Красно-флуоресцентные микросферы с потоком 500 нм RCY500NM-630 0,5%

Красно-флуоресцентные микросферы с потоком 500 нм для проточной цитометрии

SHBC RCY500NM-630 Flow Red-Fluo Microspheres — это флуоресцентные полимерные микросферы дальнего красного цвета длиной 500 нм, разработанные для исследований проточной цитометрии, анализа субмикронных частиц, разработки методов флуоресцентного обнаружения и разработки проточных анализов.

Микросферы рассчитаны на возбуждение с длиной волны примерно 630 нм и обеспечивают широкий диапазон излучения в дальней красной области 665–720 нм. Этот спектральный профиль делает их подходящими для проточных цитометров, оснащенных красным лазером и совместимыми детекторами дальней красной флуоресценции.

RCY500NM-630 поставляется в виде суспензии с содержанием твердых веществ 0,5% и доступен для исследовательской оценки, опытно-промышленных разработок и массового производства.

Краткое описание продукта

• Название продукта: Микросферы Flow Red-Fluo

• Номер по каталогу: RCY500NM-630

• Номинальный диаметр частиц: 500 нм

• Длина волны возбуждения: 630 нм

• Диапазон излучения: 665–720 нм

• Содержание твердых веществ: 0,5%

• Область флуоресценции: Дальний красный

• Основное применение: исследования проточной цитометрии.

• Возможности поставок: образцы, пилотные партии и массовое производство.

• Использование по назначению: только для исследовательских целей.

Обзор продукта RCY500NM-630

RCY500NM-630 состоит из флуоресцентных полимерных микросфер номинальным диаметром 500 нм. Флуоресцентный материал включен в частицы, чтобы обеспечить обнаруживаемый сигнал дальнего красного цвета при возбуждении совместимым красным лазером.

Сочетание субмикронного диаметра частиц и дальней красной флуоресценции делает эти микросферы подходящими для лабораторий, разрабатывающих методы проточной цитометрии для обнаружения мелких частиц.

По сравнению с шариками для проточной цитометрии размером с клетку, частицы размером 500 нм можно использовать для оценки чувствительности прибора, обнаружения, запускаемого флуоресценцией, настройки пороговых значений, контроля фона, разведения образцов и стратегии гейтирования для субмикронных популяций частиц.

Широкий диапазон излучения 665–720 нм также дает исследователям гибкость при выборе детекторных фильтров, перекрывающих дальний красный спектр флуоресценции.

RCY500NM-630 предназначен для исследовательских организаций, лабораторий проточной цитометрии, разработчиков приборов, производителей реагентов, биотехнологических компаний и групп разработчиков аналитических методов, которым требуется постоянная поставка флуоресцентных микросфер.

Технические характеристики

Информация о конкретной партии, доступный химический состав поверхности, варианты упаковки, характеристики размера частиц, флуоресцентные испытания и сопроводительная документация могут обсуждаться в соответствии с требованиями проекта.

Дальнекрасная флуоресценция с возбуждением 630 нм

Микросферы RCY500NM-630 предназначены для возбуждения в диапазоне 630 нм и излучают флуоресценцию в диапазоне 665–720 нм.

Этот профиль возбуждения и излучения подходит для проточных цитометров, оснащенных красными лазерными линиями, такими как 630, 633, 635, 637 или 640 нм, при условии, что детектор прибора и оптический фильтр перекрывают спектр излучения.

Дальнекрасная область флуоресценции предлагает несколько практических преимуществ для исследований проточной цитометрии:

• Совместимость с широко распространенными проточными цитометрами с красным лазером.

• Отделение от многих зеленых и желтых каналов флуоресценции.

• Потенциальная интеграция в многоцветные экспериментальные проекты.

• Снижение помех от коротковолновых флуоресцентных репортеров.

• Гибкий выбор детекторов в диапазоне излучения 665–720 нм.

• Подходящий запуск флуоресценции для анализа субмикронных частиц

Фактическая интенсивность флуоресценции и совместимость каналов должны быть подтверждены на предполагаемом проточном цитометре, поскольку мощность лазера, оптическая конфигурация, чувствительность детектора, полоса пропускания фильтра, настройки пороговых значений и концентрация образца могут повлиять на конечный сигнал.

Зачем использовать флуоресцентные микросферы с длиной волны 500 нм в проточной цитометрии?

Разработка метода субмикронных частиц

Диаметр 500 нм обеспечивает подходящий размер частиц для разработки и оптимизации методов проточной цитометрии, ориентированных на субмикронные частицы.

Эти микросферы можно использовать при оценке настроек инструментов для исследований, включающих модели внеклеточных везикул, синтетические наночастицы, частицы размером с микровезикулы, частицы для доставки лекарств, вирусы, липосомы и другие небольшие флуоресцентные объекты.

Они не предназначены для представления биологических или химических свойств этих образцов, но могут обеспечить согласованную популяцию синтетических частиц для разработки методов.

Обнаружение на основе флуоресценции

Субмикронные частицы могут производить относительно слабые сигналы прямого и бокового рассеяния на обычных проточных цитометрах. Флуоресцентная маркировка может обеспечить дополнительный параметр обнаружения и поддерживать сбор данных, запускаемый флуоресценцией.

Таким образом, микросферы RCY500NM-630 можно использовать для изучения взаимосвязи между флуоресценцией частиц, оптическим рассеянием, настройками электронного порога, фоновыми событиями и чувствительностью прибора.

Совместимость с красным лазером

Профиль возбуждения 630 нм предназначен для приборов с красными лазерами. Исследователи могут оценить работу детектора дальнего красного диапазона, не полагаясь исключительно на возбуждение синего или фиолетового лазера.

Подготовка серии разбавлений

Суспензию 0,5% твердых веществ можно разбавлять для получения различных рабочих концентраций для оптимизации концентрации, тестирования частоты событий, оценки пороговых значений и исследований по подготовке проб.

Соответствующее разведение следует определять экспериментально для каждого проточного цитометра и применения.

Ключевые особенности продукта

Субмикронный размер частиц 500 нм

Номинальный диаметр 500 нм подходит для исследований, включающих проточную цитометрию мелких частиц, определение порога флуоресценции и рабочие процессы субмикронного обнаружения.

Дальнекрасная флуоресценция

Возбуждение около 630 нм и излучение от 665 до 720 нм обеспечивают совместимость с платформами проточной цитометрии красного лазера и детекторами дальней красной флуоресценции.

Широкий диапазон выбросов

Широкий профиль излучения позволяет исследователям оценивать различные фильтры детекторов в дальней красной области.

Стабильная суспензия микросфер

Продукт поставляется в виде водной суспензии, что позволяет удобно разбавлять, смешивать и интегрировать его в лабораторные рабочие процессы.

Подходит для исследований и разработки продуктов

RCY500NM-630 может поддерживать технико-экономические обоснования на ранних стадиях, оптимизацию анализа, разработку приборов, разработку реагентов и оценку масштабирования.

Возможность массового производства

SHBC поддерживает оценку образцов, пилотное производство, повторные заказы и массовое производство для исследовательских организаций и компаний-разработчиков реагентов.

Настройка на основе проекта

Концентрация частиц, формат упаковки, функциональность поверхности, интенсивность флуоресценции, размер частиц и другие параметры проекта могут обсуждаться в рамках квалифицированных программ индивидуальной разработки.

Приложения для проточной цитометрии

RCY500NM-630 Flow Red-Fluo микросферы могут быть оценены для следующих исследовательских целей.

Проточная цитометрия малых частиц

Используйте микросферы для разработки методов сбора и анализа флуоресцентных субмикронных частиц.

Потенциальные исследования включают в себя:

• Чувствительность обнаружения мелких частиц

• Регистрация событий, запускаемых флуоресценцией

• Сравнение рассеяния и флуоресценции

• Электронная оптимизация порогов

• Дискриминация фоновых событий

• Оптимизация разбавления образца

• Сравнение расхода

• Разработка стратегии ворот

Исследование методом внеклеточных пузырьков

Микросферы размером 500 нм могут использоваться в качестве синтетических частиц при разработке рабочих процессов проточной цитометрии для исследований, связанных с микровезикулами и внеклеточными пузырьками.

Их не следует рассматривать как эталонные биологические внеклеточные везикулы или сертифицированные стандарты размера, если это не подтверждено необходимой квалификацией для конкретной партии.

Исследования и разработки проточных цитометров

Производители приборов и исследовательские группы могут использовать флуоресцентные микросферы при изучении:

• Характеристики возбуждения красного лазера

• Чувствительность детектора дальнего красного цвета

• Концепции оптического выравнивания

• Гидравлическая стабильность

• Производительность на уровне событий

• Пределы обнаружения мелких частиц

• Выбор детектора-фильтра

• Настройки сбора данных

Пригодность продукта для формальной калибровки приборов должна быть подтверждена независимо.

Оценка канала флуоресценции

RCY500NM-630 можно использовать для оценки каналов детектора, перекрывающих диапазон излучения 665–720 нм.

Возможные области фильтра могут включать примерно:

• 660–680 нм

• 665–695 нм

• 670–710 нм

• 680–720 нм

• 690–735 нм

Точная совместимость зависит от длины волны лазера проточного цитометра, чувствительности детектора, дихроичных зеркал и полосовых фильтров.

Разработка мультиплексного проточного анализа

Дальнекрасные флуоресцентные микросферы можно оценить как одну популяцию частиц в исследованиях мультиплексной проточной цитометрии.

Различные размеры частиц, интенсивность флуоресценции, цвета излучения или химический состав поверхности потенциально могут быть объединены для создания различимых популяций шариков.

Производительность мультиплекса должна быть оптимизирована в соответствии с конфигурацией прибора, репортерными флуорофорами, требованиями к компенсации и дизайном анализа.

Отслеживание флуоресцентных частиц

Микросферы также могут использоваться в исследованиях, включающих:

• Транспорт частиц

• Микрофлюидные исследования потока

• Фильтрационные исследования

• Исследования поглощения частиц

• Флуоресцентная микроскопия

• Оценка жидкостной системы

• Исследование подготовки проб

Пригодность применения должна быть подтверждена в реальных экспериментальных условиях.

Рекомендуемые лазерные каналы и каналы обнаружения

RCY500NM-630 предназначен для возбуждения на длине волны примерно 630 нм.

Его можно оценить с помощью проточных цитометров с красным лазером, используя длины волн лазера, включая:

• 630 нм

• 633 нм

• 635 нм

• 637 нм

• 640 нм

Ожидаемое излучение распределяется между 665 и 720 нм. Поэтому детектор должен использовать оптический фильтр, который перекрывает подходящую часть этого диапазона.

Потенциально совместимые каналы дальнего красного цвета могут включать в себя конфигурации детекторов типа APC, дальнего красного цвета, флуоресценции красного лазера или расширенного красного детектора. Названия каналов различаются у разных производителей приборов, поэтому следует пересматривать характеристики фильтров, а не полагаться только на название детектора.

Прежде чем начать полное исследование, подтвердите:

1. Прибор оснащен совместимым красным лазером.

2. Эмиссионный фильтр перекрывает 665–720 нм.

3. Детектор достаточно чувствителен к частицам размером 500 нм.

4. Прибор поддерживает соответствующие настройки пороговых значений для мелких частиц.

5. Оболочная жидкость и буфер для проб имеют низкий уровень содержания твердых частиц.

6. Выбранная концентрация не приводит к чрезмерным совпадающим событиям.

RCY500NM-630 изначально не предназначен для возбуждения лазерами с длиной волны 405, 488 или 561 нм, если отдельные спектральные испытания не подтвердят адекватное возбуждение на этих длинах волн.

Рекомендуемый рабочий процесс проточной цитометрии

Следующий рабочий процесс является общей отправной точкой и должен быть оптимизирован для предполагаемого инструмента и исследовательского приложения.

1. Подготовьте инструмент

Очистите жидкостную систему в соответствии с рекомендациями производителя прибора.

Используйте чистую, отфильтрованную проточную жидкость и убедитесь, что фоновые явления приемлемо низкие, прежде чем анализировать микросферы.

Для обнаружения субмикронных частиц особенно важна чистота проточной жидкости, пробирок для образцов, буферов и жидкостной части прибора.

2. Подготовьте буферную заготовку.

Запустите тот же буфер, который использовался для разбавления микросфер.

Перед добавлением частиц запишите частоту фоновых событий в каналах рассеяния и флуоресценции.

Буферный бланк помогает отличить события микросфер от электронного шума, частиц буфера, загрязнения пробирки или переноса.

3. Ресуспендируйте микросферы.

Перед использованием дайте флакону достичь рекомендуемой рабочей температуры.

Аккуратно перемешайте, переворачивая или контролируемым встряхиванием, пока суспензия не станет однородной. При необходимости для повторного диспергирования осевших частиц можно оценить краткую, мягкую обработку ультразвуком в ванне.

Избегайте резкой или продолжительной обработки ультразвуком, которая может нагреть образец или повлиять на рецептуру.

4. Подготовьте серию разведений.

Подготовьте несколько рабочих концентраций, а не используйте только одно разведение.

Серийное разведение может помочь определить концентрацию, которая обеспечивает:

• Стабильная частота событий

• Минимум совпадающих событий

• Четкое разрешение частиц

• Приемлемое разделение фона

• Воспроизводимая интенсивность флуоресценции

Используйте чистые пробирки с низким уровнем связывания и свежеотфильтрованный буфер, совместимый с частицами.

5. Выберите красный лазер.

Используйте красный лазер с длиной волны возбуждения, близкой к указанной 630 нм.

Лазер с длиной волны 633, 635, 637 или 640 нм также может обеспечить подходящее возбуждение, но реакция флуоресценции должна быть подтверждена экспериментально.

6. Выберите детектор дальнего красного цвета.

Выберите фильтр детектора, который перекрывает диапазон излучения 665–720 нм.

Сначала проанализируйте образец при низкой концентрации и постепенно регулируйте усиление или напряжение детектора, чтобы избежать насыщения сигнала.

7. Оптимизируйте настройки порога и триггера.

Для частиц размером 500 нм обычный запуск по прямому рассеянию может не обеспечить наилучшую чувствительность на каждом приборе.

Сравнивать:

• Запуск по прямому рассеянию

• Запуск по боковому рассеянию

• Запуск флуоресценции

• Комбинированные подходы к воротам

Запишите все настройки сбора данных, чтобы метод можно было воспроизвести в ходе экспериментов.

8. Контролируйте частоту событий

Во время первоначальной оптимизации используйте низкую или умеренную скорость потока пробы.

Высокая концентрация частиц или чрезмерная скорость потока могут увеличить количество совпадающих событий, в результате чего две или более частиц будут обнаружены как одно событие.

Разбавьте образец, если частота событий нестабильна или неожиданно высока.

9. Подтвердите воспроизводимость

Повторите измерение, используя самостоятельно приготовленные разведения.

Оценивать:

• Стабильность количества событий

• Медиана флуоресценции или среднее значение

• Ширина распределения

• Разделение фона

• Позиция разброса

• Стабильность от запуска к запуску

Контроль качества и постоянство партии

При разработке реагентов для проточной цитометрии и массовом производстве важным фактором является согласованность производственных партий.

В зависимости от требований проекта оценка качества может включать в себя:

• Характеристика размера частиц

• Распределение частиц по размерам

• Внешний вид подвески

• Проверка содержания твердых веществ

• Тестирование возбуждения флуоресценции

• Тестирование флуоресцентного излучения

• Относительное сравнение интенсивности флуоресценции

• Оценка гистограммы проточной цитометрии

• Оценка дисперсии и агрегации

• Ускоренная оценка стабильности или оценка стабильности в режиме реального времени

• Сравнение партий с партиями

Доступные спецификации выпуска и методы тестирования должны быть согласованы до начала массового производства.

Для проектов, требующих количественных стандартов флуоресценции, сертифицированных стандартов размера частиц, присвоений MESF, прослеживаемости или заявлений о калибровке приборов, требуется дополнительная квалификация и документация. Стандартные микросферы RCY500NM-630 не следует называть сертифицированными калибровочными шариками до тех пор, пока не будет проведена соответствующая сертификация.

Массовые поставки и изготовление на заказ

SHBC оказывает поддержку в производстве флуоресцентных микросфер биотехнологическим компаниям, лабораториям проточной цитометрии, разработчикам реагентов, производителям приборов и исследовательским организациям.

Наш типичный процесс сотрудничества может включать в себя:

Оценка выборки исследования

Небольшие количества можно оценить по интенсивности флуоресценции, совместимости детекторов, дисперсии частиц, отделению фона и осуществимости анализа.

Пилотная разработка

Пилотные партии могут способствовать оптимизации метода, проверке рецептуры, тестированию стабильности и первоначальным исследованиям по разработке продукта.

Массовое производство

После подтверждения технических спецификаций можно организовать повторное производство и оптовые партии в соответствии с прогнозом проекта.

Обсуждение индивидуального проекта

Доступная настройка может включать в себя:

• Альтернативные диаметры частиц

• Различные цвета флуоресценции

• Скорректированная интенсивность флуоресценции

• Альтернативные концентрации твердых веществ

• Упаковка для конкретного проекта

• Поверхностно-функционализированные микросферы

• Карбоксил, амино или другие варианты поверхности

• Разработка биомолекулярной связи

• Требования к контролю качества для конкретной партии

Возможность каждой индивидуальной настройки зависит от требуемого размера частиц, спектра флуоресценции, химического состава поверхности, концентрации, упаковки и количества заказа.

Рекомендации по обращению и хранению

Для лучшей производительности:

• Храните микросферы в защищенном от света месте.

• Обычно рекомендуется хранить в холодильнике при температуре 2–8°C, если иное не указано в документации на продукт.

• Не замораживайте суспензию, если ее стабильность при замораживании и оттаивании не была специально подтверждена.

• Держите флакон плотно закрытым, когда он не используется.

• Избегайте длительного воздействия яркого лабораторного света.

• Перед отбором проб тщательно перемешайте.

• Используйте чистые наконечники для пипеток и пробирки с низким фоновым содержанием частиц.

• Предотвратите микробное загрязнение или загрязнение частицами.

• Избегайте повторного перемещения между контейнерами.

• Не допускайте высыхания суспензии.

• Запишите номер партии и дату открытия для возможности отслеживания.

Перед использованием проверьте суспензию на предмет неожиданной агрегации, изменения цвета, загрязнения или необратимого осаждения.

Условия хранения, информация о консервантах, срок годности и требования к транспортировке должны быть подтверждены с помощью этикетки продукта, паспорта технических данных, паспорта безопасности или сертификата анализа, прилагаемого к заказу.

Часто задаваемые вопросы

Что такое RCY500NM-630?

RCY500NM-630 представляет собой суспензию флуоресцентных микросфер дальнего красного цвета с длиной волны 500 нм и содержанием твердых веществ 0,5%. Он предназначен для возбуждения около 630 нм и излучает флуоресценцию в диапазоне от 665 до 720 нм.

Какой лазер для проточной цитометрии следует использовать?

Рекомендуется красный лазер с длиной волны около 630 нм. Приборы с лазерами на длину волны 633, 635, 637 или 640 нм также могут подойти, но эффективность возбуждения должна быть подтверждена экспериментально.

Какой детектор выбрать?

Выберите фильтр детектора, который перекрывает диапазон излучения 665–720 нм. Названия детекторов различаются у разных производителей проточных цитометров, поэтому следует проверить фактическую спецификацию полосового фильтра.

Можно ли обнаружить эти микросферы методом прямого рассеяния?

Обнаружение зависит от оптической конструкции проточного цитометра и чувствительности к мелким частицам. Некоторые традиционные цитометры могут иметь ограниченную чувствительность к рассеянию на длине волны 500 нм. Обнаружение, инициируемое флуоресценцией, может обеспечить лучшую идентификацию событий во время исследований субмикронных частиц.

Можно ли использовать RCY500NM-630 для исследования внеклеточных пузырьков?

Микросферы могут быть оценены как синтетические частицы при разработке метода проточной цитометрии внеклеточных везикул или микровезикул. Они не являются биологическими внеклеточными везикулами и не должны автоматически рассматриваться как сертифицированные стандарты размера или концентрации.

Это сертифицированные калибровочные шарики?

Только в том случае, если в поставляемой документации на продукт прямо не указано, что сертификация или отслеживание включены. Стандартные флуоресцентные микросферы могут использоваться при разработке методов и сравнительных исследованиях, но официальные заявления о калибровке требуют дополнительной квалификации.

Почему рекомендуется серия разбавлений?

Серия разбавлений помогает определить подходящую концентрацию частиц, уменьшить количество совпадающих событий, оптимизировать частоту событий и отличить настоящие частицы от фоновых событий.

Можно ли использовать микросферы в мультиплексной проточной цитометрии?

В мультиплексных исследованиях их можно оценить как популяцию дальнекрасных частиц. Совместимость с другими популяциями гранул и репортерными флуорофорами должна быть проверена с использованием предполагаемого инструмента и стратегии компенсации.

Можно ли функционализировать поверхность частицы?

Может обсуждаться химия поверхности для конкретного проекта. В зависимости от применения карбоксильные, амино- или другие функционализированные флуоресцентные микросферы могут быть доступны посредством индивидуальной разработки.

Могут ли антитела или белки быть связаны с микросферами?

Для связывания биомолекул требуется совместимая поверхностная функциональная группа и оптимизированный процесс связывания. При запросе индивидуального продукта укажите желаемую биомолекулу, химический состав поверхности, формат анализа, размер частиц и целевое применение.

Доступны ли другие размеры частиц?

Различные размеры флуоресцентных микросфер нанометрового и микрометрового масштаба можно обсудить для проектов проточной цитометрии, флуоресцентной микроскопии, иммуноанализа, отслеживания частиц и проектов разработки приборов.

Возможно ли массовое производство?

Да. RCY500NM-630 предназначен для исследовательской оценки, опытно-промышленных разработок и оптовых поставок. Формат упаковки, годовой спрос, требования к контролю качества и график поставки могут обсуждаться во время оценки проекта.

Какую информацию следует предоставить при запросе ценового предложения?

Пожалуйста, предоставьте:

• Каталожный номер продукта

• Требуемое количество

• Ожидаемый годовой спрос

• Предпочтительный размер упаковки

• Длина волны лазера проточного цитометра

• Конфигурация детектора-фильтра

• Требуемая химия поверхности

• Целевая интенсивность флуоресценции

• Описание приложения

• Необходимая документация по качеству

• Место доставки

Запросить образцы или оптовое предложение

RCY500NM-630 Проточные красные флуоресцентные микросферы с длиной волны 500 нм предоставляют возможность использования флуоресцентных частиц в дальнем красном диапазоне для исследований проточной цитометрии с красным лазером, разработки методов субмикронного обнаружения, оценки каналов флуоресценции, разработки приборов и исследований на основе проточного анализа.

Для оценки образцов или массового производства укажите конфигурацию вашего прибора, применение, необходимое количество, предпочтительную упаковку и требования к контролю качества.

Продукт: Микросферы красного фтора с потоком 500 нм
Каталожный номер: RCY500NM-630
Диаметр частиц: 500 нм
Возбуждение: 630 нм
Эмиссия: 665–720 нм
Содержание твердых веществ: 0,5 %
Применение: Исследования методом проточной цитометрии
Поставка: Образцы, пилотные партии и массовое производство
Использование: Только для научных исследований. Не для диагностического или терапевтического использования.