検出
リガンド結合の可視化
細胞と粒子の相互作用の研究
表面蛍光分析
粒子の局在化
マイクロ流体追跡
パーティクル回収確認
強力な粒子の識別
大きな微小球は、イメージング、マイクロ流体、粒子計数、およびフローベースの分析システムにおいて、小さなデブリや多くのバックグラウンド粒子と明確に区別できます。
細胞サイズ範囲の研究に最適
直径 20μm は、多くの真核細胞および細胞サイズの生物学的構造の広いサイズ範囲内にあります。
SAPS20UM-10 は次の点で評価できます。
合成細胞モデルの研究
細胞サイズの粒子輸送
粒子と細胞の接触研究
食作用または取り込みの研究
細胞表面受容体の相互作用
マイクロ流体システムにおける機械的取り扱い
映像システム開発
合成ミクロスフェアは、生細胞の光学的、機械的、化学的、または生物学的特性を完全には再現しません。細胞モデルとしての適合性はプロジェクトごとに検証する必要があります。
便利な回復と操作
大きな粒子は、最適化された遠心分離、濾過、または制御された沈降方法により比較的簡単に回収できます。
最も適切な方法は以下によって異なります。
粒子密度
粒子材料
処理量
遠心力
遠心分離時間
フィルターの孔径
チューブの形状
緩衝液の粘度
界面活性剤濃度
必要な回収率
サイズコード化されたアッセイに最適
粒子をサイズで区別する研究システムでは、20µm の集団をより小さいマイクロスフェアの集団と組み合わせることができます。
サイズベースのコーディングは次の場合に役立ちます。
マルチプレックスアッセイ
複数の分析物の研究
プロセス制御
画像ベースのアッセイ
マイクロ流体選別
粒子追跡実験
主な機能と利点
公称粒子径 20μm
大きなミクロスフェア サイズにより、直接観察、個々の粒子の分析、サイズに基づく同定、生物学的モデリング、および粒子操作がサポートされます。
ストレプトアビジン機能性表面
表面は、ビオチン化された抗体、抗原、タンパク質、ペプチド、酵素、オリゴヌクレオチド、DNA、RNA、アプタマー、受容体、およびその他のビオチン含有分子を捕捉します。
固形分1%の懸濁液
SAPS20UM-10 は固形分 1% で供給され、必要な粒子数、反応量、結合容量、検出方法に応じて希釈できます。
シンプルなキャプチャーリガンドの固定化
ビオチン化捕捉分子は、エンドユーザーによるミクロスフェア表面の直接化学活性化を必要とせずに結合させることができます。
粒子あたりの大きな表面積
各 20µm のマイクロスフェアは、リガンドの固定化とシグナル生成のための比較的大きな物理的表面を提供します。
複数の検出プラットフォームに適しています
粒子は次のように評価できます。
光学顕微鏡
蛍光顕微鏡検査
共焦点顕微鏡
フローサイトメトリー
イメージングフローサイトメトリー
マイクロ流体システム
プレートベースのアッセイ
粒子計数システム
比色検出
蛍光検出
モジュール式生物学的アッセイプラットフォーム
同じ粒子プラットフォームを異なるビオチン化捕捉分子とともに使用できます。
大量生産能力
SHBC は、サンプル、パイロット バッチ、繰り返し生産、OEM 協力、プライベート ラベル プロジェクト、およびバルク供給をサポートします。
カスタム開発オプション
適格なプロジェクトについては、粒子サイズ、ストレプトアビジンコーティングレベル、結合能力、濃度、緩衝液、防腐剤、蛍光コーディング、カラーコーディング、パッケージング、および品質仕様について議論する場合があります。
生物学的研究への応用
ビーズベースのイムノアッセイの開発
SAPS20UM-10 は、サンドイッチ、間接、競合、または凝集ベースの研究アッセイにおける固相として使用できます。
サンドイッチアッセイには以下が含まれる場合があります。
ビオチン化捕捉抗体の固定化。
人のいない表面のブロック。
ターゲットサンプルとのインキュベーション。
標的分析物の捕捉。
標識された検出抗体の追加。
未結合試薬の除去。
粒子関連信号の検出。
潜在的な研究対象には次のようなものがあります。
抗体
抗原
サイトカイン
ホルモン
成長因子
酵素
バイオマーカー
病原体関連タンパク質
食品安全性分析物
環境目標
獣医学の研究対象
研究化合物
競合結合アッセイ
競合するアッセイ形式は次の点で評価されます。
低分子
ハプテン
薬物
毒素
ペプチド
ホルモン
代謝物
結合部位が限られたターゲット
標的濃度と測定シグナルの関係は、アッセイ設計によって異なります。
抗体の固定化とスクリーニング
ビオチン化抗体は次の目的で結合できます。
抗原の検出
抗体スクリーニング
ハイブリドーマのスクリーニング
抗体特異性研究
交差反応性の評価
アフィニティの比較
捕捉抗体の選択
アッセイ実現可能性テスト
タンパク質とペプチドの相互作用研究
ビオチン化タンパク質またはペプチドは、以下を調査するために固定化できます。
抗体と抗原の相互作用
タンパク質間相互作用
受容体とリガンドの結合
エピトープ認識
酵素と基質の相互作用
阻害剤スクリーニング
薬剤候補の結合
タンパク質の親和性の比較
核酸捕捉
ビオチン化オリゴヌクレオチド、DNA、RNA、PCR 産物、およびアプタマーを SAPS20UM-10 に結合させることができます。
潜在的な用途には次のようなものがあります。
シーケンス固有のキャプチャ
ハイブリダイゼーションアッセイの開発
PCR産物の捕捉
ジェノタイピング研究
変異検出研究
アプタマーベースの検出
DNA-タンパク質相互作用の研究
RNA結合研究
分子アッセイの開発
細胞と粒子の相互作用の研究
適切なビオチン化抗体、リガンド、受容体、レクチン、またはペプチドで機能化すると、粒子は細胞との相互作用について評価できます。
考えられる研究の方向性は次のとおりです。
細胞表面受容体の認識
細胞接着
リガンドを介した細胞結合
免疫細胞相互作用
粒子の取り込み
食作用
細胞イメージング
細胞選別研究
合成抗原提示粒子の研究
重要な変数には次のものがあります。
捕捉リガンド密度
粒子対細胞の比率
細胞濃度
インキュベーション時間
温度
混合方法
洗浄条件
細胞生存率
粒子の凝集
不特定の添付ファイル
顕微鏡検査と画像処理
20µm の粒子は以下をサポートします。
明視野イメージング
蛍光イメージング
共焦点顕微鏡
ハイコンテンツイメージング
粒子の局在化
細胞粒子相互作用イメージング
表面蛍光分析
画像ベースのアッセイ開発
マイクロ流体研究
SAPS20UM-10 は次の方法で評価できます。
粒子輸送の研究
マイクロチャネル流の研究
サイズベースの分離
粒子捕捉
流体力学的集束
マイクロ流体デバイスにおけるイメージング
細胞サイズの粒子操作
デバイスの性能テスト
マイクロチャネルの寸法と最も狭い流路が 20µm の粒子に対応していることを確認します。
凝集研究
大きなストレプトアビジン ミクロスフェアは、標的または架橋分子の結合により測定可能な粒子のクラスタリングが生じる場合、粒子凝集法で評価できます。
凝集は以下を使用して観察できます。
顕微鏡検査
光学イメージング
光散乱法
沈降パターン
自動画像解析
凝集とターゲット濃度の関係は実験的に最適化する必要があります。
アフィニティの捕捉と分離
粒子は、ビオチン化生体分子または固定化リガンドによって認識される標的の親和性捕捉について評価され得る。
SAPS20UM-10 は必ずしも磁気を帯びているわけではありません。粒子の回収には、確認された粒子の材質に適合する方法を使用する必要があります。
適合するビオチン化生体分子
ビオチン化抗体
考えられる抗体フォーマットには次のものがあります。
全長 IgG
IgM
ファブフラグメント
F(ab')₂ フラグメント
組換え抗体
単鎖可変フラグメント
単一ドメイン抗体
操作された抗体フォーマット
固定化後の抗体活性は以下に依存します。
ビオチン化化学
ビオチン基の数
ビオチン基の位置
スペーサーの長さ
タンパク質の純度
抗体の凝集
表面荷重
保管条件
ビオチン化タンパク質
例としては次のものが挙げられます。
組換え抗原
酵素
サイトカイン
成長因子
受容体
レクチン
結合タンパク質
融合タンパク質
タンパク質標準品
ビオチン化ペプチド
潜在的な用途には次のようなものがあります。
エピトープマッピング
抗体スクリーニング
受容体結合研究
酵素の研究
タンパク質相互作用の研究
薬物スクリーニングアッセイ
ビオチンとペプチドの間に適切なスペーサーがあると、アクセシビリティが向上する可能性があります。
ビオチン化核酸
互換性のある形式には次のものが含まれます。
一本鎖DNA
二本鎖DNA
RNA
オリゴヌクレオチドプローブ
PCRアンプリコン
アプタマー
修飾核酸プローブ
キャプチャシーケンス
ビオチン化小分子
ビオチン基がアクセス可能なままであれば、小さなビオチン化化合物が固定化される可能性があります。
スペーサーの設計と分子の配向は、メソッドの開発中に考慮する必要があります。
推奨されるビオチン化リガンドローディングプロトコール
次の手順は、一般的な開発の開始点です。最終条件は、実際の生体分子とアプリケーションに合わせて最適化する必要があります。
1. SAPS20UM-10 を再懸濁します。
製品が推奨取り扱い温度に達するまで待ちます。
懸濁液が均一になるまで、穏やかに反転、回転、または制御されたボルテックスによって混合します。
20μm の粒子はすぐに沈降する可能性があるため、各アリコートを取り出す直前に懸濁液を混合してください。
サンプリングを繰り返す間、穏やかな混合を続けて、アリコート間の濃度差を減らします。
2. 必要な粒子量の計算
以下に従って必要な量を決定します。
検査数
テストごとに必要な粒子
反応ごとに必要な表面積
反応量
予想される目標濃度
ロット固有の結合容量
洗浄ステップ数
予想される処理損失
固形分濃度のみからリガンド負荷容量を推定しないでください。
3. マイクロスフィアを転送します
必要な量を清潔な低結合チューブまたは処理容器に移します。
20µm の粒子に適した開口部を備えたピペットチップを使用してください。
粒子の移動が制限されたり、サンプリングが不均一になる可能性がある非常に細いチップは避けてください。
4. 粒子を洗浄する
ストレプトアビジンおよび選択したビオチン化リガンドと互換性のあるバッファーを使用してミクロスフェアを洗浄します。
リガンドの固定化中は遊離ビオチンを含むバッファーを避けてください。
考えられる回復方法には次のものがあります。
低速または中速の遠心分離
膜ろ過
沈降の制御
その他の検証済みの固液分離方法
正しい方法は、実際の粒子の材質、密度、緩衝液、体積、および回収要件を使用して決定する必要があります。
5. ビオチン化リガンドの準備
選択したリガンドを適合する結合バッファーで希釈します。
レビュー：
リガンド濃度
ビオチン化レベル
分子純度
集計レベル
無料のビオチン含有量
遊離ビオチン化試薬
緩衝剤添加剤
タンパク質の安定性
核酸の安定性
6. リガンドの追加
洗浄した粒子をビオチン化リガンドと組み合わせます。
穏やかな回転、揺動、または制御された混合を使用して、粒子を浮遊状態に保ちます。
過度のボルテックス、発泡、機械的損傷、生体分子の変性を避けてください。
7. インキュベーションを最適化する
評価する：
粒子濃度
リガンド濃度
リガンド対粒子の比率
インキュベーション時間
温度
緩衝液のpH
塩分濃度
混合速度
反応量
インキュベーション中に 20µm の粒子が沈降する可能性があるため、継続的に穏やかに混合することが特に重要です。
8. 未結合のリガンドを除去する
粒子を分離して洗浄し、結合していないビオチン化分子を除去します。
洗浄が不十分だとバックグラウンドが増加する可能性があり、洗浄が過剰だと粒子の回収率が低下する可能性があります。
9. ミクロスフェア表面をブロックする
リガンドをロードした粒子をアプリケーション互換のブロッキング試薬とともにインキュベートします。
潜在的な阻害要因には次のようなものがあります。
ウシ血清アルブミン
カゼイン
魚ゼラチン
非免疫免疫グロブリン
合成ブロッキングポリマー
市販のミクロスフェアブロッキングバッファー
ブロッカーは、標的特異的結合を大幅に減少させることなく、ネガティブサンプルシグナルを減少させる必要があります。
10. 調製したマイクロスフェアを再懸濁します。
コーティングされブロックされた粒子を適切なアッセイまたは保存バッファーに再懸濁します。
評価する：
粒子分散
リガンドの保持
結合活性
非特異的結合
粒子回収
セトリング動作
再分散
短期的な安定性
長期安定性
微生物の安定性
推奨される生物学的アッセイのワークフロー
1. キャプチャーマイクロスフィアの準備
選択したビオチン化捕捉分子を SAPS20UM-10 にロードします。
サンプルテストの前に粒子を洗浄してブロックしてください。
2. 実験コントロールの準備
推奨されるコントロールには次のものが含まれます。
アッセイバッファーブランク
捕捉リガンドを含まないストレプトアビジンマイクロスフェア
リガンドをロードした粒子をターゲットなしで捕捉
ネガティブサンプル
陽性サンプル
レポーターのみの制御
アイソタイプ制御
関連しないビオチン化リガンドのコントロール
ラベルのないターゲット コントロール
蛍光使用時の単色制御
3. テストサンプルの追加
調製した粒子をサンプルと混合します。
最適化する：
サンプル量
サンプルの希釈
粒子濃度
反応あたりの粒子数
目標濃度範囲
インキュベーション時間
インキュベーション温度
混合方法
サンプルマトリックス
インキュベーション中は穏やかな混合を維持してください。
4. マイクロスフィアを洗浄します
許容可能な粒子回収率を維持しながら、結合していないサンプル成分を除去します。
記録：
洗濯回数
洗浄緩衝液組成物
洗浄量
分離方法
残留上清量
混合手順
5. 検出試薬を追加します。
蛍光、酵素、比色、化学発光、またはその他の互換性のある検出試薬を追加します。
選択した検出システムは、目的の機器およびアッセイ形式に一致する必要があります。
6. インキュベートと洗浄
レポーター濃度とインキュベーション時間を最適化します。
バックグラウンドを減らすために未結合の検出試薬を除去します。
7. 検出のための再懸濁
粒子をきれいな検出バッファーに再懸濁します。
サンプルを機器またはイメージングチャンバーに移す直前に混合してください。
8. 信号を測定する
潜在的な分析出力には次のものがあります。
粒子蛍光の平均値または中央値
陽性粒子の割合
シグナル対バックグラウンド比
粒子関連酵素活性
色の濃さ
凝集レベル
粒子数の変化
用量反応曲線
アッセイ精度
回復
特異性
交差反応性
9. 結果を分析する
適切なコントロールを使用して、正と負のしきい値を設定します。
検査サンプルのみを使用して陽性結果を定義しないでください。
20µm マイクロスフェアの取り扱い、混合、回収
沈降
20μm のマイクロスフェアは、より小さな粒子よりも早く沈降する可能性があります。
沈降は次の原因となる可能性があります。
粒子濃度が不均一
アリコート間の変動
一貫性のないリガンドの負荷
反応間で粒子数が異なる
さまざまなアッセイシグナル
再現性の低下
各サンプリングステップの直前にストック懸濁液を混合します。
均一なサスペンションの維持
適切な混合方法には次のようなものがあります。
穏やかな反転
エンドオーバーエンド回転
遅い軌道混合
優しい揺れ
使用前のボルテックスの制御
断続的なピペット混合
泡立ちや生体分子の損傷を引き起こす高速混合は避けてください。
ピペッティング
適切なピペットチップ開口部を使用してください。
繰り返しサンプリング中:
ストックを混ぜます。
必要量を速やかに吸引してください。
完全に排出してください。
次のアリコートの前に再度混合します。
遠心分離
粒子は、小さな微小球よりも低い遠心力または短い遠心時間を使用して回収可能である可能性がありますが、正しい条件は粒子の材質と密度によって異なります。
以下を提供する最小条件を決定します。
許容可能な粒子回収率
扱いやすいペレット
再分散が容易
最小限の集約
生体分子の損傷を最小限に抑える
濾過
適切な孔径を備えた膜を回収または洗浄に使用できます。
確認する：
粒子保持
生体分子の適合性
低非特異吸着
許容範囲内の回復
粒子の放出が容易
処理量との互換性
沈降の制御
一部のワークフローでは、自然沈降または加速沈降が考慮される場合があります。
沈降ベースの回収は、遠心分離よりも遅く、変動しやすい場合がありますが、機械的ストレスを軽減できます。
顕微鏡検査、フローサイトメトリー、マイクロ流体検出
光学顕微鏡
20μm の微小球は通常、標準的な光学顕微鏡で観察できます。
潜在的な用途には次のようなものがあります。
形態評価
骨材検査
粒子計数
表面結合の視覚化
細胞粒子相互作用イメージング
回復評価
蛍光顕微鏡
粒子が蛍光レポーター、内部に組み込まれた色素、または蛍光標識されたターゲットを担持している場合、蛍光顕微鏡を使用して以下を評価できます。
信号の位置特定
結合の均一性
正の粒子と負の粒子
細胞と粒子の相互作用
多重粒子集団
フローサイトメトリー
SAPS20UM-10 は、機器の流体工学が 20µm の粒子に適合する場合、フローサイトメトリーによって評価できます。
使用する前に、次のことを確認してください。
サンプルチューブの直径
フローセルの寸法
ノズルまたはオリフィスのサイズ
サンプル流量
粒子濃度
集計レベル
散乱検出器の範囲
粒子は、最も狭い流体経路よりも実質的に小さいままでなければなりません。
イメージングフローサイトメトリー
大きな粒子サイズは、粒子関連蛍光と形態学的イメージングを組み合わせたフローサイトメトリー研究のイメージングに役立つ可能性があります。
マイクロ流体工学
マイクロチャネル、くびれ、フィルター、バルブが閉塞することなく 20µm の粒子を収容できることを確認します。
ブロッキングおよび非特異的結合の制御
非特異的吸着によりバックグラウンドが増加し、アッセイ感度が低下する可能性があります。
考えられる原因は次のとおりです。
不十分なブロッキング
互換性のないブロッキング試薬
過剰な捕捉リガンド
過剰な検出試薬
洗浄が不十分である
凝集した抗体
疎水性サンプル成分
高いサンプルタンパク質濃度
粒子の凝集
サンプルとマトリックスの干渉
複数のブロッキング試薬をスクリーニングする
いくつかのブロッキング処方を比較します。
好ましいブロッカーは、標的特異的結合を維持しながら、ネガティブサンプルシグナルを減少させる必要があります。
捕捉リガンドのローディングを最適化する
リガンドを最大にロードしても、常に最大のアッセイ性能が得られるわけではありません。
過剰な負荷により、次のような可能性があります。
立体的な混雑を引き起こす
ターゲットのアクセシビリティを低下させる
試薬消費量の増加
非特異的な相互作用の増加
アッセイのバリエーションを増やす
検出試薬の滴定
過剰な検出試薬はバックグラウンドを増加させる可能性があります。
ポジティブコントロールとネガティブコントロールを使用して、いくつかの濃度をテストします。
洗浄を最適化する
評価する：
洗濯回数
洗浄緩衝液組成物
洗浄量
分離方法
混合方法
残留上清
粒子回収
洗剤を慎重に評価する
少量の適合性洗剤を使用すると、粒子の分散が改善され、非特異的吸着が減少する可能性があります。
過剰な界面活性剤は、生体分子の相互作用や検出試薬を妨げる可能性があります。
20μm、10μm、5μmのマイクロスフェアの比較
比較 | SAPS20UM-10 | SAPS10UM-10 | SAPS5UM-10 |
|---|---|---|---|
呼び径 | 20μm | 10μm | 5μm |
固形分含有量 | 1% | 1% | 1% |
個々の粒子ごとの表面 | 最大 | 中級 | より小さい |
単位質量あたりの粒子数 | 最低 | 中級 | 最高 |
ヘタリ傾向 | 一般的に最高 | 高い | 適度 |
顕微鏡の可視性 | 素晴らしい | とても良い | 良い |
セルサイズ範囲のモデリング | 強い関連性 | 関連する | より小さな粒子モデル |
流路互換性 | 注意深くチェックする必要があります | 通常は簡単です | 一般的には簡単です |
粒子回収 | 便利なことが多い | 便利 | 一般的に実用的 |
サイズコード化された多重化 | 最大人口として有用 | 役に立つ | 役に立つ |
継続的な混合の必要性 | 最高 | 高い | 適度 |
次の場合に SAPS20UM-10 を選択してください。
大きな個々の粒子の表面が必要です。
直接顕微鏡検査は重要です。
セルサイズ範囲の粒子モデルが推奨されます。
個々の粒子の分析が必要です。
サイズに基づいた明確な識別が必要です。
マイクロ流体操作が研究されています。
大粒子凝集研究が計画されています。
粒子回収の強力な視覚的確認は有用です。
次の場合に SAPS10UM-10 を選択してください。
大きな粒子サイズと容易な流体適合性との間のバランスが望まれる。
従来のフローサイトメトリーは主要な検出方法です。
強力な散乱検出が必要です。
20μm の粒子よりも沈降が少ないことが好ましい。
次の場合に SAPS5UM-10 を選択してください。
単位質量あたりの粒子数を増やす必要があります。
より低い沈降が好ましい。
標準的なビーズベースのフローアッセイが開発されています。
より少ない反応体積が使用されます。
より容易な流体適合性が重要です。
最終的な選択は、意図する生物学的用途、機器の能力、必要な粒子数、リガンドの負荷、沈降挙動、回収方法および検出プラットフォームに基づいて行う必要があります。
品質管理とバッチの一貫性
潜在的な品質管理パラメーターには次のものがあります。
平均粒子径
粒子径範囲
粒度分布
粒径変動係数
粒子の形態
サスペンション外観
固形分含有量
ストレプトアビジンコーティングの一貫性
ビオチン結合能
粒子分散
集計レベル
沈降速度
再分散性能
粒子回収
バックグラウンド信号
非特異的結合
微生物制御
梱包の完全性
保存安定性
ロット間の一貫性
粒度試験
粒子サイズの特性評価により、次のことが報告される場合があります。
平均直径
中央直径
サイズ範囲
サイズ分布
変動係数
顕微鏡検査の結果
機器による粒度データ
粒子サイズの結果を報告する際には、測定方法を明記する必要があります。
ビオチン結合能
結合能力は、定義されたビオチン化プローブを使用して測定する必要があります。
測定結果は次の影響を受ける可能性があります。
プローブの種類
分子サイズ
ビオチン化レベル
プローブの純度
培養条件
バッファー組成
検出方法
算出根拠
異なるプローブまたは方法を使用して取得された値は、直接比較できない場合があります。
機能的な品質管理
機能的 QC アッセイでは以下を評価できます。
標準化されたビオチン化プローブの結合
陽性粒子の割合
信号分配
背景の分離
粒子回収
総人口
再現性
保管後の再分散
ロット固有のドキュメント
利用可能なドキュメントには次のものが含まれます。
分析証明書
製品仕様
粒子サイズの結果
固形分含有量の結果
結合能力の結果
安全データシート
取り扱い上の注意
ストレージに関する推奨事項
ロット番号
製造日
大量生産の前に、必要なリリーステストと合格基準について合意する必要があります。
大量生産とカスタマイズ
Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. は、実験室研究、パイロット開発、反復生産、企業の大量購入向けに SHBC ストレプトアビジン マイクロスフェアを供給しています。
研究サンプルの評価
サンプルは次の点で評価できます。
粒子の形態
粒子分散
ストレプトアビジン活性
ビオチン化リガンドのローディング
非特異的結合
粒子回収
アッセイの実現可能性
顕微鏡の互換性
フローシステムの互換性
沈降と再分散
パイロットスケールの開発
パイロット バッチは以下をサポートする場合があります。
アッセイの最適化
結合能力の検証
安定性の研究
バッファの選択
防腐剤の評価
包装評価
品質管理開発
顧客確認
プロセス転送
大量生産
技術要件とリリース仕様を確認した上で、バルク生産を手配できます。
以下を提供してください:
必要数量
予想される年間需要
希望のパッケージサイズ
意図された生物学的用途
必要な粒子径
必要な固形分含有量
必要な結合容量
ビオチン化リガンドの種類
バッファ要件
防腐剤の制限
品質管理要件
必要書類
配送スケジュール
配送先
カスタム粒子径
用途および製造の実現可能性に応じて、代替の粒子サイズを検討する場合があります。
カスタムストレプトアビジンローディング
プロジェクト固有のストレプトアビジン コーティング レベルまたは結合能力の目標を評価できます。
カスタム蛍光またはカラーコーディング
イメージングおよびマルチプレックス プロジェクトの場合は、蛍光でコード化された、または目に見える色のストレプトアビジン ミクロスフェアが検討される場合があります。
考えられるオプションには次のようなものがあります。
異なる励起波長
異なる発光波長
複数の蛍光色
複数の蛍光強度
目に見える粒子の色
顧客固有のコーディング システム
カスタムバッファーと濃度
代替の固形分濃度、緩衝剤配合、界面活性剤、保存剤システム、および包装形式を評価することもできます。
OEM およびプライベート ラベルの供給
利用可能な連携形式には次のものがあります。
OEMパッケージ
顧客固有のラベル
プライベートブランドの供給
顧客固有のカタログ番号
原料のバルク供給
カスタマイズされた技術文書
顧客固有のリリース仕様
ストレージと安定性に関する推奨事項
最終製品ラベル、技術データシート、およびロット固有の分析証明書に従ってください。
一般的な推奨事項は次のとおりです。
指定された冷蔵条件下で保管してください。
凍結融解の安定性が検証されていない限り、凍結しないでください。
容器をしっかり閉めて保管してください。
バイアルを立てて保管してください。
サンプリングする前に十分に混合してください。
処理中、粒子を懸濁液中に維持します。
清潔なピペットチップと低結合チューブを使用してください。
元のサスペンションの汚染を避けてください。
粒子を乾燥させないでください。
不必要な温度変化を繰り返さないようにしてください。
希釈した材料を元の容器に戻さないでください。
製品のロット番号と開封日を記録します。
ストレプトアビジンでコーティングされた粒子は、通常、保管および取り扱い中は液体のままでなければなりません。乾燥または凍結すると性能が低下する可能性があります。パフォーマンスを低下させます。 引用turn146812search1turn146812search5
沈降と再懸濁
SAPS20UM-10は粒子が大きいため、沈降が早くなる場合があります。
使用前に:
バイアルが推奨取り扱い温度に達するまで待ちます。
バイアルを静かに反転または回転させます。
必要に応じて、制御されたボルテックスを適用します。
懸濁液が均一であることを確認します。
サンプリングの直前に混合してください。
不可逆的な凝集体がないか検査します。
可逆的な沈下は、必ずしも製品の故障を示すわけではありません。
乾燥を避ける
洗浄中に粒子ペレットを乾燥させないでください。
乾燥すると次のような原因が考えられます。
不可逆的な凝集
ストレプトアビジン活性の低下
再分散が困難
アッセイバックグラウンドの増加
粒子回収率の低下
凍結を避ける
凍結すると次のような原因が考えられます。
粒子の凝集
サスペンションの安定性の変化
タンパク質活性の低下
粒子回収率の低下
アッセイのばらつきの増加
調製した試薬の安定性を評価する
リガンドがロードされブロックされたミクロスフェアは、元の SAPS20UM-10 懸濁液とは異なる安定性を有する可能性があります。
最終的に調製された試薬を、意図された保管、輸送、および操作条件下で評価します。
トラブルシューティングガイド
弱いビオチン化リガンド結合
考えられる原因:
バッファー中の遊離ビオチン
除去されていないビオチン化試薬
低リガンドビオチン化
アクセスできないビオチングループ
リガンド濃度が不十分
不適切なインキュベーション時間
不活性ストレプトアビジン
互換性のないバッファ
インキュベーション中の粒子の沈降
推奨されるアクション:
遊離ビオチンを除去します。
ビオチン化リガンドを精製します。
ビオチン化を確認します。
適切なスペーサーを評価します。
穏やかな混合を維持してください。
リガンド濃度を徐々に増加させます。
ポジティブコントロールのビオチン化リガンドをテストします。
高いバックグラウンド信号
考えられる原因:
ブロッキングが不十分
過剰な検出試薬
不十分な洗浄
非特異的試薬の吸着
サンプルとマトリックスの干渉
凝集した抗体
過剰な捕捉リガンドの負荷
推奨されるアクション:
さまざまなブロッカーを比較します。
検出試薬を滴定します。
洗浄を最適化します。
必要に応じてタンパク質凝集体を除去します。
サンプルを希釈します。
捕獲リガンドの負荷を減らします。
アリコート間で結果が異なる
考えられる原因:
粒子の迅速な沈降
原料の混合が不十分である
ミキシングとサンプリングの間の遅延
狭いピペットチップの開口部
一貫性のない転送手法
推奨されるアクション:
各アリコートの直前に混合します。
適切なピペットチップを使用してください。
繰り返し分注する間は、ゆっくりとした連続混合を維持してください。
サンプリング間隔を標準化します。
粒子の凝集
考えられる原因:
互換性のないバッファ
極端なpH
高いイオン強度
凍結
乾燥
過剰なリガンド負荷
安定剤が不十分です
微生物汚染
推奨されるアクション:
バッファの互換性を評価します。
凍結や乾燥は避けてください。
リガンドのローディングを最適化します。
制御された穏やかな混合を使用してください。
安定剤と保存料の要件を確認します。
粒子回収率が低い
考えられる原因:
上清除去時の損失
チューブへの接着力
フィルターの孔径が間違っている
不完全な沈降
不完全な転送
過度の洗濯
ピペットチップ内の粒子の沈降
推奨されるアクション:
低結合チューブを使用してください。
分離条件を最適化します。
フィルター膜を検証します。
移す前に必ず混合してください。
不必要な洗浄ステップを減らします。
ペレットの上に制御された残留量を残します。
よくある質問
SAPS20UM-10とは何ですか?
SAPS20UM-10 は、生物学研究やビーズベースのアッセイでビオチン化生体分子を捕捉するために固形分 1% で供給される 20 µm のストレプトアビジンでコーティングされたマイクロスフェア懸濁液です。
SHBCブランドとは何ですか？
SHBC は、Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. のマイクロスフェアおよびバイオテクノロジー材料のブランドです。
公称粒径はどれくらいですか?
公称粒径は20μmです。
測定された直径、サイズ範囲、粒度分布は、ロット固有の文書を使用して確認する必要があります。
固形分は何ですか？
SAPS20UM-10 は固形分 1% で供給されます。
SAPS20UM-10 ミクロスフェアは磁性を持っていますか?
製品仕様に磁気特性が特に記載されていない限り、製品が磁気を帯びているとみなすべきではありません。
磁気分離の場合は、特にストレプトアビジン磁気ビーズと記載されている製品を選択してください。
マイクロスフィアは蛍光性ですか？
蛍光が特に記載されていない限り、標準製品には内部蛍光色素が含まれているとみなすべきではありません。
蛍光エンコードされたバージョンは、カスタム製品として議論される場合があります。
SAPS20UM-10 に結合できる分子はどれですか?
ストレプトアビジン表面は、ビオチン化抗体、抗原、タンパク質、ペプチド、酵素、受容体、オリゴヌクレオチド、DNA、RNA、アプタマー、およびその他のビオチン含有分子を捕捉できます。
未修飾の抗体は直接結合できますか?
未修飾の抗体は、最初にビオチン化されるか、別の互換性のある試薬を介して接続されない限り、ストレプトアビジンとビオチンの相互作用を通じて特異的に結合しません。
EDC/NHS のアクティベーションは必要ですか?
ストレプトアビジンでコーティングされたマイクロスフェアにビオチン化分子をロードする場合、通常、EDC/NHS の活性化は必要ありません。
ビオチン結合能力とは何ですか?
結合能力は、製品仕様書またはロット固有の分析証明書を使用して確認する必要があります。
固形分のみから推定すべきではありません。
20µm のマイクロスフェアを選択する理由は何ですか?
20µm の粒子は、個々の粒子あたりの表面積が大きく、顕微鏡での鮮明な可視性、細胞サイズ範囲の寸法、および便利な粒子識別を提供します。
20µm のマイクロスフェアは、より小さい粒子よりも表面積が大きいですか?
20µm の各粒子は、より小さな粒子よりも表面積が大きくなります。
しかし、一般に粒子が小さいほど粒子の量が多くなり、単位質量あたりの総表面積が大きくなります。
なぜ粒子はすぐに沈降するのでしょうか?
通常、大きな粒子は小さな微小球よりも早く沈降します。
サンプリングの直前にストックを混合し、インキュベーション中は穏やかな混合を維持します。
SAPS20UM-10 はフローサイトメトリーに使用できますか?
機器の流体工学、フローセル、サンプル経路が 20µm の粒子に対応している場合、フローサイトメトリーで評価できます。
顕微鏡検査に使用できますか?
はい。粒径が大きいため、光学顕微鏡、蛍光顕微鏡、または共焦点顕微鏡による評価に適しています。
SAPS20UM-10をセルモデルとして使用できますか?
20µm というサイズは、細胞サイズ範囲の粒子研究に役立つ可能性があります。
ただし、合成ミクロスフェアは、生きた細胞の光学的、機械的、化学的、または生物学的特性をすべて再現するわけではありません。
マイクロスフェアはイムノアッセイに使用できますか?
はい。ビオチン化捕捉抗体を粒子上に固定化し、その後、適切なレポーターを使用して標的を捕捉および検出することができます。
粒子は核酸の捕捉に使用できますか?
はい。ビオチン化オリゴヌクレオチド、DNA、RNA、PCR 産物およびアプタマーは、固定化とターゲット捕捉に関して評価できます。
SAPS20UM-10 はマルチプレックスアッセイで使用できますか?
はい、20µm 集団が他の粒子集団と区別できる場合に限ります。
サイズコーディング、蛍光コーディング、またはカラーコーディングが考慮される場合があります。
粒子はどのように洗浄すればよいですか?
洗浄方法は、粒子の材質、密度、緩衝液、容量、必要な回収率によって異なります。
遠心分離、濾過、または制御された沈降を評価することができます。
どうすれば非特異的結合を減らすことができるのでしょうか?
ブロッキング試薬、捕捉リガンド濃度、検出試薬濃度、洗浄条件、界面活性剤レベル、サンプル希釈およびインキュベーション時間を最適化します。
遊離ビオチンを含むバッファーは使用できますか?
遊離ビオチンはストレプトアビジン結合部位を占有する可能性があるため、一般にキャプチャーリガンドのローディング中は避けるべきです。
使用前に製品を希釈する必要がありますか?
はい。必要な粒子数、アッセイ量、検出方法に応じて使用濃度を調製します。
SAPS20UM-10は凍結できますか?
凍結融解の安定性が特に検証されていない限り、凍結は一般的に推奨されません。
濃度はカスタマイズできますか?
プロジェクトの要件と製造の実現可能性に応じて、代替の固形分濃度について議論する場合があります。
結合容量はカスタマイズできますか?
プロジェクト固有のストレプトアビジン コーティング レベルまたは結合能力の目標を評価できます。
蛍光性の 20µm ストレプトアビジン マイクロスフェアを製造できますか?
蛍光コード化または可視着色された 20 µm ストレプトアビジン ミクロスフェアは、適格なイメージング、マイクロ流体およびマルチプレックス プロジェクトで議論される可能性があります。
大量生産は可能ですか?
はい。 Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. は、サンプル、パイロット バッチ、繰り返し注文、OEM プロジェクト、大量生産をサポートします。
見積もりにはどのような情報が必要ですか?
以下を提供してください:
カタログ番号 SAPS20UM-10
必要数量
年間予想購入量
希望のパッケージサイズ
意図された生物学的用途
ビオチン化リガンドの種類
必要な結合容量
テストごとに必要な粒子数
検出方法
バッファ制限
防腐剤の制限
品質管理要件
必要書類
配送先
サンプルまたは一括見積もりをリクエストする
SHBC SAPS20UM-10 20µm ストレプトアビジン マイクロスフェアは、ビオチン化抗体、タンパク質、ペプチド、酵素、受容体、オリゴヌクレオチド、DNA、RNA、アプタマー、およびその他のビオチン標識分子を固定化するための、大きくて明確に識別可能な粒子プラットフォームを提供します。
この製品は次のような用途に適しています。
生物学的アッセイの開発
ビーズベースのイムノアッセイ
抗体の固定化
タンパク質相互作用研究
核酸捕捉
ハイブリダイゼーションアッセイ
細胞と粒子の相互作用の研究
顕微鏡検査と画像処理
マイクロ流体研究
凝集研究
サイズコード化された多重化システム
研究用試薬の製造
SAPS20UM-10 は以下を提供します。
公称粒子径 20μm
ストレプトアビジン機能性表面
固形分1%の懸濁液
個々の粒子あたりの表面積が大きい
鮮明な顕微鏡視認性
ビオチン化生体分子との適合性
サンプルとパイロットバッチの供給
大量生産能力
OEMおよびカスタム開発のサポート
サンプル評価または一括購入の場合は、使用目的、必要量、ビオチン化リガンド、必要な結合容量、検出プラットフォーム、パッケージング要件、および品質管理仕様を提供してください。
製品名: 20µm ストレプトアビジンマイクロスフェア
カタログ番号: SAPS20UM-10
ブランド: SHBC
メーカー: Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.
公称粒径: 20µm
表面改質: ストレプトアビジン
固体含有量: 1%
主な用途: 生物学的研究およびビーズベースのアッセイ
供給能力: サンプル、パイロットバッチおよびバルク生産
使用目的: 研究用途のみ。診断または治療用ではありません。