3um Flow Rot-Fluo-Mikrosphären RCY3UM-630 0,5 %

3 µm Flow Red-Fluo-Mikrosphären für die Durchflusszytometrie

SHBC RCY3UM-630 Flow Red-Fluo Microspheres sind 3 µm große, tiefrot fluoreszierende Mikrokügelchen, die für die Rotlaser-Durchflusszytometrieforschung, Fluoreszenzkanalbewertung, Instrumentenmethodenentwicklung, Bead-basierte Assay-Forschung und Massenreagenzienproduktion entwickelt wurden.

Die Mikrokügelchen sind für eine Anregung bei etwa 630 nm ausgelegt und bieten einen breiten Emissionsbereich im tiefroten Bereich von 665–720 nm. Dieses Spektralprofil eignet sich für Durchflusszytometer, die mit kompatiblen roten Lasern und Fernrot-Fluoreszenzdetektoren ausgestattet sind.

RCY3UM-630 wird als Suspension mit 0,5 % Feststoffgehalt geliefert und ist für Laborbewertungen, die Entwicklung im Pilotmaßstab, die wiederholte Produktion und die Massenlieferung verfügbar.

Schnelle Produktantwort

RCY3UM-630 ist eine 3 µm große, tiefrot fluoreszierende Mikrokügelchensuspension mit 0,5 % Feststoffen, einer Anregung von ca. 630 nm und einer Emission von 665–720 nm. Es ist für die Durchflusszytometrie-Forschung, die Rotlaser-Fluoreszenzdetektion, Studien zur Geräteeinstellung, die Entwicklung perlenbasierter Methoden und die Herstellung von Forschungsreagenzien vorgesehen.

Produkt-Highlights

• Produktname: Flow Red-Fluo Microspheres

• Katalognummer: RCY3UM-630

• Nomineller Partikeldurchmesser: 3 µm

• Anregungswellenlänge: 630 nm

• Emissionswellenlänge: 665–720 nm

• Fluoreszenzbereich: Dunkelrot

• Feststoffgehalt: 0,5 %

• Hauptanwendung: Durchflusszytometrie-Forschung

• Lieferfähigkeit: Muster-, Pilot- und Massenproduktion

• Verwendungszweck: Nur für Forschungszwecke

RCY3UM-630 Produktübersicht

RCY3UM-630 besteht aus 3 µm großen fluoreszierenden Mikrokügelchen, die unter kompatibler roter Laseranregung ein fernrotes Fluoreszenzsignal erzeugen.

Der Partikeldurchmesser von 3 µm bietet eine klar definierte Mikrosphärenpopulation für viele herkömmliche Durchflusszytometrieplattformen. Im Vergleich zu Partikeln im Submikronbereich erzeugen 3-µm-Mikrokügelchen im Allgemeinen eine stärkere optische Streuung und lassen sich möglicherweise leichter von elektronischem Rauschen und Partikelhintergrund trennen.

Dadurch eignet sich RCY3UM-630 für Forschungsteams, die Folgendes entwickeln oder evaluieren:

• Rotlaser-Fluoreszenzdetektion

• Einstellungen für den Dunkelrot-Detektor

• Streu- und Fluoreszenz-Gating

• Einrichtung der Durchflusszytometer-Methode

• Verfolgung fluoreszierender Partikel

• Bead-basierte Assay-Plattformen

• Optimierung der Partikelkonzentration

• Arbeitsabläufe bei der Reagenzienentwicklung

• Vergleich der Instrumentenleistung

• Fluoreszenzbewertung von Charge zu Charge

Das Produkt kann von Biotechnologieunternehmen, Durchflusszytometrielabors, Instrumentenentwicklern, Assay-Herstellern, Universitäten, Forschungsinstituten und Organisationen zur Entwicklung diagnostischer Reagenzien verwendet werden.

RCY3UM-630 wird für Forschung und Entwicklung geliefert. Jede Verwendung als formales Kalibrierungsmaterial, absoluter Zählstandard, quantitativer Fluoreszenzstandard oder regulierte diagnostische Kontrolle erfordert eine zusätzliche Qualifizierung und Validierung.

Technische Spezifikationen

Gemäß der bestätigten Produktionsspezifikation können zusätzliche losspezifische Informationen verfügbar sein.

Die Projektdokumentation kann gegebenenfalls Folgendes umfassen:

• Analysezertifikat

• Ergebnisse des Partikelgrößentests

• Ergebnisse des Fluoreszenztests

• Informationen zum Feststoffgehalt

• Anweisungen zur Produkthandhabung

• Sicherheitsdatenblatt

• Lagerungsempfehlungen

• Chargen- und Produktionsinformationen

Partikelzusammensetzung, Oberflächenchemie, Konservierungssystem, Variationskoeffizient der Partikelgröße, Grenzwerte der Fluoreszenzintensität, Verpackungskonfiguration und Haltbarkeit sollten anhand des Angebots, des technischen Datenblatts oder des chargenspezifischen Analysezertifikats bestätigt werden.

Dunkelrote Fluoreszenz mit 630 nm Anregung

RCY3UM-630-Mikrokügelchen sind für eine Anregung nahe 630 nm ausgelegt und emittieren Fluoreszenz im gesamten Wellenlängenbereich von 665–720 nm.

Dieses Anregungs- und Emissionsprofil eignet sich für Rotlaser-Durchflusszytometriesysteme unter Verwendung eines kompatiblen Fernrotdetektors.

Zu den potenziell kompatiblen Wellenlängen roter Laser können gehören:

• 630 nm

• 633 nm

• 635 nm

• 637 nm

• 640 nm

Die bei jeder Laserwellenlänge erhaltene Fluoreszenzreaktion kann unterschiedlich sein. Die Kompatibilität sollte daher mit dem vorgesehenen Durchflusszytometer überprüft werden.

Der breite Emissionsbereich von 665–720 nm kann mehrere Detektorkonfigurationen im fernen Rot überlappen. Abhängig vom Instrument können geeignete optische Filter Filter umfassen, deren Mitte ungefähr bei Folgendem liegt:

• 660–680 nm

• 665–695 nm

• 670–710 nm

• 680–720 nm

• 690–735 nm

Das tatsächliche Signal hängt ab von:

• Laserwellenlänge

• Laserleistung

• Detektortyp

• Detektorverstärkung oder -spannung

• Bandpassfilter

• Dichroitische Spiegelkonfiguration

• Partikelkonzentration

• Probenflussrate

• Pufferhintergrund

• Optische Ausrichtung des Instruments

Forscher sollten die tatsächliche optische Konfiguration überprüfen, anstatt sich nur auf Kanalnamen wie APC, FL4, Far Red, Red Fluoreszenz oder R-Kanal zu verlassen.

Warum sollten Sie sich für fluoreszierende Mikrokügelchen mit einer Größe von 3 µm entscheiden?

Einfachere Erkennung mit herkömmlichen Durchflusszytometern

Der Partikeldurchmesser von 3 µm ist deutlich größer als bei Nanopartikeln und Submikron-Perlen.

Bei vielen herkömmlichen Durchflusszytometern können 3-µm-Partikel stärkere Vorwärts- und Seitenstreusignale erzeugen als 500-nm-Partikel. Dadurch lässt sich die Mikrosphärenpopulation bei der Ersteinrichtung des Instruments leichter lokalisieren und steuern.

Die Geräteleistung schwankt immer noch und die Erkennung sollte auf der vorgesehenen Plattform bestätigt werden.

Geeignet für die Auswertung von Rotlaserkanälen

RCY3UM-630 liefert ein fernrotes Fluoreszenzsignal unter Anregung mit einem roten Laser.

Das Produkt kann evaluiert werden, wenn Forscher bestätigen müssen, dass ein roter Laser und der zugehörige Dunkelrot-Detektor eine konsistente Population fluoreszierender Partikel identifizieren können.

Nützlich für die Methodenentwicklung

Eine definierte Population fluoreszierender Mikrokügelchen kann Forschern dabei helfen, Folgendes zu ermitteln:

• Einstellungen für die Detektorverstärkung

• Fluoreszenzschwellen

• Streutore

• Probenflussraten

• Partikelverdünnungsgrade

• Grenzwerte für die Ereignisrate

• Hintergrundausschlussregeln

• Analysevorlagen

Geeignet für perlenbasierte Forschung

Der Größenbereich von 3 µm wird üblicherweise für die perlenbasierte Durchflusszytometrieforschung in Betracht gezogen, da die Partikel einzeln erkannt werden können und gleichzeitig eine physische Oberfläche bieten, die zukünftige Strategien zur Assay-Entwicklung unterstützen könnte.

Wenn eine Biomolekülkopplung erforderlich ist, muss eine geeignete funktionelle Oberfläche ausgewählt und validiert werden.

Geeignet für die Entwicklung von Massenreagenzien

RCY3UM-630 kann im Frühstadium der Forschung evaluiert und dann nach Bestätigung der erforderlichen technischen Spezifikationen in die Pilot- oder Massenproduktion überführt werden.

Wichtige Produktmerkmale

3µm Partikeldurchmesser

Die Nenngröße von 3 µm bietet eine nachweisbare Mikrosphärenpopulation für die Entwicklung von Durchflusszytometriemethoden, die Fluoreszenzanalyse und die partikelbasierte Forschung.

Dunkelrote Fluoreszenz

Die Mikrokügelchen sind für eine Anregung bei ca. 630 nm und eine Emission bei 665–720 nm ausgelegt.

Rot-Laser-Kompatibilität

RCY3UM-630 ist für die Auswertung auf Durchflusszytometern vorgesehen, die mit kompatiblen roten Lasern ausgestattet sind.

0,5 % Feststoffgehalt

Die mitgelieferte Konzentration ermöglicht es Forschern, Arbeitsverdünnungen entsprechend der erforderlichen Ereignisrate und Anwendung herzustellen.

Breite dunkelrote Emission

Der breite Emissionsbereich bietet Flexibilität bei der Auswahl von Detektoren und Filtern, die das fernrote Spektrum überlappen.

Versorgung von der Forschung bis zur Produktion

Das Produkt kann Erstmustertests, Laboroptimierung, Pilotproduktion und Großeinkauf unterstützen.

Individuelle Projektunterstützung

Alternative Partikelgrößen, Konzentrationen, Fluoreszenzintensitäten, Oberflächenchemien und Verpackungsformate können für qualifizierte Entwicklungsprojekte diskutiert werden.

Anwendungen der Durchflusszytometrie

Rotlaser-Fluoreszenzdetektion

RCY3UM-630 kann verwendet werden, um zu bewerten, ob der rote Laser und der Fernrotdetektor eines Durchflusszytometers eine definierte Population fluoreszierender Partikel erkennen können.

Forscher können vergleichen:

• Fluoreszenzintensität

• Reaktion des Detektors

• Signal-Hintergrund-Trennung

• Veranstaltungsverteilung

• Histogrammbreite

• Messstabilität im Alltag

Forschung zur Instrumenteneinrichtung

Die Mikrokügelchen können die Entwicklung konsistenter Verfahren zur Instrumenteneinrichtung unterstützen.

Zu den möglichen Forschungsanwendungen gehören:

• Lokalisierung der Partikelpopulation

• Vorwärtsstreuungsverstärkung anpassen

• Seitenstreuverstärkung anpassen

• Einstellen der Spannung des Dunkelrot-Detektors

• Festlegung einer Fluoreszenzschwelle

• Erstellen eines Standard-Analysetors

• Überprüfung der Stabilität des Probenflusses

• Vergleich niedriger, mittlerer und hoher Durchflussraten

RCY3UM-630 sollte nicht automatisch als zertifizierter Instrumentenkalibrierungsstandard bezeichnet werden, es sei denn, das gelieferte Produkt wurde speziell für diesen Zweck getestet und dokumentiert.

Überprüfung des Far-Red-Kanals

Mithilfe der Mikrokügelchen kann festgestellt werden, ob der ausgewählte Detektorfilter den Emissionsbereich des Produkts von 665–720 nm überlappt.

Der Benutzer kann Folgendes bewerten:

• Empfindlichkeit des Detektors

• Filterkompatibilität

• Hintergrundtrennung

• Signalsättigung

• Wiederholbarkeit der Erfassung

• Spillover von Kanal zu Kanal

Formale Kompensationskontrollen erfordern normalerweise Kontrollen, die den Fluorophor- und Markierungseigenschaften des Assays entsprechen. RCY3UM-630 sollte daher vor der Verwendung als Kompensationskontrolle validiert werden.

Entwicklung von Fluoreszenzauslösern

In einigen Forschungsabläufen kann Fluoreszenz anstelle von Streuung als Erfassungsauslöser verwendet werden.

RCY3UM-630 kann evaluiert werden für:

• Durch Fluoreszenz ausgelöste Aufnahme

• Optimierung der Triggerschwelle

• Hintergrunddiskriminierung

• Ausschluss von Ereignissen mit geringer Fluoreszenz

• Vergleich von Streuung und Fluoreszenztriggerung

Partikelverdünnungs- und Ereignisratenstudien

Die 0,5 %ige Suspension kann verdünnt werden, um verschiedene Partikelkonzentrationen herzustellen.

Eine Verdünnungsreihe kann dabei helfen, Bedingungen zu identifizieren, die Folgendes bewirken:

• Stabile Veranstaltungsraten

• Minimaler Zufall

• Klare Partikelauflösung

• Reproduzierbare Fluoreszenz

• Akzeptable Erfassungszeit

• Geringer Probenverbrauch

Bewertung von Fluidsystemen

Fluoreszierende Mikrokügelchen können bei der Untersuchung der Probeneinführung und der Partikelbewegung durch ein Durchflusszytometer oder ein Mikrofluidiksystem untersucht werden.

Zu den möglichen Beobachtungen gehören:

• Stabilität der Ereignisrate

• Probenverschleppung

• Flussunterbrechung

• Partikelrückgewinnung

• Konsistenz von Rohr zu Rohr

• Fluidische Reinigungswirkung

Bead-basierte Assay-Entwicklung

Wenn sie mit einer geeigneten Oberflächenchemie geliefert oder unter Verwendung dieser entwickelt werden, können 3 µm große fluoreszierende Mikrokügelchen die perlenbasierte Assay-Forschung unterstützen.

Zu den möglichen Assay-Entwicklungsrichtungen gehören:

• Antikörperimmobilisierung

• Antigen-Immobilisierung

• Proteinbindungsstudien

• Forschung zum Einfangen von Nukleinsäuren

• Studien zur Ligand-Rezeptor-Interaktion

• Multiplex-Partikelkodierung

• Entwicklung fluoreszierender Trägerpartikel

Die Standardoberflächenchemie von RCY3UM-630 muss vor der Planung eines Kopplungsverfahrens bestätigt werden.

Fluoreszenzmikroskopie und Partikelverfolgung

Zusätzlich zur Durchflusszytometrie können die Mikrosphären in kompatiblen Fluoreszenzmikroskopie-, Bildgebungs-, Mikrofluidik-, Filtrations- und Partikelverfolgungsstudien bewertet werden.

Die Anwendungseignung hängt von der Anregungsquelle des Mikroskops, dem Filtersatz, der Detektorempfindlichkeit, der Probenmatrix und dem erforderlichen Partikelverhalten ab.

Kompatible Laser und Erkennungskanäle

Empfohlene Anregung

Empfohlen wird ein roter Laser nahe der angegebenen Anregungswellenlänge von 630 nm.

Mögliche Laserlinien sind:

RCY3UM-630 ist nicht primär für die Anregung mit 405-nm-, 488-nm- oder 561-nm-Lasern konzipiert, es sei denn, separate Spektraltests bestätigen eine ausreichende Anregung.

Empfohlener Erkennungsbereich

Wählen Sie einen Detektor, dessen optischer Filter den Emissionsbereich von 665–720 nm überlappt.

Ein Filter mit einer Mitte in der Nähe von 680 nm, 690 nm oder 700 nm kann geeignet sein, wenn seine Bandbreite einen ausreichenden Teil des Emissionsspektrums erfasst.

Der beste Detektor kann nicht allein anhand der Mittenwellenlänge ausgewählt werden. Sowohl die Mittenwellenlänge als auch die Filterbreite sollten berücksichtigt werden.

Zum Beispiel:

• Ein 670/30-Filter sammelt etwa 655–685 nm.

• Ein 695/40-Filter sammelt etwa 675–715 nm.

• Ein 710/50-Filter sammelt etwa 685–735 nm.

Hierbei handelt es sich eher um Beispiele für Filterbereiche als um garantierte Instrumentenempfehlungen.

APC-ähnliche Erkennungskanäle

Die tiefrote Emission des Produkts kann Detektorkanäle überlappen, die üblicherweise mit APC-ähnlicher Fluoreszenz in Verbindung gebracht werden.

Allerdings sollte RCY3UM-630 nicht als chemisch identisch oder spektral identisch mit APC beschrieben werden. Die Kompatibilität sollte auf dem tatsächlichen Anregungs- und Emissionsprofil und nicht auf dem Namen des Fluorophorkanals basieren.

Empfohlener Workflow für die Durchflusszytometrie

Der folgende Arbeitsablauf ist ein allgemeiner Ausgangspunkt. Geräteeinstellungen und Probenvorbereitung sollten für die beabsichtigte Anwendung optimiert werden.

1. Bereiten Sie das Durchflusszytometer vor

Reinigen und grundieren Sie das Instrument gemäß den Anweisungen des Herstellers.

Bestätigen Sie, dass das Fluidsystem stabil ist und dass der rote Laser und der Fernrotdetektor verfügbar sind.

2. Führen Sie einen Buffer Blank durch

Verwenden Sie denselben Puffer, der zum Verdünnen der Mikrokügelchen verwendet wird.

Notieren Sie die Leerereignisrate in:

• Vorwärtsstreuung

• Seitliche Streuung

• Dunkelrote Fluoreszenz

• Alle anderen überwachten Kanäle

Ein Pufferleerwert hilft bei der Identifizierung von Partikelverunreinigungen, elektronischem Rauschen, Pufferfluoreszenz und Verschleppungen aus früheren Proben.

3. Resuspendieren Sie die Mikrosphären

Mischen Sie das Fläschchen vor der Probenahme vorsichtig, bis die Suspension homogen ist.

Geeignete Erstmethoden können sein:

• Sanfte Inversion

• Kontrolliertes Vortexen

• Bei Bedarf kurzes, mildes Ultraschallbad

Vermeiden Sie übermäßige Schaumbildung, Überhitzung, längere Ultraschallbehandlung oder harte mechanische Behandlung.

Verlassen Sie sich nicht allein auf das optische Erscheinungsbild, um eine vollständige Ausbreitung zu bestätigen.

4. Bereiten Sie eine Verdünnungsreihe vor

Bereiten Sie mehrere Arbeitsverdünnungen in sauberen Röhrchen vor.

Beispielsweise kann eine Vorstudie mehrere zehnfache oder schrittweise Verdünnungen umfassen.

Die genaue Verdünnung hängt ab von:

• Ursprüngliche Feststoffkonzentration

• Probenrate des Durchflusszytometers

• Gewünschte Ereignisrate

• Erfassungszeit

• Anwendung

• Hintergrundebene

Beginnen Sie mit einer niedrigen Konzentration und erhöhen Sie diese bei Bedarf schrittweise.

5. Verwenden Sie eine niedrige Probenflussrate

Während der anfänglichen Optimierung wird eine niedrige Flussrate empfohlen, da sie die Populationsauflösung verbessern und gleichzeitig auftretende Ereignisse reduzieren kann.

Nachdem geeignete Bedingungen geschaffen wurden, können mittlere oder hohe Durchflussraten bewertet werden.

6. Lokalisieren Sie die Partikelpopulation

Beginnen Sie mit Vorwärtsstreuungs-, Seitenstreuungs- und Fernrot-Fluoreszenzdiagrammen.

Passen Sie die Streuungs- und Fluoreszenzeinstellungen schrittweise an, bis die Partikelpopulation deutlich vom Pufferhintergrund getrennt ist.

7. Wählen Sie den Far-Red-Detektor aus

Wählen Sie einen Detektorfilter, der den Emissionsbereich von 665–720 nm überlappt.

Erhöhen Sie die Spannung oder Verstärkung des Detektors vorsichtig, um eine Sättigung des Signals zu vermeiden.

8. Richten Sie ein Tor ein

Erstellen Sie ein Tor um die Hauptpopulation der Mikrosphären.

Ausschließen:

• Puffergeräusch

• Trümmer

• Mögliche Aggregate

• Zusammenfallende Ereignisse mit sehr hoher Intensität

• Elektronische Artefakte

9. Bewerten Sie den Zufall

Führen Sie mindestens zwei oder drei Partikelverdünnungen durch.

Wenn sich die scheinbare Fluoreszenzintensität, die Streuposition oder die Ereignisverteilung bei der Verdünnung der Probe erheblich ändern, liegt möglicherweise eine Koinzidenz vor.

Setzen Sie die Verdünnung fort, bis die Messung innerhalb des erforderlichen experimentellen Bereichs konzentrationsunabhängig wird.

10. Notieren Sie alle Einstellungen

Zur Reproduzierbarkeit notieren Sie Folgendes:

• Instrumentenmodell

• Laserwellenlänge

• Detektorfilter

• Detektorspannung oder -verstärkung

• Scatter-Einstellungen

• Triggerkanal

• Triggerschwelle

• Probenflussrate

• Verdünnungsfaktor

• Erfassungszeit

• Anzahl der gesammelten Ereignisse

• Pufferzusammensetzung

Verwendung von RCY3UM-630 in der Bead-basierten Assay-Entwicklung

RCY3UM-630 kann als Plattform für fluoreszierende Partikel bei der perlenbasierten Durchflusszytometrieforschung in Betracht gezogen werden.

Überprüfen Sie vor der Testentwicklung, ob das Produkt eine glatte, Carboxyl-, Amino-, Streptavidin-, Epoxid- oder andere funktionelle Oberfläche hat.

Immobilisierung von Biomolekülen

Wenn eine geeignete Oberflächenchemie verfügbar ist, können die Mikrokügelchen hinsichtlich ihrer Immobilisierung bewertet werden:

• Antikörper

• Antigene

• Proteine

• Peptide

• Enzyme

• Oligonukleotide

• Nukleinsäuresonden

• Andere Liganden

Die Kopplungsmethode muss entsprechend der Oberflächenfunktionsgruppe und dem Biomolekül ausgewählt werden.

Assay-Entwicklungsfaktoren

Wichtige Parameter können sein:

• Koppelpuffer

• Puffer-pH

• Biomolekülkonzentration

• Konzentration des Aktivierungsreagenzes

• Kopplungszeit

• Blockiermittel

• Waschvorgang

• Speicherpuffer

• Mikrosphärenkonzentration

• Zielprobenmatrix

• Unspezifische Adsorption

• Fluoreszenzretention

Forschung zur Multiplex-Durchflusszytometrie

Verschiedene Mikrosphärenpopulationen können potenziell unterschieden werden durch:

• Partikeldurchmesser

• Fluoreszenzfarbe

• Fluoreszenzintensität

• Oberflächenchemie

• Interne Codierungsstrategie

Bei einem Multiplex-Assay sollte jede Population nach der Kopplung, Blockierung, Lagerung und Probeninkubation klar getrennt bleiben.

Die Reporterfluoreszenz sollte auch vom fernroten Identifikationssignal RCY3UM-630 getrennt werden.

RCY3UM-630 im Vergleich zu 500 nm fluoreszierenden Mikrokügelchen

Sowohl 3-µm- als auch 500-nm-Mikrokügelchen können in der Durchflusszytometrie-Forschung verwendet werden, eignen sich jedoch für unterschiedliche experimentelle Prioritäten.

Wählen Sie RCY3UM-630, wenn:

• Voraussetzung ist eine deutlich erkennbare Population dunkelroter Partikel.

• Das Projekt verwendet ein herkömmliches Durchflusszytometer.

• Der Forschungsschwerpunkt liegt auf dem Aufbau von Rotlaser-Detektoren.

• Eine Perlenplattform im Mikrometerbereich wird bevorzugt.

• Die Entwicklung von Bead-basierten Assays wird derzeit in Betracht gezogen.

• Sowohl Streu- als auch Fluoreszenz-Gating sind erforderlich.

Wählen Sie 500-nm-Mikrosphären, wenn:

• Das Projekt konzentriert sich speziell auf Submikronpartikel.

• Die Leistung der Erkennung kleiner Partikel wird untersucht.

• Das Gerät verfügt über eine geeignete Fähigkeit zur Detektion von Nanopartikeln oder extrazellulären Vesikeln.

• Die durch Fluoreszenz ausgelöste Erfassung ist ein wichtiges Forschungsziel.

Qualitätskontrolle und Chargenkonsistenz

Bei Reagenzienentwicklungs- und Massenproduktionsprojekten sollten die erforderlichen Qualitätsspezifikationen vor der Herstellung vereinbart werden.

Mögliche Qualitätskontrollparameter können sein:

• Nomineller Partikeldurchmesser

• Partikelgrößenverteilung

• Variationskoeffizient der Partikelgröße

• Aussehen der Federung

• Feststoffgehalt

• Dispersionsleistung

• Aggregatebene

• Anregungsspektrum

• Emissionsspektrum

• Relative Fluoreszenzintensität

• Fluoreszenzverteilung

• Durchflusszytometrie-Histogramm

• Fluoreszenzvergleich von Charge zu Charge

• Mikrobielle Kontrolle

• Lagerstabilität

• Beschleunigte Stabilität

• Verpackungsintegrität

Nicht jeder Parameter ist in jeder Standardproduktspezifikation enthalten. Erforderliche Grenzwerte sollten bei der technischen Bewertung besprochen werden.

Auswertung der Durchflusszytometrie

Ein durchflusszytometrisches QC-Verfahren kann Folgendes bewerten:

• Hauptbevölkerungsposition

• Fluoreszenzmedian oder Mittelwert

• Verteilungsbreite

• Prozentsatz der eingeschlossenen Partikel

• Gesamtbevölkerung

• Hintergrundtrennung

• Wiederholgenauigkeit von Lauf zu Lauf

Beim Vergleich verschiedener Produktionschargen sollten die Geräteeinstellungen unverändert bleiben.

Kalibrierung und Rückverfolgbarkeit

RCY3UM-630 sollte nicht automatisch wie folgt dargestellt werden:

• Ein NIST-rückverfolgbarer Partikelgrößenstandard

• Ein zertifizierter Fluoreszenzintensitätsstandard

• Ein vom MESF zugewiesener Standard

• Ein absoluter Partikelzählstandard

• Eine geregelte Diagnosekontrolle

• Eine zertifizierte Durchflusszytometer-Kalibrierungsperle

Diese Ansprüche erfordern spezifische Tests, Wertzuweisung, Dokumentation und Rückverfolgbarkeit.

Eine projektspezifische Qualifikation kann besprochen werden, wenn ein formeller Antrag auf Referenzmaterial erforderlich ist.

Massenlieferung und kundenspezifische Fertigung

SHBC unterstützt fluoreszierende Mikrosphärenprojekte von der Laborbewertung über die Pilotproduktion bis hin zur Massenfertigung.

Forschungsproben

Zur Beurteilung können Proben verwendet werden:

• Rot-Laser-Kompatibilität

• Kompatibilität mit Dunkelrot-Detektoren

• Fluoreszenzintensität

• Partikeldispersion

• Durchflusszytometrie-Gating

• Probenverdünnung

• Machbarkeit des Tests

Pilotproduktion

Pilotchargen können Folgendes unterstützen:

• Methodenoptimierung

• Stabilitätsforschung

• Verpackungsbewertung

• Erster Losvergleich

• Assay-Transfer

• Kundenüberprüfung

Massenproduktion

Nachdem die technischen Spezifikationen bestätigt wurden, kann die Massenfertigung entsprechend der erwarteten Nachfrage des Kunden arrangiert werden.

Zu den für die Massenbewertung erforderlichen Informationen können gehören:

• Benötigte Menge

• Jahresprognose

• Zielpaketgröße

• Lieferplan

• Anwendung

• Konfiguration des Durchflusszytometers

• Erforderlicher Fluoreszenzpegel

• Oberflächenchemie

• Pufferanforderungen

• QC-Spezifikationen

• Dokumentationsanforderungen

Kundenspezifische Fertigungsoptionen

Abhängig von der technischen Machbarkeit kann die Anpassung Folgendes umfassen:

• Alternative Partikeldurchmesser

• Verschiedene Anregungswellenlängen

• Verschiedene Emissionswellenlängen

• Angepasste Fluoreszenzintensität

• Alternative Feststoffgehalte

• Glatte Mikrosphärenoberflächen

• Carboxylfunktionalisierte Oberflächen

• Aminofunktionalisierte Oberflächen

• Weitere funktionale Oberflächen

• Kundenspezifische Verpackung

• Kundenspezifische QC-Kriterien

• OEM-Kennzeichnung

• ODM-Produktentwicklung

Die endgültige Machbarkeit hängt von den gesamten technischen Anforderungen und dem Auftragsvolumen ab.

Empfehlungen zur Handhabung und Lagerung

Um eine optimale Leistung zu erzielen, befolgen Sie das produktspezifische Etikett, das technische Datenblatt und das Analysezertifikat.

Zu den allgemeinen Empfehlungen gehören:

• Vor Licht geschützt lagern.

• Sofern nicht anders angegeben, wird im Allgemeinen eine gekühlte Lagerung bei 2–8 °C empfohlen.

• Nicht einfrieren, es sei denn, die Gefrier-Tau-Stabilität wurde bestätigt.

• Halten Sie die Durchstechflasche fest verschlossen.

• Lagern Sie den Behälter aufrecht.

• Mischen Sie die Suspension vor Gebrauch.

• Verwenden Sie saubere Pipettenspitzen und Probenröhrchen.

• Vermeiden Sie eine Kontamination des Originalbehälters.

• Vermeiden Sie eine längere Einwirkung von starkem Licht.

• Vermeiden Sie wiederholte unnötige Temperaturänderungen.

• Lassen Sie die Mikrokügelchen nicht trocknen.

• Verdünntes Material nicht in den Originalbehälter zurückgeben.

Resuspension

Wenn es während der Lagerung zu Absetzungen kommt:

1. Lassen Sie die Durchstechflasche die empfohlene Handhabungstemperatur erreichen.

2. Vorsichtig durch Umdrehen mischen.

3. Bei Bedarf kontrolliert vortexen.

4. Untersuchen Sie die Suspension auf sichtbare Aggregate.

5. Bewerten Sie eine kleine Probe mittels Durchflusszytometrie, bevor Sie mit dem gesamten Experiment beginnen.

Eine kurze milde Badbeschallung kann sinnvoll sein, wenn normales Mischen nicht zu einer ausreichenden Dispersion führt.

Lichtschutz

Da das Produkt fluoreszierend ist, sollte eine unnötige Belastung durch starkes Laborlicht minimiert werden.

Arbeitsverdünnungen sollten nach Möglichkeit kurz vor der Verwendung hergestellt werden.

Einfrieren

Das Einfrieren kann zu einer irreversiblen Partikelaggregation oder zu Veränderungen der Suspensionsleistung führen.

Frieren Sie das Produkt nicht ein, es sei denn, die mitgelieferte Dokumentation erlaubt ausdrücklich eine Tiefkühllagerung.

Häufig gestellte Fragen

Was ist RCY3UM-630?

RCY3UM-630 ist eine 3 µm große, tiefrot fluoreszierende Mikrokügelchensuspension, die für die Durchflusszytometrie-Forschung entwickelt wurde. Es hat eine Anregung von etwa 630 nm, eine Emission von 665–720 nm und einen Feststoffgehalt von 0,5 %.

Wie groß ist der Partikeldurchmesser?

Der nominale Partikeldurchmesser beträgt 3µm.

Chargenspezifische Informationen zur Partikelgröße sollten anhand des entsprechenden technischen Dokuments oder Analysezertifikats bestätigt werden.

Welcher Laser soll verwendet werden?

Ein roter Laser nahe 630 nm wird empfohlen.

Durchflusszytometer mit 633-, 635-, 637- oder 640-nm-Lasern können ebenfalls geeignet sein, die Kompatibilität sollte jedoch experimentell bestätigt werden.

Welcher Fluoreszenzkanal soll verwendet werden?

Verwenden Sie einen Fernrotdetektor, dessen optischer Filter den Emissionsbereich von 665–720 nm überlappt.

Die Kanalnamen variieren je nach Instrument, daher sollte die tatsächliche Filterwellenlänge überprüft werden.

Kann es in einem APC-Kanal erkannt werden?

Der Emissionsbereich kann einige APC-assoziierte Erkennungskanäle überlappen.

Allerdings ist RCY3UM-630 spektral nicht unbedingt identisch mit APC. Die Kompatibilität sollte anhand der Laser- und Filterkonfiguration des Instruments ermittelt werden.

Kann ein 488-nm-Laser RCY3UM-630 anregen?

Das Produkt ist für eine Anregung von ca. 630 nm spezifiziert.

Es sollte nicht davon ausgegangen werden, dass es unter 488-nm-Anregung eine ausreichende Fluoreszenz liefert, es sei denn, separate Spektraltests bestätigen dieses Verhalten.

Ist RCY3UM-630 für herkömmliche Durchflusszytometer geeignet?

Der Durchmesser von 3 µm eignet sich für die Auswertung auf vielen herkömmlichen Durchflusszytometern.

Die tatsächliche Erkennung hängt von der Instrumentenoptik, dem Laser, den Detektoren, Filtern, der Fluidik und den Einstellungen ab.

Kann es zur Instrumentenausrichtung verwendet werden?

Es kann während der Instrumenteneinstellung und der vergleichenden Ausrichtungsforschung ausgewertet werden.

Es sollte nicht verkauft oder als zertifizierter Ausrichtungsstandard beschrieben werden, es sei denn, es werden entsprechende Qualifikationen, Kalibrierungen und Dokumentationen bereitgestellt.

Handelt es sich um eine Fluoreszenzkalibrierungsperle?

Nicht automatisch.

Ein zertifizierter Fluoreszenzstandard erfordert normalerweise zugewiesene Fluoreszenzwerte, definierte Unsicherheit, Rückverfolgbarkeit und unterstützende Dokumentation.

RCY3UM-630 wird in erster Linie als fluoreszierende Forschungsmikrosphäre geliefert, sofern nicht anders angegeben.

Kann es zum absoluten Zählen verwendet werden?

Für die absolute Zählung sind eine verifizierte Partikelanzahlkonzentration und ein entsprechendes Zählprotokoll erforderlich.

Der Feststoffwert von 0,5 % allein reicht nicht aus, um eine absolute Partikelzahl pro Milliliter zu ermitteln. Verwenden Sie das Produkt nicht als absoluten Zählstandard, es sei denn, es wurde ein validierter Partikelzählwert angegeben.

Kann es als Entschädigung verwendet werden?

Das Produkt kann für die Fluoreszenzkanalforschung evaluiert werden, formale Kompensationskontrollen sollten jedoch eng mit den Fluorophor- und Färbeeigenschaften des Assays übereinstimmen.

Der Benutzer sollte RCY3UM-630 validieren, bevor er es als Kompensationssteuerung verwendet.

Können Antikörper an die Mikrosphären gekoppelt werden?

Für die Antikörperkopplung ist eine geeignete funktionelle Oberfläche erforderlich.

Bitte bestätigen Sie, ob das gewünschte Produkt Carboxyl, Amino, Streptavidin, Epoxid oder eine andere Oberflächenchemie enthalten soll.

Kann es in Multiplex-Assays verwendet werden?

Ja, es kann in der Multiplex-Durchflusszytometrie-Forschung als eine Population fluoreszierender Partikel ausgewertet werden.

Die Partikelpopulation muss von anderen Perlenpopulationen und der Reporterfluoreszenz unterscheidbar bleiben.

Warum 3 µm statt 500 nm große Partikel wählen?

Die 3-µm-Partikel lassen sich im Allgemeinen leichter durch Streuung auf herkömmlichen Durchflusszytometern auflösen und eignen sich für perlenbasierte Assay- und Instrumenteneinstellungsforschung.

Die 500-nm-Partikel eignen sich besser für die Detektion im Submikronbereich und die Entwicklung von Methoden für kleine Partikel.

Welche Feststoffkonzentration wird geliefert?

RCY3UM-630 wird mit 0,5 % Feststoffgehalt geliefert.

Die geeignete Arbeitskonzentration sollte durch Verdünnung entsprechend der erforderlichen Ereignisrate bestimmt werden.

Wie soll das Produkt gemischt werden?

Vor der Probenahme vorsichtig durch Umdrehen oder kontrolliertes Vortexen mischen.

Bei Bedarf kann eine kurze milde Badbeschallung durchgeführt werden. Vermeiden Sie übermäßige Schaumbildung und Überhitzung.

Wie soll es gelagert werden?

Vor Licht geschützt lagern und die Lagerungshinweise in der Produktdokumentation befolgen.

Im Allgemeinen wird eine gekühlte Lagerung empfohlen und das Einfrieren sollte vermieden werden, sofern nicht anders angegeben.

Ist eine Massenproduktion möglich?

Ja. RCY3UM-630 kann für Musterbewertungen, Pilotentwicklungen, Nachbestellungen und Massenproduktion geliefert werden.

Kann die Konzentration oder Verpackung individuell angepasst werden?

Alternative Feststoffkonzentrationen und Verpackungsformate können je nach technischer Machbarkeit, Bestellmenge und Projektanforderungen besprochen werden.

Welche Informationen werden für ein Angebot benötigt?

Bitte geben Sie Folgendes an:

• Katalognummer RCY3UM-630

• Benötigte Menge

• Erwarteter Jahresbedarf

• Bevorzugte Packungsgröße

• Durchflusszytometer-Modell

• Wellenlänge des roten Lasers

• Dunkelroter Detektorfilter

• Verwendungszweck

• Erforderliche Oberflächenchemie

• Erforderliche Fluoreszenzintensität

• QC-Anforderungen

• Dokumentationsanforderungen

• Lieferziel

Fordern Sie ein Muster- oder Massenangebot an

RCY3UM-630 3 µm Flow Red-Fluo Microspheres bieten eine tiefrot fluoreszierende Partikellösung für die Rotlaser-Durchflusszytometrieforschung, Studien zur Geräteeinstellung, Fluoreszenzkanalbewertung, Bead-basierte Assay-Entwicklung und Forschungsreagenzherstellung.

Das Produkt vereint:

• 3 µm nominaler Partikeldurchmesser

• Ungefähr 630 nm Anregung

• 665–720 nm tiefrote Emission

• 0,5 % Feststoffe

• Kompatibilität der Durchflusszytometrie-Forschung

• Muster- und Pilotlieferung

• Fähigkeit zur Massenfertigung

• Unterstützung bei der kundenspezifischen Entwicklung

Geben Sie für eine technische Bewertung oder ein Angebot die beabsichtigte Durchflusszytometerkonfiguration, Anwendung, erforderliche Menge, Verpackungsanforderungen, Oberflächenchemie und Qualitätskontrollspezifikationen an.

Produktname: 3 µm Flow Red-Fluo Microspheres
Katalognummer: RCY3UM-630
Partikeldurchmesser: 3 µm
Anregungswellenlänge: 630 nm
Emissionswellenlänge: 665–720 nm
Feststoffgehalt: 0,5 %
Hauptanwendung: Durchflusszytometrie Forschungsversorgungskapazität
: Proben, Pilotchargen und Massenproduktion
Verwendungszweck: Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke.