Microsphères rouge-fluo à débit 500 nm RCY500NM-630 0,5 %

Microsphères Red-Fluo Flow 500 nm pour la cytométrie en flux

Les microsphères Flow Red-Fluo SHBC RCY500NM-630 sont des microsphères polymères fluorescentes rouge lointain de 500 nm développées pour la recherche en cytométrie en flux, l'analyse de particules submicroniques, le développement de méthodes de détection de fluorescence et le développement d'essais basés sur le flux.

Les microsphères sont conçues pour une excitation à environ 630 nm et offrent une large plage d'émission dans le rouge lointain de 665 à 720 nm. Ce profil spectral les rend adaptés aux cytomètres en flux équipés d'un laser rouge et de détecteurs à fluorescence rouge lointain compatibles.

Le RCY500NM-630 est fourni sous forme de suspension à 0,5 % de solides et est disponible pour l'évaluation de la recherche, le développement à l'échelle pilote et la production en vrac.

Résumé rapide du produit

• Nom du produit : Microsphères Flow Red-Fluo

• Numéro de catalogue : RCY500NM-630

• Diamètre nominal des particules : 500 nm

• Longueur d'onde d'excitation : 630 nm

• Plage d'émission : 665 à 720 nm

• Teneur en matières solides : 0,5 %

• Région de fluorescence : Rouge lointain

• Application principale : recherche sur la cytométrie en flux

• Capacité d’approvisionnement : échantillons, lots pilotes et production en vrac

• Utilisation prévue : Utilisation pour la recherche uniquement

Présentation du produit RCY500NM-630

Le RCY500NM-630 est constitué de microsphères polymères fluorescentes d'un diamètre nominal de 500 nm. Le matériau fluorescent est incorporé aux particules pour fournir un signal rouge lointain détectable lorsqu'il est excité par un laser rouge compatible.

La combinaison d'un diamètre de particule submicronique et d'une fluorescence rouge lointain rend ces microsphères adaptées aux laboratoires développant des méthodes de cytométrie en flux pour la détection de petites particules.

Par rapport aux billes de cytométrie en flux de la taille d'une cellule, les particules de 500 nm peuvent être utilisées pour évaluer la sensibilité des instruments, la détection déclenchée par fluorescence, les paramètres de seuil, le contrôle de fond, la dilution des échantillons et les stratégies de déclenchement pour les populations de particules submicroniques.

La large plage d'émission de 665 à 720 nm offre également aux chercheurs une certaine flexibilité lors de la sélection de filtres de détecteur qui chevauchent le spectre de fluorescence du rouge lointain.

Le RCY500NM-630 est destiné aux organismes de recherche, aux laboratoires de cytométrie en flux, aux développeurs d'instruments, aux fabricants de réactifs, aux sociétés de biotechnologie et aux équipes de développement de tests nécessitant un approvisionnement constant en microsphères fluorescentes.

Spécifications techniques

Les informations spécifiques au lot, la chimie de surface disponible, les options de conditionnement, la caractérisation de la taille des particules, les tests de fluorescence et la documentation à l'appui peuvent être discutées en fonction des exigences du projet.

Fluorescence rouge lointain avec excitation à 630 nm

Les microsphères RCY500NM-630 sont conçues pour une excitation autour de 630 nm et émettent une fluorescence sur la plage 665-720 nm.

Ce profil d'excitation et d'émission convient aux cytomètres en flux équipés de lignes laser rouges telles que 630, 633, 635, 637 ou 640 nm, à condition que le détecteur de l'instrument et le filtre optique chevauchent le spectre d'émission.

La région de fluorescence rouge lointain offre plusieurs avantages pratiques pour la recherche en cytométrie en flux :

• Compatibilité avec les cytomètres en flux à laser rouge couramment disponibles

• Séparation de nombreux canaux de fluorescence verte et jaune

• Intégration potentielle dans des conceptions expérimentales multicolores

• Interférence réduite des reporters fluorescents à longueur d'onde plus courte

• Sélection flexible du détecteur dans la région d'émission de 665 à 720 nm

• Déclenchement de fluorescence approprié pour l'analyse de particules submicroniques

L'intensité réelle de la fluorescence et la compatibilité des canaux doivent être confirmées sur le cytomètre en flux prévu, car la puissance du laser, la configuration optique, la sensibilité du détecteur, la bande passante du filtre, les paramètres de seuil et la concentration de l'échantillon peuvent affecter le signal final.

Pourquoi utiliser des microsphères fluorescentes de 500 nm en cytométrie en flux ?

Développement de méthodes de particules submicroniques

Le diamètre de 500 nm fournit une taille de particule pertinente pour développer et optimiser des méthodes de cytométrie en flux axées sur les particules submicroniques.

Ces microsphères peuvent être utilisées lors de l'évaluation des paramètres des instruments pour la recherche impliquant des modèles de vésicules extracellulaires, des nanoparticules synthétiques, des particules de la taille d'une microvésicule, des particules d'administration de médicaments, des virus, des liposomes et d'autres petits objets fluorescents.

Ils ne sont pas destinés à représenter les propriétés biologiques ou chimiques de ces échantillons, mais ils peuvent fournir une population de particules synthétiques cohérente pour le développement de méthodes.

Détection basée sur la fluorescence

Les particules submicroniques peuvent produire des signaux de diffusion directe et latérale relativement faibles sur les cytomètres en flux conventionnels. Le marquage fluorescent peut fournir un paramètre de détection supplémentaire et prendre en charge l’acquisition déclenchée par fluorescence.

Les microsphères RCY500NM-630 peuvent donc être utilisées pour étudier la relation entre la fluorescence des particules, la diffusion optique, les réglages de seuil électronique, les événements de fond et la sensibilité de l'instrument.

Compatibilité laser rouge

Le profil d'excitation de 630 nm est conçu pour les instruments équipés de lasers rouges. Les chercheurs peuvent évaluer les performances du détecteur dans le rouge lointain sans se fier exclusivement à l’excitation du laser bleu ou violet.

Préparation de la série de dilution

La suspension de solides à 0,5 % peut être diluée pour préparer différentes concentrations de travail pour l'optimisation des concentrations, les tests de taux d'événements, l'évaluation des seuils et les études de préparation d'échantillons.

La dilution appropriée doit être déterminée expérimentalement pour chaque cytomètre en flux et chaque application.

Principales caractéristiques du produit

Taille des particules submicroniques de 500 nm

Le diamètre nominal de 500 nm convient à la recherche impliquant la cytométrie en flux de petites particules, le développement de seuils de fluorescence et les flux de travail de détection submicronique.

Fluorescence rouge lointain

L'excitation autour de 630 nm et l'émission de 665 à 720 nm assurent la compatibilité avec les plates-formes de cytométrie en flux laser rouge et les détecteurs de fluorescence rouge lointain.

Large plage d'émission

Le large profil d'émission permet aux chercheurs d'évaluer différents filtres de détecteur dans la région rouge lointain.

Suspension de microsphères stable

Le produit est fourni sous forme de suspension aqueuse pour permettre une dilution, un mélange et une intégration pratiques dans les flux de travail du laboratoire.

Convient pour la recherche et le développement de produits

Le RCY500NM-630 peut prendre en charge les études de faisabilité préliminaires, l'optimisation des tests, le développement d'instruments, le développement de réactifs et l'évaluation à grande échelle.

Capacité de fabrication en vrac

SHBC prend en charge l'évaluation d'échantillons, la production pilote, les commandes répétées et la fabrication en vrac pour les organismes de recherche et les sociétés de développement de réactifs.

Personnalisation basée sur le projet

La concentration des particules, le format d'emballage, la fonctionnalité de la surface, l'intensité de la fluorescence, la taille des particules et d'autres paramètres du projet peuvent être discutés pour des programmes de développement personnalisés qualifiés.

Applications de cytométrie en flux

Les microsphères Flow Red-Fluo RCY500NM-630 peuvent être évaluées pour les applications de recherche suivantes.

Cytométrie en flux à petites particules

Utiliser les microsphères pour développer des méthodes d’acquisition et d’analyse de particules fluorescentes submicroniques.

Les études potentielles comprennent :

• Sensibilité de détection des petites particules

• Acquisition d'événements déclenchés par fluorescence

• Comparaison diffusion/fluorescence

• Optimisation du seuil électronique

• Discrimination fondée sur des événements de fond

• Optimisation de la dilution des échantillons

• Comparaison de débit

• Développement d’une stratégie de contrôle

Recherche sur la méthode des vésicules extracellulaires

Les microsphères de 500 nm peuvent être utilisées comme particules synthétiques lors du développement de flux de travail de cytométrie en flux pour la recherche liée aux microvésicules et aux vésicules extracellulaires.

Ils ne doivent pas être traités comme des matériaux biologiques de référence pour vésicules extracellulaires ou comme des normes de taille certifiées, à moins qu'ils ne soient étayés par la qualification spécifique au lot requise.

Recherche et développement de cytomètres en flux

Les fabricants d’instruments et les équipes de recherche peuvent utiliser des microsphères fluorescentes pour étudier :

• Performances d'excitation du laser rouge

• Sensibilité du détecteur rouge lointain

• Concepts d'alignement optique

• Stabilité fluidique

• Performances au niveau des événements

• Limites de détection des petites particules

• Sélection détecteur-filtre

• Paramètres d'acquisition de données

L'adéquation du produit à l'étalonnage formel des instruments doit être validée de manière indépendante.

Évaluation des canaux de fluorescence

Le RCY500NM-630 peut être utilisé pour évaluer les canaux de détection qui chevauchent la plage d'émission de 665 à 720 nm.

Les régions de filtrage possibles peuvent inclure environ :

• 660-680 nm

• 665-695 nm

• 670-710 nm

• 680-720 nm

• 690-735 nm

La compatibilité exacte dépend de la longueur d'onde laser du cytomètre en flux, de la sensibilité du détecteur, des miroirs dichroïques et des filtres passe-bande.

Développement d’essais en flux multiplex

Les microsphères fluorescentes rouge lointain peuvent être évaluées comme une seule population de particules dans la recherche en cytométrie en flux multiplex.

Différentes tailles de particules, intensités de fluorescence, couleurs d'émission ou compositions chimiques de surface peuvent potentiellement être combinées pour créer des populations de billes distinctes.

Les performances du multiplex doivent être optimisées en fonction de la configuration de l’instrument, des fluorophores rapporteurs, des exigences de compensation et de la conception du test.

Suivi des particules fluorescentes

Les microsphères peuvent également soutenir des recherches impliquant :

• Transport de particules

• Études de flux microfluidiques

• Recherche sur la filtration

• Études sur l'absorption des particules

• Microscopie à fluorescence

• Évaluation du système fluidique

• Recherche sur la préparation des échantillons

L’adéquation de l’application doit être confirmée dans les conditions expérimentales réelles.

Canaux laser et de détection recommandés

Le RCY500NM-630 est conçu pour une excitation à environ 630 nm.

Il peut être évalué avec des cytomètres en flux laser rouge utilisant des longueurs d'onde laser comprenant :

• 630 nm

• 633 nm

• 635 nm

• 637 nm

• 640 nm

L'émission attendue est répartie entre 665 et 720 nm. Un détecteur doit donc utiliser un filtre optique qui chevauche une partie appropriée de cette plage.

Les canaux rouge lointain potentiellement compatibles peuvent inclure des configurations de détecteurs de type APC, rouge lointain, à fluorescence laser rouge ou rouge étendu. Les noms de canaux varient selon les fabricants d'instruments, les spécifications des filtres doivent donc être revues plutôt que de se fier uniquement au nom du détecteur.

Avant de commencer une étude complète, confirmez :

1. L'instrument dispose d'un laser rouge compatible.

2. Le filtre d'émission chevauche 665-720 nm.

3. Le détecteur est suffisamment sensible pour les particules de 500 nm.

4. L'instrument prend en charge les paramètres de seuil de petites particules appropriés.

5. Le fluide de gaine et le tampon d'échantillon ont un faible fond particulaire.

6. La concentration sélectionnée ne produit pas d'événements coïncidents excessifs.

Le RCY500NM-630 n'est pas principalement conçu pour l'excitation avec des lasers de 405, 488 ou 561 nm, à moins que des tests spectraux séparés ne confirment une excitation adéquate à ces longueurs d'onde.

Flux de travail suggéré pour la cytométrie en flux

Le flux de travail suivant est un point de départ général et doit être optimisé pour l’instrument et l’application de recherche prévus.

1. Préparez l'instrument

Nettoyer le système fluidique selon les recommandations du fabricant de l'instrument.

Utilisez un fluide de gaine propre et filtré et confirmez que les événements de fond sont suffisamment faibles avant d’analyser les microsphères.

Pour la détection de particules submicroniques, la propreté du fluide de la gaine, des tubes à échantillons, des tampons et de la fluidique des instruments est particulièrement importante.

2. Préparez un blanc tampon

Exécutez le même tampon utilisé pour diluer les microsphères.

Enregistrez le taux d’événements de fond dans les canaux de diffusion et de fluorescence avant d’ajouter des particules.

Un tampon vierge permet de distinguer les événements de microsphères du bruit électronique, des particules tampons, de la contamination des tubes ou des transferts.

3. Remettre en suspension les microsphères

Laisser le flacon atteindre la température de travail recommandée avant utilisation.

Mélanger délicatement par inversion ou vortex contrôlé jusqu'à ce que la suspension apparaisse uniforme. Une étape brève et douce de sonication dans le bain peut être évaluée si nécessaire pour redisperser les particules déposées.

Évitez les sonications dures ou prolongées qui pourraient chauffer l’échantillon ou affecter la formulation.

4. Préparez une série de dilutions

Préparez plusieurs concentrations de travail plutôt que d’utiliser une seule dilution.

Une dilution en série peut aider à déterminer la concentration qui fournit :

• Un rythme d'événements stable

• Événements coïncidents minimes

• Résolution claire des particules

• Séparation d'arrière-plan acceptable

• Intensité de fluorescence reproductible

Utilisez des tubes propres à faible liaison et un tampon fraîchement filtré et compatible avec les particules.

5. Sélectionnez le laser rouge

Utilisez un laser rouge proche de la longueur d’onde d’excitation spécifiée de 630 nm.

Un laser de 633, 635, 637 ou 640 nm peut également fournir une excitation appropriée, mais la réponse de fluorescence doit être confirmée expérimentalement.

6. Sélectionnez le détecteur rouge lointain

Choisissez un filtre de détecteur qui chevauche la plage d'émission de 665 à 720 nm.

Exécutez d’abord l’échantillon à faible concentration et ajustez progressivement le gain ou la tension du détecteur pour éviter la saturation du signal.

7. Optimiser les paramètres de seuil et de déclenchement

Pour les particules de 500 nm, le déclenchement classique par diffusion vers l’avant peut ne pas offrir la meilleure sensibilité sur chaque instrument.

Comparer:

• Déclenchement par diffusion vers l'avant

• Déclenchement par diffusion latérale

• Déclenchement de fluorescence

• Approches de gate combinées

Enregistrez tous les paramètres d’acquisition afin que la méthode puisse être reproduite à travers les expériences.

8. Contrôler le taux d'événements

Utilisez un débit d’échantillon faible ou modéré lors de l’optimisation initiale.

Une concentration élevée de particules ou un débit excessif peut augmenter les événements coïncidents, provoquant la détection de deux ou plusieurs particules comme un seul événement.

Diluer l’échantillon si le taux d’événements est instable ou étonnamment élevé.

9. Confirmer la reproductibilité

Répétez la mesure en utilisant des dilutions préparées indépendamment.

Évaluer:

• Stabilité du nombre d'événements

• Médiane ou moyenne de fluorescence

• Largeur de distribution

• Séparation d'arrière-plan

• Position de dispersion

• Cohérence d'une exécution à l'autre

Contrôle qualité et cohérence des lots

Pour le développement de réactifs de cytométrie en flux et la fabrication en vrac, la cohérence entre les lots de production est une considération importante.

Selon les exigences du projet, l'évaluation de la qualité peut inclure :

• Caractérisation granulométrique

• Distribution granulométrique

• Apparence des suspensions

• Vérification de la teneur en solides

• Test d'excitation de fluorescence

• Test d'émission de fluorescence

• Comparaison relative de l'intensité de fluorescence

• Évaluation de l'histogramme par cytométrie en flux

• Évaluation de la dispersion et de l'agrégation

• Évaluation de la stabilité accélérée ou en temps réel

• Comparaison lot à lot

Les spécifications de version disponibles et les méthodes de test doivent être convenues avant la production en masse.

Pour les projets nécessitant des étalons quantitatifs de fluorescence, des étalons certifiés de granulométrie, des missions MESF, une traçabilité ou des réclamations d'étalonnage d'instruments, une qualification et une documentation supplémentaires sont requises. Les microsphères standard RCY500NM-630 ne doivent pas être décrites comme des billes d'étalonnage certifiées à moins que la certification appropriée n'ait été complétée.

Approvisionnement en vrac et fabrication sur mesure

SHBC fournit un support de fabrication de microsphères fluorescentes aux entreprises de biotechnologie, aux laboratoires de cytométrie en flux, aux développeurs de réactifs, aux fabricants d'instruments et aux organismes de recherche.

Notre processus de coopération typique peut inclure :

Évaluation des échantillons de recherche

De petites quantités peuvent être évaluées pour l'intensité de fluorescence, la compatibilité du détecteur, la dispersion des particules, la séparation du fond et la faisabilité du test.

Développement à l’échelle pilote

Les lots pilotes peuvent prendre en charge l’optimisation des méthodes, le criblage des formulations, les tests de stabilité et les études initiales de développement de produits.

Production en vrac

Une fois les spécifications techniques confirmées, une production répétée et des quantités en vrac peuvent être organisées en fonction des prévisions du projet.

Discussion sur un projet personnalisé

La personnalisation disponible peut inclure :

• Diamètres de particules alternatifs

• Différentes couleurs de fluorescence

• Intensité de fluorescence ajustée

• Concentrations alternatives de solides

• Emballage spécifique au projet

• Microsphères fonctionnalisées en surface

• Carboxyle, amino ou autres options de surface

• Développement de couplages de biomolécules

• Exigences de contrôle qualité spécifiques aux lots

La faisabilité de chaque personnalisation dépend de la taille des particules demandée, du spectre de fluorescence, de la chimie de la surface, de la concentration, du conditionnement et de la quantité commandée.

Recommandations de manipulation et de stockage

Pour de meilleures performances :

• Conserver les microsphères à l'abri de la lumière.

• Un stockage réfrigéré entre 2 et 8 °C est généralement recommandé, sauf indication contraire dans la documentation du produit.

• Ne pas congeler la suspension à moins que la stabilité gel-dégel ait été spécifiquement validée.

• Gardez le flacon bien fermé lorsqu'il n'est pas utilisé.

• Évitez une exposition prolongée à une forte lumière de laboratoire.

• Bien mélanger avant de prélever.

• Utilisez des pointes de pipettes propres et des tubes à faible fond de particules.

• Prévenir la contamination microbienne ou particulaire.

• Évitez les transferts répétés entre les conteneurs.

• Ne laissez pas la suspension sécher.

• Enregistrez le numéro de lot et la date d’ouverture pour la traçabilité.

Avant utilisation, inspectez la suspension pour détecter toute agrégation inattendue, changement de couleur, contamination ou décantation irréversible.

Les conditions de stockage, les informations de conservation, la durée de conservation et les exigences de transport doivent être confirmées à l'aide de l'étiquette du produit, de la fiche technique, de la fiche de données de sécurité ou du certificat d'analyse fourni avec la commande.

Foire aux questions

Qu'est-ce que le RCY500NM-630 ?

RCY500NM-630 est une suspension de microsphères fluorescentes rouge lointain de 500 nm avec 0,5 % de solides. Il est conçu pour une excitation autour de 630 nm et émet une fluorescence entre 665 et 720 nm.

Quel laser de cytométrie en flux faut-il utiliser ?

Un laser rouge proche de 630 nm est recommandé. Les instruments équipés de lasers 633, 635, 637 ou 640 nm peuvent également convenir, mais l'efficacité de l'excitation doit être confirmée expérimentalement.

Quel détecteur choisir ?

Sélectionnez un filtre de détecteur qui chevauche la plage d'émission de 665 à 720 nm. Les noms des détecteurs varient selon les fabricants de cytomètres en flux, c'est pourquoi les spécifications réelles du filtre passe-bande doivent être vérifiées.

Ces microsphères peuvent-elles être détectées par diffusion vers l’avant ?

La détection dépend de la conception optique du cytomètre en flux et de sa sensibilité aux petites particules. Certains cytomètres conventionnels peuvent avoir une sensibilité de diffusion limitée à 500 nm. La détection déclenchée par fluorescence peut fournir une meilleure identification des événements lors des études de particules submicroniques.

Le RCY500NM-630 peut-il être utilisé pour la recherche sur les vésicules extracellulaires ?

Les microsphères peuvent être évaluées en tant que particules synthétiques lors du développement d'un procédé de cytométrie en flux pour vésicules extracellulaires ou microvésicules. Ce ne sont pas des vésicules extracellulaires biologiques et ne doivent pas automatiquement être traitées comme des normes certifiées de taille ou de concentration.

S'agit-il de billes d'étalonnage certifiées ?

Non, sauf si la documentation produit fournie indique spécifiquement que la certification ou la traçabilité est incluse. Les microsphères fluorescentes standards peuvent prendre en charge le développement de méthodes et les études comparatives, mais les déclarations formelles d'étalonnage nécessitent une qualification supplémentaire.

Pourquoi une série de dilutions est-elle recommandée ?

Une série de dilutions permet d'identifier une concentration de particules appropriée, de réduire les événements coïncidents, d'optimiser le taux d'événements et de distinguer les particules réelles des événements de fond.

Les microsphères peuvent-elles être utilisées en cytométrie en flux multiplex ?

Ils peuvent être évalués comme une population de particules rouge lointain dans la recherche multiplex. La compatibilité avec d’autres populations de billes et fluorophores rapporteurs doit être testée à l’aide de l’instrument et de la stratégie de compensation prévus.

La surface des particules peut-elle être fonctionnalisée ?

La chimie des surfaces spécifique au projet peut être discutée. En fonction de l'application, des microsphères fluorescentes fonctionnalisées carboxyle, amino ou autres peuvent être disponibles via un développement personnalisé.

Des anticorps ou des protéines peuvent-ils être couplés aux microsphères ?

Le couplage de biomolécules nécessite un groupe fonctionnel de surface compatible et un processus de couplage optimisé. Veuillez spécifier la biomolécule souhaitée, la chimie de la surface, le format de test, la taille des particules et l'application cible lorsque vous demandez un produit personnalisé.

Existe-t-il d'autres tailles de particules disponibles ?

Différentes tailles de microsphères fluorescentes à l’échelle nanométrique et micrométrique peuvent être discutées pour les projets de cytométrie en flux, de microscopie à fluorescence, d’immunoessai, de suivi des particules et de développement d’instruments.

La production en vrac est-elle disponible ?

Oui. Le RCY500NM-630 est destiné à l'évaluation de la recherche, au développement à l'échelle pilote et à l'approvisionnement en gros. Le format d'emballage, la demande annuelle, les exigences de contrôle qualité et le calendrier de livraison peuvent être discutés lors de l'évaluation du projet.

Quelles informations doivent être fournies lors d’une demande de devis ?

Veuillez fournir :

• Numéro de catalogue du produit

• Quantité requise

• Demande annuelle attendue

• Taille de paquet préférée

• Longueur d'onde du laser du cytomètre en flux

• Configuration détecteur-filtre

• Chimie de surface requise

• Intensité de fluorescence cible

• Description de l'application

• Documentation qualité requise

• Lieu de livraison

Demander des échantillons ou un devis groupé

Les microsphères RCY500NM-630 à flux rouge-fluo de 500 nm offrent une option de particules fluorescentes rouge lointain pour la recherche en cytométrie en flux laser rouge, le développement de méthodes de détection submicroniques, l'évaluation de canaux de fluorescence, le développement d'instruments et la recherche d'essais basés sur le flux.

Pour l'évaluation d'échantillons ou la production en vrac, veuillez fournir la configuration de votre instrument, l'application, la quantité requise, l'emballage préféré et les exigences de contrôle qualité.

Produit : Microsphères Red-Fluo à flux de 500 nm
Numéro de catalogue : RCY500NM-630
Diamètre des particules : 500 nm
Excitation : 630 nm
Émission : 665-720 nm
Teneur en solides : 0,5 %
Application : Recherche en cytométrie en flux
Fourniture : Échantillons, lots pilotes et production en vrac
Utilisation : Utilisation pour la recherche uniquement. Pas pour un usage diagnostique ou thérapeutique.