Microsfere di streptavidina 50um SAPS50UM-10 1%

Microsfere di streptavidina da 50 µm per la ricerca biologica

Le microsfere di streptavidina SHBC SAPS50UM-10 sono microsfere con superficie funzionalizzata da 50 µm sviluppate per l'immobilizzazione e la cattura di anticorpi biotinilati, antigeni, proteine, peptidi, enzimi, recettori, oligonucleotidi, DNA, RNA, aptameri, lectine e altre molecole marcate con biotina.

Il prodotto viene fornito come sospensione di solidi all'1% ed è progettato per lo sviluppo di test biologici, l'immobilizzazione di biomolecole, la ricerca sull'interazione di affinità, la microscopia, gli studi sull'interazione cellula-particella, la cattura dell'acido nucleico, la microfluidica, la ricerca sull'agglutinazione delle particelle, il rilevamento basato su imaging e la produzione di reagenti di ricerca.

Il diametro delle particelle di 50 µm fornisce un'ampia superficie su ogni singola microsfera e rende le particelle facili da identificare con un'adeguata microscopia ottica o a fluorescenza. La grande dimensione delle particelle è particolarmente rilevante per i progetti che richiedono l'analisi delle singole particelle, la manipolazione delle particelle visibili, test con codifica dimensionale, modelli di particelle con intervallo di dimensioni cellulari, trasporto microfluidico o rilevamento biologico basato su imaging.

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. supporta la valutazione di campioni di laboratorio, lo sviluppo su scala pilota, la produzione ripetuta, la cooperazione OEM, progetti con marchio privato e fornitura all'ingrosso aziendale.

Risposta rapida sul prodotto

SAPS50UM-10 è una sospensione di microsfere rivestite di streptavidina da 50 µm fornita all'1% di solidi. La sua superficie funzionale streptavidina lega le biomolecole biotinilate per l'immobilizzazione di anticorpi e proteine, la cattura di acidi nucleici, test biologici, microscopia, ricerca microfluidica, studi di interazione cellula-particella, agglutinazione di particelle e rilevamento basato su imaging.

Caratteristiche salienti del prodotto

• Nome del prodotto: microsfere di streptavidina da 50 µm

• Numero di catalogo: SAPS50UM-10

• Marca: SHBC

• Produttore: Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.

• Diametro nominale delle particelle: 50 µm

• Modificazione della superficie: streptavidina

• Contenuto solido: 1%

• Principio legante: affinità streptavidina-biotina

• Forma fisica: Sospensione acquosa di microsfere

• Applicazione principale: ricerca biologica e saggi basati su particelle

• Capacità di fornitura: campioni, lotti pilota e produzione in serie

• Personalizzazione: Disponibile secondo fattibilità tecnica

• Destinazione d'uso: Solo per uso di ricerca

Cosa sono le microsfere di streptavidina SAPS50UM-10?

SAPS50UM-10 è costituito da microsfere da 50 µm con streptavidina immobilizzata sulla superficie delle particelle.

Il rivestimento di streptavidina fornisce siti di legame per le molecole biotinilate. I ricercatori possono attaccare un anticorpo, un antigene, una proteina, un peptide, una sonda di acido nucleico, un recettore, un ligando, una lectina, un aptamero o un'altra biomolecola biotinilati selezionati senza attivare direttamente la superficie della microsfera con la chimica EDC/NHS.

Dopo che una molecola di cattura è stata immobilizzata, le particelle funzionalizzate possono essere utilizzate come fase solida per:

• Cattura del bersaglio

• Immobilizzazione degli anticorpi

• Analisi dell'interazione delle proteine

• Ibridazione degli acidi nucleici

• Studi di legame con la superficie cellulare

• Saggi basati sulla microscopia

• Biosensori basati sull'imaging

• Agglutinazione delle particelle

• Ricerca microfluidica

• Esperimenti di cattura di affinità

• Analisi delle singole particelle

• Ricerca multiplex con codifica dimensionale

Le potenziali molecole di cattura biotinilate includono:

• Anticorpi monoclonali

• Anticorpi policlonali

• Anticorpi ricombinanti

• Frammenti di anticorpi

• Antigeni

• Proteine ​​ricombinanti

• Peptidi

• Enzimi

• Recettori

• Lectine

• Citochine

• Fattori di crescita

• Sonde oligonucleotidiche

• Sonde del DNA

• Sonde di RNA

• Prodotti PCR

• Aptameri

• Piccole molecole biotinilate

Le particelle da 50 µm forniscono un'area superficiale significativamente maggiore per singola microsfera rispetto alle particelle più piccole. Alla stessa concentrazione di massa, tuttavia, forniscono meno particelle individuali e una superficie collettiva inferiore rispetto alle microsfere molto più piccole realizzate con lo stesso materiale.

SAPS50UM-10 è quindi particolarmente adatto quando il progetto dà priorità a:

• Ampia area superficiale per singola particella

• Osservazione microscopica diretta

• Misurazione del segnale di singola particella

• Manipolazione manuale o automatizzata delle particelle

• Modellazione delle particelle con intervallo di dimensioni cellulari

• Differenziazione delle particelle in base alla dimensione

• Saggi biologici basati su imaging

• Trasporto e intrappolamento microfluidico

• Agglutinazione delle particelle

• Conferma visiva del recupero delle particelle

SAPS50UM-10 viene fornito come materia prima di ricerca. Non deve essere automaticamente rappresentato come un reagente diagnostico finito, uno standard certificato di dimensione delle particelle, una sfera per conteggio assoluto, una sfera magnetica o una microsfera fluorescente interna a meno che queste proprietà non siano specificatamente incluse nelle specifiche del prodotto finale.

Specifiche tecniche SAPS50UM-10

I seguenti parametri devono essere confermati utilizzando la specifica tecnica finale o il certificato di analisi specifico del lotto:

• Materiale particellare

• Diametro medio delle particelle

• Intervallo di dimensioni delle particelle

• Distribuzione granulometrica

• Coefficiente di variazione della dimensione delle particelle

• Morfologia delle particelle

• Densità delle particelle

• Livello di rivestimento della streptavidina

• Capacità di legare la biotina

• Concentrazione del numero di particelle

• Numero di particelle per milligrammo

• Tampone di sospensione

• pH tampone

• Stabilizzante o tensioattivo

• Conservante

• Metodo di lavaggio consigliato

• Condizioni di recupero consigliate

• Dimensioni del pacchetto

• Durata di conservazione

• Condizioni di conservazione

La capacità legante la biotina deve essere riportata insieme a:

• Tipo di molecola di prova biotinilata

• Peso molecolare della molecola in esame

• Numero di gruppi di biotina per molecola

• Composizione del buffer di legame

• Tempo di incubazione

• Temperatura di incubazione

• Procedura di lavaggio

• Metodo di rilevamento

• Base di calcolo

• Risultato del test specifico del lotto

La capacità legante non deve essere stimata solo in base al contenuto di solidi dell'1% o al diametro nominale delle particelle.

Come funziona il legame streptavidina-biotina

La streptavidina è una proteina legante la biotina che consente l'attacco di molecole biotinilate alla superficie della microsfera.

Quando un ligando di cattura biotinilato viene miscelato con SAPS50UM-10, il gruppo biotina si lega ai siti streptavidina disponibili sulla particella.

La struttura generale può essere rappresentata come:

Superficie della microsfera – Streptavidina – Biotina – Molecola di cattura

Per un test sandwich basato su anticorpi, la struttura può essere:

Microsfera – Streptavidina – Anticorpo di cattura biotinilato – Antigene bersaglio – Anticorpo di rilevamento

L'anticorpo di rilevamento può portare un'etichetta fluorescente, enzimatica, colorimetrica, chemiluminescente o altra etichetta misurabile.

Vantaggi dell'immobilizzazione con streptavidina-biotina

• L'attivazione diretta dell'EDC/NHS normalmente non è necessaria quando si carica un ligando biotinilato.

• Una piattaforma di microsfere può essere utilizzata con molte molecole biotinilate diverse.

• Anticorpi, proteine, peptidi, DNA, RNA, oligonucleotidi e aptameri possono essere immobilizzati.

• Il caricamento del ligando può essere condotto in condizioni acquose relativamente blande.

• La molecola di cattura può essere modificata senza riprogettare la particella base.

• Il caricamento del ligando può essere ottimizzato separatamente dal rilevamento del target.

• È possibile utilizzare diversi sistemi reporter con la stessa piattaforma a microsfere.

• La piattaforma può supportare la ricerca a bersaglio singolo e multiplex.

• Le particelle possono essere adattate all'imaging, alla microscopia, ai test microfluidici e su piastre.

Fattori che influenzano le prestazioni di rilegatura

Il caricamento finale del ligando e le prestazioni del test possono essere influenzati da:

• Densità del rivestimento di streptavidina

• Attività della streptavidina

• Numero di gruppi biotina per ligando

• Posizione dei gruppi biotina

• Accessibilità alla biotina

• Lunghezza del distanziatore

• Dimensione molecolare del ligando

• Purezza del ligando

• Aggregazione dei ligandi

• Affollamento superficiale

• Composizione del tampone

• Concentrazione di sale

• Tempo di incubazione

• Temperatura di incubazione

• Metodo di miscelazione

• Decantazione delle particelle

• Efficienza di lavaggio

La biotina libera o i reagenti biotinilati non reagiti possono occupare i siti disponibili per la streptavidina. Le biomolecole biotinilate dovrebbero quindi essere adeguatamente purificate quando la biotina libera residua può interferire con l'immobilizzazione.

Perché scegliere le microsfere di streptavidina da 50 µm?

Ampia superficie per singola particella

Una microsfera da 50 µm fornisce una superficie fisica sostanzialmente maggiore su ciascuna particella rispetto a una microsfera da 30 µm, 20 µm, 10 µm o 5 µm.

Questo può essere utile quando:

• Su ciascuna particella è necessaria una grande quantità di ligando di cattura

• Si desidera una forte generazione di segnale per singola particella

• La fluorescenza superficiale sarà misurata mediante microscopia

• È necessaria l'analisi delle singole particelle

• È in fase di studio la modellazione della superficie delle particelle

• Verrà osservato il legame localizzato delle biomolecole

• È necessario un modello di particelle sintetiche di grandi dimensioni

Una particella individuale più grande non fornisce necessariamente una maggiore superficie totale per milligrammo. Le particelle più piccole normalmente forniscono molte più particelle alla stessa concentrazione di massa.

Eccellente visibilità microscopica

Il diametro di 50 µm rende le singole particelle facili da identificare utilizzando adeguati sistemi di imaging ottico.

I potenziali metodi di imaging includono:

• Microscopia in campo chiaro

• Microscopia a contrasto di fase

• Microscopia a fluorescenza

• Microscopia confocale

• Imaging automatizzato ad alto contenuto

• Citometria a flusso per immagini

• Analisi digitale delle particelle

La microscopia può essere utilizzata per valutare:

• Morfologia delle particelle

• Fluorescenza associata alla superficie

• Distribuzione dei ligandi

• Aggregazione delle particelle

• Interazione cellula-particella

• Recupero delle particelle

• Differenziazione basata sulle dimensioni

• Movimento microfluidico

• Agglutinazione delle particelle

Adatto per l'analisi di singole particelle

Le grandi dimensioni consentono di trattare ciascuna particella come una superficie di reazione separata o un'unità analitica.

Le potenziali direzioni di ricerca includono:

• Misurazione della fluorescenza di singole particelle

• Analisi della variazione da particella a particella

• Uniformità di legame superficiale

• Imaging di singole particelle

• Classificazione automatizzata delle particelle

• Conteggio digitale delle particelle

• Classificazione positiva/negativa basata su immagini

Rilevante per i modelli di celle di grandi dimensioni

Il diametro di 50 µm rientra nell'intervallo dimensionale di alcune cellule di grandi dimensioni, aggregati cellulari, embrioni, sferoidi, strutture biologiche e modelli cellulari sintetici.

SAPS50UM-10 può essere valutato per:

• Trasporto di particelle di grandi dimensioni

• Studi di contatto cellula-particella

• Test su modelli cellulari microfluidici

• Cattura di particelle in dispositivi di elaborazione cellulare

• Sviluppo di sistemi di imaging

• Modelli di particelle biologiche sintetiche

• Ricerca sulla movimentazione meccanica

Le microsfere sintetiche non riproducono tutte le proprietà ottiche, meccaniche, chimiche o biologiche delle cellule viventi. È richiesta la convalida specifica dell'applicazione.

Chiara identificazione basata sulle dimensioni

La grande dimensione delle particelle consente di differenziare SAPS50UM-10 da molte popolazioni di microsfere, cellule, detriti e particelle di fondo più piccole.

Questo è utile per:

• Saggi multiplex con codifica delle dimensioni

• Saggi basati su immagini

• Tracciamento delle particelle

• Ordinamento microfluidico

• Analisi dell'agglutinazione

• Controlli dei processi interni

• Ricerca multipopolazione

Manipolazione manuale pratica

Le singole particelle da 50 µm possono essere manipolate utilizzando strumenti di laboratorio adeguati, come:

• Puntali per pipette a diametro largo

• Micropipette

• Microcapillari

• Micromanipolatori

• Sistemi di raccolta delle particelle

• Reti o filtri cellulari

• Strutture di intrappolamento microfluidico

Caratteristiche e vantaggi principali

Diametro nominale delle particelle 50 µm

La dimensione delle particelle di grandi dimensioni supporta la microscopia, l'analisi delle singole particelle, l'identificazione basata sulle dimensioni, la manipolazione microfluidica e la ricerca biologica sulle particelle di grandi dimensioni.

Superficie funzionale streptavidina

La superficie cattura anticorpi biotinilati, proteine, peptidi, enzimi, recettori, oligonucleotidi, DNA, RNA, aptameri, lectine e altre molecole contenenti biotina.

Sospensione di solidi all'1%.

SAPS50UM-10 viene fornito all'1% di solidi e può essere diluito in base al numero di particelle, al volume di reazione, alla capacità legante e al metodo di rilevamento richiesti.

Immobilizzazione semplice del ligando

Le molecole di cattura biotinilate possono essere attaccate senza l'attivazione diretta della carbodiimmide della superficie della microsfera da parte dell'utente finale.

Grande superficie per particella

Ciascuna microsfera fornisce una superficie fisica relativamente ampia per l'immobilizzazione del ligando di cattura e la generazione del segnale.

Forte compatibilità delle immagini

La dimensione delle particelle è adatta per la ricerca di imaging ottico, a fluorescenza, confocale e automatizzata.

Piattaforma di test biologici modulare

La stessa particella base può essere combinata con diverse molecole di cattura biotinilate per diversi obiettivi di ricerca.

Fornitura da campione a massa

SHBC supporta la valutazione di laboratorio, la produzione pilota, la produzione ripetuta, la cooperazione OEM e l'acquisto di grandi quantità da parte delle imprese.

Opzioni di sviluppo personalizzato

Per progetti qualificati è possibile discutere la dimensione delle particelle, il carico di streptavidina, la capacità legante, il contenuto di solidi, il tampone, il conservante, la codifica della fluorescenza, il colore visibile, l'imballaggio e le specifiche di rilascio.

Applicazioni di ricerca biologica

Sviluppo di test immunologici basati su microsfere

SAPS50UM-10 può essere utilizzato come fase solida nei test di ricerca sandwich, indiretti, competitivi o di agglutinazione di particelle.

Un tipico test sandwich può includere:

1. Immobilizzazione di un anticorpo di cattura biotinilato.

2. Blocco della superficie rimanente delle particelle.

3. Incubazione con il campione da testare.

4. Cattura dell'analita bersaglio.

5. Aggiunta di un anticorpo di rilevamento marcato.

6. Rimozione dei reagenti non legati.

7. Misura del segnale associato alla particella.

I potenziali obiettivi della ricerca includono:

• Anticorpi

• Antigeni

• Citochine

• Ormoni

• Fattori di crescita

• Enzimi

• Biomarcatori

• Proteine ​​associate ai patogeni

• Analiti per la sicurezza alimentare

• Obiettivi ambientali

• Obiettivi della ricerca veterinaria

• Composti di ricerca

Saggi vincolanti competitivi

I formati competitivi potranno essere valutati per:

• Piccole molecole

• Apteni

• Peptidi

• Droghe

• Tossine

• Ormoni

• Metaboliti

• Target con siti di legame accessibili limitati

La relazione tra la concentrazione dell'analita e il segnale misurato dipende dalla progettazione finale del test.

Immobilizzazione e screening degli anticorpi

Gli anticorpi biotinilati possono essere immobilizzati per:

• Rilevazione dell'antigene

• Screening degli anticorpi

• Screening dell'ibridoma

• Studi sulla specificità degli anticorpi

• Valutazione della reattività crociata

• Confronto di affinità

• Selezione degli anticorpi di cattura

• Test di fattibilità del test

• Ricerca sui biomarcatori

Ricerca sull'interazione di proteine ​​e peptidi

Proteine ​​o peptidi biotinilati possono essere attaccati per studiare:

• Interazioni antigene-anticorpo

• Interazioni proteina-proteina

• Legame recettore-ligando

• Riconoscimento degli epitopi

• Legame enzima-substrato

• Screening degli inibitori

• Legame farmaco-candidato

• Confronto dell'affinità proteica

Cattura e ibridazione degli acidi nucleici

Oligonucleotidi biotinilati, DNA, RNA, prodotti della PCR e aptameri possono essere attaccati a SAPS50UM-10.

Le potenziali applicazioni includono:

• Acquisizione specifica della sequenza

• Sviluppo di test di ibridazione

• Cattura del prodotto PCR

• Ricerca sulla genotipizzazione

• Ricerca sul rilevamento di mutazioni

• Rilevamento basato su aptameri

• Analisi dell'interazione DNA-proteina

• Ricerca sul legame dell'RNA

• Sviluppo di test molecolari

Ricerca sull'interazione cellula-particella

Se rivestito con un anticorpo, recettore, ligando, lectina o peptide biotinilato appropriato, SAPS50UM-10 può essere valutato per l'interazione con le cellule.

Le potenziali direzioni di ricerca includono:

• Riconoscimento dei recettori sulla superficie cellulare

• Adesione cellulare

• Legame cellulare mediato da ligando

• Interazione immuno-cellula

• Contatto cellulare con particelle di grandi dimensioni

• Ricerca sull'aggregazione cellulare

• Posizionamento cellulare mediato da particelle

• Ricerca su particelle sintetiche presentanti l'antigene

• Imaging delle interfacce cellula-particella

Le variabili importanti includono:

• Densità del ligando di cattura

• Rapporto particella-cella

• Concentrazione cellulare

• Tempo di incubazione

• Temperatura di incubazione

• Metodo di miscelazione

• Condizioni di lavaggio

• Vitalità cellulare

• Aggregazione delle particelle

• Attaccamento non specifico

Microscopia e imaging ad alto contenuto

Le microsfere da 50 µm possono supportare:

• Imaging in campo chiaro

• Imaging a contrasto di fase

• Imaging a fluorescenza

• Microscopia confocale

• Proiezione ad alto contenuto

• Conteggio automatizzato delle particelle

• Analisi di legame superficiale

• Classificazione delle particelle

• Imaging dell'interazione cellula-particella

• Analisi digitale delle particelle positive/negative

Ricerca microfluidica

SAPS50UM-10 può essere valutato in:

• Studi sul trasporto di particelle

• Ricerca sul flusso dei microcanali

• Separazione basata sulle dimensioni

• Intrappolamento delle particelle

• Focalizzazione idrodinamica

• Posizionamento delle particelle

• Imaging in dispositivi microfluidici

• Manipolazione di modelli cellulari di grandi dimensioni

• Test delle prestazioni del dispositivo

Il canale, il connettore, la valvola, il filtro e il percorso del flusso più stretti devono essere compatibili con particelle da 50 µm.

Ricerca sull'agglutinazione

Le microsfere di streptavidina di grandi dimensioni possono essere utilizzate nei metodi di ricerca in cui il legame di una molecola bersaglio o ponte produce clustering di particelle misurabili.

L'agglutinazione può essere analizzata mediante:

• Microscopia ottica

• Immagini automatizzate

• Metodi di diffusione della luce

• Modelli di sedimentazione

• Cambiamenti nel conteggio delle particelle

• Algoritmi di analisi delle immagini

La relazione tra aggregazione e concentrazione dell'analita deve essere ottimizzata sperimentalmente.

Biosensori basati su particelle

SAPS50UM-10 può fungere da trasportatore visibile in fase solida in:

• Biosensori ottici

• Biosensori basati sull'imaging

• Saggi di particelle fluorescenti

• Saggi di particelle legate a enzimi

• Biosensori microfluidici

• Studi di legame superficiale

• Saggi di particelle digitali

Ricerca multiplex con codice dimensione

La popolazione di particelle da 50 µm può essere combinata con microsfere più piccole per creare popolazioni di test distinguibili per dimensione.

Ciascuna popolazione di particelle può potenzialmente trasportare un diverso ligando di cattura biotinilato.

Il progetto multiplex finale dovrebbe considerare:

• Separazione granulometrica

• Specificità del ligando

• Canale del segnale

• Recupero delle particelle

• Aggregazione

• Risoluzione dell'immagine

• Compatibilità dello strumento

Biomolecole biotinilate compatibili

Anticorpi biotinilati

I potenziali formati di anticorpi includono:

• IgG a lunghezza intera

• IgM

• Frammenti favolosi

• Frammenti F(ab′)₂

• Anticorpi ricombinanti

• Frammenti variabili a catena singola

• Anticorpi a dominio singolo

• Formati di anticorpi ingegnerizzati

L’attività anticorpale dopo l’immobilizzazione dipende da:

• Chimica della biotinilazione

• Numero di gruppi di biotina

• Posizione dei gruppi di biotina

• Lunghezza del distanziatore

• Purezza delle proteine

• Aggregazione di anticorpi

• Carico superficiale

• Condizioni di conservazione

Proteine ​​biotinilate

I potenziali esempi includono:

• Antigeni ricombinanti

• Enzimi

• Citochine

• Fattori di crescita

• Recettori

• Lectine

• Legame delle proteine

• Proteine ​​di fusione

• Standard proteici

Peptidi biotinilati

Le potenziali applicazioni includono:

• Mappatura degli epitopi

• Screening degli anticorpi

• Studi sul legame dei recettori

• Ricerca sugli enzimi

• Studi sull'interazione delle proteine

• Saggi di screening farmacologico

Un distanziatore adatto tra la biotina e il peptide può migliorare l'accessibilità molecolare.

Acidi nucleici biotinilati

I formati compatibili possono includere:

• DNA a filamento singolo

• DNA a doppio filamento

• RNA

• Sonde oligonucleotidiche

• Ampliconi della PCR

• Aptameri

• Sonde di acido nucleico modificate

• Cattura sequenze

Piccole molecole biotinilate

Piccoli composti biotinilati possono essere immobilizzati quando i loro gruppi biotinici rimangono accessibili alla superficie della streptavidina.

Durante lo sviluppo del metodo è necessario considerare la progettazione del distanziatore e l'orientamento molecolare.

Protocollo di caricamento del ligando biotinilato consigliato

La procedura seguente costituisce un punto di partenza generale per lo sviluppo. Le condizioni finali dovrebbero essere ottimizzate per la biomolecola, il materiale particellare e l'applicazione effettivi.

1. Risospendere SAPS50UM-10

Lasciare che la sospensione raggiunga la temperatura di manipolazione consigliata.

Miscelare mediante inversione delicata, rotazione lenta, agitazione o vortex controllato fino a quando la sospensione risulta omogenea.

Poiché le particelle da 50 µm possono depositarsi rapidamente, mescolare il materiale immediatamente prima di ogni fase di campionamento.

Durante le dispensazioni ripetute, mantenere una miscelazione delicata o rimescolare la sospensione prima di ciascuna aliquota.

2. Calcolare la quantità di particelle richiesta

Determinare la quantità richiesta in base a:

• Numero di test

• Numero di particelle richieste per test

• Superficie richiesta per reazione

• Volume di reazione

• Concentrazione target prevista

• Capacità legante specifica del lotto

• Numero di fasi di lavaggio

• Perdita di elaborazione prevista

Non calcolare la capacità di caricamento dei ligandi solo dal contenuto di solidi.

3. Trasferire le microsfere

Trasferire il volume richiesto in una provetta o in un recipiente di lavorazione pulito e a basso legame.

Utilizzare una punta per pipetta a diametro largo o un altro dispositivo di trasferimento con un'apertura adatta per particelle da 50 µm.

Evita suggerimenti stretti che potrebbero:

• Trattenere le particelle

• Limitare il movimento delle particelle

• Producono numeri di particelle incoerenti

• Promuovere l'aggregazione

• Ridurre la precisione del trasferimento

4. Lavare le microsfere

Lavare le particelle con un tampone compatibile con streptavidina e il ligando biotinilato selezionato.

Evitare la biotina libera durante l'immobilizzazione del ligando.

I potenziali metodi di ripristino includono:

• Centrifugazione

• Filtrazione su membrana

• Recupero con rete o filtro cellulare

• Sedimentazione controllata

• Raccolta manuale delle particelle

• Altri metodi di separazione solido-liquido validati

Il metodo deve essere stabilito utilizzando il materiale effettivo delle particelle, la densità, il tampone, il volume di lavorazione e il recupero richiesto.

5. Preparare il ligando biotinilato

Diluire la biomolecola selezionata in un tampone di legame compatibile.

Revisione:

• Concentrazione del ligando

• Livello di biotinilazione

• Purezza molecolare

• Livello aggregato

• Contenuto di biotina libera

• Reagente di biotinilazione residua

• Additivi tampone

• Stabilità delle proteine

• Stabilità degli acidi nucleici

6. Aggiungere il ligando

Unire le particelle lavate con il ligando biotinilato.

Utilizzare una rotazione delicata, un'oscillazione o una miscelazione controllata per mantenere le particelle esposte in modo uniforme al ligando.

Evitare eccessivi vortex, formazione di schiuma e condizioni meccaniche che potrebbero danneggiare la biomolecola.

7. Ottimizza l'incubazione

Valutare:

• Concentrazione di particelle

• Concentrazione del ligando

• Rapporto ligando-particella

• Tempo di incubazione

• Temperatura di incubazione

• pH tampone

• Concentrazione di sale

• Velocità di miscelazione

• Volume di reazione

La miscelazione delicata e continua è particolarmente importante per le particelle da 50 µm poiché la sedimentazione può causare un caricamento irregolare del ligando.

8. Rimuovere il ligando non legato

Separare e lavare le particelle per rimuovere le molecole biotinilate non legate.

Un lavaggio insufficiente può aumentare il fondo, mentre un lavaggio eccessivo può ridurre il recupero delle particelle.

9. Blocca la superficie delle particelle

Incubare le microsfere caricate con il ligando con un reagente bloccante compatibile con l'applicazione.

I potenziali bloccanti includono:

• Albumina sierica bovina

• Caseina

• Gelatina di pesce

• Immunoglobulina non immune

• Polimeri bloccanti sintetici

• Tamponi commerciali per il blocco delle particelle

Il bloccante dovrebbe ridurre il segnale del campione negativo senza ridurre sostanzialmente il legame specifico del bersaglio.

10. Risospendere le microsfere preparate

Risospendere le particelle rivestite e bloccate in un test adatto o in un tampone di conservazione.

Valutare:

• Dispersione delle particelle

• Ritenzione del ligando

• Attività vincolante

• Legame non specifico

• Recupero delle particelle

• Comportamento di assestamento

• Prestazioni di ridispersione

• Stabilità a breve termine

• Stabilità a lungo termine

• Stabilità microbica

Flusso di lavoro consigliato per i test biologici

1. Preparare le microsfere di cattura

Caricare SAPS50UM-10 con la molecola di cattura biotinilata selezionata.

Lavare e bloccare le particelle prima dell'analisi del campione.

2. Preparare i controlli sperimentali

I controlli consigliati possono includere:

• Vuoto del tampone del test

• Microsfere di streptavidina senza ligando di cattura

• Particelle caricate con ligando di cattura senza bersaglio

• Campione negativo

• Campione positivo

• Controllo riservato al reporter

• Controllo degli isotipi

• Controllo del ligando biotinilato non rilevante

• Controllo target senza etichetta

• Controlli monocolore quando viene utilizzata la fluorescenza

3. Aggiungere il campione di prova

Unire le microsfere preparate al campione.

Ottimizzare:

• Volume del campione

• Diluizione del campione

• Concentrazione di particelle

• Particelle per reazione

• Intervallo di concentrazione target

• Tempo di incubazione

• Temperatura di incubazione

• Metodo di miscelazione

• Matrice del campione

Mantenere una miscelazione delicata durante l'incubazione.

4. Lavare le Particelle

Rimuovere i componenti del campione non legati mantenendo un recupero accettabile.

Documentazione:

• Numero di lavaggi

• Composizione del tampone di lavaggio

• Volume di lavaggio

• Metodo di separazione

• Volume residuo del surnatante

• Procedura di miscelazione

• Recupero delle particelle

5. Aggiungere il reagente di rilevamento

Aggiungere un reporter fluorescente, enzimatico, colorimetrico, chemiluminescente o altro reporter compatibile.

Il sistema di rilevamento selezionato deve corrispondere alla piattaforma analitica prevista.

6. Incubare e lavare

Ottimizza la concentrazione del reporter e il tempo di incubazione.

Rimuovere il reagente di rilevamento non legato per ridurre lo sfondo.

7. Risospendere per il rilevamento

Risospendere le particelle in un tampone di rilevamento pulito.

Miscelare immediatamente prima di trasferire il campione sul vetrino del microscopio, sulla camera di imaging, sulla micropiastra, sul dispositivo microfluidico o su un altro strumento.

8. Misurare il segnale

I potenziali risultati analitici includono:

• Fluorescenza media delle particelle

• Fluorescenza mediana delle particelle

• Percentuale di particelle positive

• Distribuzione della fluorescenza superficiale

• Rapporto segnale/fondo

• Attività enzimatica associata alle particelle

• Intensità del colore

• Livello di agglutinazione

• Cambiamenti nel conteggio delle particelle

• Curva dose-risposta

• Precisione del dosaggio

• Recupero

• Specificità

• Reattività crociata

9. Analizzare i risultati

Stabilire soglie positive e negative utilizzando controlli appropriati.

Non definire un risultato positivo utilizzando solo il campione del test.

Manipolazione, miscelazione e campionamento di microsfere da 50 µm

Sedimentazione rapida delle particelle

Le microsfere da 50 µm possono depositarsi rapidamente quando si interrompe la miscelazione.

La sedimentazione può causare:

• Concentrazione di particelle disuguale

• Variazione tra aliquote

• Caricamento incoerente del ligando

• Diversi numeri di particelle tra le reazioni

• Esposizione irregolare a campioni o giornalisti

• Segnali di analisi variabili

• Ridotta riproducibilità dei lotti

Mantenimento di una sospensione uniforme

I metodi di miscelazione adatti possono includere:

• Inversione delicata

• Rotazione end-over-end

• Miscelazione orbitale lenta

• Dondolo delicato

• Vortexatura controllata prima del campionamento

• Agitazione meccanica lenta

• Miscelazione intermittente con pipetta a diametro largo

Evitare una miscelazione vigorosa che produca schiuma, danneggi le proteine ​​o provochi collisioni e aggregazioni di particelle.

Campionamento coerente

Per erogazioni ripetute:

1. Mescolare accuratamente il brodo.

2. Aspirare tempestivamente il volume richiesto.

3. Erogare il volume completo.

4. Remix prima dell'aliquota successiva.

5. Utilizzare lo stesso metodo di trasferimento per tutti i campioni.

6. Minimizza i ritardi tra il mixaggio e il campionamento.

Per il riempimento pilota o in massa, è necessario convalidare la miscelazione lenta e continua per mantenere una distribuzione uniforme delle particelle.

Puntali per pipette a foro largo

Le punte a foro largo o tagliate possono migliorare il trasferimento di particelle di grandi dimensioni.

L'apertura dovrebbe essere sufficientemente più grande del diametro delle particelle per ridurre:

• Ritenzione delle particelle

• Taglio

• Consegna incoerente delle particelle

• Blocco della punta

• Variazione del campionamento

Conteggio delle particelle

Quando il numero di particelle per test è importante, utilizzare un metodo di conteggio appropriato anziché fare affidamento solo sul volume della sospensione.

I possibili approcci includono:

• Conteggio microscopico

• Immagini automatizzate

• Contatori di particelle

• Calcolo gravimetrico supportato dalla dimensione e dalla densità delle particelle misurate

• Dati sul numero di particelle specifici del lotto

Metodi di recupero e lavaggio delle particelle

Centrifugazione

La centrifugazione può essere utilizzata quando la composizione e la densità delle particelle consentono un recupero efficiente.

La forza centrifuga effettiva minima e il tempo devono essere determinati sperimentalmente.

Le condizioni selezionate dovrebbero fornire:

• Recupero accettabile

• Un pellet di particelle gestibile

• Ridispersione facile

• Aggregazione minima

• Danni limitati alle biomolecole immobilizzate

Filtrazione

Per il recupero o il lavaggio è possibile utilizzare una membrana, una rete o un filtro cellulare con dimensioni dei pori adeguate.

Confermare:

• Ritenzione delle particelle

• Basso adsorbimento di biomolecole

• Recupero accettabile

• Facile rilascio delle particelle

• Compatibilità con il volume di lavorazione

• Deformazione minima delle particelle

Sedimentazione controllata

La sedimentazione naturale o accelerata può essere presa in considerazione in flussi di lavoro selezionati.

La sedimentazione può ridurre lo stress meccanico ma può richiedere tempi di lavorazione più lunghi e un'attenta rimozione del surnatante.

Manipolazione manuale delle particelle

Per i progetti di microscopia e di singola particella, le singole microsfere possono essere raccolte utilizzando:

• Micropipette a diametro largo

• Microcapillari

• Sistemi di micromanipolazione

• Strumenti per la raccolta delle particelle

• Dispositivi basati su mesh

Separazione magnetica

SAPS50UM-10 non dovrebbe essere considerato magnetico.

La separazione magnetica è appropriata solo quando la specifica del prodotto conferma esplicitamente che le microsfere contengono un componente magnetico.

Microscopia, imaging e rilevamento microfluidico

Microscopia ottica

Le particelle da 50 µm possono generalmente essere osservate utilizzando la microscopia ottica standard.

I potenziali usi includono:

• Valutazione della morfologia delle particelle

• Ispezione aggregata

• Conteggio delle particelle

• Visualizzazione del legame di superficie

• Imaging dell'interazione cellula-particella

• Conferma del recupero delle particelle

• Osservazione della distribuzione dimensionale

Microscopia a fluorescenza

Quando le particelle trasportano un reporter fluorescente, un colorante interno o un bersaglio marcato in modo fluorescente, la microscopia a fluorescenza può essere utilizzata per valutare:

• Segnale di superficie

• Uniformità vincolante

• Particelle positive e negative

• Localizzazione del giornalista

• Interazioni cellula-particella

• Popolazioni di particelle multiplex

Microscopia confocale

L'imaging confocale può supportare l'analisi tridimensionale della fluorescenza associata alla superficie e aiutare a distinguere il segnale legato alla microsfera dalla fluorescenza circostante.

Imaging automatizzato

Poiché le particelle sono relativamente grandi, è possibile utilizzare un software automatizzato di analisi delle immagini per quantificare:

• Numero di particelle

• Diametro delle particelle

• Intensità della fluorescenza

• Percentuale di particelle positive

• Livello aggregato

• Distribuzione del segnale di superficie

• Eventi di contatto cellulare

Rilevazione microfluidica

Prima di utilizzare SAPS50UM-10 in un dispositivo microfluidico, verificare che:

• I canali sono sufficientemente ampi

• Le costrizioni possono far passare le particelle

• Valvole e connettori sono compatibili

• I filtri non tratterranno le particelle involontariamente

• La portata non favorirà il blocco

• La concentrazione delle particelle è appropriata

• L'aggregazione è adeguatamente controllata

Compatibilità con citometria a flusso

SAPS50UM-10 può essere valutato mediante citometria a flusso solo quando la fluidica dello strumento è progettata per gestire particelle di queste dimensioni.

Prima del test, confermare:

• Diametro del tubo del campione

• Dimensioni della cella a flusso

• Dimensioni dell'ugello o dell'orifizio

• Via fluidica più stretta

• Dimensioni della sonda campione

• Concentrazione di particelle

• Livello aggregato

• Portata del campione

• Portata del rilevatore di dispersione

Alcuni citometri a flusso convenzionali potrebbero non essere adatti per particelle da 50 µm.

Le particelle dovrebbero rimanere sostanzialmente più piccole del percorso di flusso interno più stretto.

La citometria a flusso per immagini, la citometria a particelle di grandi dimensioni, la microscopia automatizzata o l'analisi delle particelle basata su immagini possono essere più appropriate per alcune applicazioni.

Controllo bloccante e vincolante non specifico

L'adsorbimento non specifico può aumentare il fondo e ridurre la sensibilità del test.

Le potenziali cause includono:

• Blocco inadeguato

• Reagente bloccante incompatibile

• Legante di cattura in eccesso

• Reagente di rilevamento in eccesso

• Lavaggio insufficiente

• Anticorpi aggregati

• Componenti del campione idrofobo

• Elevata concentrazione di proteine ​​nel campione

• Aggregazione delle particelle

• Interferenza matrice-campione

Esaminare più reagenti bloccanti

Confronta diverse formulazioni bloccanti.

Il bloccante preferito dovrebbe ridurre il segnale del campione negativo mantenendo il legame specifico del bersaglio.

Ottimizza il caricamento del ligando di cattura

Il caricamento massimo del ligando non sempre fornisce le massime prestazioni del test.

Un carico eccessivo può:

• Causa affollamento sterico

• Ridurre l'accessibilità del target

• Aumentare il consumo di reagente

• Aumentare le interazioni non specifiche

• Aumentare la variazione del test

Titolare il reagente di rilevazione

Un eccesso di reagente di rilevamento può aumentare lo sfondo.

Valutare diverse concentrazioni reporter utilizzando controlli positivi e negativi.

Ottimizza il lavaggio

Valutare:

• Numero di lavaggi

• Composizione del tampone di lavaggio

• Volume di lavaggio

• Metodo di separazione

• Metodo di miscelazione

• Supernatante residuo

• Recupero delle particelle

Valutare attentamente i detersivi

Una piccola quantità di detergente compatibile può migliorare la dispersione delle particelle e ridurre l'adsorbimento non specifico.

Una quantità eccessiva di detergente può interferire con le interazioni delle biomolecole o con il legame del reporter.

Confronto tra microsfere di streptavidina da 50 µm, 30 µm e 20 µm

Scegli SAPS50UM-10 quando:

• È preferibile la superficie massima per singola particella.

• La microscopia diretta è un metodo di rilevamento primario.

• È necessaria l'analisi delle singole particelle.

• La manipolazione manuale o automatizzata delle particelle è importante.

• È necessaria una chiara identificazione basata sulle dimensioni.

• È in fase di studio l'intrappolamento microfluidico di particelle di grandi dimensioni.

• È prevista la ricerca sull'agglutinazione di particelle di grandi dimensioni.

• È necessaria una forte conferma visiva del recupero delle particelle.

Scegli SAPS30UM-10 quando:

• È necessaria una microsfera grande con un trasferimento leggermente più semplice e compatibilità fluidica.

• La microscopia e la ricerca sull’intervallo dimensionale delle cellule rimangono importanti.

• È desiderato un numero di particelle maggiore per unità di massa.

• È preferibile una sedimentazione inferiore a particelle da 50 µm.

Scegli SAPS20UM-10 quando:

• È necessaria una piattaforma per particelle di grandi dimensioni più piccola.

• Sono necessarie più particelle per unità di massa.

• L’analisi basata sul flusso è più importante.

• È preferibile una sedimentazione inferiore.

• È necessaria una compatibilità microfluidica più semplice.

La dimensione finale delle particelle deve essere selezionata in base all'applicazione biologica, alla piattaforma di rilevamento, al numero di particelle richiesto, al carico del ligando, al comportamento di sedimentazione, al metodo di recupero e alla compatibilità dello strumento.

Controllo di qualità e coerenza dei lotti

I potenziali parametri di controllo qualità per SAPS50UM-10 includono:

• Diametro medio delle particelle

• Intervallo di dimensioni delle particelle

• Distribuzione granulometrica

• Coefficiente di variazione della dimensione delle particelle

• Morfologia delle particelle

• Aspetto della sospensione

• Contenuto di solidi

• Consistenza del rivestimento di streptavidina

• Capacità di legare la biotina

• Concentrazione del numero di particelle

• Dispersione delle particelle

• Livello aggregato

• Tasso di liquidazione

• Prestazioni di ridispersione

• Recupero delle particelle

• Segnale di fondo

• Legame non specifico

• Controllo microbico

• Integrità dell'imballaggio

• Stabilità di stoccaggio

• Coerenza da lotto a lotto

Test sulla dimensione delle particelle

La caratterizzazione delle dimensioni delle particelle può includere:

• Diametro medio

• Diametro mediano

• Dimensioni minime e massime

• Distribuzione delle dimensioni

• Coefficiente di variazione

• Risultati della microscopia

• Analisi granulometrica strumentale

Il metodo di misurazione dovrebbe essere indicato quando si riportano i dati sulle dimensioni.

Capacità di legare la biotina

La capacità di legame deve essere misurata utilizzando una molecola di prova biotinilata definita.

Il risultato può essere influenzato da:

• Tipo di sonda

• Dimensione molecolare

• Livello di biotinilazione

• Purezza della sonda

• Condizioni di incubazione

• Composizione del tampone

• Procedura di lavaggio

• Metodo di rilevamento

• Base di calcolo

I risultati della capacità di legame ottenuti utilizzando sonde o metodi di test diversi potrebbero non essere direttamente confrontabili.

Controllo Qualità Funzionale

Un test QC funzionale può valutare:

• Legame di una sonda biotinilata standardizzata

• Percentuale di particelle positive

• Distribuzione del segnale

• Separazione dello sfondo

• Recupero delle particelle

• Percentuale aggregata

• Ripetibilità

• Ridispersione dopo lo stoccaggio

Riempimento e consistenza del campionamento

Poiché le particelle da 50 µm possono depositarsi rapidamente, le procedure di riempimento devono essere convalidate attentamente.

I potenziali controlli includono:

• Miscelazione continua e delicata durante il riempimento

• Test di conteggio delle particelle all'inizio, a metà e alla fine del riempimento

• Verifica del contenuto solido

• Ispezione visiva dell'omogeneità

• Confronto del conteggio delle particelle tra contenitori

• Test di ridispersione ripetuti

Documentazione specifica del lotto

La documentazione disponibile può includere:

• Certificato di analisi

• Specifiche del prodotto

• Risultati relativi alla dimensione delle particelle

• Risultati del contenuto di solidi

• Risultati sulla capacità di legame

• Risultati del conteggio delle particelle

• Scheda dati di sicurezza

• Istruzioni per la manipolazione

• Consigli per la conservazione

• Numero di lotto

• Data di produzione

I test di rilascio richiesti e i criteri di accettazione dovrebbero essere concordati prima della produzione in serie.

Produzione in serie e personalizzazione

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. fornisce microsfere di streptavidina SHBC per la ricerca di laboratorio, lo sviluppo pilota, la produzione ripetuta e l'acquisto di grandi quantità da parte delle imprese.

Valutazione del campione di ricerca

I campioni possono essere valutati per:

• Morfologia delle particelle

• Distribuzione granulometrica

• Dispersione delle particelle

• Attività della streptavidina

• Caricamento del ligando biotinilato

• Legame non specifico

• Recupero delle particelle

• Fattibilità del test

• Compatibilità microscopica

• Compatibilità microfluidica

• Decantazione e ridispersione

• Consistenza del campionamento

Sviluppo su scala pilota

I lotti pilota possono supportare:

• Ottimizzazione del test

• Verifica della capacità legante

• Studi sulla stabilità

• Selezione del buffer

• Valutazione conservativa

• Valutazione dell'imballaggio

• Sviluppo del processo di riempimento

• Sviluppo del controllo qualità

• Verifica del cliente

• Trasferimento del processo

Produzione in serie

La produzione in serie può essere organizzata dopo la conferma dei requisiti tecnici e delle specifiche di rilascio.

Si prega di fornire:

• Quantità richiesta

• Domanda annua prevista

• Dimensione del pacchetto preferita

• Applicazione biologica prevista

• Diametro delle particelle richiesto

• Contenuto di solidi richiesto

• Capacità vincolante richiesta

• Concentrazione del numero di particelle richiesta

• Tipo di ligando biotinilato

• Requisiti di buffer

• Restrizioni conservative

• Requisiti di controllo della qualità

• Requisiti di documentazione

• Programma di consegna

• Destinazione di consegna

Diametro delle particelle personalizzato

È possibile discutere dimensioni alternative delle particelle in base all'applicazione e alla fattibilità della produzione.

Caricamento personalizzato della streptavidina

Possono essere valutati i livelli di rivestimento di streptavidina o gli obiettivi di capacità legante specifici del progetto.

Fluorescenza personalizzata o codifica a colori

Per l'imaging e la ricerca multiplex, si possono discutere microsfere di streptavidina codificate in modo fluorescente o visibilmente colorate.

Le opzioni potenziali possono includere:

• Lunghezze d'onda di eccitazione alternative

• Lunghezze d'onda di emissione alternative

• Diversi colori di fluorescenza

• Livelli multipli di intensità di fluorescenza

• Colori delle particelle visibili

• Sistemi di codifica specifici del cliente

Tampone e concentrazione personalizzati

Possono essere valutate concentrazioni di solidi, formulazioni tampone, tensioattivi, sistemi conservanti e formati di imballaggio alternativi.

Fornitura OEM e con marchio privato

I formati di cooperazione disponibili possono includere:

• Confezione OEM

• Etichette specifiche per il cliente

• Fornitura a marchio privato

• Numeri di catalogo specifici del cliente

• Fornitura di materie prime sfuse

• Documenti tecnici personalizzati

• Specifiche di rilascio specifiche del cliente

Raccomandazioni per la conservazione e la stabilità

Segui l'etichetta del prodotto finale, la scheda tecnica e il certificato di analisi specifico del lotto.

Le raccomandazioni generali includono:

• Conservare nelle condizioni refrigerate specificate.

• Non congelare a meno che non sia stata convalidata la stabilità al congelamento-scongelamento.

• Tenere il contenitore ben chiuso.

• Conservare la fiala in posizione verticale.

• Mantenere le microsfere nel liquido.

• Mescolare accuratamente prima del campionamento.

• Mantenere una miscelazione delicata durante le erogazioni ripetute.

• Utilizzare puntali per pipette puliti e con diametro largo e provette a basso legame.

• Evitare la contaminazione della sospensione originale.

• Non lasciare asciugare le particelle.

• Evitare ripetuti sbalzi di temperatura non necessari.

• Non restituire il materiale diluito al contenitore originale.

• Registrare il numero di lotto del prodotto e la data di apertura.

Allo stesso modo, i protocolli dei fornitori consolidati raccomandano di mantenere le particelle di streptavidina in un liquido, evitando l'essiccazione e il congelamento perché queste condizioni possono ridurre le prestazioni o causare aggregazione irreversibile.

Decantazione e risospensione

Poiché SAPS50UM-10 contiene particelle di grandi dimensioni, la sedimentazione può avvenire rapidamente.

Prima dell'uso:

1. Lasciare che la fiala raggiunga la temperatura di manipolazione consigliata.

2. Capovolgere o ruotare delicatamente la fiala.

3. Applicare il vortex controllato quando necessario.

4. Confermare che la sospensione sia omogenea.

5. Mescolare immediatamente prima del campionamento.

6. Continuare a mescolare delicatamente durante le erogazioni ripetute.

7. Ispezionare gli aggregati irreversibili.

Un assestamento reversibile non indica necessariamente un guasto del prodotto.

Evitare l'essiccazione

Non lasciare asciugare il pellet di particelle durante il lavaggio.

L'essiccazione può causare:

• Aggregazione irreversibile

• Ridotta attività della streptavidina

• Ridispersione difficile

• Background del test aumentato

• Ridotto recupero di particelle

Evitare il congelamento

Il congelamento può causare:

• Aggregazione delle particelle

• Cambiamenti nella stabilità delle sospensioni

• Ridotta attività della streptavidina

• Ridotto recupero di particelle

• Maggiore variabilità del test

Valutare la stabilità del reagente preparato

Le microsfere bloccate e caricate con ligando biotinilato possono avere una stabilità diversa rispetto alla sospensione originale SAPS50UM-10.

Valutare il reagente finale preparato nelle condizioni di conservazione, trasporto e funzionamento previste.

Guida alla risoluzione dei problemi

Debole legame con il ligando biotinilato

Possibili cause:

• Biotina libera nel tampone

• Reagente di biotinilazione residua

• Bassa biotinilazione del ligando

• Gruppi di biotina inaccessibili

• Concentrazione di ligando insufficiente

• Tempo di incubazione inadeguato

• Streptavidina inattiva

• Buffer incompatibile

• Decantazione delle particelle durante l'incubazione

Azioni consigliate:

• Rimuovere la biotina libera.

• Purificare il ligando biotinilato.

• Verificare il livello di biotinilazione.

• Valutare un distanziale adatto.

• Mantenere una miscelazione continua e delicata.

• Aumentare gradualmente la concentrazione del ligando.

• Testare un ligando biotinilato di controllo positivo.

Segnale di fondo elevato

Possibili cause:

• Blocco insufficiente

• Reagente di rilevamento in eccesso

• Lavaggio inadeguato

• Adsorbimento reporter non specifico

• Interferenza matrice-campione

• Anticorpi aggregati

• Caricamento eccessivo del ligando di cattura

Azioni consigliate:

• Confronta diversi bloccanti.

• Titolare il reagente di rilevamento.

• Ottimizza il lavaggio.

• Rimuovere gli aggregati proteici quando appropriato.

• Diluire il campione.

• Ridurre il carico del ligando di cattura.

Numeri di particelle disuguali tra le aliquote

Possibili cause:

• Decantazione rapida delle particelle

• Miscelazione del brodo inadeguata

• Ritardo tra miscelazione e campionamento

• Apertura stretta del puntale della pipetta

• Tecnica di trasferimento incoerente

• Ritenzione delle particelle nella punta

Azioni consigliate:

• Mescolare prima di ogni aliquota.

• Utilizzare una punta per pipetta a diametro largo.

• Mantenere una miscelazione lenta durante le erogazioni ripetute.

• Standardizzare l'intervallo di campionamento.

• Verificare i numeri delle particelle durante il riempimento.

Aggregazione di particelle

Possibili cause:

• Buffer incompatibile

• pH estremo

• Elevata forza ionica

• Congelamento

• Essiccazione

• Carico eccessivo di ligandi

• Stabilizzatore insufficiente

• Contaminazione microbica

Azioni consigliate:

• Valutare la compatibilità del buffer.

• Evitare il congelamento e l'essiccazione.

• Ottimizza il caricamento dei ligandi.

• Utilizzare una miscelazione delicata e controllata.

• Esaminare i requisiti di stabilizzanti e conservanti.

Basso recupero di particelle

Possibili cause:

• Perdita durante la rimozione del surnatante

• Adesione ai tubi

• Filtro o dimensione mesh errati

• Sedimentazione incompleta

• Trasferimento incompleto

• Lavaggio eccessivo

• Ritenzione delle particelle all'interno dei puntali delle pipette

Azioni consigliate:

• Utilizzare provette a basso legame.

• Ottimizzare le condizioni di separazione.

• Convalidare il filtro o la mesh.

• Mescolare prima di ogni trasferimento.

• Riduci le fasi di lavaggio non necessarie.

• Lasciare un volume residuo controllato sopra il pellet.

Blocco microfluidico

Possibili cause:

• Le dimensioni del canale sono troppo piccole

• Aggregazione delle particelle

• Concentrazione eccessiva di particelle

• Connettori stretti

• Valvole o filtri incompatibili

• Lavaggio insufficiente del dispositivo

Azioni consigliate:

• Conferma la dimensione minima del canale.

• Ridurre la concentrazione di particelle.

• Rimuovere gli aggregati prima del caricamento.

• Aumentare le dimensioni del percorso del flusso.

• Convalidare prima il dispositivo completo con particelle semplici da 50 µm.

Domande frequenti

Cos'è SAPS50UM-10?

SAPS50UM-10 è una sospensione di microsfere rivestite con streptavidina da 50 µm fornita all'1% di solidi per catturare biomolecole biotinilate nella ricerca biologica e nei test basati su particelle.

Qual è il marchio SHBC?

SHBC è il marchio di microsfere e materiali biotecnologici di Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.

Qual è il diametro nominale delle particelle?

Il diametro nominale delle particelle è 50 µm.

Il diametro misurato, l'intervallo dimensionale e la distribuzione granulometrica devono essere confermati utilizzando la documentazione specifica del lotto.

Qual è il contenuto di solidi?

SAPS50UM-10 viene fornito all'1% di solidi.

Le microsfere SAPS50UM-10 sono magnetiche?

Non si deve presumere che il prodotto sia magnetico a meno che le proprietà magnetiche non siano specificatamente indicate nelle specifiche tecniche.

Per la separazione magnetica, selezionare un prodotto specificamente descritto come sfere magnetiche di streptavidina.

Le microsfere sono fluorescenti?

Non si deve presumere che il prodotto standard SAPS50UM-10 contenga un colorante fluorescente interno a meno che la fluorescenza non sia specificatamente indicata.

Una versione codificata in modo fluorescente può essere considerata un prodotto personalizzato.

Quali molecole possono legarsi a SAPS50UM-10?

La superficie della streptavidina può catturare anticorpi biotinilati, antigeni, proteine, peptidi, enzimi, recettori, lectine, oligonucleotidi, DNA, RNA, aptameri e altre molecole contenenti biotina.

Un anticorpo non modificato può legarsi direttamente?

Un anticorpo non modificato non si attaccherà specificamente attraverso l'interazione streptavidina-biotina a meno che non venga biotinilato o collegato tramite un altro reagente compatibile.

È necessaria l'attivazione dell'EDC/NHS?

L'attivazione dell'EDC/NHS normalmente non è necessaria quando si carica una molecola biotinilata su microsfere rivestite con streptavidina.

Qual è la capacità di legare la biotina?

La capacità legante deve essere confermata utilizzando la specifica del prodotto o il certificato di analisi specifico del lotto.

Non dovrebbe essere stimato solo dal contenuto di solidi o dal diametro delle particelle.

Perché scegliere le microsfere da 50μm?

Le particelle da 50 µm forniscono un'ampia superficie per singola particella, eccellente visibilità al microscopio, facile identificazione delle singole particelle e dimensioni adatte per la ricerca biologica e microfluidica su particelle di grandi dimensioni.

Le particelle da 50 µm forniscono una superficie totale maggiore?

Ogni particella da 50 µm ha un'area superficiale maggiore di ogni particella più piccola.

Tuttavia, le particelle più piccole normalmente forniscono più particelle e una maggiore area superficiale collettiva per unità di massa.

Perché le particelle si depositano rapidamente?

Le particelle grandi generalmente si depositano più rapidamente delle microsfere più piccole.

Mescolare il brodo immediatamente prima del campionamento e mantenere una miscelazione delicata durante l'incubazione e l'erogazione ripetuta.

SAPS50UM-10 può essere utilizzato per la microscopia?

SÌ. La dimensione delle particelle è adatta per la valutazione mediante microscopia ottica, a fluorescenza e confocale.

SAPS50UM-10 può essere utilizzato nella citometria a flusso?

Può essere utilizzato solo quando la fluidica del citometro a flusso, l'ugello, la cella a flusso, la sonda campione e i percorsi interni sono compatibili con particelle da 50 µm.

SAPS50UM-10 può essere utilizzato come modello di cella?

Il diametro di 50 µm può essere rilevante per la ricerca selezionata su grandi cellule, sferoidi, embrioni o particelle biologiche sintetiche.

Le microsfere sintetiche non riproducono tutte le proprietà ottiche, meccaniche, chimiche o biologiche delle cellule viventi.

Le microsfere possono essere utilizzate per i test immunologici?

SÌ. Un anticorpo di cattura biotinilato può essere immobilizzato sulla particella, seguito dalla cattura e dal rilevamento del bersaglio con un reporter compatibile.

Le particelle possono essere utilizzate per la cattura dell'acido nucleico?

SÌ. Oligonucleotidi biotinilati, DNA, RNA, prodotti della PCR e aptameri possono essere valutati per l'immobilizzazione e la cattura del bersaglio.

È possibile utilizzare SAPS50UM-10 nei test multiplex?

Sì, a condizione che la popolazione di 50 µm possa essere distinta dalle altre popolazioni di microsfere.

Si può prendere in considerazione la codifica delle dimensioni, la codifica della fluorescenza o la codifica del colore visibile.

Come devono essere lavate le particelle?

Il metodo di lavaggio dipende dal materiale delle particelle, dalla densità, dal tampone, dal volume e dal recupero richiesto.

È possibile valutare la centrifugazione, la filtrazione, il recupero su rete o la sedimentazione controllata.

Come si può ridurre il legame non specifico?

Ottimizza il reagente bloccante, la concentrazione del ligando di cattura, la concentrazione del reagente di rilevamento, le condizioni di lavaggio, il livello del detergente, la diluizione del campione e il tempo di incubazione.

È possibile utilizzare tamponi contenenti biotina libera?

La biotina libera può occupare siti di legame della streptavidina e dovrebbe generalmente essere evitata durante il caricamento del ligando di cattura.

SAPS50UM-10 deve essere diluito prima dell'uso?

SÌ. Preparare una concentrazione di lavoro in base al numero di particelle, al volume di reazione e al metodo di rilevamento richiesti.

SAPS50UM-10 può essere congelato?

Il congelamento generalmente non è raccomandato a meno che la stabilità al gelo-disgelo non sia stata specificatamente convalidata.

La concentrazione può essere personalizzata?

Concentrazioni di solidi alternative possono essere discusse in base ai requisiti del progetto e alla fattibilità della produzione.

La capacità di rilegatura può essere personalizzata?

Possono essere valutati i livelli di rivestimento di streptavidina o gli obiettivi di capacità legante specifici del progetto.

È possibile produrre microsfere fluorescenti di streptavidina da 50 µm?

Le microsfere di streptavidina da 50 µm codificate in modo fluorescente o visibilmente colorate possono essere discusse per progetti di imaging qualificati, microfluidici e multiplex.

È disponibile la produzione in serie?

SÌ. Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. supporta campioni, lotti pilota, ordini ripetuti, progetti OEM e produzione di massa.

Quali informazioni sono necessarie per un preventivo?

Si prega di fornire:

• Numero di catalogo SAPS50UM-10

• Quantità richiesta

• Volume di acquisto annuale previsto

• Dimensione del pacchetto preferita

• Applicazione biologica prevista

• Tipo di ligando biotinilato

• Capacità vincolante richiesta

• Particelle richieste per test

• Metodo di rilevamento

• Restrizioni del buffer

• Restrizioni conservative

• Requisiti di controllo della qualità

• Requisiti di documentazione

• Destinazione di consegna

Richiedi un campione o un preventivo in blocco

Le microsfere di streptavidina SHBC SAPS50UM-10 da 50 µm forniscono una piattaforma di particelle ampia e chiaramente identificabile per immobilizzare anticorpi biotinilati, proteine, peptidi, enzimi, recettori, lectine, oligonucleotidi, DNA, RNA, aptameri e altre molecole marcate con biotina.

Il prodotto è adatto per:

• Sviluppo di test biologici

• Saggi immunologici basati su microsfere

• Immobilizzazione degli anticorpi

• Ricerca sull'interazione delle proteine

• Cattura dell'acido nucleico

• Saggi di ibridazione

• Ricerca sull'interazione cellula-particella

• Microscopia e imaging ad alto contenuto

• Ricerca microfluidica

• Agglutinazione delle particelle

• Sistemi multiplex con codifica dimensionale

• Biosensori basati su particelle

• Analisi delle singole particelle

• Produzione di reagenti di ricerca

SAPS50UM-10 fornisce:

• Diametro nominale delle particelle 50 µm

• Superficie streptavidina-funzionale

• Sospensione di solidi all'1%.

• Ampia superficie per singola particella

• Eccellente visibilità microscopica

• Compatibilità con biomolecole biotinilate

• Fornitura di campioni e lotti pilota

• Capacità di produzione in serie

• OEM e supporto per lo sviluppo personalizzato

Per la valutazione del campione o l'acquisto in grandi quantità, fornire l'applicazione prevista, la quantità richiesta, il ligando biotinilato, la capacità legante desiderata, la piattaforma di rilevamento, i requisiti di imballaggio e le specifiche del controllo di qualità.

Nome del prodotto: Microsfere di streptavidina da 50 µm
Numero di catalogo: SAPS50UM-10
Marchio: SHBC
Produttore: Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.
Diametro nominale delle particelle: 50 µm
Modificazione della superficie: Contenuto di solidi di streptavidina
: 1%
Applicazione principale: Ricerca biologica e test basati su particelle
Capacità di fornitura: Campioni, lotti pilota e produzione in serie
Uso previsto: Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico o terapeutico.