Microesferas de estreptavidina de 50 um SAPS50UM-10 1%

Microesferas de estreptavidina de 50 µm para investigación biológica

Las microesferas de estreptavidina SHBC SAPS50UM-10 son microesferas funcionalizadas en superficie de 50 µm desarrolladas para la inmovilización y captura de anticuerpos, antígenos, proteínas, péptidos, enzimas, receptores, oligonucleótidos, ADN, ARN, aptámeros, lectinas y otras moléculas marcadas con biotina biotinilados.

El producto se suministra como una suspensión de sólidos al 1 % y está diseñado para el desarrollo de ensayos biológicos, inmovilización de biomoléculas, investigación de interacciones por afinidad, microscopía, estudios de interacción entre células y partículas, captura de ácidos nucleicos, microfluidos, investigación de aglutinación de partículas, detección basada en imágenes y fabricación de reactivos de investigación.

El diámetro de partícula de 50 µm proporciona una gran superficie en cada microesfera individual y hace que las partículas sean fáciles de identificar bajo microscopía óptica o de fluorescencia adecuada. El gran tamaño de partícula es especialmente relevante para proyectos que requieren análisis de partículas individuales, manipulación de partículas visibles, ensayos codificados por tamaño, modelos de partículas de rango de tamaño celular, transporte de microfluidos o detección biológica basada en imágenes.

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. respalda la evaluación de muestras de laboratorio, el desarrollo a escala piloto, la fabricación repetida, la cooperación OEM, los proyectos de marcas privadas y el suministro empresarial a granel.

Respuesta rápida del producto

SAPS50UM-10 es una suspensión de microesferas recubiertas de estreptavidina de 50 µm suministrada con un 1 % de sólidos. Su superficie funcional con estreptavidina se une a biomoléculas biotiniladas para la inmovilización de anticuerpos y proteínas, captura de ácidos nucleicos, ensayos biológicos, microscopía, investigación de microfluidos, estudios de interacción entre células y partículas, aglutinación de partículas y detección basada en imágenes.

Productos destacados

• Nombre del producto: Microesferas de estreptavidina de 50 µm

• Número de catálogo: SAPS50UM-10

• Marca: SHBC

• Fabricante: Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.

• Diámetro nominal de partícula: 50 µm

• Modificación de superficie: estreptavidina

• Contenido de sólidos: 1%

• Principio de unión: afinidad estreptavidina-biotina

• Forma física: Suspensión acuosa de microesferas.

• Aplicación principal: investigación biológica y ensayos basados ​​en partículas.

• Capacidad de suministro: muestras, lotes piloto y producción a granel.

• Personalización: Disponible según viabilidad técnica

• Uso previsto: uso exclusivo en investigación

¿Qué son las microesferas de estreptavidina SAPS50UM-10?

SAPS50UM-10 consta de microesferas de 50 µm con estreptavidina inmovilizada en la superficie de la partícula.

El recubrimiento de estreptavidina proporciona sitios de unión para moléculas biotiniladas. Los investigadores pueden unir un anticuerpo, antígeno, proteína, péptido, sonda de ácido nucleico, receptor, ligando, lectina, aptámero u otra biomolécula biotinilada seleccionada sin activar directamente la superficie de la microesfera con la química EDC/NHS.

Una vez inmovilizada una molécula de captura, las partículas funcionalizadas se pueden utilizar como fase sólida para:

• captura de objetivos

• Inmovilización de anticuerpos

• Análisis de interacción de proteínas.

• Hibridación de ácidos nucleicos.

• Estudios de unión a la superficie celular.

• Ensayos basados ​​en microscopía.

• Biosensores basados ​​en imágenes

• Aglutinación de partículas

• Investigación de microfluidos

• Experimentos de captura por afinidad

• Análisis de partículas individuales

• Investigación multiplex codificada por tamaño

Las posibles moléculas de captura biotiniladas incluyen:

• Anticuerpos monoclonales

• Anticuerpos policlonales

• Anticuerpos recombinantes

• Fragmentos de anticuerpos

• Antígenos

• Proteínas recombinantes

• Péptidos

• enzimas

• Receptores

• Lectinas

• Citoquinas

• Factores de crecimiento

• Sondas de oligonucleótidos

• sondas de ADN

• sondas de ARN

• Productos de PCR

• aptámeros

• Pequeñas moléculas biotiniladas.

Las partículas de 50 µm proporcionan una superficie significativamente mayor por microesfera individual que las partículas más pequeñas. Sin embargo, a la misma concentración de masa, proporcionan menos partículas individuales y menos área de superficie colectiva que microesferas mucho más pequeñas hechas del mismo material.

Por lo tanto, SAPS50UM-10 es particularmente adecuado cuando el proyecto prioriza:

• Gran superficie por partícula individual

• Observación microscópica directa.

• Medición de señal de partículas individuales

• Manipulación de partículas manual o automatizada.

• Modelado de partículas en rangos de tamaño de celda

• Diferenciación de partículas basada en el tamaño

• Ensayos biológicos basados ​​en imágenes.

• Transporte y captura de microfluidos.

• Aglutinación de partículas

• Confirmación visual de la recuperación de partículas.

SAPS50UM-10 se suministra como materia prima de investigación. No debe representarse automáticamente como un reactivo de diagnóstico terminado, un estándar de tamaño de partícula certificado, una perla de conteo absoluto, una perla magnética o una microesfera fluorescente interna, a menos que estas propiedades estén incluidas específicamente en la especificación del producto final.

SAPS50UM-10 Especificaciones técnicas

Los siguientes parámetros deben confirmarse utilizando la especificación técnica final o el Certificado de Análisis específico del lote:

• Material de partículas

• Diámetro medio de partículas

• Rango de tamaño de partículas

• Distribución del tamaño de partículas

• Coeficiente de variación del tamaño de partícula.

• Morfología de partículas

• Densidad de partículas

• Nivel de recubrimiento de estreptavidina

• Capacidad de unión a biotina

• Concentración del número de partículas

• Número de partículas por miligramo

• Tampón de suspensión

• pH del tampón

• Estabilizador o tensioactivo

• Preservativo

• Método de lavado recomendado

• Condiciones de recuperación recomendadas

• Tamaño del paquete

• Duración

• Condiciones de almacenamiento

La capacidad de unión a biotina debe informarse junto con:

• Tipo de molécula de prueba biotinilada

• Peso molecular de la molécula de prueba.

• Número de grupos de biotina por molécula

• Composición del buffer de unión

• tiempo de incubación

• Temperatura de incubación

• Procedimiento de lavado

• Método de detección

• Base de cálculo

• Resultado de la prueba específica del lote

La capacidad de unión no debe estimarse únicamente a partir del 1% de contenido de sólidos o del diámetro nominal de partícula.

Cómo funciona la unión estreptavidina-biotina

La estreptavidina es una proteína de unión a biotina que permite la unión de moléculas biotiniladas a la superficie de las microesferas.

Cuando se mezcla un ligando de captura biotinilado con SAPS50UM-10, el grupo biotina se une a los sitios de estreptavidina disponibles en la partícula.

La estructura general se puede representar como:

Superficie de microesferas – Estreptavidina – Biotina – Molécula de captura

Para un ensayo sándwich basado en anticuerpos, la estructura puede ser:

Microesfera – Estreptavidina – Anticuerpo de captura biotinilado – Antígeno objetivo – Anticuerpo de detección

El anticuerpo de detección puede llevar un marcador fluorescente, enzimático, colorimétrico, quimioluminiscente u otro marcador mensurable.

Ventajas de la inmovilización con estreptavidina y biotina

• La activación directa de EDC/NHS normalmente es innecesaria cuando se carga un ligando biotinilado.

• Una plataforma de microesferas se puede utilizar con muchas moléculas biotiniladas diferentes.

• Se pueden inmovilizar anticuerpos, proteínas, péptidos, ADN, ARN, oligonucleótidos y aptámeros.

• La carga del ligando se puede realizar en condiciones acuosas relativamente suaves.

• La molécula de captura se puede cambiar sin rediseñar la partícula base.

• La carga de ligando se puede optimizar por separado de la detección del objetivo.

• Se pueden utilizar diferentes sistemas reporteros con la misma plataforma de microesferas.

• La plataforma puede admitir investigaciones de objetivo único y múltiples.

• Las partículas se pueden adaptar a ensayos de imágenes, microscopía, microfluidos y basados ​​en placas.

Factores que afectan el rendimiento vinculante

La carga final del ligando y el rendimiento del ensayo pueden verse influenciados por:

• Densidad del recubrimiento de estreptavidina

• Actividad de estreptavidina

• Número de grupos de biotina por ligando

• Ubicación de los grupos de biotina.

• Accesibilidad a la biotina

• Longitud del espaciador

• Tamaño molecular del ligando

• Pureza del ligando

• Agregación de ligandos

• Apiñamiento de superficie

• Composición del búfer

• Concentración de sal

• tiempo de incubación

• Temperatura de incubación

• Método de mezcla

• Sedimentación de partículas

• Eficiencia de lavado

La biotina libre o los reactivos biotinilados que no han reaccionado pueden ocupar los sitios de estreptavidina disponibles. Por lo tanto, las biomoléculas biotiniladas deben purificarse adecuadamente cuando la biotina libre residual pueda interferir con la inmovilización.

¿Por qué elegir microesferas de estreptavidina de 50 µm?

Gran superficie por partícula individual

Una microesfera de 50 µm proporciona sustancialmente más superficie física en cada partícula que una microesfera de 30 µm, 20 µm, 10 µm o 5 µm.

Esto puede resultar útil cuando:

• Se requiere una gran cantidad de ligando de captura en cada partícula.

• Se desea una fuerte generación de señales por partícula individual

• La fluorescencia de la superficie se medirá mediante microscopía.

• Se requiere análisis de partículas individuales

• Se están estudiando los patrones de la superficie de las partículas.

• Se observará la unión de biomoléculas localizadas.

• Se necesita un modelo de partículas sintéticas grandes

Una partícula individual más grande no necesariamente proporciona una mayor superficie total por miligramo. Las partículas más pequeñas normalmente proporcionan muchas más partículas con la misma concentración de masa.

Excelente visibilidad microscópica

El diámetro de 50 µm hace que las partículas individuales sean fáciles de identificar utilizando sistemas de imágenes ópticas adecuados.

Los posibles métodos de obtención de imágenes incluyen:

• Microscopía de campo brillante

• Microscopía de contraste de fases.

• Microscopía de fluorescencia

• microscopía confocal

• Imágenes automatizadas de alto contenido

• Citometría de flujo por imágenes

• Análisis de partículas digitales

La microscopía se puede utilizar para evaluar:

• Morfología de partículas

• Fluorescencia asociada a la superficie

• Distribución de ligandos

• Agregación de partículas

• Interacción célula-partícula

• Recuperación de partículas

• Diferenciación basada en el tamaño

• Movimiento de microfluidos

• Aglutinación de partículas

Adecuado para análisis de partículas individuales

El gran tamaño permite tratar cada partícula como una superficie de reacción o unidad analítica separada.

Las posibles direcciones de investigación incluyen:

• Medición de fluorescencia de una sola partícula

• Análisis de variación de partícula a partícula.

• Uniformidad de unión a la superficie

• Imágenes de partículas individuales

• Clasificación automatizada de partículas

• Conteo digital de partículas

• Clasificación positiva/negativa basada en imágenes

Relevante para modelos de tamaño de celda grande

El diámetro de 50 µm se encuentra dentro del rango de tamaño de ciertas células grandes, agregados celulares, embriones, esferoides, estructuras biológicas y modelos celulares sintéticos.

SAPS50UM-10 puede evaluarse para:

• Transporte de partículas de gran tamaño celular.

• Estudios de contacto entre células y partículas.

• Pruebas de modelos celulares de microfluidos

• Captura de partículas en dispositivos de procesamiento celular.

• Desarrollo de sistemas de imágenes

• Modelos de partículas biológicas sintéticas.

• Investigación sobre manipulación mecánica.

Las microesferas sintéticas no reproducen todas las propiedades ópticas, mecánicas, químicas o biológicas de las células vivas. Se requiere validación específica de la aplicación.

Identificación clara basada en el tamaño

El gran tamaño de partícula permite diferenciar SAPS50UM-10 de muchas poblaciones de microesferas, células, desechos y partículas de fondo más pequeñas.

Esto es útil para:

• Ensayos multiplex codificados por tamaño

• Ensayos basados ​​en imágenes

• Seguimiento de partículas

• Clasificación de microfluidos

• Análisis de aglutinación

• Controles de procesos internos

• Investigación multipoblacional

Manipulación manual práctica

Las partículas individuales de 50 µm pueden manipularse utilizando herramientas de laboratorio adecuadas, como:

• Puntas de pipeta de gran calibre

• Micropipetas

• Microcapilares

• Micromanipuladores

• Sistemas de recogida de partículas

• Mallas o coladores de células

• Estructuras de captura de microfluidos.

Características y beneficios clave

Diámetro nominal de partícula de 50 µm

El gran tamaño de las partículas admite la microscopía, el análisis de partículas individuales, la identificación basada en el tamaño, la manipulación de microfluidos y la investigación biológica de partículas grandes.

Superficie funcional de estreptavidina

La superficie captura anticuerpos, proteínas, péptidos, enzimas, receptores, oligonucleótidos, ADN, ARN, aptámeros, lectinas y otras moléculas que contienen biotina biotinilados.

Suspensión de sólidos al 1%

SAPS50UM-10 se suministra con un 1 % de sólidos y se puede diluir según la cantidad requerida de partículas, el volumen de reacción, la capacidad de unión y el método de detección.

Inmovilización de ligando simple

Las moléculas de captura biotiniladas se pueden unir sin que el usuario final active directamente la superficie de la microesfera con carbodiimida.

Gran superficie por partícula

Cada microesfera proporciona una superficie física comparativamente grande para la inmovilización del ligando de captura y la generación de señales.

Fuerte compatibilidad de imágenes

El tamaño de partícula es adecuado para la investigación de imágenes ópticas, de fluorescencia, confocales y automatizadas.

Plataforma modular de ensayos biológicos

La misma partícula base se puede combinar con diferentes moléculas de captura biotiniladas para diferentes objetivos de investigación.

Suministro de muestra a granel

SHBC respalda la evaluación de laboratorio, la producción piloto, la fabricación repetida, la cooperación OEM y las compras empresariales al por mayor.

Opciones de desarrollo personalizadas

Para proyectos calificados se pueden discutir el tamaño de partícula, la carga de estreptavidina, la capacidad de unión, el contenido de sólidos, el tampón, el conservante, la codificación de fluorescencia, el color visible, el empaque y las especificaciones de liberación.

Aplicaciones de investigación biológica

Desarrollo de inmunoensayos basados ​​en perlas

SAPS50UM-10 se puede utilizar como fase sólida en ensayos de investigación tipo sándwich, indirectos, competitivos o de aglutinación de partículas.

Un ensayo tipo sándwich típico puede incluir:

1. Inmovilización de un anticuerpo de captura biotinilado.

2. Bloqueo de la superficie restante de las partículas.

3. Incubación con la muestra de prueba.

4. Captura del analito objetivo.

5. Adición de un anticuerpo de detección marcado.

6. Eliminación de reactivos no unidos.

7. Medición de la señal asociada a partículas.

Los objetivos potenciales de la investigación incluyen:

• Anticuerpos

• Antígenos

• Citoquinas

• hormonas

• Factores de crecimiento

• enzimas

• Biomarcadores

• Proteínas asociadas a patógenos

• Analitos de seguridad alimentaria

• Objetivos medioambientales

• Objetivos de investigación veterinaria

• Compuestos de investigación

Ensayos de unión competitiva

Los formatos competitivos podrán ser evaluados para:

• Moléculas pequeñas

• haptenos

• Péptidos

• Drogas

• Toxinas

• hormonas

• metabolitos

• Objetivos con sitios de enlace accesibles limitados

La relación entre la concentración del analito y la señal medida depende del diseño final del ensayo.

Inmovilización y detección de anticuerpos

Los anticuerpos biotinilados pueden inmovilizarse para:

• Detección de antígenos

• Detección de anticuerpos

• Detección de hibridomas

• Estudios de especificidad de anticuerpos.

• Evaluación de reactividad cruzada

• Comparación de afinidad

• Selección de anticuerpos de captura.

• Pruebas de viabilidad del ensayo.

• Investigación de biomarcadores

Investigación sobre la interacción de proteínas y péptidos

Se pueden adjuntar proteínas o péptidos biotinilados para estudiar:

• Interacciones anticuerpo-antígeno

• Interacciones proteína-proteína

• Unión receptor-ligando

• Reconocimiento de epítopos

• Unión enzima-sustrato

• Detección de inhibidores

• Vinculación fármaco-candidato

• Comparación de afinidad de proteínas

Captura e hibridación de ácidos nucleicos.

Se pueden unir oligonucleótidos biotinilados, ADN, ARN, productos de PCR y aptámeros a SAPS50UM-10.

Las aplicaciones potenciales incluyen:

• Captura específica de secuencia

• Desarrollo de ensayos de hibridación.

• Captura de productos de PCR

• Investigación de genotipado

• Investigación de detección de mutaciones

• Detección basada en aptámeros

• Análisis de interacción ADN-proteína.

• Investigación de unión a ARN

• Desarrollo de ensayos moleculares.

Investigación sobre la interacción célula-partícula

Cuando se recubre con un anticuerpo, receptor, ligando, lectina o péptido biotinilado apropiado, se puede evaluar la interacción de SAPS50UM-10 con las células.

Las posibles direcciones de investigación incluyen:

• Reconocimiento de receptores de superficie celular.

• Adhesión celular

• Unión celular mediada por ligando

• Interacción de células inmunes

• Contacto celular de partículas grandes

• Investigación de agregación celular.

• Posicionamiento celular mediado por partículas.

• Investigación de partículas presentadoras de antígenos sintéticos

• Imágenes de interfaces célula-partícula

Las variables importantes incluyen:

• Densidad de ligando de captura

• Relación partícula-celda

• Concentración celular

• tiempo de incubación

• Temperatura de incubación

• Método de mezcla

• Condiciones de lavado

• Viabilidad celular

• Agregación de partículas

• Apego no específico

Microscopía e imágenes de alto contenido

Las microesferas de 50 µm podrán soportar:

• Imágenes de campo brillante

• Imágenes de contraste de fase

• Imágenes de fluorescencia

• microscopía confocal

• Proyección de alto contenido

• Conteo automatizado de partículas

• Análisis de unión superficial

• Clasificación de partículas

• Imágenes de interacción célula-partícula

• Análisis digital de partículas positivas/negativas.

Investigación de microfluidos

SAPS50UM-10 podrá evaluarse en:

• Estudios de transporte de partículas.

• Investigación de flujo de microcanales.

• Separación basada en el tamaño

• atrapamiento de partículas

• Enfoque hidrodinámico

• Posicionamiento de partículas

• Imágenes en dispositivos de microfluidos.

• Manipulación de modelos de células grandes.

• Pruebas de rendimiento del dispositivo

El canal, conector, válvula, filtro y ruta de flujo más estrechos deben ser compatibles con partículas de 50 µm.

Investigación sobre aglutinación

Se pueden utilizar microesferas de estreptavidina grandes en métodos de investigación en los que la unión de una molécula objetivo o puente produce agrupaciones de partículas mensurables.

La aglutinación puede analizarse mediante:

• Microscopía óptica

• Imágenes automatizadas

• Métodos de dispersión de luz

• Patrones de sedimentación

• Cambios en el recuento de partículas

• Algoritmos de análisis de imágenes

La relación entre agregación y concentración de analito debe optimizarse experimentalmente.

Biosensores basados ​​en partículas

SAPS50UM-10 puede servir como portador visible de fase sólida en:

• Biosensores ópticos

• Biosensores basados ​​en imágenes

• Ensayos de partículas fluorescentes.

• Ensayos de partículas ligadas a enzimas.

• Biosensores de microfluidos

• Estudios de unión a superficies.

• Ensayos digitales de partículas.

Investigación multiplex codificada por tamaño

La población de partículas de 50 µm se puede combinar con microesferas más pequeñas para crear poblaciones de ensayo de tamaño distinguible.

Cada población de partículas puede potencialmente transportar un ligando de captura biotinilado diferente.

El diseño final del multiplex debe considerar:

• Separación por tamaño de partículas

• Especificidad del ligando

• Canal de señal

• Recuperación de partículas

• Agregación

• Resolución de imagen

• Compatibilidad de instrumentos

Biomoléculas biotiniladas compatibles

Anticuerpos biotinilados

Los posibles formatos de anticuerpos incluyen:

• IgG de longitud completa

• IgM

• Fragmentos fabulosos

• Fragmentos F(ab′)₂

• Anticuerpos recombinantes

• Fragmentos variables de cadena única

• Anticuerpos de dominio único

• Formatos de anticuerpos diseñados

La actividad de los anticuerpos después de la inmovilización depende de:

• Química de biotinilación

• Número de grupos de biotina

• Ubicación de los grupos de biotina.

• Longitud del espaciador

• Pureza de proteínas

• Agregación de anticuerpos

• Carga superficial

• Condiciones de almacenamiento

Proteínas biotiniladas

Los ejemplos potenciales incluyen:

• Antígenos recombinantes

• enzimas

• Citoquinas

• Factores de crecimiento

• Receptores

• Lectinas

• Proteínas de unión

• Proteínas de fusión

• Estándares de proteínas

Péptidos biotinilados

Las aplicaciones potenciales incluyen:

• Mapeo de epítopos

• Detección de anticuerpos

• Estudios de unión a receptores

• investigación enzimática

• Estudios de interacción de proteínas.

• Ensayos de detección de drogas

Un espaciador adecuado entre la biotina y el péptido puede mejorar la accesibilidad molecular.

Ácidos nucleicos biotinilados

Los formatos compatibles pueden incluir:

• ADN monocatenario

• ADN bicatenario

• ARN

• Sondas de oligonucleótidos

• amplicones de PCR

• aptámeros

• Sondas de ácido nucleico modificadas

• Capturar secuencias

Moléculas pequeñas biotiniladas

Los pequeños compuestos biotinilados pueden inmovilizarse cuando sus grupos biotina permanecen accesibles a la superficie de la estreptavidina.

Durante el desarrollo del método se deben considerar el diseño del espaciador y la orientación molecular.

Protocolo de carga de ligando biotinilado recomendado

El siguiente procedimiento es un punto de partida del desarrollo general. Las condiciones finales deben optimizarse para la biomolécula, el material de partículas y la aplicación reales.

1. Resuspender SAPS50UM-10

Deje que la suspensión alcance la temperatura de manipulación recomendada.

Mezcle mediante inversión suave, rotación lenta, balanceo o agitación controlada hasta que la suspensión sea homogénea.

Debido a que las partículas de 50 µm pueden sedimentar rápidamente, mezcle el stock inmediatamente antes de cada paso de muestreo.

Durante la dispensación repetida, mantenga un mezclado suave o vuelva a mezclar la suspensión antes de cada alícuota.

2. Calcule la cantidad de partículas requerida

Determinar la cantidad requerida según:

• Número de pruebas

• Número de partículas requeridas por prueba

• Superficie requerida por reacción

• Volumen de reacción

• Concentración objetivo esperada

• Capacidad de encuadernación específica del lote

• Número de pasos de lavado

• Pérdida de procesamiento esperada

No calcule la capacidad de carga de ligandos únicamente a partir del contenido de sólidos.

3. Transferir las microesferas

Transfiera el volumen requerido a un tubo o recipiente de procesamiento limpio y de baja unión.

Utilice una punta de pipeta de diámetro ancho u otro dispositivo de transferencia con una abertura adecuada para partículas de 50 µm.

Evite puntas estrechas que puedan:

• Retener partículas

• Restringir el movimiento de partículas

• Producir números de partículas inconsistentes

• Promover la agregación

• Reducir la precisión de la transferencia

4. Lavar las Microesferas

Lavar las partículas con un tampón compatible con estreptavidina y el ligando biotinilado seleccionado.

Evite la biotina libre durante la inmovilización del ligando.

Los posibles métodos de recuperación incluyen:

• Centrifugación

• Filtración por membrana

• Recuperación de malla o colador celular.

• Sedimentación controlada

• Recogida manual de partículas.

• Otros métodos validados de separación sólido-líquido

El método debe establecerse utilizando el material de partículas real, la densidad, el tampón, el volumen de procesamiento y la recuperación requerida.

5. preparar el ligando biotinilado

Diluir la biomolécula seleccionada en un tampón de unión compatible.

Revisar:

• Concentración de ligando

• Nivel de biotinilación

• Pureza molecular

• Nivel agregado

• Contenido libre de biotina

• Reactivo de biotinilación residual

• Aditivos tampón

• Estabilidad de las proteínas

• Estabilidad del ácido nucleico

6. Agregue el ligando

Combine las partículas lavadas con el ligando biotinilado.

Utilice una rotación suave, un balanceo o una mezcla controlada para mantener las partículas expuestas uniformemente al ligando.

Evite el vórtice excesivo, la formación de espuma y las condiciones mecánicas que puedan dañar la biomolécula.

7. Optimizar la incubación

Evaluar:

• Concentración de partículas

• Concentración de ligando

• Relación ligando-partícula

• tiempo de incubación

• Temperatura de incubación

• pH del tampón

• Concentración de sal

• Velocidad de mezcla

• Volumen de reacción

La mezcla suave y continua es particularmente importante para partículas de 50 µm porque la sedimentación puede causar una carga desigual de ligando.

8. Eliminar el ligando libre

Separar y lavar las partículas para eliminar las moléculas biotiniladas no unidas.

Un lavado insuficiente puede aumentar el fondo, mientras que un lavado excesivo puede reducir la recuperación de partículas.

9. Bloquear la superficie de las partículas

Incubar las microesferas cargadas de ligando con un reactivo de bloqueo compatible con la aplicación.

Los posibles bloqueadores incluyen:

• Albúmina sérica bovina

• Caseína

• gelatina de pescado

• Inmunoglobulina no inmune

• Polímeros bloqueantes sintéticos

• Tampones comerciales de bloqueo de partículas

El bloqueador debería reducir la señal de la muestra negativa sin reducir sustancialmente la unión específica del objetivo.

10. Resuspender las microesferas preparadas.

Resuspender las partículas recubiertas y bloqueadas en un tampón de ensayo o almacenamiento adecuado.

Evaluar:

• Dispersión de partículas

• Retención de ligando

• Actividad vinculante

• Unión no específica

• Recuperación de partículas

• Comportamiento de asentamiento

• Rendimiento de redispersión

• Estabilidad a corto plazo

• Estabilidad a largo plazo

• Estabilidad microbiana

Flujo de trabajo de ensayos biológicos recomendado

1. preparar las microesferas de captura

Cargue SAPS50UM-10 con la molécula de captura biotinilada seleccionada.

Lave y bloquee las partículas antes de probar la muestra.

2. preparar controles experimentales

Los controles recomendados pueden incluir:

• Blanco de tampón de ensayo

• Microesferas de estreptavidina sin ligando de captura.

• Captura de partículas cargadas de ligando sin objetivo

• muestra negativa

• muestra positiva

• Control exclusivo para reporteros

• control de isotipos

• Control de ligando biotinilado no relevante

• Control de objetivos sin etiquetar

• Controles de un solo color cuando se utiliza fluorescencia

3. Agregue la muestra de prueba

Combine las microesferas preparadas con la muestra.

Optimizar:

• Volumen de muestra

• Dilución de muestra

• Concentración de partículas

• Partículas por reacción

• Rango de concentración objetivo

• tiempo de incubación

• Temperatura de incubación

• Método de mezcla

• Matriz de muestra

Mantenga una mezcla suave durante la incubación.

4. Lavar las partículas

Elimine los componentes de la muestra no unidos mientras mantiene una recuperación aceptable.

Registro:

• Número de lavados

• Composición del tampón de lavado

• Volumen de lavado

• Método de separación

• Volumen de sobrenadante residual

• Procedimiento de mezcla

• Recuperación de partículas

5. Agregue el reactivo de detección

Agregue un indicador fluorescente, enzimático, colorimétrico, quimioluminiscente u otro compatible.

El sistema de detección seleccionado debe coincidir con la plataforma analítica prevista.

6. Incubar y lavar

Optimice la concentración del reportero y el tiempo de incubación.

Retire el reactivo de detección no unido para reducir el fondo.

7. resuspender para la detección

Resuspender las partículas en un tampón de detección limpio.

Mezcle inmediatamente antes de transferir la muestra al portaobjetos del microscopio, la cámara de imágenes, la microplaca, el dispositivo de microfluidos u otro instrumento.

8. Mida la señal

Los posibles resultados analíticos incluyen:

• Fluorescencia media de partículas

• Fluorescencia de partículas mediana

• Porcentaje de partículas positivas

• Distribución de fluorescencia superficial.

• Relación señal-fondo

• Actividad enzimática asociada a partículas

• Intensidad del color

• Nivel de aglutinación

• Cambios en el recuento de partículas

• Curva dosis-respuesta

• Precisión del ensayo

• Recuperación

• Especificidad

• Reactividad cruzada

9. Analizar los resultados

Establecer umbrales positivos y negativos utilizando controles adecuados.

No defina un resultado positivo utilizando únicamente la muestra de prueba.

Manipulación, mezcla y muestreo de microesferas de 50 µm

Asentamiento rápido de partículas

Las microesferas de 50 µm pueden sedimentarse rápidamente cuando se detiene la mezcla.

El asentamiento puede causar:

• Concentración de partículas desigual

• Variación entre alícuotas

• Carga de ligando inconsistente

• Diferentes números de partículas entre reacciones.

• Exposición desigual a muestras o reporteros.

• Señales de ensayo variables

• Reproducibilidad de lotes reducida

Mantener una suspensión uniforme

Los métodos de mezcla adecuados pueden incluir:

• inversión suave

• Rotación de un extremo a otro

• Mezcla orbital lenta

• Balanceo suave

• Vortex controlado antes del muestreo.

• Agitación mecánica lenta

• Mezcla intermitente con pipeta de gran calibre

Evite una mezcla vigorosa que produzca espuma, dañe las proteínas o provoque colisiones y agregaciones de partículas.

Muestreo consistente

Para dispensación repetida:

1. Mezclar bien el caldo.

2. Aspire el volumen requerido rápidamente.

3. Dispensar el volumen completo.

4. Vuelva a mezclar antes de la siguiente alícuota.

5. Utilice el mismo método de transferencia para todas las muestras.

6. Minimiza los retrasos entre la mezcla y el muestreo.

Para el llenado piloto o a granel, se debe validar la mezcla lenta y continua para mantener una distribución uniforme de las partículas.

Puntas de pipeta de calibre ancho

Las puntas anchas o cortadas pueden mejorar la transferencia de partículas grandes.

La abertura debe ser suficientemente mayor que el diámetro de las partículas para reducir:

• Retención de partículas

• Cortar

• Entrega de partículas inconsistente

• Bloqueo de punta

• Variación de muestreo

Conteo de partículas

Cuando el número de partículas por prueba sea importante, utilice un método de recuento adecuado en lugar de confiar únicamente en el volumen de la suspensión.

Los posibles enfoques incluyen:

• conteo microscópico

• Imágenes automatizadas

• Contadores de partículas

• Cálculo gravimétrico respaldado por el tamaño y la densidad de las partículas medidas

• Datos de número de partículas específicos del lote

Métodos de lavado y recuperación de partículas

Centrifugación

La centrifugación se puede utilizar cuando la composición y densidad de las partículas permiten una recuperación eficiente.

La fuerza centrífuga mínima efectiva y el tiempo deben determinarse experimentalmente.

Las condiciones seleccionadas deben proporcionar:

• Recuperación aceptable

• Un pellet de partículas manejable

• Fácil redispersión

• Agregación mínima

• Daño limitado a biomoléculas inmovilizadas.

Filtración

Para la recuperación o el lavado se puede utilizar una membrana, malla o filtro celular con un tamaño de poro adecuado.

Confirmar:

• Retención de partículas

• Baja adsorción de biomoléculas.

• Recuperación aceptable

• Fácil liberación de partículas

• Compatibilidad con el volumen de procesamiento.

• Deformación mínima de partículas

Sedimentación controlada

Se puede considerar la sedimentación natural o acelerada en flujos de trabajo seleccionados.

La sedimentación puede reducir la tensión mecánica, pero puede requerir tiempos de procesamiento más prolongados y una eliminación cuidadosa del sobrenadante.

Manipulación manual de partículas

Para proyectos de microscopía y de una sola partícula, se pueden recolectar microesferas individuales usando:

• Micropipetas de gran calibre

• Microcapilares

• Sistemas de micromanipulación

• Herramientas para recoger partículas

• Dispositivos basados ​​en malla

Separación magnética

No se debe suponer que SAPS50UM-10 sea magnético.

La separación magnética es apropiada sólo cuando la especificación del producto confirma explícitamente que las microesferas contienen un componente magnético.

Microscopía, imágenes y detección de microfluidos.

Microscopía óptica

Las partículas de 50 µm generalmente se pueden observar mediante microscopía óptica estándar.

Los usos potenciales incluyen:

• Evaluación de la morfología de partículas.

• Inspección agregada

• conteo de partículas

• Visualización de unión de superficies

• Imágenes de interacción célula-partícula

• Confirmación de recuperación de partículas.

• Observación de distribución de tamaño

Microscopía de fluorescencia

Cuando las partículas llevan un indicador fluorescente, un tinte interno o un objetivo marcado con fluorescencia, se puede utilizar la microscopía de fluorescencia para evaluar:

• Señal de superficie

• Uniformidad de unión

• Partículas positivas y negativas.

• Localización de reporteros

• Interacciones célula-partícula

• Poblaciones de partículas multiplex

Microscopía confocal

Las imágenes confocales pueden respaldar el análisis tridimensional de la fluorescencia asociada a la superficie y ayudar a distinguir la señal unida a microesferas de la fluorescencia circundante.

Imágenes automatizadas

Debido a que las partículas son relativamente grandes, se puede utilizar un software de análisis de imágenes automatizado para cuantificar:

• Número de partícula

• Diámetro de partícula

• Intensidad de fluorescencia

• Porcentaje de partículas positivas

• Nivel agregado

• Distribución de señales de superficie

• Eventos de contacto celular

Detección de microfluidos

Antes de utilizar SAPS50UM-10 en un dispositivo de microfluidos, confirme que:

• Los canales son lo suficientemente anchos.

• Las constricciones pueden pasar las partículas.

• Las válvulas y conectores son compatibles.

• Los filtros no retendrán las partículas involuntariamente.

• El caudal no promoverá el bloqueo.

• La concentración de partículas es apropiada.

• La agregación está adecuadamente controlada

Compatibilidad con citometría de flujo

SAPS50UM-10 puede evaluarse mediante citometría de flujo solo cuando los fluidos del instrumento están diseñados para manejar partículas de este tamaño.

Antes de realizar la prueba, confirme:

• Diámetro del tubo de muestra

• Dimensiones de la celda de flujo

• Tamaño de boquilla u orificio

• Vía fluídica más estrecha

• Dimensiones de la sonda de muestra

• Concentración de partículas

• Nivel agregado

• Caudal de muestra

• Rango del detector de dispersión

Es posible que algunos citómetros de flujo convencionales no sean adecuados para partículas de 50 µm.

Las partículas deberían permanecer sustancialmente más pequeñas que el camino de flujo interno más estrecho.

La citometría de flujo por imágenes, la citometría de partículas grandes, la microscopía automatizada o el análisis de partículas basado en imágenes pueden ser más apropiados para determinadas aplicaciones.

Control de bloqueo y vinculación no específica

La adsorción no específica puede aumentar el fondo y reducir la sensibilidad del ensayo.

Las posibles causas incluyen:

• Bloqueo inadecuado

• Reactivo de bloqueo incompatible

• Exceso de ligando de captura

• Exceso de reactivo de detección

• Lavado insuficiente

• Anticuerpos agregados

• Componentes de muestra hidrofóbicos

• Alta concentración de proteína en la muestra

• Agregación de partículas

• Interferencia muestra-matriz

Analizar múltiples reactivos de bloqueo

Compare varias formulaciones de bloqueo.

El bloqueador preferido debe reducir la señal de la muestra negativa manteniendo al mismo tiempo la unión específica al objetivo.

Optimizar la carga del ligando de captura

La carga máxima de ligando no siempre proporciona el máximo rendimiento del ensayo.

Una carga excesiva puede:

• Causar apiñamiento estérico

• Reducir la accesibilidad del objetivo

• Aumentar el consumo de reactivos

• Incrementar las interacciones no específicas

• Aumentar la variación del ensayo.

Valorar el reactivo de detección

El exceso de reactivo de detección puede aumentar el fondo.

Evalúe varias concentraciones de indicadores utilizando controles positivos y negativos.

Optimizar el lavado

Evaluar:

• Número de lavados

• Composición del tampón de lavado

• Volumen de lavado

• Método de separación

• Método de mezcla

• Sobrenadante residual

• Recuperación de partículas

Evalúe los detergentes con cuidado

Una pequeña cantidad de detergente compatible puede mejorar la dispersión de las partículas y reducir la adsorción no específica.

El exceso de detergente puede interferir con las interacciones de biomoléculas o la unión de reporteros.

Comparación de microesferas de estreptavidina de 50 µm, 30 µm y 20 µm

Elija SAPS50UM-10 cuando:

• Se prefiere la superficie máxima por partícula individual.

• La microscopía directa es un método de detección primario.

• Se requiere análisis de partículas individuales.

• La manipulación de partículas manual o automatizada es importante.

• Se necesita una identificación clara basada en el tamaño.

• Se está estudiando la captura de microfluidos de partículas grandes.

• Está prevista una investigación sobre la aglutinación de partículas grandes.

• Se requiere una fuerte confirmación visual de la recuperación de partículas.

Elija SAPS30UM-10 cuando:

• Se requiere una microesfera grande con una transferencia algo más fácil y compatibilidad fluídica.

• La microscopía y la investigación del rango de tamaño de las células siguen siendo importantes.

• Se desea un mayor número de partículas por unidad de masa.

• Se prefiere una sedimentación inferior a las partículas de 50 µm.

Elija SAPS20UM-10 cuando:

• Se requiere una plataforma más pequeña para partículas grandes.

• Se necesitan más partículas por unidad de masa.

• El análisis basado en el flujo es más importante.

• Se prefiere una sedimentación más baja.

• Se requiere una compatibilidad de microfluidos más sencilla.

El tamaño de partícula final debe seleccionarse según la aplicación biológica, la plataforma de detección, el número de partículas requerido, la carga de ligando, el comportamiento de sedimentación, el método de recuperación y la compatibilidad del instrumento.

Control de calidad y consistencia de lotes

Los posibles parámetros de control de calidad para SAPS50UM-10 incluyen:

• Diámetro medio de partículas

• Rango de tamaño de partículas

• Distribución del tamaño de partículas

• Coeficiente de variación del tamaño de partícula.

• Morfología de partículas

• Aspecto de la suspensión

• Contenido de sólidos

• Consistencia del recubrimiento de estreptavidina

• Capacidad de unión a biotina

• Concentración de número de partículas

• Dispersión de partículas

• Nivel agregado

• Tasa de liquidación

• Rendimiento de redispersión

• Recuperación de partículas

• Señal de fondo

• Unión no específica

• control microbiano

• Integridad del embalaje

• Estabilidad de almacenamiento

• Consistencia lote a lote

Pruebas de tamaño de partículas

La caracterización del tamaño de las partículas puede incluir:

• Diámetro medio

• Diámetro mediano

• Tamaño mínimo y máximo

• Distribución de tallas

• Coeficiente de variación

• Resultados de microscopía

• Análisis instrumental del tamaño de partículas.

El método de medición debe indicarse al informar los datos de tamaño.

Capacidad de unión a biotina

La capacidad de unión debe medirse utilizando una molécula de prueba biotinilada definida.

El resultado puede verse afectado por:

• Tipo de sonda

• tamaño molecular

• Nivel de biotinilación

• Pureza de la sonda

• Condiciones de incubación

• Composición del búfer

• Procedimiento de lavado

• Método de detección

• Base de cálculo

Los resultados de la capacidad de unión obtenidos utilizando diferentes métodos o sondas de prueba pueden no ser directamente comparables.

Control de calidad funcional

Un ensayo de control de calidad funcional puede evaluar:

• Unión de una sonda biotinilada estandarizada.

• Porcentaje de partículas positivas

• Distribución de señal

• Separación de fondo

• Recuperación de partículas

• Porcentaje agregado

• Repetibilidad

• Redispersión después del almacenamiento.

Consistencia de llenado y muestreo

Dado que las partículas de 50 µm pueden sedimentar rápidamente, los procedimientos de llenado deben validarse cuidadosamente.

Los controles potenciales incluyen:

• Mezclado suave y continuo durante el llenado

• Pruebas de recuento de partículas al principio, a la mitad y al final del llenado.

• Verificación del contenido de sólidos

• Inspección visual de homogeneidad.

• Comparación del recuento de partículas entre contenedores.

• Pruebas de redispersión repetidas.

Documentación específica del lote

La documentación disponible puede incluir:

• Certificado de Análisis

• Especificación del producto

• Resultados del tamaño de partícula

• Resultados del contenido de sólidos

• Resultados de capacidad de unión

• Resultados del recuento de partículas

• Ficha de datos de seguridad

• Instrucciones de manejo

• Recomendaciones de almacenamiento

• Número de lote

• fecha de producción

Las pruebas de liberación requeridas y los criterios de aceptación deben acordarse antes de la fabricación a granel.

Fabricación a granel y personalización

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. suministra microesferas de estreptavidina SHBC para investigación de laboratorio, desarrollo piloto, producción repetida y compra empresarial a granel.

Evaluación de muestras de investigación

Las muestras pueden evaluarse para:

• Morfología de partículas

• Distribución del tamaño de partículas

• Dispersión de partículas

• Actividad de estreptavidina

• Carga de ligando biotinilado

• Unión no específica

• Recuperación de partículas

• Viabilidad del ensayo

• Compatibilidad con microscopía

• Compatibilidad con microfluidos

• Sedimentación y redispersión

• Consistencia del muestreo

Desarrollo a escala piloto

Los lotes piloto pueden admitir:

• Optimización del ensayo

• Verificación de capacidad vinculante

• Estudios de estabilidad

• Selección de búfer

• Evaluación conservante

• Evaluación de embalaje

• Desarrollo del proceso de llenado

• Desarrollo de control de calidad

• Verificación del cliente

• Transferencia de proceso

Producción a granel

La fabricación a granel se puede organizar una vez que se hayan confirmado los requisitos técnicos y las especificaciones de lanzamiento.

Por favor proporcione:

• Cantidad requerida

• Demanda anual esperada

• Tamaño de paquete preferido

• Aplicación biológica prevista

• Diámetro de partícula requerido

• Contenido de sólidos requerido

• Capacidad de encuadernación requerida

• Concentración de número de partículas requerida

• Tipo de ligando biotinilado

• Requisitos de búfer

• Restricciones conservantes

• Requisitos de control de calidad

• Requisitos de documentación

• Calendario de entrega

• Destino de entrega

Diámetro de partícula personalizado

Se pueden discutir tamaños de partículas alternativos según la aplicación y la viabilidad de fabricación.

Carga personalizada de estreptavidina

Se pueden evaluar los niveles de recubrimiento de estreptavidina o los objetivos de capacidad de unión específicos del proyecto.

Fluorescencia personalizada o codificación de colores

Para la investigación de imágenes y multiplex, se pueden discutir las microesferas de estreptavidina codificadas con fluorescencia o visiblemente coloreadas.

Las opciones potenciales pueden incluir:

• Longitudes de onda de excitación alternativas

• Longitudes de onda de emisión alternativas

• Diferentes colores de fluorescencia

• Múltiples niveles de intensidad de fluorescencia

• Colores de partículas visibles

• Sistemas de codificación específicos del cliente

Buffer y concentración personalizados

Se pueden evaluar concentraciones de sólidos, formulaciones de tampón, tensioactivos, sistemas conservantes y formatos de envasado alternativos.

Suministro de OEM y marcas privadas

Los formatos de cooperación disponibles pueden incluir:

• Embalaje OEM

• Etiquetas específicas del cliente

• Suministro de marca privada

• Números de catálogo específicos del cliente

• Suministro de materia prima a granel

• Documentos técnicos personalizados

• Especificaciones de lanzamiento específicas del cliente

Recomendaciones de almacenamiento y estabilidad

Siga la etiqueta del producto final, la ficha técnica y el Certificado de análisis específico del lote.

Las recomendaciones generales incluyen:

• Almacenar en las condiciones de refrigeración especificadas.

• No congelar a menos que se haya validado la estabilidad de congelación y descongelación.

• Mantener el recipiente bien cerrado.

• Guarde el vial en posición vertical.

• Mantener las microesferas en líquido.

• Mezclar bien antes de tomar la muestra.

• Mantenga una mezcla suave durante la dispensación repetida.

• Utilice puntas de pipeta limpias y de calibre ancho y tubos de baja unión.

• Evite la contaminación de la suspensión original.

• No permita que las partículas se sequen.

• Evite repetidos cambios de temperatura innecesarios.

• No devuelva el material diluido al contenedor original.

• Registre el número de lote del producto y la fecha de apertura.

Los protocolos establecidos de los proveedores recomiendan de manera similar mantener las partículas de estreptavidina en líquido, evitar el secado y evitar la congelación porque estas condiciones pueden reducir el rendimiento o causar una agregación irreversible.

Asentamiento y Resuspensión

Debido a que SAPS50UM-10 contiene partículas grandes, puede ocurrir una sedimentación rápida.

Antes de usar:

1. Deje que el vial alcance la temperatura de manipulación recomendada.

2. Invierta o gire suavemente el vial.

3. Aplique agitación controlada cuando sea necesario.

4. Confirmar que la suspensión sea homogénea.

5. Mezclar inmediatamente antes del muestreo.

6. Continúe mezclando suavemente durante la dispensación repetida.

7. Inspeccione si hay agregados irreversibles.

El asentamiento reversible no necesariamente indica falla del producto.

Evite el secado

No permita que el pellet de partículas se seque durante el lavado.

El secado puede causar:

• Agregación irreversible

• Actividad reducida de la estreptavidina.

• Difícil redispersión

• Mayor fondo de ensayo

• Recuperación reducida de partículas

Evite la congelación

La congelación puede causar:

• Agregación de partículas

• Cambios en la estabilidad de la suspensión.

• Actividad reducida de la estreptavidina.

• Recuperación reducida de partículas

• Mayor variabilidad del ensayo.

Evaluar la estabilidad del reactivo preparado

Las microesferas bloqueadas y cargadas con ligando biotinilado pueden tener una estabilidad diferente a la de la suspensión SAPS50UM-10 original.

Evalúe el reactivo preparado final en las condiciones previstas de almacenamiento, transporte y funcionamiento.

Guía de solución de problemas

Unión débil del ligando biotinilado

Posibles causas:

• Biotina libre en el buffer

• Reactivo de biotinilación residual

• Biotinilación de ligando bajo

• Grupos de biotina inaccesibles

• Concentración de ligando insuficiente

• Tiempo de incubación inadecuado

• Estreptavidina inactiva

• Búfer incompatible

• Sedimentación de partículas durante la incubación.

Acciones recomendadas:

• Elimina la biotina libre.

• Purificar el ligando biotinilado.

• Verifique el nivel de biotinilación.

• Evalúe un espaciador adecuado.

• Mantenga una mezcla suave y continua.

• Aumente gradualmente la concentración de ligando.

• Pruebe un ligando biotinilado de control positivo.

Señal de fondo alta

Posibles causas:

• Bloqueo insuficiente

• Exceso de reactivo de detección

• Lavado inadecuado

• Adsorción de reportero no específico

• Interferencia muestra-matriz

• Anticuerpos agregados

• Exceso de carga de ligando de captura

Acciones recomendadas:

• Compara diferentes bloqueadores.

• Valorar el reactivo de detección.

• Optimizar el lavado.

• Retire los agregados de proteínas cuando sea apropiado.

• Diluir la muestra.

• Reducir la carga del ligando de captura.

Números de partículas desiguales entre alícuotas

Posibles causas:

• Sedimentación rápida de partículas

• Mezcla de caldo inadecuada

• Retraso entre la mezcla y el muestreo.

• Abertura estrecha para punta de pipeta

• Técnica de transferencia inconsistente

• Retención de partículas en la punta.

Acciones recomendadas:

• Mezclar antes de cada alícuota.

• Utilice una punta de pipeta de calibre ancho.

• Mantenga una mezcla lenta durante la dispensación repetida.

• Estandarizar el intervalo de muestreo.

• Verifique el número de partículas durante el llenado.

Agregación de partículas

Posibles causas:

• Búfer incompatible

• pH extremo

• Alta fuerza iónica

• Congelación

• El secado

• Carga excesiva de ligando

• Estabilizador insuficiente

• Contaminación microbiana

Acciones recomendadas:

• Evaluar la compatibilidad del buffer.

• Evite congelar y secar.

• Optimice la carga de ligandos.

• Utilice una mezcla suave y controlada.

• Revisar los requisitos de estabilizadores y conservantes.

Baja recuperación de partículas

Posibles causas:

• Pérdida durante la eliminación del sobrenadante.

• Adhesión a tubos

• Filtro o tamaño de malla incorrecto

• Sedimentación incompleta

• Transferencia incompleta

• Lavado excesivo

• Retención de partículas dentro de las puntas de pipeta

Acciones recomendadas:

• Utilice tubos de baja unión.

• Optimice las condiciones de separación.

• Validar el filtro o malla.

• Mezclar antes de cada transferencia.

• Reduzca los pasos de lavado innecesarios.

• Dejar un volumen residual controlado encima del pellet.

Bloqueo de microfluidos

Posibles causas:

• Las dimensiones del canal son demasiado pequeñas.

• Agregación de partículas

• Concentración excesiva de partículas

• Conectores estrechos

• Válvulas o filtros incompatibles

• Lavado insuficiente del dispositivo

Acciones recomendadas:

• Confirme la dimensión mínima del canal.

• Reducir la concentración de partículas.

• Retire los agregados antes de cargar.

• Aumente las dimensiones de la ruta de flujo.

• Primero valide el dispositivo completo con partículas simples de 50 µm.

Preguntas frecuentes

¿Qué es SAPS50UM-10?

SAPS50UM-10 es una suspensión de microesferas recubiertas de estreptavidina de 50 µm suministrada con un 1 % de sólidos para capturar biomoléculas biotiniladas en investigaciones biológicas y ensayos basados ​​en partículas.

¿Qué es la marca SHBC?

SHBC es la marca de microesferas y materiales biotecnológicos de Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.

¿Cuál es el diámetro nominal de partícula?

El diámetro nominal de las partículas es de 50 µm.

El diámetro medido, el rango de tamaño y la distribución del tamaño de las partículas deben confirmarse utilizando la documentación específica del lote.

¿Cuál es el contenido de sólidos?

SAPS50UM-10 se suministra con 1% de sólidos.

¿Son magnéticas las microesferas SAPS50UM-10?

No se debe asumir que el producto es magnético a menos que las propiedades magnéticas se indiquen específicamente en la especificación técnica.

Para la separación magnética, seleccione un producto descrito específicamente como perlas magnéticas de estreptavidina.

¿Las microesferas son fluorescentes?

No se debe asumir que el producto estándar SAPS50UM-10 contiene un tinte fluorescente interno a menos que se indique específicamente la fluorescencia.

Se puede considerar una versión codificada con fluorescencia como producto personalizado.

¿Qué moléculas pueden unirse a SAPS50UM-10?

La superficie de estreptavidina puede capturar anticuerpos, antígenos, proteínas, péptidos, enzimas, receptores, lectinas, oligonucleótidos, ADN, ARN, aptámeros y otras moléculas que contienen biotina biotinilados.

¿Puede un anticuerpo no modificado unirse directamente?

Un anticuerpo no modificado no se unirá específicamente a través de la interacción estreptavidina-biotina a menos que esté biotinilado o conectado a través de otro reactivo compatible.

¿Se requiere la activación de EDC/NHS?

Normalmente no se requiere la activación de EDC/NHS cuando se carga una molécula biotinilada en microesferas recubiertas de estreptavidina.

¿Cuál es la capacidad de unión a biotina?

La capacidad de unión debe confirmarse utilizando la especificación del producto o el Certificado de Análisis específico del lote.

No debe estimarse únicamente a partir del contenido de sólidos o del diámetro de las partículas.

¿Por qué elegir microesferas de 50 µm?

Las partículas de 50 µm proporcionan una gran superficie por partícula individual, excelente visibilidad microscópica, fácil identificación de partículas individuales y dimensiones adecuadas para la investigación biológica y de microfluidos de partículas grandes.

¿Las partículas de 50 µm proporcionan más superficie total?

Cada partícula de 50 µm tiene más superficie que cada partícula más pequeña.

Sin embargo, las partículas más pequeñas normalmente proporcionan más partículas y una mayor superficie colectiva por unidad de masa.

¿Por qué las partículas se depositan rápidamente?

Las partículas grandes generalmente se sedimentan más rápidamente que las microesferas más pequeñas.

Mezcle el stock inmediatamente antes del muestreo y mantenga una mezcla suave durante la incubación y la dispensación repetida.

¿Se puede utilizar SAPS50UM-10 para microscopía?

Sí. El tamaño de partícula es adecuado para evaluación mediante microscopía óptica, de fluorescencia y confocal.

¿Se puede utilizar SAPS50UM-10 en citometría de flujo?

Solo se puede utilizar cuando los fluidos, la boquilla, la celda de flujo, la sonda de muestra y las vías internas del citómetro de flujo sean compatibles con partículas de 50 µm.

¿Se puede utilizar SAPS50UM-10 como modelo de celda?

El diámetro de 50 µm puede ser relevante para la investigación de células grandes, esferoides, embriones o partículas biológicas sintéticas seleccionadas.

Las microesferas sintéticas no reproducen todas las propiedades ópticas, mecánicas, químicas o biológicas de las células vivas.

¿Se pueden utilizar las microesferas para inmunoensayos?

Sí. Se puede inmovilizar un anticuerpo de captura biotinilado en la partícula, seguido de la captura del objetivo y la detección con un indicador compatible.

¿Se pueden utilizar las partículas para la captura de ácidos nucleicos?

Sí. Se pueden evaluar oligonucleótidos biotinilados, ADN, ARN, productos de PCR y aptámeros para determinar su inmovilización y captura del objetivo.

¿Se puede utilizar SAPS50UM-10 en ensayos multiplex?

Sí, siempre que la población de 50 µm pueda distinguirse de otras poblaciones de microesferas.

Se puede considerar la codificación de tamaño, la codificación de fluorescencia o la codificación de colores visibles.

¿Cómo se deben lavar las partículas?

El método de lavado depende del material de las partículas, la densidad, el tampón, el volumen y la recuperación requerida.

Se puede evaluar la centrifugación, filtración, recuperación basada en malla o sedimentación controlada.

¿Cómo se puede reducir la unión no específica?

Optimice el reactivo de bloqueo, la concentración del ligando de captura, la concentración del reactivo de detección, las condiciones de lavado, el nivel de detergente, la dilución de la muestra y el tiempo de incubación.

¿Se pueden utilizar tampones que contengan biotina libre?

La biotina libre puede ocupar sitios de unión de estreptavidina y, en general, debe evitarse durante la carga del ligando de captura.

¿Se debe diluir SAPS50UM-10 antes de su uso?

Sí. Prepare una concentración de trabajo de acuerdo con el número de partículas, el volumen de reacción y el método de detección requeridos.

¿Se puede congelar SAPS50UM-10?

Por lo general, no se recomienda la congelación a menos que se haya validado específicamente la estabilidad de congelación y descongelación.

¿Se puede personalizar la concentración?

Se pueden discutir concentraciones de sólidos alternativas de acuerdo con los requisitos del proyecto y la viabilidad de fabricación.

¿Se puede personalizar la capacidad de encuadernación?

Se pueden evaluar los niveles de recubrimiento de estreptavidina o los objetivos de capacidad de unión específicos del proyecto.

¿Se pueden producir microesferas fluorescentes de estreptavidina de 50 µm?

Se pueden analizar microesferas de estreptavidina de 50 µm codificadas con fluorescencia o de colores visibles para proyectos calificados de imágenes, microfluidos y multiplex.

¿Está disponible la producción a granel?

Sí. Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. admite muestras, lotes piloto, pedidos repetidos, proyectos OEM y fabricación a granel.

¿Qué información se requiere para una cotización?

Por favor proporcione:

• Número de catálogo SAPS50UM-10

• Cantidad requerida

• Volumen de compras anual esperado

• Tamaño de paquete preferido

• Aplicación biológica prevista

• Tipo de ligando biotinilado

• Capacidad de encuadernación requerida

• Partículas requeridas por prueba

• Método de detección

• Restricciones de búfer

• Restricciones conservantes

• Requisitos de control de calidad

• Requisitos de documentación

• Destino de entrega

Solicite una muestra o una cotización al por mayor

Las microesferas de estreptavidina SHBC SAPS50UM-10 de 50 µm proporcionan una plataforma de partículas grande y claramente identificable para inmovilizar anticuerpos, proteínas, péptidos, enzimas, receptores, lectinas, oligonucleótidos, ADN, ARN, aptámeros y otras moléculas marcadas con biotina.

El producto es adecuado para:

• Desarrollo de ensayos biológicos.

• Inmunoensayos basados ​​en perlas

• Inmovilización de anticuerpos

• Investigación de interacción de proteínas.

• Captura de ácido nucleico

• Ensayos de hibridación

• Investigación sobre la interacción célula-partícula.

• Microscopía e imágenes de alto contenido.

• Investigación de microfluidos

• Aglutinación de partículas

• Sistemas multiplex codificados por tamaño

• Biosensores basados ​​en partículas

• Análisis de partículas individuales

• Fabricación de reactivos de investigación.

SAPS50UM-10 proporciona:

• Diámetro nominal de partícula de 50 µm

• Superficie funcional de estreptavidina

• suspensión al 1% de sólidos

• Gran superficie por partícula individual

• Excelente visibilidad microscópica

• Compatibilidad con biomoléculas biotiniladas

• Suministro de muestras y lotes piloto.

• Capacidad de fabricación a granel

• OEM y soporte de desarrollo personalizado

Para la evaluación de muestras o la compra al por mayor, proporcione la aplicación prevista, la cantidad requerida, el ligando biotinilado, la capacidad de unión deseada, la plataforma de detección, los requisitos de embalaje y las especificaciones de control de calidad.

Nombre del producto: Microesferas de estreptavidina de 50 µm
Número de catálogo: SAPS50UM-10
Marca: SHBC
Fabricante: Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.
Diámetro nominal de partícula: 50 µm
Modificación de superficie: Estreptavidina
Contenido de sólidos: 1 %
Aplicación principal: Investigación biológica y ensayos basados ​​en partículas
Capacidad de suministro: Muestras, lotes piloto y producción a granel
Uso previsto: Solo para uso en investigación. No para uso diagnóstico o terapéutico.