Produtos
A SHBC fornece microesferas coloridas, microesferas fluorescentes, esferas magnéticas, microesferas de sílica, microesferas de empacotamento para cromatografia e reagentes biológicos para desenvolvimento de ensaios de diagnóstico, extração de ácidos nucleicos, purificação de proteínas e aplicações de separação.
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RCY500NM-630
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SHBC
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0,5%
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500 nm
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10ml,20ml,50ml ,500ml,1000ml
Microesferas Red-Fluo de fluxo de 500 nm para citometria de fluxo
As microesferas SHBC RCY500NM-630 Flow Red-Fluo são microesferas de polímero fluorescente vermelho distante de 500 nm desenvolvidas para pesquisa de citometria de fluxo, análise de partículas submicrométricas, desenvolvimento de métodos de detecção de fluorescência e desenvolvimento de ensaios baseados em fluxo.
As microesferas são projetadas para excitação em aproximadamente 630 nm e fornecem uma ampla faixa de emissão no vermelho extremo de 665–720 nm. Este perfil espectral os torna adequados para citômetros de fluxo equipados com laser vermelho e detectores de fluorescência de vermelho extremo compatíveis.
RCY500NM-630 é fornecido como uma suspensão de 0,5% de sólidos e está disponível para avaliação de pesquisa, desenvolvimento em escala piloto e produção em massa.
Resumo rápido do produto
Nome do produto: Microesferas Flow Red-Fluo
Número de catálogo: RCY500NM-630
Diâmetro nominal da partícula: 500 nm
Comprimento de onda de excitação: 630nm
Faixa de emissão: 665–720 nm
Conteúdo de sólidos: 0,5%
Região de fluorescência: Vermelho distante
Aplicação primária: pesquisa por citometria de fluxo
Capacidade de fornecimento: Amostras, lotes piloto e produção em massa
Uso pretendido: Somente para uso em pesquisa
Visão geral do produto RCY500NM-630
RCY500NM-630 consiste em microesferas de polímero fluorescentes com diâmetro nominal de 500 nm. O material fluorescente é incorporado às partículas para fornecer um sinal vermelho distante detectável quando excitado por um laser vermelho compatível.
A combinação de um diâmetro de partícula submícron e fluorescência vermelha torna essas microesferas adequadas para laboratórios que desenvolvem métodos de citometria de fluxo para detecção de partículas pequenas.
Em comparação com esferas de citometria de fluxo do tamanho de uma célula, partículas de 500 nm podem ser usadas para avaliar a sensibilidade do instrumento, detecção desencadeada por fluorescência, configurações de limite, controle de fundo, diluição de amostra e estratégias de controle para populações de partículas submicrométricas.
A ampla faixa de emissão de 665–720 nm também oferece aos pesquisadores flexibilidade ao selecionar filtros detectores que se sobrepõem ao espectro de fluorescência do vermelho extremo.
O RCY500NM-630 destina-se a organizações de pesquisa, laboratórios de citometria de fluxo, desenvolvedores de instrumentos, fabricantes de reagentes, empresas de biotecnologia e equipes de desenvolvimento de ensaios que exigem fornecimento consistente de microesferas fluorescentes.
Especificações Técnicas
Parâmetro | Especificação |
|---|---|
Nome do produto | Microesferas Fluo Vermelho-Fluo |
Número de catálogo | RCY500NM-630 |
Diâmetro nominal | 500 nm |
Classe de tamanho de partícula | Microesferas submicrométricas |
Comprimento de onda de excitação | 630 nm |
Comprimento de onda de emissão | 665–720nm |
Cor de fluorescência | Vermelho distante |
Conteúdo de sólidos | 0,5% |
Forma física | Suspensão aquosa de microesferas |
Método de detecção primária | Citometria de fluxo |
Formato de fornecimento | Amostras de pesquisa e fornecimento em massa |
Uso pretendido | Somente para uso em pesquisa |
Informações específicas do lote, química de superfície disponível, opções de embalagem, caracterização de tamanho de partícula, testes de fluorescência e documentação de apoio podem ser discutidas de acordo com os requisitos do projeto.
Fluorescência Vermelha Extrema com Excitação de 630nm
As microesferas RCY500NM-630 são projetadas para excitação em torno de 630 nm e emitem fluorescência na faixa de 665–720 nm.
Este perfil de excitação e emissão é adequado para citômetros de fluxo equipados com linhas de laser vermelhas como 630, 633, 635, 637 ou 640 nm, desde que o detector do instrumento e o filtro óptico se sobreponham ao espectro de emissão.
A região de fluorescência vermelha oferece vários benefícios práticos para pesquisas em citometria de fluxo:
Compatibilidade com citômetros de fluxo a laser vermelho comumente disponíveis
Separação de muitos canais de fluorescência verdes e amarelos
Potencial integração em projetos experimentais multicoloridos
Interferência reduzida de repórteres fluorescentes de comprimento de onda mais curto
Seleção flexível de detectores na região de emissão de 665–720 nm
Disparo de fluorescência adequado para análise de partículas submicrométricas
A intensidade real da fluorescência e a compatibilidade do canal devem ser confirmadas no citômetro de fluxo pretendido porque a potência do laser, a configuração óptica, a sensibilidade do detector, a largura de banda do filtro, as configurações de limite e a concentração da amostra podem afetar o sinal final.
Por que usar microesferas fluorescentes de 500 nm em citometria de fluxo?
Desenvolvimento de método de partículas submicrométricas
O diâmetro de 500 nm fornece um tamanho de partícula relevante para o desenvolvimento e otimização de métodos de citometria de fluxo focados em partículas submicrométricas.
Essas microesferas podem ser usadas na avaliação de configurações de instrumentos para pesquisas envolvendo modelos de vesículas extracelulares, nanopartículas sintéticas, partículas do tamanho de microvesículas, partículas de distribuição de medicamentos, vírus, lipossomas e outros pequenos objetos fluorescentes.
Eles não pretendem representar as propriedades biológicas ou químicas dessas amostras, mas podem fornecer uma população consistente de partículas sintéticas para o desenvolvimento de métodos.
Detecção Baseada em Fluorescência
Partículas submicrométricas podem produzir sinais de dispersão direta e lateral relativamente fracos em citômetros de fluxo convencionais. A marcação fluorescente pode fornecer um parâmetro de detecção adicional e pode suportar a aquisição desencadeada por fluorescência.
As microesferas RCY500NM-630 podem, portanto, ser usadas para estudar a relação entre fluorescência de partículas, dispersão óptica, configurações de limiar eletrônico, eventos de fundo e sensibilidade do instrumento.
Compatibilidade com Laser Vermelho
O perfil de excitação de 630 nm foi projetado para instrumentos com lasers vermelhos. Os pesquisadores podem avaliar o desempenho do detector de vermelho distante sem depender exclusivamente da excitação do laser azul ou violeta.
Preparação da série de diluição
A suspensão de sólidos a 0,5% pode ser diluída para preparar diferentes concentrações de trabalho para otimização de concentração, testes de taxa de eventos, avaliação de limiar e estudos de preparação de amostras.
A diluição apropriada deve ser determinada experimentalmente para cada citômetro de fluxo e aplicação.
Principais recursos do produto
tamanho de partícula submícron de 500 nm
O diâmetro nominal de 500 nm é adequado para pesquisas que envolvem citometria de fluxo de partículas pequenas, desenvolvimento de limiar de fluorescência e fluxos de trabalho de detecção submícron.
Fluorescência Vermelha Extrema
A excitação em torno de 630 nm e a emissão de 665 a 720 nm fornecem compatibilidade com plataformas de citometria de fluxo a laser vermelho e detectores de fluorescência de vermelho extremo.
Ampla faixa de emissão
O amplo perfil de emissão permite aos pesquisadores avaliar diferentes filtros detectores na região do vermelho extremo.
Suspensão Estável de Microesferas
O produto é fornecido como uma suspensão aquosa para facilitar a diluição, mistura e integração em fluxos de trabalho de laboratório.
Adequado para pesquisa e desenvolvimento de produtos
O RCY500NM-630 pode suportar estudos de viabilidade em estágio inicial, otimização de ensaios, desenvolvimento de instrumentos, desenvolvimento de reagentes e avaliação de aumento de escala.
Capacidade de fabricação em massa
SHBC oferece suporte à avaliação de amostras, produção piloto, pedidos repetidos e fabricação em massa para organizações de pesquisa e empresas de desenvolvimento de reagentes.
Personalização baseada em projetos
Concentração de partículas, formato de embalagem, funcionalidade de superfície, intensidade de fluorescência, tamanho de partícula e outros parâmetros do projeto podem ser discutidos para programas qualificados de desenvolvimento personalizado.
Aplicações de citometria de fluxo
As microesferas Red-Fluo Flow RCY500NM-630 podem ser avaliadas para as seguintes aplicações de pesquisa.
Citometria de fluxo de pequenas partículas
Use as microesferas para desenvolver métodos de aquisição e análise de partículas submicrométricas fluorescentes.
Estudos potenciais incluem:
Sensibilidade de detecção de partículas pequenas
Aquisição de eventos desencadeados por fluorescência
Comparação de dispersão versus fluorescência
Otimização de limite eletrônico
Discriminação de eventos de fundo
Otimização da diluição da amostra
Comparação de vazão
Desenvolvimento de estratégia de gate
Pesquisa do método de vesículas extracelulares
As microesferas de 500 nm podem ser usadas como partículas sintéticas durante o desenvolvimento de fluxos de trabalho de citometria de fluxo para pesquisas relacionadas a microvesículas e vesículas extracelulares.
Eles não devem ser tratados como materiais de referência de vesículas extracelulares biológicas ou padrões de tamanho certificados, a menos que sejam apoiados pela qualificação específica do lote exigida.
Pesquisa e desenvolvimento de citômetro de fluxo
Os fabricantes de instrumentos e as equipes de pesquisa podem usar microesferas fluorescentes ao estudar:
Desempenho de excitação do laser vermelho
Sensibilidade do detector vermelho distante
Conceitos de alinhamento óptico
Estabilidade fluídica
Desempenho da taxa de eventos
Limites de detecção de partículas pequenas
Seleção de filtro detector
Configurações de aquisição de dados
A adequação do produto para calibração formal de instrumentos deve ser validada de forma independente.
Avaliação de canais de fluorescência
O RCY500NM-630 pode ser usado para avaliar canais de detectores que se sobrepõem à faixa de emissão de 665–720 nm.
Possíveis regiões de filtro podem incluir aproximadamente:
660–680nm
665–695nm
670–710nm
680–720nm
690–735nm
A compatibilidade exata depende do comprimento de onda do laser do citômetro de fluxo, da sensibilidade do detector, dos espelhos dicróicos e dos filtros passa-faixa.
Desenvolvimento de ensaio de fluxo multiplex
Microesferas fluorescentes vermelhas distantes podem ser avaliadas como uma população de partículas em pesquisas de citometria de fluxo multiplex.
Diferentes tamanhos de partículas, intensidades de fluorescência, cores de emissão ou químicas de superfície podem ser potencialmente combinados para criar populações de esferas distinguíveis.
O desempenho do multiplex deve ser otimizado de acordo com a configuração do instrumento, os fluoróforos repórteres, os requisitos de compensação e o design do ensaio.
Rastreamento de Partículas Fluorescentes
As microesferas também podem apoiar pesquisas envolvendo:
Transporte de partículas
Estudos de fluxo microfluídico
Pesquisa de filtragem
Estudos de absorção de partículas
Microscopia de fluorescência
Avaliação do sistema fluídico
Pesquisa de preparação de amostras
A adequação da aplicação deve ser confirmada nas condições experimentais reais.
Canais de Laser e Detecção Recomendados
O RCY500NM-630 foi projetado para excitação em aproximadamente 630 nm.
Pode ser avaliado com citômetros de fluxo a laser vermelho usando comprimentos de onda de laser, incluindo:
630 nm
633 nm
635 nm
637 nm
640 nm
A emissão esperada está distribuída entre 665 e 720nm. Um detector deve, portanto, usar um filtro óptico que se sobreponha a uma porção adequada desta faixa.
Canais de vermelho distante potencialmente compatíveis podem incluir configurações de detector tipo APC, vermelho distante, fluorescência de laser vermelho ou vermelho estendido. Os nomes dos canais variam entre os fabricantes de instrumentos, portanto as especificações do filtro devem ser revisadas em vez de depender apenas do nome do detector.
Antes de iniciar um estudo completo, confirme:
O instrumento possui um laser vermelho compatível.
O filtro de emissão se sobrepõe a 665–720 nm.
O detector é sensível o suficiente para partículas de 500 nm.
O instrumento suporta configurações adequadas de limite de partículas pequenas.
O fluido de revestimento e o tampão de amostra têm baixo teor de partículas.
A concentração selecionada não produz eventos coincidentes excessivos.
O RCY500NM-630 não foi projetado principalmente para excitação com lasers de 405, 488 ou 561 nm, a menos que testes espectrais separados confirmem excitação adequada nesses comprimentos de onda.
Fluxo de trabalho sugerido de citometria de fluxo
O fluxo de trabalho a seguir é um ponto de partida geral e deve ser otimizado para o instrumento pretendido e a aplicação de pesquisa.
1. Prepare o instrumento
Limpe o sistema fluídico de acordo com as recomendações do fabricante do instrumento.
Use fluido de revestimento limpo e filtrado e confirme se os eventos de fundo estão aceitavelmente baixos antes de analisar as microesferas.
Para detecção de partículas submicrométricas, a limpeza do fluido do invólucro, dos tubos de amostra, dos tampões e dos fluidos do instrumento é especialmente importante.
2. Prepare um buffer em branco
Execute o mesmo buffer usado para diluir as microesferas.
Grave a taxa de eventos de fundo nos canais de dispersão e fluorescência antes de adicionar partículas.
Um tampão em branco ajuda a distinguir eventos de microesferas de ruído eletrônico, partículas de tampão, contaminação de tubos ou transferência.
3. Ressuspender as microesferas
Deixe o frasco atingir a temperatura de trabalho recomendada antes de usar.
Misture suavemente por inversão ou vórtex controlado até a suspensão parecer uniforme. Uma etapa breve e suave de banho-sonicação pode ser avaliada quando necessário para redispersar as partículas sedimentadas.
Evite sonicação forte ou prolongada que possa aquecer a amostra ou afetar a formulação.
4. Prepare uma série de diluições
Prepare várias concentrações de trabalho em vez de usar apenas uma diluição.
Uma diluição em série pode ajudar a determinar a concentração que fornece:
Uma taxa de eventos estável
Eventos coincidentes mínimos
Resolução clara de partículas
Separação de fundo aceitável
Intensidade de fluorescência reproduzível
Use tubos limpos e de baixa ligação e tampão compatível com partículas recém-filtrados.
5. Selecione o Laser Vermelho
Use um laser vermelho próximo ao comprimento de onda de excitação especificado de 630 nm.
Um laser de 633, 635, 637 ou 640 nm também pode fornecer excitação adequada, mas a resposta de fluorescência deve ser confirmada experimentalmente.
6. Selecione o Detector Far-Red
Escolha um filtro detector que se sobreponha à faixa de emissão de 665–720 nm.
Execute primeiro a amostra em baixa concentração e ajuste o ganho ou tensão do detector gradualmente para evitar a saturação do sinal.
7. Otimize as configurações de limite e gatilho
Para partículas de 500 nm, o disparo convencional de dispersão direta pode não fornecer a melhor sensibilidade em todos os instrumentos.
Comparar:
Acionamento de dispersão direta
Acionamento de dispersão lateral
Acionamento de fluorescência
Abordagens de gate combinadas
Grave todas as configurações de aquisição para que o método possa ser reproduzido em experimentos.
8. Controle a taxa de eventos
Use uma taxa de fluxo de amostra baixa ou moderada durante a otimização inicial.
Uma alta concentração de partículas ou taxa de fluxo excessiva pode aumentar eventos coincidentes, fazendo com que duas ou mais partículas sejam detectadas como um único evento.
Dilua a amostra se a taxa de eventos for instável ou inesperadamente alta.
9. Confirme a reprodutibilidade
Repita a medição usando diluições preparadas independentemente.
Avaliar:
Estabilidade da contagem de eventos
Mediana ou média de fluorescência
Largura de distribuição
Separação de fundo
Posição de dispersão
Consistência corrida a corrida
Controle de qualidade e consistência de lote
Para o desenvolvimento de reagentes de citometria de fluxo e fabricação em massa, a consistência entre os lotes de produção é uma consideração importante.
Dependendo dos requisitos do projeto, a avaliação da qualidade pode incluir:
Caracterização granulométrica
Distribuição de tamanho de partícula
Aparência de suspensão
Verificação de conteúdo de sólidos
Teste de excitação de fluorescência
Teste de emissão de fluorescência
Comparação relativa de intensidade de fluorescência
Avaliação do histograma por citometria de fluxo
Avaliação de dispersão e agregação
Avaliação de estabilidade acelerada ou em tempo real
Comparação lote a lote
As especificações de liberação e métodos de teste disponíveis devem ser acordados antes da produção em massa.
Para projetos que exigem padrões quantitativos de fluorescência, padrões certificados de tamanho de partículas, atribuições MESF, rastreabilidade ou reivindicações de calibração de instrumentos, são necessárias qualificações e documentação adicionais. As microesferas RCY500NM-630 padrão não devem ser descritas como esferas de calibração certificadas, a menos que a certificação relevante tenha sido concluída.
Fornecimento a granel e fabricação personalizada
A SHBC fornece suporte à fabricação de microesferas fluorescentes para empresas de biotecnologia, laboratórios de citometria de fluxo, desenvolvedores de reagentes, fabricantes de instrumentos e organizações de pesquisa.
Nosso processo típico de cooperação pode incluir:
Avaliação de amostra de pesquisa
Pequenas quantidades podem ser avaliadas quanto à intensidade de fluorescência, compatibilidade do detector, dispersão de partículas, separação de fundo e viabilidade do ensaio.
Desenvolvimento em escala piloto
Os lotes piloto podem apoiar a otimização de métodos, triagem de formulações, testes de estabilidade e estudos iniciais de desenvolvimento de produtos.
Produção em massa
Após a confirmação das especificações técnicas, a produção repetida e as quantidades a granel podem ser organizadas de acordo com a previsão do projeto.
Discussão de projeto personalizado
A personalização disponível pode incluir:
Diâmetros de partículas alternativos
Diferentes cores de fluorescência
Intensidade de fluorescência ajustada
Concentrações alternativas de sólidos
Embalagem específica do projeto
Microesferas funcionalizadas em superfície
Carboxil, amino ou outras opções de superfície
Desenvolvimento de acoplamento de biomoléculas
Requisitos de controle de qualidade específicos do lote
A viabilidade de cada personalização depende do tamanho de partícula solicitado, espectro de fluorescência, química da superfície, concentração, embalagem e quantidade do pedido.
Recomendações de manuseio e armazenamento
Para melhor desempenho:
Armazene as microesferas protegidas da luz.
O armazenamento refrigerado entre 2 e 8°C é geralmente recomendado, salvo indicação em contrário na documentação do produto.
Não congele a suspensão a menos que a estabilidade de congelamento-descongelamento tenha sido especificamente validada.
Mantenha o frasco bem fechado quando não estiver em uso.
Evite a exposição prolongada à luz forte do laboratório.
Misture bem antes da amostragem.
Use pontas de pipeta limpas e tubos com baixo teor de partículas.
Evitar contaminação microbiana ou particulada.
Evite transferências repetidas entre recipientes.
Não deixe a suspensão secar.
Registre o número do lote e a data de abertura para rastreabilidade.
Antes de usar, inspecione a suspensão quanto a agregação inesperada, alteração de cor, contaminação ou sedimentação irreversível.
As condições de armazenamento, informações sobre conservação, prazo de validade e requisitos de transporte devem ser confirmados através do rótulo do produto, ficha técnica, ficha de dados de segurança ou certificado de análise fornecido com o pedido.
Perguntas frequentes
O que é RCY500NM-630?
RCY500NM-630 é uma suspensão de microesferas fluorescentes de vermelho extremo de 500 nm com 0,5% de sólidos. Ele foi projetado para excitação em torno de 630 nm e emite fluorescência entre 665 e 720 nm.
Qual laser de citometria de fluxo deve ser usado?
Recomenda-se um laser vermelho próximo a 630nm. Instrumentos com lasers de 633, 635, 637 ou 640 nm também podem ser adequados, mas a eficiência de excitação deve ser confirmada experimentalmente.
Qual detector deve ser selecionado?
Selecione um filtro detector que se sobreponha à faixa de emissão de 665–720 nm. Os nomes dos detectores variam entre os fabricantes de citômetros de fluxo, portanto, a especificação real do filtro passa-banda deve ser verificada.
Essas microesferas podem ser detectadas por dispersão direta?
A detecção depende do design óptico do citômetro de fluxo e da sensibilidade a partículas pequenas. Alguns citômetros convencionais podem ter sensibilidade de dispersão limitada a 500 nm. A detecção desencadeada por fluorescência pode fornecer melhor identificação de eventos durante estudos de partículas submicrométricas.
O RCY500NM-630 pode ser usado para pesquisa de vesículas extracelulares?
As microesferas podem ser avaliadas como partículas sintéticas durante o desenvolvimento do método de citometria de fluxo de vesículas extracelulares ou microvesículas. Não são vesículas extracelulares biológicas e não devem ser automaticamente tratadas como padrões certificados de tamanho ou concentração.
Essas contas de calibração são certificadas?
Não, a menos que a documentação do produto fornecida declare especificamente que a certificação ou rastreabilidade está incluída. As microesferas fluorescentes padrão podem apoiar o desenvolvimento de métodos e estudos comparativos, mas as reivindicações formais de calibração exigem qualificação adicional.
Por que uma série de diluições é recomendada?
Uma série de diluições ajuda a identificar uma concentração de partículas apropriada, reduzir eventos coincidentes, otimizar a taxa de eventos e distinguir partículas genuínas de eventos de fundo.
As microesferas podem ser usadas em citometria de fluxo multiplex?
Eles podem ser avaliados como uma população de partículas vermelhas em pesquisas multiplex. A compatibilidade com outras populações de esferas e fluoróforos repórteres deve ser testada utilizando o instrumento pretendido e a estratégia de compensação.
A superfície da partícula pode ser funcionalizada?
A química de superfície específica do projeto pode ser discutida. Dependendo da aplicação, carboxila, amino ou outras microesferas fluorescentes funcionalizadas podem estar disponíveis por meio de desenvolvimento personalizado.
Os anticorpos ou proteínas podem ser acoplados às microesferas?
O acoplamento de biomoléculas requer um grupo funcional de superfície compatível e um processo de acoplamento otimizado. Especifique a biomolécula desejada, a química da superfície, o formato do ensaio, o tamanho da partícula e a aplicação alvo ao solicitar um produto personalizado.
Existem outros tamanhos de partículas disponíveis?
Diferentes tamanhos de microesferas fluorescentes em escala nanométrica e micrométrica podem ser discutidos para citometria de fluxo, microscopia de fluorescência, imunoensaio, rastreamento de partículas e projetos de desenvolvimento de instrumentos.
A produção em massa está disponível?
Sim. O RCY500NM-630 destina-se à avaliação de pesquisas, desenvolvimento em escala piloto e fornecimento em massa. O formato da embalagem, a demanda anual, os requisitos de CQ e o cronograma de entrega podem ser discutidos durante a avaliação do projeto.
Que informações devem ser fornecidas ao solicitar um orçamento?
Forneça:
Número de catálogo do produto
Quantidade necessária
Demanda anual esperada
Tamanho de pacote preferido
Comprimento de onda do laser do citômetro de fluxo
Configuração do filtro detector
Química de superfície necessária
Intensidade de fluorescência alvo
Descrição do aplicativo
Documentação de qualidade necessária
Destino de entrega
Solicite amostras ou uma cotação em massa
As microesferas Red-Fluo de fluxo de 500 nm RCY500NM-630 fornecem uma opção de partícula fluorescente vermelha distante para pesquisa de citometria de fluxo com laser vermelho, desenvolvimento de métodos de detecção submícron, avaliação de canais de fluorescência, desenvolvimento de instrumentos e pesquisa de ensaios baseados em fluxo.
Para avaliação de amostras ou produção em massa, forneça a configuração do instrumento, a aplicação, a quantidade necessária, a embalagem preferida e os requisitos de controle de qualidade.
Produto: Microesferas Red-Fluo de fluxo de 500 nm
Número de catálogo: RCY500NM-630
Diâmetro da partícula: 500 nm
Excitação: 630 nm
Emissão: 665–720 nm
Conteúdo de sólidos: 0,5%
Aplicação: Citometria de fluxo
Fornecimento de pesquisa: amostras, lotes piloto e produção em massa
Uso: somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico ou terapêutico.