Su fabricante de microesferas de confianza para la innovación en diagnóstico

Productos

SHBC proporciona microesferas coloreadas, microesferas fluorescentes, perlas magnéticas, microesferas de sílice, microesferas de empaquetamiento para cromatografía y reactivos biológicos para el desarrollo de ensayos de diagnóstico, extracción de ácidos nucleicos, purificación de proteínas y aplicaciones de separación.

Hogar Microesferas para IVD y POCT Microesferas de estreptavidina de 30um SAPS30UM-10 1%
Microesferas de estreptavidina de 30um SAPS30UM-10 1%
Microesferas de estreptavidina de 30um SAPS30UM-10 1%
Microesferas recubiertas de estreptavidina de 30 µm con 1 % de sólidos para la captura de anticuerpos, proteínas y ácidos nucleicos biotinilados en investigación biológica y suministro a granel.
  • SAPS30UM-10

  • SHBC

  • 1%

  • 30 µm

  • 10ml,20ml,50ml,500ml,1000ml

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Microesferas de estreptavidina de 30 µm para investigación biológica

Las microesferas de estreptavidina SHBC SAPS30UM-10 son microesferas funcionalizadas en superficie de 30 µm desarrolladas para inmovilizar anticuerpos, antígenos, proteínas, péptidos, enzimas, receptores, oligonucleótidos, ADN, ARN, aptámeros y otras moléculas marcadas con biotina.

El producto se suministra como una suspensión de sólidos al 1 % y está diseñado para el desarrollo de ensayos biológicos, inmovilización de biomoléculas, investigación de interacciones por afinidad, microscopía, estudios de interacción entre células y partículas, captura de ácidos nucleicos, microfluidos, investigación de aglutinación, biosensores basados ​​en partículas y fabricación de reactivos de investigación.

El diámetro de 30 µm proporciona una gran superficie de partículas individuales y hace que las microesferas sean comparativamente fáciles de observar y manipular en microscopía y sistemas basados ​​en imágenes. El gran tamaño de las partículas también puede respaldar la modelización del rango de tamaño de las células, el análisis de partículas individuales, los ensayos codificados por tamaño y la investigación biológica que requiere microesferas claramente identificables.

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. respalda la evaluación de muestras de investigación, el desarrollo a escala piloto, la fabricación repetida, la cooperación OEM, los proyectos de marca privada y el suministro a granel para empresas de biotecnología, universidades, institutos de investigación, desarrolladores de reactivos, fabricantes de instrumentos y organizaciones de investigación biológica.

Respuesta rápida del producto

SAPS30UM-10 es una suspensión de microesferas recubiertas de estreptavidina de 30 µm suministrada con un 1 % de sólidos. Su superficie funcional con estreptavidina captura biomoléculas biotiniladas para la inmovilización de anticuerpos y proteínas, captura de ácidos nucleicos, ensayos biológicos, microscopía, estudios de interacción entre células y partículas, microfluidos, investigación de aglutinación y desarrollo de sistemas de detección basados ​​en partículas.

Productos destacados

  • Nombre del producto: Microesferas de estreptavidina de 30 µm

  • Número de catálogo: SAPS30UM-10

  • Marca: SHBC

  • Fabricante: Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.

  • Diámetro nominal de partícula: 30 µm

  • Modificación de superficie: estreptavidina

  • Contenido de sólidos: 1%

  • Principio de unión: afinidad estreptavidina-biotina

  • Forma física: Suspensión acuosa de microesferas.

  • Aplicación principal: investigación biológica y ensayos basados ​​en perlas.

  • Capacidad de suministro: muestras, lotes piloto y producción a granel.

  • Personalización: Disponible según viabilidad técnica

  • Uso previsto: uso exclusivo en investigación

¿Qué son las microesferas de estreptavidina SAPS30UM-10?

SAPS30UM-10 consta de microesferas de 30 µm con estreptavidina inmovilizada en la superficie de la partícula.

El recubrimiento de estreptavidina proporciona sitios de unión para moléculas biotiniladas. Los investigadores pueden unir un anticuerpo, proteína, péptido, sonda de ácido nucleico, aptámero, receptor, lectina, ligando u otra biomolécula biotinilada seleccionada sin activar directamente la superficie de la microesfera con la química EDC/NHS.

Una vez inmovilizada una molécula de captura biotinilada, las partículas funcionalizadas pueden servir como fase sólida para:

  • captura de objetivos

  • Inmovilización de biomoléculas

  • Detección de anticuerpos

  • Análisis de interacción de proteínas.

  • Hibridación de ácidos nucleicos.

  • Investigación de unión a la superficie celular

  • Detección basada en microscopía

  • Biosensores basados ​​en partículas

  • Estudios de aglutinación

  • Investigación de microfluidos

  • Ensayos biológicos basados ​​en imágenes.

  • Experimentos de captura por afinidad

Las posibles moléculas de captura biotiniladas incluyen:

  • Anticuerpos monoclonales

  • Anticuerpos policlonales

  • Anticuerpos recombinantes

  • Fragmentos de anticuerpos

  • Antígenos

  • Proteínas recombinantes

  • Péptidos

  • enzimas

  • Receptores

  • Lectinas

  • Factores de crecimiento

  • Sondas de oligonucleótidos

  • sondas de ADN

  • sondas de ARN

  • Productos de PCR

  • aptámeros

  • Pequeñas moléculas biotiniladas.

Las microesferas recubiertas de estreptavidina se utilizan ampliamente como matriz para inmovilizar anticuerpos, proteínas y sondas de ácidos nucleicos biotinilados. El rendimiento final depende del recubrimiento de estreptavidina, la biotinilación del ligando, la accesibilidad de la superficie, el tampón, las condiciones de mezcla y lavado.

El diámetro de partícula de 30 µm proporciona más superficie física por partícula individual que las microesferas más pequeñas. Sin embargo, a la misma concentración de masa, las microesferas más grandes proporcionan menos partículas individuales que las microesferas más pequeñas.

Por lo tanto, SAPS30UM-10 es particularmente adecuado cuando el proyecto prioriza:

  • Gran superficie por partícula individual

  • Observación óptica directa

  • Análisis de partículas individuales

  • Modelado de partículas en rangos de tamaño de celda

  • Diferenciación de partículas basada en el tamaño

  • Manipulación controlada de partículas

  • Microscopía e imagen

  • Transporte de microfluidos

  • Aglutinación de partículas grandes

  • Fácil confirmación visual de la recuperación de partículas.

SAPS30UM-10 se suministra como materia prima de investigación. No debe describirse automáticamente como un reactivo de diagnóstico terminado, un estándar de partículas certificado, una perla de conteo absoluto, una perla de separación magnética o una perla de codificación fluorescente, a menos que esas características estén incluidas específicamente en la especificación técnica final.

SAPS30UM-10 Especificaciones técnicas

Parámetro

Especificación

Nombre del producto

Microesferas de estreptavidina de 30 µm

Número de catálogo

SAPS30UM-10

Marca

SHBC

Fabricante

Shanghai SanYu Biotecnología Co., Ltd.

Diámetro nominal de partículas

30 µm

Modificación de superficie

recubierto de estreptavidina

Contenido de sólidos

1%

forma fisica

Suspensión de microesferas

Principio vinculante

Afinidad estreptavidina-biotina

Ligandos compatibles

Biomoléculas biotiniladas

Aplicación primaria

Investigación biológica y ensayos basados ​​en perlas.

Formato de suministro

Muestras, lotes piloto y cantidades a granel.

Uso previsto

Uso exclusivo en investigación

Los siguientes valores deben confirmarse utilizando la especificación del producto final o el Certificado de análisis específico del lote:

  • matriz de partículas

  • Diámetro medio de partículas

  • Rango de tamaño de partículas

  • Distribución del tamaño de partículas

  • Coeficiente de variación del tamaño de partícula.

  • Morfología de partículas

  • Densidad de partículas

  • Nivel de recubrimiento de estreptavidina

  • Capacidad de unión a biotina

  • Concentración del número de partículas

  • Tampón de suspensión

  • pH del tampón

  • Estabilizador o tensioactivo

  • Preservativo

  • Método de recuperación recomendado

  • Tamaño del paquete

  • Duración

  • Condiciones de almacenamiento

Las páginas de la competencia directa suelen exponer el diámetro exacto, la funcionalidad de la superficie, la concentración, el tamaño del paquete y la documentación técnica en el área de especificaciones del producto. Se debe utilizar la misma arquitectura de información para SAPS30UM-10 una vez que los datos de prueba SHBC correspondientes estén disponibles.

La capacidad de unión a biotina debe informarse junto con:

  • Tipo de sonda de prueba biotinilada

  • Peso molecular de la sonda

  • Nivel de biotinilación

  • Búfer de enlace

  • tiempo de incubación

  • Temperatura de incubación

  • Procedimiento de lavado

  • Método de detección

  • Base de cálculo

  • Resultado específico del lote

El valor del 1% de sólidos por sí solo no puede determinar la concentración del número de partículas o la capacidad de unión de biotina disponible.

Cómo funciona la unión estreptavidina-biotina

La estreptavidina es una proteína de unión a biotina que permite la unión estable y no covalente de moléculas biotiniladas a la superficie de una microesfera.

Cuando se mezcla un ligando biotinilado con SAPS30UM-10, el grupo biotina se une a los sitios de estreptavidina disponibles en la partícula.

La estructura general se puede representar como:

Superficie de microesferas – Estreptavidina – Biotina – Molécula de captura

Para un ensayo sándwich basado en anticuerpos, la estructura puede ser:

Microesfera – Estreptavidina – Anticuerpo de captura biotinilado – Antígeno objetivo – Anticuerpo de detección

El anticuerpo de detección puede portar un indicador fluorescente, enzimático, colorimétrico, quimioluminiscente u otro indicador mensurable.

Ventajas de la inmovilización con estreptavidina y biotina

  • La activación directa de EDC/NHS normalmente no es necesaria para cargar un ligando biotinilado.

  • Se puede utilizar una plataforma de microesferas con diferentes biomoléculas biotiniladas.

  • Se pueden inmovilizar anticuerpos, proteínas, péptidos y sondas de ácidos nucleicos.

  • La carga del ligando se puede realizar en condiciones acuosas relativamente suaves.

  • La molécula de captura se puede cambiar sin rediseñar la partícula base.

  • El sistema admite el desarrollo de ensayos modulares.

  • La carga de ligando se puede optimizar por separado de la detección del objetivo.

  • Se pueden utilizar diferentes sistemas indicadores con la misma partícula de captura.

  • La plataforma puede admitir investigaciones de objetivo único y múltiples.

Factores que afectan el rendimiento vinculante

La unión final y el rendimiento del ensayo pueden verse afectados por:

  • Densidad del recubrimiento de estreptavidina

  • Actividad de estreptavidina

  • Número de grupos de biotina por ligando

  • Ubicación de los grupos de biotina.

  • Accesibilidad a la biotina

  • Longitud del espaciador

  • Tamaño molecular del ligando

  • Pureza del ligando

  • Agregación de ligandos

  • Apiñamiento de superficie

  • Composición del búfer

  • Concentración de sal

  • tiempo de incubación

  • Temperatura de incubación

  • Método de mezcla

  • Sedimentación de partículas

La biotina libre puede ocupar los sitios de estreptavidina disponibles y reducir la carga del ligando de captura. Por lo tanto, las moléculas biotiniladas deben purificarse cuando pueda haber biotina libre residual o exceso de reactivo de biotinilación.

¿Por qué elegir microesferas de estreptavidina de 30 µm?

Gran superficie por partícula individual

Una microesfera de 30 µm proporciona una superficie física más grande por partícula individual que una microesfera de 20 µm, 10 µm, 5 µm o 3 µm.

Esto puede resultar útil cuando:

  • Se requiere una gran cantidad de molécula de captura por partícula individual.

  • Se desea una fuerte generación de señales por partícula

  • Las partículas individuales se analizarán por separado.

  • La distribución de unión a la superficie se observará mediante microscopía.

  • Se requiere un modelo sintético de rango de tamaño de celda

  • Se están investigando la unión localizada o el patrón de superficie.

Una partícula más grande no necesariamente proporciona una mayor superficie total por unidad de masa. Las partículas más pequeñas normalmente proporcionan más partículas con la misma concentración de masa.

Excelente visibilidad microscópica

El diámetro de 30 µm hace que las partículas individuales sean comparativamente fáciles de localizar mediante microscopía óptica adecuada.

Los posibles métodos de obtención de imágenes incluyen:

  • Microscopía de campo brillante

  • Microscopía de contraste de fases.

  • Microscopía de fluorescencia

  • microscopía confocal

  • Citometría de flujo por imágenes

  • Imágenes automatizadas de alto contenido

La microscopía se puede utilizar para evaluar:

  • Morfología de partículas

  • Fluorescencia superficial

  • Distribución de ligandos

  • Agregación

  • Interacciones célula-partícula

  • Recuperación de partículas

  • Diferenciación basada en el tamaño

  • Movimiento de microfluidos

Adecuado para investigaciones de rangos de tamaño de células

El diámetro de partícula de 30 µm está dentro del rango de tamaño de muchas células grandes y estructuras biológicas similares a células.

Las posibles direcciones de investigación incluyen:

  • Estudios de modelos celulares sintéticos.

  • Transporte de partículas del tamaño de una célula.

  • Investigación del contacto entre células y partículas.

  • Estudios de fagocitosis y absorción.

  • Unión al receptor de la superficie celular

  • Investigación de interacción entre células inmunes.

  • Pruebas de modelos celulares de microfluidos

  • Desarrollo de sistemas de imágenes

Las microesferas sintéticas no reproducen todas las propiedades ópticas, mecánicas, químicas o biológicas de las células vivas. La idoneidad como modelo celular debe validarse para el proyecto previsto.

Identificación clara de partículas

El gran tamaño de las partículas permite que SAPS30UM-10 se separe visualmente de muchas partículas y desechos pequeños del fondo.

Esto puede ser útil en:

  • Microscopía

  • Imágenes automatizadas

  • conteo de partículas

  • Clasificación de microfluidos

  • Análisis de aglutinación

  • Ensayos codificados por tamaño

  • Seguimiento de partículas individuales

Recuperación y manipulación práctica

Las partículas grandes se pueden recuperar utilizando un método optimizado de centrifugación, filtración, sedimentación o recolección de partículas.

El método más adecuado depende de:

  • Material de partículas

  • Densidad de partículas

  • Volumen de procesamiento

  • fuerza centrífuga

  • tiempo de centrifugación

  • Tamaño de poro del filtro

  • Geometría del tubo

  • Viscosidad del tampón

  • Concentración de surfactante

  • Recuperación de partículas requerida

Adecuado para investigaciones multiplexadas con código de tamaño

Se puede combinar una población de 30 µm con poblaciones de microesferas más pequeñas en sistemas de investigación que distinguen las partículas por tamaño.

Las aplicaciones potenciales incluyen:

  • Ensayos de múltiples analitos

  • Controles de procesos internos

  • Ensayos multiplex basados ​​en imágenes.

  • Clasificación de microfluidos

  • Experimentos de seguimiento de partículas.

  • Múltiples poblaciones de ligandos de captura.

Características y beneficios clave

Diámetro nominal de partícula de 30 µm

El gran tamaño de las partículas permite la observación directa, el análisis de partículas individuales, la identificación basada en el tamaño y la investigación biológica del rango de tamaño de las células.

Superficie funcional de estreptavidina

La superficie captura anticuerpos, antígenos, proteínas, péptidos, enzimas, receptores, oligonucleótidos, ADN, ARN, aptámeros y otras moléculas que contienen biotina biotinilados.

Suspensión de sólidos al 1%

SAPS30UM-10 se suministra con un 1 % de sólidos y se puede diluir según el número de partículas, el volumen de reacción, la capacidad de unión y el método de detección requeridos.

Inmovilización de ligando simple

Las moléculas de captura biotiniladas pueden unirse sin activación química directa de la superficie de la microesfera por parte del usuario final.

Gran superficie por partícula

Cada microesfera de 30 µm proporciona una superficie física comparativamente grande para la inmovilización de ligandos y la generación de señales asociadas a partículas.

Múltiples plataformas de detección

Las microesferas se pueden evaluar con:

  • Microscopía óptica

  • Microscopía de fluorescencia

  • microscopía confocal

  • Citometría de flujo por imágenes

  • Citometría de flujo convencional cuando los fluidos lo permitan

  • Sistemas de microfluidos

  • Imágenes basadas en placas

  • Sistemas de conteo de partículas

  • Detección colorimétrica

  • Detección fluorescente

  • Imágenes de aglutinación

Plataforma modular de ensayos biológicos

La misma plataforma de partículas se puede combinar con diferentes moléculas de captura biotiniladas para diferentes proyectos de investigación.

Capacidad de fabricación a granel

SHBC admite muestras de laboratorio, lotes piloto, fabricación repetida, cooperación OEM y suministro a granel.

Opciones de desarrollo personalizadas

Para proyectos calificados se pueden discutir el diámetro de las partículas, la carga de estreptavidina, la capacidad de unión, el contenido de sólidos, el tampón, el conservante, la codificación fluorescente, el color visible, el empaque y las especificaciones de liberación.

Aplicaciones de investigación biológica

Desarrollo de inmunoensayos basados ​​en perlas

SAPS30UM-10 se puede utilizar como fase sólida en ensayos de investigación tipo sándwich, indirectos, competitivos o de aglutinación de partículas.

Un ensayo tipo sándwich típico puede incluir:

  1. Inmovilización de un anticuerpo de captura biotinilado.

  2. Bloqueo de la superficie restante de las partículas.

  3. Incubación con la muestra de prueba.

  4. Captura del analito objetivo.

  5. Adición de un anticuerpo de detección marcado.

  6. Eliminación de reactivos no unidos.

  7. Medición de señal asociada a partículas.

Los objetivos potenciales de la investigación incluyen:

  • Anticuerpos

  • Antígenos

  • Citoquinas

  • hormonas

  • Factores de crecimiento

  • enzimas

  • Biomarcadores

  • Proteínas asociadas a patógenos

  • Analitos de seguridad alimentaria

  • Objetivos medioambientales

  • Objetivos de investigación veterinaria

  • Compuestos de investigación

Ensayos de unión competitiva

Se pueden evaluar formatos de ensayo competitivos para:

  • Moléculas pequeñas

  • haptenos

  • Péptidos

  • Drogas

  • Toxinas

  • hormonas

  • metabolitos

  • Objetivos con sitios de enlace accesibles limitados

La relación entre la concentración objetivo y la señal depende del diseño del ensayo específico.

Inmovilización y detección de anticuerpos

Se pueden unir anticuerpos biotinilados para:

  • Detección de antígenos

  • Detección de anticuerpos

  • Detección de hibridomas

  • Estudios de especificidad

  • Evaluación de reactividad cruzada

  • Comparación de afinidad

  • Selección de anticuerpos de captura.

  • Pruebas de viabilidad del ensayo.

  • Investigación de biomarcadores

Investigación sobre la interacción de proteínas y péptidos

Se pueden inmovilizar proteínas y péptidos biotinilados para investigar:

  • Interacciones anticuerpo-antígeno

  • Unión proteína-proteína

  • Interacciones receptor-ligando

  • Reconocimiento de epítopos

  • Unión enzima-sustrato

  • Detección de inhibidores

  • Vinculación fármaco-candidato

  • Comparación de afinidad de proteínas

Captura e hibridación de ácidos nucleicos.

Se pueden unir oligonucleótidos biotinilados, ADN, ARN, productos de PCR y aptámeros a SAPS30UM-10.

Las aplicaciones potenciales incluyen:

  • Captura específica de secuencia

  • Desarrollo de ensayos de hibridación.

  • Captura de productos de PCR

  • Investigación de genotipado

  • Investigación de detección de mutaciones

  • Detección basada en aptámeros

  • Análisis de interacción ADN-proteína.

  • Investigación de unión a ARN

  • Desarrollo de ensayos moleculares.

Investigación sobre la interacción célula-partícula

Cuando se recubre con un anticuerpo, receptor, lectina, ligando o péptido biotinilado apropiado, se puede evaluar la interacción de SAPS30UM-10 con las células.

Las posibles direcciones de investigación incluyen:

  • Reconocimiento de receptores de superficie celular.

  • Adhesión celular

  • Unión celular mediada por ligando

  • Interacción de células inmunes

  • Captación celular

  • fagocitosis

  • Internalización de partículas

  • Investigación de clasificación celular

  • Investigación de partículas presentadoras de antígenos sintéticos

Las variables importantes incluyen:

  • Densidad de ligando de captura

  • Relación partícula-celda

  • Concentración celular

  • tiempo de incubación

  • Temperatura de incubación

  • Método de mezcla

  • Condiciones de lavado

  • Viabilidad celular

  • Agregación de partículas

  • Apego no específico

Microscopía e imágenes de alto contenido

Las partículas de 30 µm pueden soportar:

  • Imágenes de campo brillante

  • Imágenes de contraste de fase

  • Imágenes de fluorescencia

  • microscopía confocal

  • Proyección de alto contenido

  • Localización de partículas

  • Imágenes de interacción célula-partícula

  • Análisis de unión superficial

  • Clasificación automatizada de partículas

Investigación de microfluidos

SAPS30UM-10 podrá evaluarse en:

  • Estudios de transporte de partículas.

  • Investigación de flujo de microcanales.

  • Separación basada en el tamaño

  • atrapamiento de partículas

  • Enfoque hidrodinámico

  • Imágenes en dispositivos de microfluidos.

  • Manipulación de partículas del tamaño de una célula.

  • Pruebas de rendimiento del dispositivo

El canal, válvula, filtro y conector más estrechos deben ser compatibles con partículas de 30 µm.

Investigación sobre aglutinación

Las microesferas de estreptavidina de gran tamaño se pueden evaluar en métodos de investigación en los que las moléculas de unión o puente de destino producen agrupaciones de partículas mensurables.

La aglutinación se puede analizar mediante:

  • Microscopía óptica

  • Imágenes automatizadas

  • dispersión de luz

  • Patrones de sedimentación

  • Cambios en el recuento de partículas

  • Algoritmos de análisis de imágenes

La relación entre agregación y concentración de analito debe optimizarse experimentalmente.

Biosensores basados ​​en partículas

SAPS30UM-10 puede servir como portador visible de fase sólida en:

  • Biosensores ópticos

  • Biosensores basados ​​en imágenes

  • Biosensores de microfluidos

  • Ensayos de partículas fluorescentes.

  • Ensayos de partículas ligadas a enzimas.

  • Estudios de unión a superficies.

Biomoléculas biotiniladas compatibles

Anticuerpos biotinilados

Los formatos potenciales incluyen:

  • IgG de longitud completa

  • IgM

  • Fragmentos fabulosos

  • Fragmentos F(ab′)₂

  • Anticuerpos recombinantes

  • Fragmentos variables de cadena única

  • Anticuerpos de dominio único

  • Formatos de anticuerpos diseñados

La actividad de los anticuerpos después de la inmovilización depende de:

  • Química de biotinilación

  • Número de grupos de biotina

  • Ubicación de los grupos de biotina.

  • Longitud del espaciador

  • Pureza de proteínas

  • Agregación de anticuerpos

  • Carga superficial

  • Condiciones de almacenamiento

Proteínas biotiniladas

Los ejemplos potenciales incluyen:

  • Antígenos recombinantes

  • enzimas

  • Citoquinas

  • Factores de crecimiento

  • Receptores

  • Lectinas

  • Proteínas de unión

  • Proteínas de fusión

  • Estándares de proteínas

Péptidos biotinilados

Los usos potenciales incluyen:

  • Mapeo de epítopos

  • Detección de anticuerpos

  • Estudios de unión a receptores

  • investigación enzimática

  • Estudios de interacción de proteínas.

  • Ensayos de detección de drogas

Un espaciador adecuado entre la biotina y el péptido puede mejorar la accesibilidad molecular.

Ácidos nucleicos biotinilados

Los formatos compatibles pueden incluir:

  • ADN monocatenario

  • ADN bicatenario

  • ARN

  • Sondas de oligonucleótidos

  • amplicones de PCR

  • aptámeros

  • Sondas de ácido nucleico modificadas

  • Capturar secuencias

Moléculas pequeñas biotiniladas

Los pequeños compuestos biotinilados pueden inmovilizarse cuando sus grupos biotina permanecen accesibles a la superficie de la estreptavidina.

Durante el desarrollo del método se deben considerar el diseño del espaciador y la orientación molecular.

El siguiente procedimiento es un punto de partida del desarrollo general. Las condiciones finales deben optimizarse para la biomolécula y la aplicación reales.

1. Resuspender SAPS30UM-10

Deje que la suspensión alcance la temperatura de manipulación recomendada.

Mezcle mediante inversión suave, rotación o agitación controlada hasta que la suspensión sea homogénea.

Debido a que las partículas de 30 µm pueden sedimentar rápidamente, mezcle el stock inmediatamente antes de cada paso de muestreo.

Durante la dispensación repetida, mantenga un mezclado suave o vuelva a mezclar la suspensión antes de cada alícuota.

2. Calcule la cantidad de partículas requerida

Determinar la cantidad requerida según:

  • Número de pruebas

  • Número de partículas requeridas por prueba

  • Superficie requerida por reacción

  • Volumen de reacción

  • Concentración objetivo esperada

  • Capacidad de encuadernación específica del lote

  • Número de pasos de lavado

  • Pérdida de procesamiento esperada

No estime la capacidad de carga de ligandos únicamente a partir de la concentración de sólidos.

3. Transferir las microesferas

Transfiera el volumen requerido a un tubo o recipiente de procesamiento limpio y de baja unión.

Utilice una punta de pipeta con una abertura adecuada para partículas de 30 µm.

Evite puntas estrechas que puedan restringir la transferencia de partículas o producir números de partículas inconsistentes.

4. Lavar las Microesferas

Lavar las partículas utilizando un tampón de unión compatible con estreptavidina y el ligando biotinilado seleccionado.

Evite la biotina libre durante la inmovilización del ligando.

Los posibles métodos de recuperación incluyen:

  • Centrifugación

  • Filtración por membrana

  • Sedimentación controlada

  • Recuperación basada en filtro celular

  • Otros métodos validados de separación sólido-líquido

El método debe establecerse utilizando el material de partículas real, la densidad, el tampón, el volumen de procesamiento y la recuperación requerida.

5. preparar el ligando biotinilado

Diluir la biomolécula seleccionada en un tampón de unión compatible.

Revisar:

  • Concentración de ligando

  • Nivel de biotinilación

  • Pureza molecular

  • Nivel agregado

  • Contenido libre de biotina

  • Reactivo de biotinilación residual

  • Aditivos tampón

  • Estabilidad de las proteínas

  • Estabilidad del ácido nucleico

6. Agregue el ligando

Combine las partículas lavadas con el ligando biotinilado.

Utilice una rotación suave, un balanceo o una mezcla controlada para mantener las microesferas suspendidas.

Evite el vórtice excesivo, la formación de espuma y las condiciones mecánicas que puedan dañar la biomolécula.

7. Optimizar la incubación

Evaluar:

  • Concentración de microesferas

  • Concentración de ligando

  • Relación ligando-partícula

  • tiempo de incubación

  • Temperatura de incubación

  • pH del tampón

  • Concentración de sal

  • Velocidad de mezcla

  • Volumen de reacción

La mezcla suave y continua es especialmente importante para partículas de 30 µm porque la sedimentación puede producir una exposición desigual al ligando.

8. Eliminar el ligando libre

Separar y lavar las partículas para eliminar las moléculas biotiniladas no unidas.

Un lavado insuficiente puede aumentar el fondo, mientras que un lavado excesivo puede reducir la recuperación de partículas.

9. Bloquear la superficie de las partículas

Incubar las microesferas cargadas de ligando con un reactivo de bloqueo compatible con la aplicación.

Los posibles materiales de bloqueo incluyen:

  • Albúmina sérica bovina

  • Caseína

  • gelatina de pescado

  • Inmunoglobulina no inmune

  • Polímeros bloqueantes sintéticos

  • Tampones comerciales de bloqueo de partículas

El bloqueador debería reducir la señal de la muestra negativa sin reducir sustancialmente la unión específica del objetivo.

10. Resuspender las microesferas preparadas.

Resuspender las partículas recubiertas y bloqueadas en un tampón de ensayo o almacenamiento adecuado.

Evaluar:

  • Dispersión de partículas

  • Retención de ligando

  • Actividad vinculante

  • Unión no específica

  • Recuperación de partículas

  • Comportamiento de asentamiento

  • Redispersión

  • Estabilidad a corto plazo

  • Estabilidad a largo plazo

  • Estabilidad microbiana

1. preparar microesferas de captura

Cargue SAPS30UM-10 con la molécula de captura biotinilada seleccionada.

Lave y bloquee las partículas antes de probar la muestra.

2. Preparar controles

Los controles recomendados pueden incluir:

  • Blanco de tampón de ensayo

  • Microesferas de estreptavidina sin ligando de captura.

  • Captura de microesferas cargadas de ligando sin objetivo

  • muestra negativa

  • muestra positiva

  • Control exclusivo para reporteros

  • control de isotipos

  • Control de ligando biotinilado no relevante

  • Control de objetivos sin etiquetar

  • Controles de un solo color cuando se utiliza fluorescencia

3. Agregue la muestra de prueba

Combine las microesferas preparadas con la muestra de prueba.

Optimizar:

  • Volumen de muestra

  • Dilución de muestra

  • Concentración de partículas

  • Partículas por reacción

  • Rango de concentración objetivo

  • tiempo de incubación

  • Temperatura de incubación

  • Método de mezcla

  • Matriz de muestra

Mantenga una mezcla suave durante toda la incubación.

4. Lavar las partículas

Elimine los componentes de la muestra no unidos mientras mantiene una recuperación aceptable.

Registro:

  • Número de lavados

  • Composición del tampón de lavado

  • Volumen de lavado

  • Método de separación

  • Volumen de sobrenadante residual

  • Procedimiento de mezcla

5. Agregue el reactivo de detección

Agregue un indicador fluorescente, enzimático, colorimétrico, quimioluminiscente u otro compatible.

El sistema de detección seleccionado debe coincidir con la plataforma de ensayo prevista.

6. Incubar y lavar

Optimice la concentración del reportero y el tiempo de incubación.

Retire el reactivo de detección no unido para reducir el fondo.

7. resuspender para la detección

Resuspender las partículas en un tampón de detección limpio.

Mezcle inmediatamente antes de transferir la muestra al instrumento, portaobjetos, microplaca o cámara de imágenes.

8. Mida la señal

Los posibles resultados analíticos incluyen:

  • Fluorescencia media de partículas

  • Fluorescencia de partículas mediana

  • Porcentaje de partículas positivas

  • Distribución de fluorescencia superficial.

  • Relación señal-fondo

  • Actividad enzimática asociada a partículas

  • Intensidad del color

  • Nivel de aglutinación

  • Cambios en el recuento de partículas

  • Curva dosis-respuesta

  • Precisión del ensayo

  • Recuperación

  • Especificidad

  • Reactividad cruzada

9. Analizar los resultados

Establecer umbrales positivos y negativos utilizando controles adecuados.

No defina un resultado positivo utilizando únicamente la muestra de prueba.

Manipulación, mezcla y muestreo de microesferas de 30 µm

Asentamiento rápido

Las microesferas de 30 µm pueden sedimentarse más rápidamente que las partículas más pequeñas.

El asentamiento puede causar:

  • Concentraciones de partículas desiguales

  • Variación entre alícuotas

  • Carga de ligando inconsistente

  • Diferentes recuentos de partículas entre reacciones.

  • Exposición desigual a la muestra.

  • Señales de ensayo variables

  • Reproducibilidad reducida

Mantener una suspensión uniforme

Los métodos de mezcla adecuados pueden incluir:

  • inversión suave

  • Rotación de un extremo a otro

  • Mezcla orbital lenta

  • Balanceo suave

  • Vortex controlado antes del muestreo.

  • Mezcla de pipetas intermitente

Evite realizar mezclas vigorosas que produzcan espuma o dañen los reactivos proteicos.

Pipeteo consistente

Durante la dispensación repetida:

  1. Mezclar bien el caldo.

  2. Aspire el volumen requerido rápidamente.

  3. Dispensar todo el volumen.

  4. Vuelva a mezclar antes de la siguiente alícuota.

  5. Utilice la misma técnica de pipeteo para todas las muestras.

Para lotes grandes, un sistema de mezcla lenta validado puede ayudar a mantener una concentración de partículas constante durante el llenado.

Selección de puntas de pipeta

Utilice puntas con una abertura lo suficientemente grande para permitir el movimiento sin restricciones de las partículas.

Las puntas muy estrechas pueden:

  • Retener partículas

  • Producir números de partículas desiguales.

  • Promover la agregación

  • Reducir la precisión de la entrega

  • Aumentar la variación entre muestras.

Métodos de lavado y recuperación de partículas

Centrifugación

La centrifugación se puede utilizar cuando la densidad de las partículas y la formulación de la suspensión permiten una recuperación eficiente.

La fuerza centrífuga mínima efectiva y el tiempo deben determinarse experimentalmente.

Una condición ideal debería proporcionar:

  • Recuperación de partículas aceptable

  • Un pellet de partículas manejable

  • Fácil redispersión

  • Agregación mínima

  • Daño limitado a biomoléculas.

Filtración

Para el lavado o la recuperación se puede utilizar una membrana, malla o filtro celular con un tamaño de poro adecuado.

Confirmar:

  • Retención de partículas

  • Baja adsorción de biomoléculas no específicas.

  • Recuperación de partículas aceptable

  • Fácil liberación de la membrana.

  • Compatibilidad con el volumen de procesamiento.

Sedimentación controlada

La sedimentación natural o acelerada puede ser adecuada para flujos de trabajo seleccionados.

La recuperación basada en sedimentación puede reducir el estrés mecánico, pero puede requerir tiempos de procesamiento más prolongados y un control cuidadoso de la eliminación del sobrenadante.

Selección manual de partículas

En microscopía o proyectos de una sola partícula, las microesferas individuales se pueden manipular usando:

  • Micropipetas

  • Microcapilares

  • Sistemas de micromanipulación

  • Dispositivos ópticos o mecánicos de recogida de partículas.

Separación magnética

No se debe suponer que SAPS30UM-10 sea magnético.

La separación magnética sólo es apropiada cuando la especificación del producto establece explícitamente que las partículas contienen un componente magnético.

Microscopía, citometría de flujo y detección de microfluidos.

Microscopía óptica

Las partículas de 30 µm generalmente se pueden observar mediante microscopía óptica estándar.

Los usos potenciales incluyen:

  • Evaluación de morfología

  • Inspección agregada

  • conteo de partículas

  • Visualización de unión de superficies

  • Análisis de interacción célula-partícula.

  • Evaluación de recuperación

  • Observación de distribución de tamaño

Microscopía de fluorescencia

Cuando la partícula porta un indicador fluorescente, un tinte interno o un objetivo marcado con fluorescencia, se puede utilizar microscopía de fluorescencia para evaluar:

  • Señal de superficie

  • Uniformidad de unión

  • Partículas positivas y negativas.

  • Interacciones célula-partícula

  • Poblaciones multiplex

  • Localización de reporteros

Microscopía confocal

Las imágenes confocales pueden ayudar a distinguir la fluorescencia asociada a la superficie de la fluorescencia en la solución circundante y pueden respaldar el análisis tridimensional de la unión asociada a partículas.

Citometría de flujo

SAPS30UM-10 puede evaluarse mediante citometría de flujo solo cuando los fluidos del instrumento sean compatibles con partículas de 30 µm.

Antes de realizar la prueba, confirme:

  • Diámetro del tubo de muestra

  • Dimensiones de la celda de flujo

  • Tamaño de boquilla u orificio

  • Vía fluídica más estrecha

  • Concentración de partículas

  • Nivel agregado

  • Caudal de muestra

  • Rango de detección

Es posible que algunos citómetros de flujo convencionales no sean adecuados para partículas de este tamaño. La compatibilidad del instrumento debe confirmarse antes del uso rutinario.

Citometría de flujo por imágenes

El gran tamaño de partícula puede ser adecuado para plataformas de citometría de flujo de imágenes compatibles que combinan imágenes morfológicas con medición de fluorescencia.

Sistemas de microfluidos

Antes de utilizar SAPS30UM-10 en un dispositivo de microfluidos, confirme que:

  • Los canales son lo suficientemente anchos.

  • Las constricciones pueden pasar las partículas.

  • Las válvulas y conectores son compatibles.

  • Los filtros no retendrán las partículas involuntariamente.

  • El caudal seleccionado no favorece el bloqueo.

  • La agregación está adecuadamente controlada

Control de bloqueo y vinculación no específica

La adsorción no específica puede aumentar el fondo y reducir la sensibilidad del ensayo.

Las posibles causas incluyen:

  • Bloqueo inadecuado

  • Reactivo de bloqueo incompatible

  • Exceso de ligando de captura

  • Exceso de reactivo de detección

  • Lavado insuficiente

  • Anticuerpos agregados

  • Componentes de muestra hidrofóbicos

  • Alta concentración de proteína en la muestra

  • Agregación de partículas

  • Interferencia muestra-matriz

Analizar múltiples reactivos de bloqueo

Compare varias formulaciones de bloqueo.

El bloqueador preferido debe reducir la señal de la muestra negativa manteniendo al mismo tiempo la unión específica al objetivo.

Optimizar la carga del ligando de captura

La carga máxima de ligando no siempre produce el máximo rendimiento del ensayo.

Una carga excesiva puede:

  • Causar apiñamiento estérico

  • Reducir la accesibilidad del objetivo

  • Aumentar el consumo de reactivos

  • Incrementar las interacciones no específicas

  • Aumentar la variación del ensayo.

Valorar el reactivo de detección

El exceso de reactivo de detección puede aumentar el fondo.

Pruebe varias concentraciones de indicadores utilizando controles positivos y negativos.

Optimizar el lavado

Evaluar:

  • Número de pasos de lavado

  • Composición del tampón de lavado

  • Volumen de lavado

  • Método de separación

  • Método de mezcla

  • Sobrenadante residual

  • Recuperación de partículas

Evalúe los detergentes con cuidado

Una pequeña cantidad de detergente compatible puede mejorar la dispersión de las partículas y reducir la adsorción no específica.

El exceso de detergente puede interferir con las interacciones de biomoléculas o los reactivos de detección.

Comparación de microesferas de 30 µm, 20 µm y 10 µm

Comparación

SAPS30UM-10

SAPS20UM-10

SAPS10UM-10

Diámetro nominal

30 µm

20 µm

10 µm

Contenido de sólidos

1%

1%

1%

Superficie por partícula individual

más grande

Grande

Menor

Número de partículas por unidad de masa

Más bajo

Intermedio

más alto

Tendencia a estabilizarse

Generalmente más alto

Alto

Más bajo

Visibilidad de microscopía

Excelente

Excelente

Muy bien

Modelado de rango de tamaño de celda

Fuerte relevancia

Fuerte relevancia

Importante

Compatibilidad fluídica

Requiere una verificación cuidadosa

Requiere verificación

Generalmente más fácil

Identificación codificada por tamaño

muy claro

Claro

Claro

Necesidad de mezcla continua

más alto

Alto

Moderado

Análisis de partículas individuales

Muy adecuado

Adecuado

Adecuado

Elija SAPS30UM-10 cuando:

  • Se prefiere la superficie máxima por microesfera individual.

  • La microscopía directa es un método de detección primario.

  • Se requiere un modelo de partículas de gran rango de tamaño de celda.

  • El análisis de partículas individuales es importante.

  • Se necesita una identificación clara basada en el tamaño.

  • Se está estudiando la manipulación de microfluidos.

  • Está prevista una investigación sobre la aglutinación de partículas grandes.

  • Es útil una fuerte confirmación visual de la recuperación.

Elija SAPS20UM-10 cuando:

  • Se requiere una microesfera grande con una compatibilidad fluídica algo más sencilla.

  • La microscopía y la investigación del rango de tamaño de las células son importantes.

  • Se prefiere una sedimentación inferior a las partículas de 30 µm.

  • Se requiere un mayor número de partículas por unidad de masa.

Elija SAPS10UM-10 cuando:

  • La citometría de flujo convencional es un método de detección primario.

  • Se requieren más partículas por unidad de masa.

  • Se prefiere una sedimentación más baja.

  • Se utilizarán volúmenes de reacción más pequeños.

  • Es importante una compatibilidad fluida más sencilla.

El tamaño de partícula final debe seleccionarse según la aplicación biológica, la plataforma de detección, el número de partículas requerido, la carga de ligando, el comportamiento de sedimentación, el método de recuperación y la compatibilidad del instrumento.

Control de calidad y consistencia de lotes

Los posibles parámetros de control de calidad para SAPS30UM-10 incluyen:

  • Diámetro medio de partículas

  • Rango de tamaño de partículas

  • Distribución del tamaño de partículas

  • Coeficiente de variación del tamaño de partícula.

  • Morfología de partículas

  • Aspecto de la suspensión

  • Contenido de sólidos

  • Consistencia del recubrimiento de estreptavidina

  • Capacidad de unión a biotina

  • Dispersión de partículas

  • Nivel agregado

  • Tasa de liquidación

  • Rendimiento de redispersión

  • Recuperación de partículas

  • Señal de fondo

  • Unión no específica

  • control microbiano

  • Integridad del embalaje

  • Estabilidad de almacenamiento

  • Consistencia lote a lote

Pruebas de tamaño de partículas

La caracterización del tamaño de las partículas puede incluir:

  • Diámetro medio

  • Diámetro mediano

  • Tamaño mínimo y máximo

  • Distribución de tallas

  • Coeficiente de variación

  • Resultados de microscopía

  • Análisis instrumental del tamaño de partículas.

El método de medición debe indicarse al informar los datos sobre el tamaño de las partículas.

Capacidad de unión a biotina

La capacidad de unión debe medirse utilizando una sonda biotinilada definida.

El resultado puede verse afectado por:

  • Tipo de sonda

  • tamaño molecular

  • Nivel de biotinilación

  • Pureza de la sonda

  • Condiciones de incubación

  • Composición del búfer

  • Procedimiento de lavado

  • Método de detección

  • Base de cálculo

Los valores de unión obtenidos con diferentes sondas o métodos de prueba pueden no ser directamente comparables. De manera similar, Bangs Laboratories informa la capacidad de unión específica del lote a través del Certificado de análisis en lugar de confiar únicamente en las propiedades nominales de las partículas.

Control de calidad funcional

Un ensayo de control de calidad funcional puede evaluar:

  • Unión de una sonda biotinilada estandarizada.

  • Porcentaje de partículas positivas

  • Distribución de señal

  • Separación de fondo

  • Recuperación de partículas

  • Porcentaje agregado

  • Repetibilidad

  • Redispersión después del almacenamiento.

Consistencia del muestreo

Debido a que las partículas de 30 µm se sedimentan con relativa rapidez, se deben validar los procedimientos de llenado y muestreo.

Los controles potenciales incluyen:

  • Mezclado suave y continuo durante el llenado

  • Pruebas de recuento de partículas al principio, a la mitad y al final del llenado.

  • Verificación del contenido de sólidos

  • Inspección visual de homogeneidad.

  • Comparación del recuento de partículas entre contenedores.

Documentación específica del lote

La documentación disponible puede incluir:

  • Certificado de Análisis

  • Especificación del producto

  • Resultados del tamaño de partícula

  • Resultados del contenido de sólidos

  • Resultados de capacidad de unión

  • Ficha de datos de seguridad

  • Instrucciones de manejo

  • Recomendaciones de almacenamiento

  • Número de lote

  • fecha de producción

Las pruebas de liberación requeridas y los criterios de aceptación deben acordarse antes de la fabricación a granel.

Fabricación a granel y personalización

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. suministra microesferas de estreptavidina SHBC para investigación de laboratorio, desarrollo piloto, producción repetida y compra empresarial a granel.

Evaluación de muestras de investigación

Las muestras pueden evaluarse para:

  • Morfología de partículas

  • Distribución del tamaño de partículas

  • Dispersión de partículas

  • Actividad de estreptavidina

  • Carga de ligando biotinilado

  • Unión no específica

  • Recuperación de partículas

  • Viabilidad del ensayo

  • Compatibilidad con microscopía

  • Compatibilidad con microfluidos

  • Sedimentación y redispersión

Desarrollo a escala piloto

Los lotes piloto pueden admitir:

  • Optimización del ensayo

  • Verificación de capacidad vinculante

  • Estudios de estabilidad

  • Selección de búfer

  • Evaluación conservante

  • Evaluación de embalaje

  • Desarrollo del proceso de llenado

  • Desarrollo de control de calidad

  • Verificación del cliente

  • Transferencia de proceso

Producción a granel

La fabricación a granel se puede organizar una vez que se hayan confirmado los requisitos técnicos y las especificaciones de lanzamiento.

Por favor proporcione:

  • Cantidad requerida

  • Demanda anual esperada

  • Tamaño de paquete preferido

  • Aplicación biológica prevista

  • Diámetro de partícula requerido

  • Contenido de sólidos requerido

  • Capacidad de encuadernación requerida

  • Tipo de ligando biotinilado

  • Requisitos de búfer

  • Restricciones conservantes

  • Requisitos de control de calidad

  • Requisitos de documentación

  • Calendario de entrega

  • Destino de entrega

Diámetro de partícula personalizado

Se pueden discutir tamaños de partículas alternativos según la aplicación y la viabilidad de fabricación.

Carga personalizada de estreptavidina

Se pueden evaluar los niveles de recubrimiento de estreptavidina o los objetivos de capacidad de unión específicos del proyecto.

Fluorescencia personalizada o codificación de colores

Para la investigación de imágenes y multiplex, se pueden discutir las microesferas de estreptavidina codificadas con fluorescencia o visiblemente coloreadas.

Las opciones potenciales pueden incluir:

  • Longitudes de onda de excitación alternativas

  • Longitudes de onda de emisión alternativas

  • Diferentes colores de fluorescencia

  • Múltiples intensidades de fluorescencia

  • Colores de partículas visibles

  • Sistemas de codificación específicos del cliente

Buffer y concentración personalizados

Se pueden evaluar concentraciones de sólidos, formulaciones de tampón, tensioactivos, sistemas conservantes y formatos de envasado alternativos.

Suministro de OEM y marcas privadas

Los formatos de cooperación disponibles pueden incluir:

  • Embalaje OEM

  • Etiquetas específicas del cliente

  • Suministro de marca privada

  • Números de catálogo específicos del cliente

  • Suministro de materia prima a granel

  • Documentos técnicos personalizados

  • Especificaciones de lanzamiento específicas del cliente

Recomendaciones de almacenamiento y estabilidad

Siga la etiqueta del producto final, la ficha técnica y el Certificado de Análisis específico del lote.

Las recomendaciones generales incluyen:

  • Almacenar en las condiciones de refrigeración especificadas.

  • No congelar a menos que se haya validado la estabilidad de congelación y descongelación.

  • Mantener el recipiente bien cerrado.

  • Guarde el vial en posición vertical.

  • Mezclar bien antes de tomar la muestra.

  • Mantener las partículas en suspensión durante el procesamiento.

  • Utilice puntas de pipeta limpias y tubos de baja unión.

  • Evite la contaminación de la suspensión original.

  • No permita que las partículas se sequen.

  • Evite repetidos cambios de temperatura innecesarios.

  • No devuelva el material diluido al contenedor original.

  • Registre el número de lote del producto y la fecha de apertura.

La orientación técnica de proveedores establecidos de partículas de estreptavidina recomienda igualmente mantener las partículas en líquido, evitando el secado y evitando la congelación.

Asentamiento y Resuspensión

Debido a que SAPS30UM-10 contiene partículas grandes, puede ocurrir una sedimentación rápida.

Antes de usar:

  1. Deje que el vial alcance la temperatura de manipulación recomendada.

  2. Invierta o gire suavemente el vial.

  3. Aplique agitación controlada cuando sea necesario.

  4. Confirmar que la suspensión sea homogénea.

  5. Mezclar inmediatamente antes del muestreo.

  6. Continúe mezclando suavemente durante la dispensación repetida.

  7. Inspeccione si hay agregados irreversibles.

El asentamiento reversible no necesariamente indica falla del producto.

Evite el secado

No permita que el pellet de partículas se seque durante el lavado.

El secado puede causar:

  • Agregación irreversible

  • Actividad reducida de la estreptavidina.

  • Difícil redispersión

  • fondo aumentado

  • Recuperación reducida de partículas

Evite la congelación

La congelación puede causar:

  • Agregación de partículas

  • Cambios en la estabilidad de la suspensión.

  • Actividad proteica reducida

  • Recuperación reducida de partículas

  • Mayor variabilidad del ensayo.

Evaluar la estabilidad del reactivo preparado

Las microesferas bloqueadas y cargadas con ligando biotinilado pueden tener una estabilidad diferente a la del producto SAPS30UM-10 original.

Evaluar el reactivo preparado final bajo las condiciones previstas de almacenamiento, transporte y operación.

Guía de solución de problemas

Unión débil del ligando biotinilado

Posibles causas:

  • Biotina libre en el buffer

  • Reactivo de biotinilación residual

  • Biotinilación de ligando bajo

  • Grupos de biotina inaccesibles

  • Concentración de ligando insuficiente

  • Tiempo de incubación inadecuado

  • Estreptavidina inactiva

  • Búfer incompatible

  • Sedimentación de partículas durante la incubación.

Acciones recomendadas:

  • Elimina la biotina libre.

  • Purificar el ligando biotinilado.

  • Verifique el nivel de biotinilación.

  • Evalúe un espaciador adecuado.

  • Mantenga una mezcla suave y continua.

  • Aumente gradualmente la concentración de ligando.

  • Pruebe un ligando biotinilado de control positivo.

Señal de fondo alta

Posibles causas:

  • Bloqueo insuficiente

  • Exceso de reactivo de detección

  • Lavado inadecuado

  • Adsorción de reportero no específico

  • Interferencia muestra-matriz

  • Anticuerpos agregados

  • Exceso de carga de ligando de captura

Acciones recomendadas:

  • Compara diferentes bloqueadores.

  • Valorar el reactivo de detección.

  • Optimizar el lavado.

  • Retire los agregados de proteínas cuando sea apropiado.

  • Diluir la muestra.

  • Reducir la carga del ligando de captura.

Números de partículas desiguales entre alícuotas

Posibles causas:

  • Sedimentación rápida de partículas

  • Mezcla de caldo inadecuada

  • Retraso entre la mezcla y el muestreo.

  • Abertura estrecha para punta de pipeta

  • Técnica de transferencia inconsistente

Acciones recomendadas:

  • Mezclar antes de cada alícuota.

  • Utilice una punta de pipeta adecuada.

  • Mantenga una mezcla lenta durante la dispensación repetida.

  • Estandarizar el intervalo de muestreo.

  • Verifique el número de partículas durante el llenado.

Agregación de partículas

Posibles causas:

  • Búfer incompatible

  • pH extremo

  • Alta fuerza iónica

  • Congelación

  • El secado

  • Carga excesiva de ligando

  • Estabilizador insuficiente

  • Contaminación microbiana

Acciones recomendadas:

  • Evaluar la compatibilidad del buffer.

  • Evite congelar y secar.

  • Optimice la carga de ligandos.

  • Utilice una mezcla suave y controlada.

  • Revisar los requisitos de estabilizadores y conservantes.

Baja recuperación de partículas

Posibles causas:

  • Pérdida durante la eliminación del sobrenadante.

  • Adhesión a tubos

  • Tamaño de poro del filtro incorrecto

  • Sedimentación incompleta

  • Transferencia incompleta

  • Lavado excesivo

  • Retención de partículas dentro de las puntas de pipeta

Acciones recomendadas:

  • Utilice tubos de baja unión.

  • Optimice las condiciones de separación.

  • Validar el filtro o malla.

  • Mezclar antes de cada transferencia.

  • Reduzca los pasos de lavado innecesarios.

  • Dejar un volumen residual controlado encima del pellet.

Bloqueo de microfluidos

Posibles causas:

  • Dimensiones del canal demasiado pequeñas

  • Agregación de partículas

  • Alta concentración de partículas

  • Conectores estrechos

  • Válvulas o filtros incompatibles

  • Lavado insuficiente del dispositivo

Acciones recomendadas:

  • Confirme la dimensión mínima del canal.

  • Reducir la concentración de partículas.

  • Retire los agregados antes de cargar.

  • Aumentar las dimensiones de la ruta de flujo.

  • Primero valide el dispositivo completo con partículas simples de 30 µm.

Preguntas frecuentes

¿Qué es SAPS30UM-10?

SAPS30UM-10 es una suspensión de microesferas recubiertas de estreptavidina de 30 µm suministrada con un 1 % de sólidos para capturar biomoléculas biotiniladas en investigaciones biológicas y ensayos basados ​​en partículas.

¿Qué es la marca SHBC?

SHBC es la marca de microesferas y materiales biotecnológicos de Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.

¿Cuál es el diámetro nominal de partícula?

El diámetro nominal de las partículas es de 30 µm.

El diámetro medido, el rango de tamaño y la distribución del tamaño de las partículas deben confirmarse mediante la documentación específica del lote.

¿Cuál es el contenido de sólidos?

SAPS30UM-10 se suministra con 1% de sólidos.

¿Son magnéticas las microesferas SAPS30UM-10?

No se debe asumir que el producto es magnético a menos que las propiedades magnéticas se indiquen específicamente en la especificación técnica.

Para la separación magnética, seleccione un producto descrito específicamente como perlas magnéticas de estreptavidina.

¿Las microesferas son fluorescentes?

No se debe suponer que el producto estándar contiene un tinte fluorescente interno a menos que se indique específicamente la fluorescencia.

Se puede considerar una versión codificada con fluorescencia como producto personalizado.

¿Qué moléculas pueden unirse a SAPS30UM-10?

La superficie de estreptavidina puede capturar anticuerpos, antígenos, proteínas, péptidos, enzimas, receptores, oligonucleótidos, ADN, ARN, aptámeros y otras moléculas que contienen biotina biotinilados.

¿Puede un anticuerpo no modificado unirse directamente?

Un anticuerpo no modificado no se unirá específicamente a través de la interacción estreptavidina-biotina a menos que esté biotinilado o conectado a través de otro reactivo compatible.

¿Se requiere la activación de EDC/NHS?

Normalmente no se requiere la activación de EDC/NHS cuando se carga una molécula biotinilada en microesferas recubiertas de estreptavidina.

¿Cuál es la capacidad de unión a biotina?

La capacidad de unión debe confirmarse utilizando la especificación del producto o el Certificado de Análisis específico del lote.

No debe estimarse únicamente a partir del contenido de sólidos.

¿Por qué elegir microesferas de 30 µm?

Las partículas de 30 µm proporcionan una gran superficie por partícula individual, excelente visibilidad microscópica, identificación clara basada en el tamaño y dimensiones adecuadas para la investigación de rangos de tamaños de células seleccionados.

¿Las partículas de 30 µm proporcionan más superficie total?

Cada partícula de 30 µm tiene más superficie que cada partícula más pequeña.

Sin embargo, las partículas más pequeñas normalmente proporcionan más partículas y una mayor superficie colectiva por unidad de masa.

¿Por qué las partículas se depositan rápidamente?

Las partículas grandes generalmente se sedimentan más rápidamente que las microesferas más pequeñas.

Mezcle el caldo inmediatamente antes del muestreo y mantenga una mezcla suave durante la incubación.

¿Se puede utilizar SAPS30UM-10 para microscopía?

Sí. El tamaño de partícula es adecuado para evaluación mediante microscopía óptica, de fluorescencia y confocal.

¿Se puede utilizar SAPS30UM-10 en citometría de flujo?

Solo se puede utilizar cuando los fluidos, la boquilla, la celda de flujo y la vía de muestra del citómetro de flujo sean compatibles con partículas de 30 µm.

¿Se puede utilizar SAPS30UM-10 como modelo de celda?

El diámetro de 30 µm puede resultar útil en la investigación de partículas de rango de tamaño celular.

Las microesferas sintéticas no reproducen todas las propiedades ópticas, mecánicas, químicas o biológicas de las células vivas.

¿Se pueden utilizar las microesferas para inmunoensayos?

Sí. Se puede inmovilizar un anticuerpo de captura biotinilado en la partícula, seguido de la captura del objetivo y la detección con un indicador compatible.

¿Se pueden utilizar las partículas para la captura de ácidos nucleicos?

Sí. Se pueden evaluar oligonucleótidos biotinilados, ADN, ARN, productos de PCR y aptámeros para determinar su inmovilización y captura del objetivo.

¿Se puede utilizar SAPS30UM-10 en ensayos multiplex?

Sí, siempre que la población de 30 µm pueda distinguirse de otras poblaciones de microesferas.

Se puede considerar la codificación de tamaño, la codificación de fluorescencia o la codificación de colores visibles.

¿Cómo se deben lavar las partículas?

El método de lavado depende del material de las partículas, la densidad, el tampón, el volumen y la recuperación requerida.

Se podrá evaluar la centrifugación, filtración, recuperación basada en malla o sedimentación controlada.

¿Cómo se puede reducir la unión no específica?

Optimice el reactivo de bloqueo, la concentración del ligando de captura, la concentración del reactivo de detección, las condiciones de lavado, el nivel de detergente, la dilución de la muestra y el tiempo de incubación.

¿Se pueden utilizar tampones que contengan biotina libre?

La biotina libre puede ocupar sitios de unión de estreptavidina y, en general, debe evitarse durante la carga del ligando de captura.

¿Se debe diluir SAPS30UM-10 antes de su uso?

Sí. Prepare una concentración de trabajo de acuerdo con el número de partículas requerido, el volumen de reacción y el método de detección.

¿Se puede congelar SAPS30UM-10?

Por lo general, no se recomienda la congelación a menos que se haya validado específicamente la estabilidad de congelación y descongelación.

¿Se puede personalizar la concentración?

Se pueden discutir concentraciones de sólidos alternativas de acuerdo con los requisitos del proyecto y la viabilidad de fabricación.

¿Se puede personalizar la capacidad de encuadernación?

Se pueden evaluar los niveles de recubrimiento de estreptavidina o los objetivos de capacidad de unión específicos del proyecto.

¿Se pueden producir microesferas fluorescentes de estreptavidina de 30 µm?

Se pueden analizar microesferas de estreptavidina de 30 µm codificadas con fluorescencia o de colores visibles para proyectos calificados de imágenes, microfluidos y multiplex.

¿Está disponible la producción a granel?

Sí. Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. admite muestras, lotes piloto, pedidos repetidos, proyectos OEM y fabricación a granel.

¿Qué información se requiere para una cotización?

Por favor proporcione:

  • Número de catálogo SAPS30UM-10

  • Cantidad requerida

  • Volumen de compras anual esperado

  • Tamaño de paquete preferido

  • Aplicación biológica prevista

  • Tipo de ligando biotinilado

  • Capacidad de encuadernación requerida

  • Partículas requeridas por prueba

  • Método de detección

  • Restricciones de búfer

  • Restricciones conservantes

  • Requisitos de control de calidad

  • Requisitos de documentación

  • Destino de entrega

Solicite una muestra o una cotización al por mayor

Las microesferas de estreptavidina SHBC SAPS30UM-10 de 30 µm proporcionan una plataforma de partículas grande y claramente identificable para inmovilizar anticuerpos, proteínas, péptidos, enzimas, receptores, oligonucleótidos, ADN, ARN, aptámeros y otras moléculas marcadas con biotina.

El producto es adecuado para:

  • Desarrollo de ensayos biológicos.

  • Inmunoensayos basados ​​en perlas

  • Inmovilización de anticuerpos

  • Investigación de interacción de proteínas.

  • Captura de ácido nucleico

  • Ensayos de hibridación

  • Investigación sobre la interacción célula-partícula.

  • Microscopía e imagen

  • Investigación de microfluidos

  • Investigación sobre aglutinación

  • Sistemas multiplex codificados por tamaño

  • Biosensores basados ​​en partículas

  • Fabricación de reactivos de investigación.

SAPS30UM-10 proporciona:

  • Diámetro nominal de partícula de 30 µm

  • Superficie funcional de estreptavidina

  • suspensión al 1% de sólidos

  • Gran superficie por partícula individual

  • Excelente visibilidad microscópica

  • Compatibilidad con biomoléculas biotiniladas

  • Suministro de muestras y lotes piloto.

  • Capacidad de fabricación a granel

  • OEM y soporte de desarrollo personalizado

Para la evaluación de muestras o la compra al por mayor, proporcione la aplicación prevista, la cantidad requerida, el ligando biotinilado, la capacidad de unión deseada, la plataforma de detección, los requisitos de embalaje y las especificaciones de control de calidad.

Nombre del producto: Microesferas de estreptavidina de 30 µm
Número de catálogo: SAPS30UM-10
Marca: SHBC
Fabricante: Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.
Diámetro nominal de partícula: 30 µm
Modificación de superficie: Estreptavidina
Contenido de sólidos: 1 %
Aplicación principal: Investigación biológica y ensayos basados ​​en perlas
Capacidad de suministro: Muestras, lotes piloto y producción a granel
Uso previsto: Solo para uso en investigación. No para uso diagnóstico o terapéutico.

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