Microsphères de streptavidine 50um SAPS50UM-10 1%

Microsphères de streptavidine de 50 µm pour la recherche biologique

Les microsphères de streptavidine SHBC SAPS50UM-10 sont des microsphères fonctionnalisées en surface de 50 µm développées pour l'immobilisation et la capture d'anticorps biotinylés, d'antigènes, de protéines, de peptides, d'enzymes, de récepteurs, d'oligonucléotides, d'ADN, d'ARN, d'aptamères, de lectines et d'autres molécules marquées à la biotine.

Le produit est fourni sous forme de suspension à 1 % de solides et est conçu pour le développement d'essais biologiques, l'immobilisation de biomolécules, la recherche sur les interactions par affinité, la microscopie, les études d'interaction cellule-particule, la capture d'acide nucléique, la microfluidique, la recherche sur l'agglutination de particules, la détection par imagerie et la fabrication de réactifs de recherche.

Le diamètre des particules de 50 µm offre une grande surface sur chaque microsphère individuelle et rend les particules faciles à identifier sous microscopie optique ou à fluorescence appropriée. La grande taille des particules est particulièrement pertinente pour les projets nécessitant une analyse de particules individuelles, une manipulation de particules visibles, des analyses codées par taille, des modèles de particules de taille cellulaire, un transport microfluidique ou une détection biologique basée sur l'imagerie.

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. prend en charge l'évaluation d'échantillons en laboratoire, le développement à l'échelle pilote, la fabrication répétée, la coopération OEM, les projets de marque privée et l'approvisionnement en gros des entreprises.

Réponse rapide au produit

SAPS50UM-10 est une suspension de microsphères enrobées de streptavidine de 50 µm fournie à 1 % de solides. Sa surface fonctionnelle streptavidine lie les biomolécules biotinylées pour l'immobilisation des anticorps et des protéines, la capture des acides nucléiques, les tests biologiques, la microscopie, la recherche microfluidique, les études d'interaction cellule-particule, l'agglutination des particules et la détection par imagerie.

Points forts du produit

• Nom du produit : Microsphères de streptavidine de 50 µm

• Numéro de catalogue : SAPS50UM-10

• Marque : SHBC

• Fabricant : Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.

• Diamètre nominal des particules : 50 µm

• Modification de surface : streptavidine

• Teneur en matières solides : 1 %

• Principe de liaison : affinité streptavidine-biotine

• Forme physique : Suspension aqueuse de microsphères

• Application principale : recherche biologique et analyses basées sur les particules

• Capacité d’approvisionnement : échantillons, lots pilotes et production en vrac

• Personnalisation : Disponible selon faisabilité technique

• Utilisation prévue : Utilisation pour la recherche uniquement

Que sont les microsphères de streptavidine SAPS50UM-10 ?

SAPS50UM-10 se compose de microsphères de 50 µm avec de la streptavidine immobilisée à la surface des particules.

L'enrobage de streptavidine fournit des sites de liaison pour les molécules biotinylées. Les chercheurs peuvent attacher un anticorps, un antigène, une protéine, un peptide, une sonde d'acide nucléique, un récepteur, un ligand, une lectine, un aptamère ou une autre biomolécule biotinylés sélectionnés sans activer directement la surface de la microsphère avec la chimie EDC/NHS.

Après immobilisation d'une molécule de capture, les particules fonctionnalisées peuvent être utilisées comme phase solide pour :

• Capture de cible

• Immobilisation d'anticorps

• Analyse des interactions protéiques

• Hybridation d'acide nucléique

• Études de liaison à la surface cellulaire

• Tests basés sur la microscopie

• Biocapteurs basés sur l'imagerie

• Agglutination des particules

• Recherche microfluidique

• Expériences de capture d'affinité

• Analyse de particules individuelles

• Recherche multiplex codée par taille

Les molécules de capture biotinylées potentielles comprennent :

• Anticorps monoclonaux

• Anticorps polyclonaux

• Anticorps recombinants

• Fragments d'anticorps

• Antigènes

• Protéines recombinantes

• Peptides

• Enzymes

• Récepteurs

• Lectines

• Cytokines

• Facteurs de croissance

• Sondes oligonucléotidiques

• sondes ADN

• Sondes d'ARN

• Produits PCR

• Aptamères

• Petites molécules biotinylées

Les particules de 50 µm offrent une surface nettement plus grande par microsphère individuelle que les particules plus petites. Cependant, à même concentration massique, elles fournissent moins de particules individuelles et moins de surface collective que des microsphères beaucoup plus petites fabriquées à partir du même matériau.

SAPS50UM-10 est donc particulièrement adapté lorsque le projet priorise :

• Grande surface par particule individuelle

• Observation microscopique directe

• Mesure du signal de particule individuelle

• Manipulation manuelle ou automatisée des particules

• Modélisation de particules de taille de cellule

• Différenciation des particules basée sur la taille

• Tests biologiques basés sur l'imagerie

• Transport et piégeage microfluidique

• Agglutination des particules

• Confirmation visuelle de la récupération des particules

SAPS50UM-10 est fourni comme matière première de recherche. Il ne doit pas être automatiquement représenté comme un réactif de diagnostic fini, un étalon certifié de granulométrie, une bille de comptage absolue, une bille magnétique ou une microsphère à fluorescence interne, à moins que ces propriétés ne soient spécifiquement incluses dans les spécifications du produit final.

SAPS50UM-10 Spécifications techniques

Les paramètres suivants doivent être confirmés à l’aide des spécifications techniques finales ou du certificat d’analyse spécifique au lot :

• Matériau particulaire

• Diamètre moyen des particules

• Plage de granulométrie

• Distribution granulométrique

• Coefficient de variation granulométrique

• Morphologie des particules

• Densité des particules

• Niveau d'enrobage de streptavidine

• Capacité de liaison à la biotine

• Concentration en nombre de particules

• Nombre de particules par milligramme

• Tampon de suspension

• pH tampon

• Stabilisant ou tensioactif

• Conservateur

• Méthode de lavage recommandée

• Conditions de récupération recommandées

• Taille du paquet

• Durée de conservation

• Conditions de stockage

La capacité de liaison à la biotine doit être indiquée avec :

• Type de molécule test biotinylée

• Poids moléculaire de la molécule à tester

• Nombre de groupes biotine par molécule

• Composition du tampon de liaison

• Temps d'incubation

• Température d'incubation

• Procédure de lavage

• Méthode de détection

• Base de calcul

• Résultat de test spécifique au lot

La capacité de liaison ne doit pas être estimée uniquement à partir de la teneur en matières solides de 1 % ou du diamètre nominal des particules.

Comment fonctionne la liaison streptavidine-biotine

La streptavidine est une protéine liant la biotine qui permet la fixation de molécules biotinylées à la surface des microsphères.

Lorsqu'un ligand de capture biotinylé est mélangé avec SAPS50UM-10, le groupe biotine se lie aux sites streptavidine disponibles sur la particule.

La structure générale peut être représentée comme suit :

Surface des microsphères – Streptavidine – Biotine – Molécule de capture

Pour un test sandwich basé sur des anticorps, la structure peut être :

Microsphère – Streptavidine – Anticorps de capture biotinylé – Antigène cible – Anticorps de détection

L'anticorps de détection peut porter un marqueur fluorescent, enzymatique, colorimétrique, chimiluminescent ou autre marqueur mesurable.

Avantages de l’immobilisation streptavidine-biotine

• L’activation directe EDC/NHS n’est normalement pas nécessaire lors du chargement d’un ligand biotinylé.

• Une plateforme de microsphères peut être utilisée avec de nombreuses molécules biotinylées différentes.

• Les anticorps, protéines, peptides, ADN, ARN, oligonucléotides et aptamères peuvent être immobilisés.

• Le chargement du ligand peut être effectué dans des conditions aqueuses relativement douces.

• La molécule de capture peut être modifiée sans reconcevoir la particule de base.

• Le chargement du ligand peut être optimisé séparément de la détection de la cible.

• Différents systèmes rapporteurs peuvent être utilisés avec la même plateforme de microsphères.

• La plateforme peut prendre en charge la recherche à cible unique et multiplexe.

• Les particules peuvent être adaptées aux analyses d’imagerie, de microscopie, microfluidiques et sur plaques.

Facteurs affectant les performances de la liaison

La charge finale du ligand et les performances du test peuvent être influencées par :

• Densité d'enrobage de streptavidine

• Activité streptavidine

• Nombre de groupes de biotine par ligand

• Localisation des groupes de biotine

• Accessibilité à la biotine

• Longueur de l'entretoise

• Taille moléculaire du ligand

• Pureté du ligand

• Agrégation de ligands

• Encombrement de la surface

• Composition du tampon

• Concentration en sel

• Temps d'incubation

• Température d'incubation

• Méthode de mélange

• Décantation des particules

• Efficacité du lavage

La biotine libre ou les réactifs biotinylés n'ayant pas réagi peuvent occuper les sites streptavidines disponibles. Les biomolécules biotinylées doivent donc être purifiées de manière adéquate lorsque la biotine libre résiduelle peut interférer avec l'immobilisation.

Pourquoi choisir des microsphères de streptavidine de 50 µm ?

Grande surface par particule individuelle

Une microsphère de 50 µm offre une surface physique nettement plus grande sur chaque particule qu'une microsphère de 30 µm, 20 µm, 10 µm ou 5 µm.

Cela peut être utile lorsque :

• Une grande quantité de ligand de capture est requise sur chaque particule

• Une génération de signal forte par particule individuelle est souhaitée

• La fluorescence de surface sera mesurée par microscopie

• Une analyse de particules individuelles est requise

• La structuration de la surface des particules est à l'étude

• Une liaison localisée à des biomolécules sera observée

• Un grand modèle de particules synthétiques est nécessaire

Une particule individuelle plus grosse ne fournit pas nécessairement une plus grande surface totale par milligramme. Les particules plus petites fournissent normalement beaucoup plus de particules à la même concentration massique.

Excellente visibilité microscopique

Le diamètre de 50 µm facilite l'identification des particules individuelles à l'aide de systèmes d'imagerie optique appropriés.

Les méthodes d’imagerie potentielles comprennent :

• Microscopie en fond clair

• Microscopie à contraste de phase

• Microscopie à fluorescence

• Microscopie confocale

• Imagerie automatisée à haut contenu

• Cytométrie en flux par imagerie

• Analyse numérique des particules

La microscopie peut être utilisée pour évaluer :

• Morphologie des particules

• Fluorescence associée à la surface

• Répartition des ligands

• Agrégation de particules

• Interaction cellule-particule

• Récupération de particules

• Différenciation basée sur la taille

• Mouvement microfluidique

• Agglutination des particules

Convient à l'analyse de particules individuelles

La grande taille permet à chaque particule d'être traitée comme une surface de réaction ou une unité analytique distincte.

Les orientations de recherche potentielles comprennent :

• Mesure de fluorescence d'une seule particule

• Analyse de variation de particule à particule

• Uniformité de liaison de surface

• Imagerie de particules individuelles

• Classification automatisée des particules

• Comptage numérique de particules

• Classification positive/négative basée sur l'image

Pertinent pour les modèles de grande taille de cellules

Le diamètre de 50 µm se situe dans la plage de taille de certaines grandes cellules, agrégats cellulaires, embryons, sphéroïdes, structures biologiques et modèles cellulaires synthétiques.

SAPS50UM-10 peut être évalué pour :

• Transport de particules de grande taille

• Études de contact cellule-particule

• Tests de modèles cellulaires microfluidiques

• Capture de particules dans les appareils de traitement cellulaire

• Développement de systèmes d'imagerie

• Modèles de particules biologiques synthétiques

• Recherche en manutention mécanique

Les microsphères synthétiques ne reproduisent pas toutes les propriétés optiques, mécaniques, chimiques ou biologiques des cellules vivantes. Une validation spécifique à l’application est requise.

Identification claire basée sur la taille

La grande taille des particules permet au SAPS50UM-10 d'être différencié de nombreuses populations de microsphères, cellules, débris et particules de fond plus petites.

Ceci est utile pour :

• Tests multiplex codés par taille

• Tests basés sur l'imagerie

• Suivi des particules

• Tri microfluidique

• Analyse d'agglutination

• Contrôles de processus internes

• Recherche multi-populations

Manipulation manuelle pratique

Les particules individuelles de 50 µm peuvent être manipulées à l'aide d'outils de laboratoire appropriés, tels que :

• Pointes de pipettes à large diamètre

• Micropipettes

• Microcapillaires

• Micromanipulateurs

• Systèmes de collecte de particules

• Mailles ou tamis cellulaires

• Structures de piégeage microfluidiques

Principales caractéristiques et avantages

Diamètre nominal des particules de 50 µm

La grande taille des particules prend en charge la microscopie, l'analyse de particules individuelles, l'identification basée sur la taille, la manipulation microfluidique et la recherche biologique sur les grosses particules.

Surface fonctionnelle de la streptavidine

La surface capture les anticorps biotinylés, les protéines, les peptides, les enzymes, les récepteurs, les oligonucléotides, l'ADN, l'ARN, les aptamères, les lectines et d'autres molécules contenant de la biotine.

Suspension à 1 % de solides

SAPS50UM-10 est fourni à 1 % de solides et peut être dilué en fonction du nombre requis de particules, du volume de réaction, de la capacité de liaison et de la méthode de détection.

Immobilisation simple du ligand

Les molécules de capture biotinylées peuvent être fixées sans activation directe par le carbodiimide de la surface des microsphères par l'utilisateur final.

Grande surface par particule

Chaque microsphère fournit une surface physique relativement grande pour l'immobilisation du ligand de capture et la génération de signaux.

Forte compatibilité d'imagerie

La taille des particules convient à la recherche en imagerie optique, par fluorescence, confocale et automatisée.

Plateforme modulaire d'analyses biologiques

La même particule de base peut être combinée avec différentes molécules de capture biotinylées pour différentes cibles de recherche.

Approvisionnement en échantillon en vrac

SHBC prend en charge l'évaluation en laboratoire, la production pilote, la fabrication répétée, la coopération OEM et les achats en gros par les entreprises.

Options de développement personnalisées

La taille des particules, la charge en streptavidine, la capacité de liaison, la teneur en solides, le tampon, le conservateur, le codage de fluorescence, la couleur visible, l'emballage et les spécifications de libération peuvent être discutés pour les projets qualifiés.

Applications de recherche biologique

Développement d'immunoessais à base de billes

SAPS50UM-10 peut être utilisé comme phase solide dans des tests de recherche en sandwich, indirects, compétitifs ou par agglutination de particules.

Un test sandwich typique peut inclure :

1. Immobilisation d'un anticorps de capture biotinylé.

2. Blocage de la surface restante des particules.

3. Incubation avec l'échantillon à tester.

4. Capture de l'analyte cible.

5. Ajout d'un anticorps de détection marqué.

6. Élimination des réactifs non liés.

7. Mesure du signal associé aux particules.

Les cibles potentielles de recherche comprennent :

• Anticorps

• Antigènes

• Cytokines

• Hormones

• Facteurs de croissance

• Enzymes

• Biomarqueurs

• Protéines associées aux agents pathogènes

• Analytes pour la sécurité alimentaire

• Objectifs environnementaux

• Objectifs de la recherche vétérinaire

• Composés de recherche

Essais de liaison compétitifs

Les formats compétitifs peuvent être évalués pour :

• Petites molécules

• Haptènes

• Peptides

• Drogues

• Toxines

• Hormones

• Métabolites

• Cibles avec des sites de liaison accessibles limités

La relation entre la concentration de l'analyte et le signal mesuré dépend de la conception finale du test.

Immobilisation et dépistage d'anticorps

Les anticorps biotinylés peuvent être immobilisés pour :

• Détection d'antigène

• Dépistage d'anticorps

• Dépistage des hybridomes

• Études de spécificité des anticorps

• Évaluation de la réactivité croisée

• Comparaison d'affinité

• Sélection d'anticorps de capture

• Tests de faisabilité des tests

• Recherche de biomarqueurs

Recherche sur les interactions entre protéines et peptides

Des protéines ou peptides biotinylés peuvent être attachés pour étudier :

• Interactions anticorps-antigène

• Interactions protéine-protéine

• Liaison récepteur-ligand

• Reconnaissance d'épitopes

• Liaison enzyme-substrat

• Dépistage des inhibiteurs

• Liaison médicament-candidat

• Comparaison d'affinité protéique

Capture et hybridation des acides nucléiques

Des oligonucléotides biotinylés, de l'ADN, de l'ARN, des produits de PCR et des aptamères peuvent être attachés au SAPS50UM-10.

Les applications potentielles comprennent :

• Capture spécifique à la séquence

• Développement de tests d'hybridation

• Capture de produits PCR

• Recherche sur le génotypage

• Recherche sur la détection des mutations

• Détection basée sur l'aptamère

• Analyse des interactions ADN-protéine

• Recherche sur la liaison à l'ARN

• Développement d'essais moléculaires

Recherche sur les interactions cellules-particules

Lorsqu'il est recouvert d'un anticorps, d'un récepteur, d'un ligand, d'une lectine ou d'un peptide biotinylé approprié, SAPS50UM-10 peut être évalué pour son interaction avec les cellules.

Les orientations de recherche potentielles comprennent :

• Reconnaissance des récepteurs de surface cellulaire

• Adhésion cellulaire

• Liaison cellulaire médiée par un ligand

• Interaction des cellules immunitaires

• Contact cellulaire à grosses particules

• Recherche sur l'agrégation cellulaire

• Positionnement cellulaire médié par les particules

• Recherche sur les particules synthétiques présentatrices d'antigènes

• Imagerie des interfaces cellules-particules

Les variables importantes comprennent :

• Densité du ligand de capture

• Rapport particules/cellules

• Concentration cellulaire

• Temps d'incubation

• Température d'incubation

• Méthode de mélange

• Conditions de lavage

• Viabilité cellulaire

• Agrégation de particules

• Attachement non spécifique

Microscopie et imagerie à haut contenu

Les microsphères de 50µm peuvent supporter :

• Imagerie en champ clair

• Imagerie à contraste de phase

• Imagerie fluorescente

• Microscopie confocale

• Criblage à haut contenu

• Comptage de particules automatisé

• Analyse de liaison de surface

• Classement des particules

• Imagerie des interactions cellule-particule

• Analyse numérique de particules positives/négatives

Recherche microfluidique

SAPS50UM-10 peut être évalué dans :

• Etudes du transport de particules

• Recherche sur les flux de microcanaux

• Séparation basée sur la taille

• Piégeage des particules

• Focalisation hydrodynamique

• Positionnement des particules

• Imagerie dans les dispositifs microfluidiques

• Manipulation de grands modèles de cellules

• Tests de performances des appareils

Le canal, le connecteur, la vanne, le filtre et le chemin d'écoulement les plus étroits doivent être compatibles avec les particules de 50 µm.

Recherche sur l'agglutination

Les grandes microsphères de streptavidine peuvent être utilisées dans des méthodes de recherche dans lesquelles la liaison d'une molécule cible ou pontante produit un regroupement mesurable de particules.

L'agglutination peut être analysée par :

• Microscopie optique

• Imagerie automatisée

• Méthodes de diffusion de la lumière

• Modèles de sédimentation

• Modifications du nombre de particules

• Algorithmes d'analyse d'images

La relation entre l’agrégation et la concentration de l’analyte doit être optimisée expérimentalement.

Biocapteurs à base de particules

SAPS50UM-10 peut servir de support visible en phase solide dans :

• Biocapteurs optiques

• Biocapteurs basés sur l'imagerie

• Tests de particules fluorescentes

• Tests de particules liées aux enzymes

• Biocapteurs microfluidiques

• Études de liaison de surface

• Dosages numériques de particules

Recherche multiplex codée par taille

La population de particules de 50 µm peut être combinée avec des microsphères plus petites pour créer des populations d’analyse de taille différenciable.

Chaque population de particules peut potentiellement porter un ligand de capture biotinylé différent.

La conception finale du multiplex doit prendre en compte :

• Séparation granulométrique

• Spécificité du ligand

• Canal de signal

• Récupération de particules

• Agrégation

• Résolution d'imagerie

• Compatibilité des instruments

Biomolécules biotinylées compatibles

Anticorps biotinylés

Les formats d’anticorps potentiels incluent :

• IgG complète

• IgM

• Fragments fabuleux

• Fragments F(ab′)₂

• Anticorps recombinants

• Fragments variables à chaîne unique

• Anticorps à domaine unique

• Formats d'anticorps modifiés

L’activité des anticorps après immobilisation dépend :

• Chimie de biotinylation

• Nombre de groupes de biotine

• Localisation des groupes de biotine

• Longueur de l'entretoise

• Pureté des protéines

• Agrégation d'anticorps

• Chargement superficiel

• Conditions de stockage

Protéines biotinylées

Les exemples potentiels incluent :

• Antigènes recombinants

• Enzymes

• Cytokines

• Facteurs de croissance

• Récepteurs

• Lectines

• Protéines de liaison

• Protéines de fusion

• Normes protéiques

Peptides biotinylés

Les applications potentielles comprennent :

• Cartographie des épitopes

• Dépistage d'anticorps

• Études de liaison aux récepteurs

• Recherche enzymatique

• Études d'interactions protéiques

• Tests de dépistage de drogues

Un espaceur approprié entre la biotine et le peptide peut améliorer l'accessibilité moléculaire.

Acides nucléiques biotinylés

Les formats compatibles peuvent inclure :

• ADN simple brin

• ADN double brin

• ARN

• Sondes oligonucléotidiques

• amplicons PCR

• Aptamères

• Sondes d'acide nucléique modifiées

• Capturer des séquences

Petites molécules biotinylées

Les petits composés biotinylés peuvent être immobilisés lorsque leurs groupes biotine restent accessibles à la surface de la streptavidine.

La conception des espaceurs et l’orientation moléculaire doivent être prises en compte lors du développement de la méthode.

Protocole de chargement de ligand biotinylé recommandé

La procédure suivante est un point de départ général du développement. Les conditions finales doivent être optimisées pour la biomolécule réelle, le matériau particulaire et l'application.

1. Remettre en suspension SAPS50UM-10

Laisser la suspension atteindre la température de manipulation recommandée.

Mélanger par inversion douce, rotation lente, basculement ou vortex contrôlé jusqu'à ce que la suspension soit homogène.

Étant donné que les particules de 50 µm peuvent se déposer rapidement, mélangez le stock immédiatement avant chaque étape d'échantillonnage.

Lors de distributions répétées, maintenir un mélange doux ou remélanger la suspension avant chaque aliquote.

2. Calculez la quantité de particules requise

Déterminer la quantité requise en fonction :

• Nombre d'essais

• Nombre de particules requis par test

• Surface requise par réaction

• Volume de réaction

• Concentration cible attendue

• Capacité de liaison spécifique au lot

• Nombre d'étapes de lavage

• Perte de traitement attendue

Ne calculez pas la capacité de chargement de ligand à partir de la seule teneur en solides.

3. Transférez les microsphères

Transférez le volume requis dans un tube ou un récipient de traitement propre et à faible liaison.

Utilisez une pointe de pipette à large diamètre ou un autre dispositif de transfert avec une ouverture adaptée aux particules de 50 µm.

Évitez les conseils étroits qui pourraient :

• Retenir les particules

• Restreindre le mouvement des particules

• Produire des nombres de particules incohérents

• Promouvoir l'agrégation

• Réduire la précision du transfert

4. Lavez les microsphères

Laver les particules avec un tampon compatible avec la streptavidine et le ligand biotinylé sélectionné.

Évitez la biotine libre pendant l’immobilisation du ligand.

Les méthodes de récupération potentielles incluent :

• Centrifugation

• Filtration membranaire

• Récupération de maille ou de tamis cellulaire

• Sédimentation contrôlée

• Collecte manuelle de particules

• Autres méthodes validées de séparation solide-liquide

La méthode doit être établie en utilisant le matériau particulaire réel, la densité, le tampon, le volume de traitement et la récupération requise.

5. préparer le ligand biotinylé

Diluer la biomolécule sélectionnée dans un tampon de liaison compatible.

Revoir:

• Concentration de ligands

• Niveau de biotinylation

• Pureté moléculaire

• Niveau global

• Contenu gratuit en biotine

• Réactif de biotinylation résiduelle

• Additifs tampons

• Stabilité des protéines

• Stabilité des acides nucléiques

6. Ajouter le ligand

Combiner les particules lavées avec le ligand biotinylé.

Utilisez une rotation douce, un balancement ou un mélange contrôlé pour maintenir les particules exposées uniformément au ligand.

Évitez les vortex excessifs, le moussage et les conditions mécaniques susceptibles d’endommager la biomolécule.

7. Optimiser l'incubation

Évaluer:

• Concentration de particules

• Concentration de ligands

• Rapport ligand/particule

• Temps d'incubation

• Température d'incubation

• pH tampon

• Concentration en sel

• Vitesse de mélange

• Volume de réaction

Un mélange doux et continu est particulièrement important pour les particules de 50 µm, car la sédimentation peut provoquer une charge inégale de ligand.

8. Supprimer le ligand non lié

Séparez et lavez les particules pour éliminer les molécules biotinylées non liées.

Un lavage insuffisant peut augmenter le bruit de fond, tandis qu'un lavage excessif peut réduire la récupération des particules.

9. Bloquez la surface des particules

Incuber les microsphères chargées de ligand avec un réactif de blocage compatible avec l’application.

Les bloqueurs potentiels incluent :

• Albumine sérique bovine

• Caséine

• Gélatine de poisson

• Immunoglobuline non immunitaire

• Polymères bloquants synthétiques

• Tampons commerciaux bloquant les particules

Le bloqueur devrait réduire le signal de l'échantillon négatif sans réduire substantiellement la liaison spécifique à la cible.

10. Remettre en suspension les microsphères préparées

Remettre en suspension les particules enrobées et bloquées dans un tampon de test ou de stockage approprié.

Évaluer:

• Dispersion des particules

• Rétention de ligand

• Activité de liaison

• Liaison non spécifique

• Récupération de particules

• Comportement de stabilisation

• Performances de redispersion

• Stabilité à court terme

• Stabilité à long terme

• Stabilité microbienne

Flux de travail recommandé pour les tests biologiques

1. Préparez les microsphères de capture

Chargez SAPS50UM-10 avec la molécule de capture biotinylée sélectionnée.

Lavez et bloquez les particules avant de tester les échantillons.

2. Préparer les contrôles expérimentaux

Les contrôles recommandés peuvent inclure :

• Blanc de tampon de test

• Microsphères de streptavidine sans ligand de capture

• Particules chargées de ligand de capture sans cible

• Échantillon négatif

• Échantillon positif

• Contrôle réservé aux journalistes

• Contrôle isotypique

• Contrôle du ligand biotinylé non pertinent

• Contrôle cible sans étiquette

• Contrôles monochromes lorsque la fluorescence est utilisée

3. Ajoutez l'échantillon de test

Combinez les microsphères préparées avec l’échantillon.

Optimiser:

• Volume d'échantillon

• Dilution de l'échantillon

• Concentration de particules

• Particules par réaction

• Plage de concentration cible

• Temps d'incubation

• Température d'incubation

• Méthode de mélange

• Exemple de matrice

Maintenir un mélange doux tout au long de l’incubation.

4. Lavez les particules

Supprimez les composants d’échantillon non liés tout en maintenant une récupération acceptable.

Enregistrer:

• Nombre de lavages

• Composition du tampon de lavage

• Volume de lavage

• Méthode de séparation

• Volume surnageant résiduel

• Procédure de mélange

• Récupération de particules

5. Ajoutez le réactif de détection

Ajoutez un reporter fluorescent, enzymatique, colorimétrique, chimiluminescent ou autre compatible.

Le système de détection sélectionné doit correspondre à la plateforme analytique prévue.

6. Incuber et laver

Optimisez la concentration du journaliste et le temps d’incubation.

Retirez le réactif de détection non lié pour réduire le bruit de fond.

7. Remettre en suspension pour la détection

Remettre les particules en suspension dans un tampon de détection propre.

Mélanger immédiatement avant de transférer l’échantillon sur la lame de microscope, la chambre d’imagerie, la microplaque, le dispositif microfluidique ou tout autre instrument.

8. Mesurez le signal

Les résultats analytiques potentiels comprennent :

• Fluorescence moyenne des particules

• Fluorescence médiane des particules

• Pourcentage de particules positives

• Distribution de fluorescence superficielle

• Rapport signal/arrière-plan

• Activité enzymatique associée aux particules

• Intensité des couleurs

• Niveau d'agglutination

• Modifications du nombre de particules

• Courbe dose-réponse

• Précision du test

• Récupération

• Spécificité

• Réactivité croisée

9. Analyser les résultats

Établissez des seuils positifs et négatifs à l’aide de contrôles appropriés.

Ne définissez pas un résultat positif en utilisant uniquement l’échantillon de test.

Manipulation, mélange et échantillonnage de microsphères de 50 µm

Décantation rapide des particules

Les microsphères de 50 µm peuvent se déposer rapidement lorsque le mélange s'arrête.

La décantation peut provoquer :

• Concentration inégale de particules

• Variation entre aliquotes

• Chargement de ligand incohérent

• Différents nombres de particules entre les réactions

• Exposition inégale aux échantillons ou aux journalistes

• Signaux de test variables

• Reproductibilité réduite des lots

Maintenir une suspension uniforme

Les méthodes de mélange appropriées peuvent inclure :

• Inversion douce

• Rotation de bout en bout

• Mélange orbital lent

• Basculement doux

• Vortex contrôlé avant échantillonnage

• Agitation mécanique lente

• Mélange intermittent avec pipettes à gros diamètre

Évitez les mélanges vigoureux qui produisent de la mousse, endommagent les protéines ou provoquent des collisions et une agrégation de particules.

Échantillonnage cohérent

Pour des distributions répétées :

1. Mélangez soigneusement le bouillon.

2. Aspirez rapidement le volume requis.

3. Distribuer le volume complet.

4. Remixer avant la prochaine aliquote.

5. Utilisez la même méthode de transfert pour tous les échantillons.

6. Minimisez les délais entre le mixage et l’échantillonnage.

Pour le remplissage pilote ou en vrac, un mélange lent et continu doit être validé pour maintenir une distribution uniforme des particules.

Pointes de pipettes à large diamètre

Les pointes larges ou coupées peuvent améliorer le transfert des grosses particules.

L'ouverture doit être suffisamment grande que le diamètre des particules pour réduire :

• Rétention des particules

• Tondre

• Livraison de particules incohérente

• Blocage de la pointe

• Variation d'échantillonnage

Comptage de particules

Lorsque le nombre de particules par test est important, utilisez une méthode de comptage appropriée plutôt que de vous fier uniquement au volume de la suspension.

Les approches possibles comprennent :

• Comptage microscopique

• Imagerie automatisée

• Compteurs de particules

• Calcul gravimétrique pris en charge par la taille et la densité des particules mesurées

• Données sur le nombre de particules spécifiques au lot

Méthodes de récupération et de lavage des particules

Centrifugation

La centrifugation peut être utilisée lorsque la composition et la densité des particules permettent une récupération efficace.

La force centrifuge efficace minimale et la durée doivent être déterminées expérimentalement.

Les conditions sélectionnées doivent fournir :

• Récupération acceptable

• Une pastille de particules gérable

• Redispersion facile

• Agrégation minimale

• Dommages limités aux biomolécules immobilisées

Filtration

Une membrane, un maillage ou un filtre cellulaire avec une taille de pores appropriée peut être utilisé pour la récupération ou le lavage.

Confirmer:

• Rétention des particules

• Faible adsorption des biomolécules

• Récupération acceptable

• Libération facile des particules

• Compatibilité avec le volume de traitement

• Déformation minimale des particules

Sédimentation contrôlée

La sédimentation naturelle ou accélérée peut être envisagée dans certains flux de travail.

La sédimentation peut réduire les contraintes mécaniques mais peut nécessiter des temps de traitement plus longs et une élimination soigneuse du surnageant.

Manipulation manuelle des particules

Pour les projets de microscopie et de particules uniques, des microsphères individuelles peuvent être collectées en utilisant :

• Micropipettes à gros diamètre

• Microcapillaires

• Systèmes de micromanipulation

• Outils de sélection de particules

• Appareils basés sur le maillage

Séparation magnétique

SAPS50UM-10 ne doit pas être considéré comme magnétique.

La séparation magnétique n'est appropriée que lorsque les spécifications du produit confirment explicitement que les microsphères contiennent un composant magnétique.

Microscopie, Imagerie et Détection Microfluidique

Microscopie Optique

Les particules de 50 µm peuvent généralement être observées en utilisant la microscopie optique standard.

Les utilisations potentielles comprennent :

• Évaluation de la morphologie des particules

• Inspection des agrégats

• Comptage de particules

• Visualisation de liaison de surface

• Imagerie des interactions cellule-particule

• Confirmation de la récupération des particules

• Observation de la distribution des tailles

Microscopie à fluorescence

Lorsque les particules portent un rapporteur fluorescent, un colorant interne ou une cible marquée par fluorescence, la microscopie à fluorescence peut être utilisée pour évaluer :

• Signal de surface

• Uniformité contraignante

• Particules positives et négatives

• Localisation du journaliste

• Interactions cellule-particule

• Populations de particules multiplexes

Microscopie confocale

L’imagerie confocale peut prendre en charge l’analyse tridimensionnelle de la fluorescence associée à la surface et aider à distinguer le signal lié aux microsphères de la fluorescence environnante.

Imagerie automatisée

Étant donné que les particules sont relativement grosses, un logiciel automatisé d’analyse d’images peut être utilisé pour quantifier :

• Numéro de particule

• Diamètre des particules

• Intensité de fluorescence

• Pourcentage de particules positives

• Niveau global

• Distribution du signal de surface

• Événements de contact cellulaire

Détection microfluidique

Avant d'utiliser le SAPS50UM-10 dans un appareil microfluidique, confirmez que :

• Les canaux sont suffisamment larges

• Les constrictions peuvent laisser passer les particules

• Les vannes et connecteurs sont compatibles

• Les filtres ne retiendront pas les particules involontairement

• Le débit ne favorisera pas le blocage

• La concentration des particules est appropriée

• L’agrégation est correctement contrôlée

Compatibilité avec la cytométrie en flux

SAPS50UM-10 peut être évalué par cytométrie en flux uniquement lorsque la fluidique de l'instrument est conçue pour gérer des particules de cette taille.

Avant de tester, confirmez :

• Diamètre du tube d'échantillon

• Dimensions de la Flow Cell

• Taille de la buse ou de l'orifice

• Voie fluidique la plus étroite

• Dimensions de la sonde d'échantillonnage

• Concentration de particules

• Niveau global

• Débit d'échantillon

• Portée du détecteur de diffusion

Certains cytomètres en flux conventionnels peuvent ne pas convenir aux particules de 50 µm.

Les particules doivent rester sensiblement plus petites que le chemin d’écoulement interne le plus étroit.

La cytométrie en flux par imagerie, la cytométrie à grosses particules, la microscopie automatisée ou l'analyse de particules basée sur l'image peuvent être plus appropriées pour certaines applications.

Contrôle de blocage et de liaison non spécifique

L'adsorption non spécifique peut augmenter le bruit de fond et réduire la sensibilité du test.

Les causes potentielles comprennent :

• Blocage inadéquat

• Réactif bloquant incompatible

• Excès de ligand de capture

• Réactif de détection en excès

• Lavage insuffisant

• Anticorps agrégés

• Composants d'échantillon hydrophobes

• Concentration élevée en protéines de l'échantillon

• Agrégation de particules

• Interférence échantillon-matrice

Filtrer plusieurs réactifs bloquants

Comparez plusieurs formulations bloquantes.

Le bloqueur préféré devrait réduire le signal de l'échantillon négatif tout en maintenant la liaison spécifique à la cible.

Optimiser le chargement du ligand de capture

La charge maximale de ligand ne fournit pas toujours des performances de test maximales.

Une charge excessive peut :

• Provoque un encombrement stérique

• Réduire l’accessibilité de la cible

• Augmenter la consommation de réactifs

• Augmenter les interactions non spécifiques

• Augmenter la variation du test

Titrer le réactif de détection

Un excès de réactif de détection peut augmenter le bruit de fond.

Évaluez plusieurs concentrations de rapporteurs à l’aide de contrôles positifs et négatifs.

Optimiser le lavage

Évaluer:

• Nombre de lavages

• Composition du tampon de lavage

• Volume de lavage

• Méthode de séparation

• Méthode de mélange

• Surnageant résiduel

• Récupération de particules

Évaluez soigneusement les détergents

Une petite quantité de détergent compatible peut améliorer la dispersion des particules et réduire l'adsorption non spécifique.

Un excès de détergent peut interférer avec les interactions des biomolécules ou la liaison du rapporteur.

Comparaison des microsphères de streptavidine de 50 µm, 30 µm et 20 µm

Choisissez SAPS50UM-10 Quand :

• La surface maximale par particule individuelle est préférable.

• La microscopie directe est une méthode de détection primaire.

• Une analyse des particules individuelles est requise.

• La manipulation manuelle ou automatisée des particules est importante.

• Une identification claire basée sur la taille est nécessaire.

• Le piégeage microfluidique des grosses particules est à l'étude.

• Des recherches sur l'agglutination des grosses particules sont prévues.

• Une confirmation visuelle solide de la récupération des particules est requise.

Choisissez SAPS30UM-10 Quand :

• Une grande microsphère est requise avec un transfert et une compatibilité fluidique un peu plus faciles.

• La microscopie et la recherche sur la taille des cellules restent importantes.

• Un plus grand nombre de particules par unité de masse est souhaité.

• Une sédimentation inférieure à 50 µm est préférable.

Choisissez SAPS20UM-10 Quand :

• Une plate-forme plus petite et à grosses particules est requise.

• Il faut davantage de particules par unité de masse.

• L'analyse basée sur les flux est plus importante.

• Un tassement plus faible est préférable.

• Une compatibilité microfluidique plus facile est requise.

La taille finale des particules doit être sélectionnée en fonction de l'application biologique, de la plate-forme de détection, du nombre de particules requis, de la charge en ligand, du comportement de sédimentation, de la méthode de récupération et de la compatibilité des instruments.

Contrôle qualité et cohérence des lots

Les paramètres potentiels de contrôle qualité pour SAPS50UM-10 incluent :

• Diamètre moyen des particules

• Plage de granulométrie

• Distribution granulométrique

• Coefficient de variation granulométrique

• Morphologie des particules

• Apparence des suspensions

• Teneur en solides

• Consistance de l'enrobage de streptavidine

• Capacité de liaison à la biotine

• Concentration en nombre de particules

• Dispersion des particules

• Niveau global

• Taux de règlement

• Performances de redispersion

• Récupération de particules

• Signal de fond

• Liaison non spécifique

• Contrôle microbien

• Intégrité de l'emballage

• Stabilité de stockage

• Cohérence d'un lot à l'autre

Tests de taille des particules

La caractérisation granulométrique peut inclure :

• Diamètre moyen

• Diamètre médian

• Taille minimale et maximale

• Répartition des tailles

• Coefficient de variation

• Résultats de microscopie

• Analyse granulométrique instrumentale

La méthode de mesure doit être indiquée lors de la déclaration des données de taille.

Capacité de liaison à la biotine

La capacité de liaison doit être mesurée à l’aide d’une molécule d’essai biotinylée définie.

Le résultat peut être affecté par :

• Type de sonde

• Taille moléculaire

• Niveau de biotinylation

• Pureté de la sonde

• Conditions d'incubation

• Composition du tampon

• Procédure de lavage

• Méthode de détection

• Base de calcul

Les résultats de capacité de liaison obtenus à l’aide de différentes sondes ou méthodes de test peuvent ne pas être directement comparables.

Contrôle qualité fonctionnel

Un test de CQ fonctionnel peut évaluer :

• Liaison d'une sonde biotinylée standardisée

• Pourcentage de particules positives

• Répartition des signaux

• Séparation d'arrière-plan

• Récupération de particules

• Pourcentage global

• Répétabilité

• Redispersion après stockage

Cohérence du remplissage et de l'échantillonnage

Étant donné que les particules de 50 µm peuvent se déposer rapidement, les procédures de remplissage doivent être soigneusement validées.

Les contrôles potentiels comprennent :

• Mélange doux et continu pendant le remplissage

• Test de comptage de particules en début, milieu et fin de remplissage

• Vérification de la teneur en solides

• Contrôle visuel d'homogénéité

• Comparaison du nombre de particules entre les conteneurs

• Tests de redispersion répétés

Documentation spécifique au lot

La documentation disponible peut inclure :

• Certificat d'analyse

• Spécification du produit

• Résultats granulométriques

• Résultats sur la teneur en solides

• Résultats de capacité de liaison

• Résultats du comptage de particules

• Fiche de données de sécurité

• Instructions de manipulation

• Recommandations de stockage

• Numéro de lot

• Date de fabrication

Les tests de libération requis et les critères d'acceptation doivent être convenus avant la fabrication en vrac.

Fabrication en vrac et personnalisation

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. fournit des microsphères de streptavidine SHBC pour la recherche en laboratoire, le développement pilote, la production répétée et les achats en gros par les entreprises.

Évaluation des échantillons de recherche

Les échantillons peuvent être évalués pour :

• Morphologie des particules

• Distribution granulométrique

• Dispersion des particules

• Activité streptavidine

• Chargement de ligand biotinylé

• Liaison non spécifique

• Récupération de particules

• Faisabilité du test

• Compatibilité microscopie

• Compatibilité microfluidique

• Décantation et redispersion

• Cohérence de l'échantillonnage

Développement à l’échelle pilote

Les lots pilotes peuvent prendre en charge :

• Optimisation des tests

• Vérification de la capacité de liaison

• Etudes de stabilité

• Sélection du tampon

• Évaluation du conservateur

• Évaluation des emballages

• Développement de processus de remplissage

• Développement du contrôle qualité

• Vérification du client

• Transfert de processus

Production en vrac

La fabrication en vrac peut être organisée une fois que les exigences techniques et les spécifications de sortie ont été confirmées.

Veuillez fournir :

• Quantité requise

• Demande annuelle attendue

• Taille de paquet préférée

• Application biologique prévue

• Diamètre de particule requis

• Teneur en solides requise

• Capacité de liaison requise

• Concentration requise en nombre de particules

• Type de ligand biotinylé

• Exigences en matière de tampon

• Restrictions relatives aux conservateurs

• Exigences de contrôle de qualité

• Exigences en matière de documentation

• Calendrier de livraison

• Lieu de livraison

Diamètre de particule personnalisé

Des tailles de particules alternatives peuvent être discutées en fonction de la faisabilité de l’application et de la fabrication.

Chargement personnalisé de streptavidine

Les niveaux d'enrobage de streptavidine ou les objectifs de capacité de liaison spécifiques au projet peuvent être évalués.

Fluorescence personnalisée ou codage couleur

Pour l’imagerie et la recherche multiplex, des microsphères de streptavidine codées par fluorescence ou visiblement colorées peuvent être discutées.

Les options potentielles peuvent inclure :

• Longueurs d'onde d'excitation alternatives

• Longueurs d'onde d'émission alternatives

• Différentes couleurs de fluorescence

• Plusieurs niveaux d'intensité de fluorescence

• Couleurs des particules visibles

• Systèmes de codage spécifiques au client

Tampon et concentration personnalisés

Des concentrations alternatives de solides, des formulations tampons, des tensioactifs, des systèmes de conservation et des formats d'emballage peuvent être évalués.

Fourniture OEM et marque privée

Les formats de coopération disponibles peuvent inclure :

• Emballage OEM

• Étiquettes spécifiques au client

• Approvisionnement en marque privée

• Numéros de catalogue spécifiques au client

• Approvisionnement en matières premières en vrac

• Documents techniques personnalisés

• Spécifications de version spécifiques au client

Recommandations de stockage et de stabilité

Suivez l'étiquette du produit final, la fiche technique et le certificat d'analyse spécifique au lot.

Les recommandations générales comprennent :

• Conserver dans les conditions réfrigérées spécifiées.

• Ne pas congeler à moins que la stabilité gel-dégel ait été validée.

• Gardez le récipient bien fermé.

• Conservez le flacon à la verticale.

• Maintenir les microsphères dans le liquide.

• Bien mélanger avant de prélever.

• Maintenir un mélange doux lors de distributions répétées.

• Utilisez des pointes de pipettes propres et de large diamètre et des tubes à faible liaison.

• Eviter la contamination de la suspension d'origine.

• Ne laissez pas les particules sécher.

• Évitez les changements de température inutiles et répétés.

• Ne remettez pas le matériau dilué dans le récipient d'origine.

• Enregistrez le numéro de lot du produit et la date d’ouverture.

Les protocoles établis des fournisseurs recommandent également de conserver les particules de streptavidine dans un liquide, d'éviter le séchage et la congélation, car ces conditions peuvent réduire les performances ou provoquer une agrégation irréversible.

Règlement et remise en suspension

Étant donné que le SAPS50UM-10 contient de grosses particules, la sédimentation peut se produire rapidement.

Avant utilisation :

1. Laisser le flacon atteindre la température de manipulation recommandée.

2. Retournez ou faites pivoter doucement le flacon.

3. Appliquer un vortex contrôlé si nécessaire.

4. Confirmez que la suspension est homogène.

5. Mélanger immédiatement avant le prélèvement.

6. Continuez à mélanger doucement lors de distributions répétées.

7. Inspectez les agrégats irréversibles.

Un tassement réversible n’indique pas nécessairement une défaillance du produit.

Évitez de sécher

Ne laissez pas les particules sécher pendant le lavage.

Le séchage peut provoquer :

• Agrégation irréversible

• Activité réduite de la streptavidine

• Redispersion difficile

• Augmentation du fond de test

• Récupération réduite des particules

Évitez le gel

Le gel peut provoquer :

• Agrégation de particules

• Modifications de la stabilité de la suspension

• Activité réduite de la streptavidine

• Récupération réduite des particules

• Variabilité accrue des tests

Évaluer la stabilité du réactif préparé

Les microsphères chargées de ligand biotinylé et bloquées peuvent avoir une stabilité différente de celle de la suspension SAPS50UM-10 d'origine.

Évaluez le réactif final préparé dans les conditions de stockage, de transport et de fonctionnement prévues.

Guide de dépannage

Faible liaison au ligand biotinylé

Causes possibles :

• Biotine libre dans le tampon

• Réactif de biotinylation résiduelle

• Biotinylation du ligand faible

• Groupes de biotine inaccessibles

• Concentration insuffisante de ligand

• Temps d'incubation insuffisant

• Streptavidine inactive

• Tampon incompatible

• Particules se déposant pendant l'incubation

Actions recommandées :

• Supprimez la biotine libre.

• Purifier le ligand biotinylé.

• Vérifiez le niveau de biotinylation.

• Évaluez une entretoise appropriée.

• Maintenir un mélange doux et continu.

• Augmentez progressivement la concentration du ligand.

• Testez un ligand biotinylé de contrôle positif.

Signal de fond élevé

Causes possibles :

• Blocage insuffisant

• Réactif de détection en excès

• Lavage inadéquat

• Adsorption rapporteur non spécifique

• Interférence échantillon-matrice

• Anticorps agrégés

• Chargement excessif du ligand de capture

Actions recommandées :

• Comparez différents bloqueurs.

• Titrer le réactif de détection.

• Optimiser le lavage.

• Retirez les agrégats de protéines le cas échéant.

• Diluer l'échantillon.

• Réduisez la charge du ligand de capture.

Nombre de particules inégaux entre les aliquotes

Causes possibles :

• Dépose rapide des particules

• Mélange de bouillon inadéquat

• Délai entre le mixage et l'échantillonnage

• Ouverture étroite de la pointe de la pipette

• Technique de transfert incohérente

• Rétention de particules dans la pointe

Actions recommandées :

• Mélanger avant chaque aliquote.

• Utilisez une pointe de pipette à large diamètre.

• Maintenir un mélange lent lors de distributions répétées.

• Standardisez l’intervalle d’échantillonnage.

• Vérifiez le nombre de particules pendant le remplissage.

Agrégation de particules

Causes possibles :

• Tampon incompatible

• pH extrême

• Haute force ionique

• Gel

• Séchage

• Charge excessive de ligand

• Stabilisateur insuffisant

• Contamination microbienne

Actions recommandées :

• Évaluez la compatibilité des tampons.

• Évitez le gel et le séchage.

• Optimisez le chargement du ligand.

• Utiliser un mélange doux et contrôlé.

• Examinez les exigences en matière de stabilisants et de conservateurs.

Faible récupération de particules

Causes possibles :

• Perte lors de l'élimination du surnageant

• Adhésion aux tubes

• Filtre ou taille de maillage incorrect

• Sédimentation incomplète

• Transfert incomplet

• Lavage excessif

• Rétention de particules à l'intérieur des pointes de pipettes

Actions recommandées :

• Utilisez des tubes à faible liaison.

• Optimiser les conditions de séparation.

• Validez le filtre ou le maillage.

• Mélangez avant chaque transfert.

• Réduisez les étapes de lavage inutiles.

• Laisser un volume résiduel contrôlé au-dessus du pellet.

Blocage microfluidique

Causes possibles :

• Les dimensions du canal sont trop petites

• Agrégation de particules

• Concentration excessive de particules

• Connecteurs étroits

• Vannes ou filtres incompatibles

• Rinçage insuffisant de l'appareil

Actions recommandées :

• Confirmez la dimension minimale du canal.

• Réduire la concentration de particules.

• Retirez les agrégats avant le chargement.

• Augmentez les dimensions du chemin d'écoulement.

• Validez d’abord l’appareil complet avec des particules simples de 50 µm.

Foire aux questions

Qu'est-ce que SAPS50UM-10 ?

SAPS50UM-10 est une suspension de microsphères enrobées de streptavidine de 50 µm fournie à 1 % de solides pour capturer des biomolécules biotinylées dans la recherche biologique et les analyses basées sur les particules.

Qu'est-ce que la marque SHBC ?

SHBC est la marque de microsphères et de matériaux biotechnologiques de Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.

Quel est le diamètre nominal des particules ?

Le diamètre nominal des particules est de 50 µm.

Le diamètre mesuré, la plage de tailles et la distribution granulométrique doivent être confirmés à l'aide de la documentation spécifique au lot.

Quelle est la teneur en solides ?

SAPS50UM-10 est fourni à 1 % de solides.

Les microsphères SAPS50UM-10 sont-elles magnétiques ?

Le produit ne doit pas être considéré comme magnétique à moins que les propriétés magnétiques ne soient spécifiquement indiquées dans les spécifications techniques.

Pour la séparation magnétique, sélectionnez un produit spécifiquement décrit sous le nom de billes magnétiques de streptavidine.

Les microsphères sont-elles fluorescentes ?

Le produit SAPS50UM-10 standard ne doit pas être supposé contenir un colorant fluorescent interne à moins que la fluorescence ne soit spécifiquement indiquée.

Une version codée par fluorescence peut être discutée comme un produit personnalisé.

Quelles molécules peuvent se lier à SAPS50UM-10 ?

La surface de la streptavidine peut capturer des anticorps biotinylés, des antigènes, des protéines, des peptides, des enzymes, des récepteurs, des lectines, des oligonucléotides, de l'ADN, de l'ARN, des aptamères et d'autres molécules contenant de la biotine.

Un anticorps non modifié peut-il se lier directement ?

Un anticorps non modifié ne se fixera pas spécifiquement via l’interaction streptavidine-biotine à moins qu’il ne soit biotinylé ou connecté via un autre réactif compatible.

L’activation EDC/NHS est-elle requise ?

L’activation EDC/NHS n’est normalement pas nécessaire lors du chargement d’une molécule biotinylée sur des microsphères recouvertes de streptavidine.

Quelle est la capacité de liaison à la biotine ?

La capacité de liaison doit être confirmée à l’aide des spécifications du produit ou du certificat d’analyse spécifique au lot.

Il ne doit pas être estimé uniquement à partir de la teneur en matières solides ou du diamètre des particules.

Pourquoi choisir des microsphères de 50 µm ?

Les particules de 50 µm offrent une grande surface par particule individuelle, une excellente visibilité microscopique, une identification facile des particules individuelles et des dimensions adaptées à la recherche biologique et microfluidique sur les grosses particules.

Les particules de 50 µm offrent-elles une plus grande surface totale ?

Chaque particule de 50 µm a plus de surface que chaque particule plus petite.

Cependant, les particules plus petites fournissent normalement plus de particules et une plus grande surface collective par unité de masse.

Pourquoi les particules se déposent-elles rapidement ?

Les grosses particules se déposent généralement plus rapidement que les petites microsphères.

Mélangez le stock immédiatement avant l’échantillonnage et maintenez un mélange doux pendant l’incubation et les distributions répétées.

Le SAPS50UM-10 peut-il être utilisé pour la microscopie ?

Oui. La taille des particules convient à l'évaluation par microscopie optique, à fluorescence et confocale.

Le SAPS50UM-10 peut-il être utilisé en cytométrie en flux ?

Il ne peut être utilisé que lorsque le système fluidique, la buse, la Flow Cell, la sonde d'échantillon et les voies internes du cytomètre en flux sont compatibles avec les particules de 50 µm.

Le SAPS50UM-10 peut-il être utilisé comme modèle de cellule ?

Le diamètre de 50 µm peut être pertinent pour la recherche sélectionnée sur les grandes cellules, les sphéroïdes, les embryons ou les particules biologiques synthétiques.

Les microsphères synthétiques ne reproduisent pas toutes les propriétés optiques, mécaniques, chimiques ou biologiques des cellules vivantes.

Les microsphères peuvent-elles être utilisées pour des immunoessais ?

Oui. Un anticorps de capture biotinylé peut être immobilisé sur la particule, suivi d'une capture cible et d'une détection avec un rapporteur compatible.

Les particules peuvent-elles être utilisées pour la capture d’acide nucléique ?

Oui. Les oligonucléotides biotinylés, l'ADN, l'ARN, les produits de PCR et les aptamères peuvent être évalués pour l'immobilisation et la capture de cibles.

Le SAPS50UM-10 peut-il être utilisé dans les tests multiplex ?

Oui, à condition que la population de 50 µm puisse être distinguée des autres populations de microsphères.

Un codage par taille, un codage par fluorescence ou un codage par couleur visible peuvent être envisagés.

Comment laver les particules ?

La méthode de lavage dépend du matériau particulaire, de la densité, du tampon, du volume et de la récupération requise.

La centrifugation, la filtration, la récupération sur maille ou la sédimentation contrôlée peuvent être évaluées.

Comment réduire les liaisons non spécifiques ?

Optimisez le réactif de blocage, la concentration du ligand de capture, la concentration du réactif de détection, les conditions de lavage, le niveau de détergent, la dilution de l’échantillon et le temps d’incubation.

Peut-on utiliser des tampons contenant de la biotine libre ?

La biotine libre peut occuper des sites de liaison à la streptavidine et doit généralement être évitée lors du chargement du ligand de capture.

Le SAPS50UM-10 doit-il être dilué avant utilisation ?

Oui. Préparez une concentration de travail en fonction du nombre de particules requis, du volume de réaction et de la méthode de détection.

Le SAPS50UM-10 peut-il être gelé ?

La congélation n’est généralement pas recommandée à moins que la stabilité gel-dégel n’ait été spécifiquement validée.

La concentration peut-elle être personnalisée ?

Des concentrations alternatives de solides peuvent être discutées en fonction des exigences du projet et de la faisabilité de la fabrication.

La capacité de reliure peut-elle être personnalisée ?

Les niveaux d'enrobage de streptavidine ou les objectifs de capacité de liaison spécifiques au projet peuvent être évalués.

Peut-on produire des microsphères fluorescentes de streptavidine de 50 µm ?

Des microsphères de streptavidine de 50 µm codées par fluorescence ou visiblement colorées peuvent être discutées pour des projets d'imagerie, microfluidiques et multiplex qualifiés.

La production en vrac est-elle disponible ?

Oui. Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. prend en charge les échantillons, les lots pilotes, les commandes répétées, les projets OEM et la fabrication en vrac.

Quelles informations sont nécessaires pour un devis ?

Veuillez fournir :

• Numéro de catalogue SAPS50UM-10

• Quantité requise

• Volume d’achat annuel prévu

• Taille de paquet préférée

• Application biologique prévue

• Type de ligand biotinylé

• Capacité de liaison requise

• Particules requises par test

• Méthode de détection

• Restrictions de tampon

• Restrictions relatives aux conservateurs

• Exigences de contrôle de qualité

• Exigences en matière de documentation

• Lieu de livraison

Demander un échantillon ou un devis groupé

Les microsphères de streptavidine SHBC SAPS50UM-10 de 50 µm fournissent une plateforme de particules large et clairement identifiable pour immobiliser les anticorps biotinylés, les protéines, les peptides, les enzymes, les récepteurs, les lectines, les oligonucléotides, l'ADN, l'ARN, les aptamères et autres molécules marquées à la biotine.

Le produit convient pour :

• Développement d'essais biologiques

• Tests immunologiques à base de billes

• Immobilisation d'anticorps

• Recherche sur les interactions protéiques

• Capture d'acide nucléique

• Tests d'hybridation

• Recherche sur les interactions cellules-particules

• Microscopie et imagerie à haut contenu

• Recherche microfluidique

• Agglutination des particules

• Systèmes multiplex à code de taille

• Biocapteurs à base de particules

• Analyse de particules individuelles

• Fabrication de réactifs de recherche

SAPS50UM-10 fournit :

• Diamètre nominal des particules de 50 µm

• Surface fonctionnelle streptavidine

• 1% de suspension solide

• Grande surface par particule individuelle

• Excellente visibilité microscopique

• Compatibilité avec les biomolécules biotinylées

• Fourniture d'échantillons et de lots pilotes

• Capacité de fabrication en vrac

• Support OEM et développement personnalisé

Pour l'évaluation d'échantillons ou l'achat en gros, fournissez l'application prévue, la quantité requise, le ligand biotinylé, la capacité de liaison souhaitée, la plate-forme de détection, les exigences d'emballage et les spécifications de contrôle qualité.

Nom du produit : Microsphères de streptavidine de 50 µm
Numéro de catalogue : SAPS50UM-10
Marque : SHBC
Fabricant : Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.
Diamètre nominal des particules : 50 µm
Modification de surface : Teneur en solides de streptavidine
: 1 %
Application principale : Recherche biologique et analyses basées sur les particules
Capacité d'approvisionnement : Échantillons, lots pilotes et production en vrac
Utilisation prévue : Utilisation pour la recherche uniquement. Pas pour un usage diagnostique ou thérapeutique.