Microsphères Rouge-Fluo Flow 3um RCY3UM-630 0,5 %

Microsphères Flow Red-Fluo de 3 µm pour la cytométrie en flux

Les microsphères rouge-fluo SHBC RCY3UM-630 sont des microsphères fluorescentes rouge lointain de 3 µm développées pour la recherche en cytométrie en flux laser rouge, l'évaluation des canaux de fluorescence, le développement de méthodes d'instruments, la recherche d'essais à base de billes et la production de réactifs en vrac.

Les microsphères sont conçues pour une excitation à environ 630 nm et offrent une large plage d'émission dans le rouge lointain de 665 à 720 nm. Ce profil spectral convient aux cytomètres en flux équipés de lasers rouges compatibles et de détecteurs à fluorescence rouge lointain.

RCY3UM-630 est fourni sous forme de suspension à 0,5 % de solides et est disponible pour l'évaluation en laboratoire, le développement à l'échelle pilote, la production répétée et l'approvisionnement en vrac.

Réponse rapide au produit

RCY3UM-630 est une suspension de microsphères fluorescentes rouge lointain de 3 µm avec 0,5 % de solides, une excitation d'environ 630 nm et une émission de 665 à 720 nm. Il est destiné à la recherche en cytométrie en flux, à la détection de fluorescence au laser rouge, aux études de réglage des instruments, au développement de méthodes basées sur les billes et à la fabrication de réactifs de recherche.

Points forts du produit

• Nom du produit : Microsphères Flow Red-Fluo

• Numéro de catalogue : RCY3UM-630

• Diamètre nominal des particules : 3 µm

• Longueur d'onde d'excitation : 630 nm

• Longueur d'onde d'émission : 665–720 nm

• Région de fluorescence : Rouge lointain

• Teneur en matières solides : 0,5 %

• Application principale : recherche sur la cytométrie en flux

• Capacité d’approvisionnement : production d’échantillons, pilotes et en vrac

• Utilisation prévue : Utilisation pour la recherche uniquement

Présentation du produit RCY3UM-630

Le RCY3UM-630 se compose de microsphères fluorescentes de 3 µm qui génèrent un signal de fluorescence rouge lointain sous excitation laser rouge compatible.

Le diamètre des particules de 3 µm fournit une population de microsphères clairement définie pour de nombreuses plates-formes de cytométrie en flux conventionnelles. Par rapport aux particules submicroniques, les microsphères de 3 µm produisent généralement une diffusion optique plus forte et peuvent être plus faciles à séparer du bruit électronique et du fond particulaire.

Le RCY3UM-630 convient donc aux équipes de recherche développant ou évaluant :

• Détection de fluorescence laser rouge

• Paramètres du détecteur rouge lointain

• Contrôle de diffusion et de fluorescence

• Configuration de la méthode du cytomètre en flux

• Suivi des particules fluorescentes

• Plateformes d'analyse à base de billes

• Optimisation de la concentration des particules

• Flux de travail de développement de réactifs

• Comparaison des performances des instruments

• Évaluation de la fluorescence lot à lot

Le produit peut être utilisé par les sociétés de biotechnologie, les laboratoires de cytométrie en flux, les développeurs d'instruments, les fabricants de tests, les universités, les instituts de recherche et les organisations de développement de réactifs de diagnostic.

RCY3UM-630 est fourni pour la recherche et le développement. Toute utilisation comme matériau d'étalonnage formel, étalon de comptage absolu, étalon quantitatif de fluorescence ou contrôle de diagnostic réglementé nécessite une qualification et une validation supplémentaires.

Spécifications techniques

Des informations supplémentaires spécifiques au lot peuvent être disponibles selon les spécifications de production confirmées.

La documentation du projet peut inclure, le cas échéant :

• Certificat d'analyse

• Résultats des tests granulométriques

• Résultats des tests de fluorescence

• Informations sur la teneur en solides

• Instructions de manipulation du produit

• Fiche de données de sécurité

• Recommandations de stockage

• Informations sur les lots et la production

La composition des particules, la chimie de la surface, le système de conservation, le coefficient de variation de la taille des particules, les limites d'intensité de fluorescence, la configuration de l'emballage et la durée de conservation doivent être confirmés à l'aide du devis, de la fiche technique ou du certificat d'analyse spécifique au lot.

Fluorescence rouge lointain avec excitation à 630 nm

Les microsphères RCY3UM-630 sont conçues pour une excitation proche de 630 nm et émettent une fluorescence sur la plage de longueurs d'onde de 665 à 720 nm.

Ce profil d’excitation et d’émission convient aux systèmes de cytométrie en flux laser rouge utilisant un détecteur rouge lointain compatible.

Les longueurs d'onde du laser rouge potentiellement compatibles peuvent inclure :

• 630 nm

• 633 nm

• 635 nm

• 637 nm

• 640 nm

La réponse de fluorescence obtenue à chaque longueur d'onde laser peut différer. La compatibilité doit donc être vérifiée à l’aide du cytomètre en flux prévu.

La large région d’émission de 665 à 720 nm peut chevaucher plusieurs configurations de détecteurs dans le rouge lointain. Selon l'instrument, les filtres optiques appropriés peuvent inclure des filtres centrés approximativement :

• 660-680 nm

• 665-695 nm

• 670-710 nm

• 680-720 nm

• 690-735 nm

Le signal réel dépend de :

• Longueur d'onde du laser

• Puissance laser

• Type de détecteur

• Gain ou tension du détecteur

• Filtre passe-bande

• Configuration du miroir dichroïque

• Concentration de particules

• Débit d'échantillon

• Arrière-plan du tampon

• Alignement optique des instruments

Les chercheurs devraient revoir la configuration optique réelle plutôt que de se fier uniquement aux noms de canaux tels que APC, FL4, rouge lointain, fluorescence rouge ou canal R.

Pourquoi choisir des microsphères fluorescentes de 3 µm ?

Détection plus facile sur les cytomètres en flux conventionnels

Le diamètre des particules de 3 µm est considérablement plus grand que celui des nanoparticules et des billes submicroniques.

Sur de nombreux cytomètres en flux conventionnels, les particules de 3 µm peuvent générer des signaux de diffusion directe et latérale plus forts que les particules de 500 nm. Cela peut rendre la population de microsphères plus facile à localiser et à contrôler lors de la configuration initiale de l’instrument.

Les performances des instruments varient encore et la détection doit être confirmée sur la plate-forme prévue.

Convient à l'évaluation du canal laser rouge

RCY3UM-630 fournit un signal de fluorescence rouge lointain sous excitation laser rouge.

Le produit peut être évalué lorsque les chercheurs doivent confirmer qu'un laser rouge et le détecteur rouge lointain associé peuvent identifier une population cohérente de particules fluorescentes.

Utile pour le développement de méthodes

Une population définie de microsphères fluorescentes peut aider les chercheurs à établir :

• Paramètres de gain du détecteur

• Seuils de fluorescence

• Portes de dispersion

• Exemples de débits

• Niveaux de dilution des particules

• Limites de taux d'événements

• Règles d'exclusion d'arrière-plan

• Modèles d'analyse

Convient à la recherche basée sur les perles

La gamme de tailles de 3 µm est généralement envisagée pour la recherche sur la cytométrie en flux basée sur les billes, car les particules peuvent être détectées individuellement tout en fournissant une surface physique susceptible de prendre en charge de futures stratégies de développement de tests.

Lorsqu’un couplage de biomolécules est requis, une surface fonctionnelle appropriée doit être sélectionnée et validée.

Convient au développement de réactifs en vrac

Le RCY3UM-630 peut être évalué lors de recherches préliminaires, puis transféré en production pilote ou en masse une fois que les spécifications techniques requises ont été confirmées.

Principales caractéristiques du produit

Diamètre des particules de 3 µm

La taille nominale de 3 µm fournit une population de microsphères détectables pour le développement de méthodes de cytométrie en flux, l'analyse de fluorescence et la recherche basée sur les particules.

Fluorescence rouge lointain

Les microsphères sont conçues pour une excitation d’environ 630 nm et une émission de 665 à 720 nm.

Compatibilité laser rouge

Le RCY3UM-630 est destiné à l’évaluation sur des cytomètres en flux équipés de lasers rouges compatibles.

0,5 % de matière solide

La concentration fournie permet aux chercheurs de préparer des dilutions de travail en fonction du taux d'événement et de l'application requis.

Large émission rouge lointain

La large plage d'émission offre une flexibilité lors de la sélection de détecteurs et de filtres qui chevauchent le spectre rouge lointain.

Approvisionnement de la recherche à la production

Le produit peut prendre en charge les tests initiaux d’échantillons, l’optimisation du laboratoire, la production pilote et les achats en gros.

Prise en charge de projets personnalisés

Des tailles de particules, des concentrations, des intensités de fluorescence, des compositions chimiques de surface et des formats d'emballage alternatifs peuvent être discutés pour des projets de développement qualifiés.

Applications de cytométrie en flux

Détection de fluorescence laser rouge

Le RCY3UM-630 peut être utilisé pour évaluer si le laser rouge et le détecteur rouge lointain d'un cytomètre en flux peuvent détecter une population de particules fluorescentes définie.

Les chercheurs peuvent comparer :

• Intensité de fluorescence

• Réponse du détecteur

• Séparation signal-arrière-plan

• Répartition des événements

• Largeur de l'histogramme

• Stabilité des mesures au jour le jour

Recherche sur la configuration des instruments

Les microsphères peuvent prendre en charge le développement de procédures cohérentes de configuration des instruments.

Les utilisations possibles en recherche comprennent :

• Localisation de la population de particules

• Ajustement du gain de diffusion vers l'avant

• Ajustement du gain de diffusion latérale

• Réglage de la tension du détecteur rouge lointain

• Établir un seuil de fluorescence

• Création d'une porte d'analyse standard

• Vérification de la stabilité du flux d'échantillon

• Comparaison des débits faibles, moyens et élevés

Le RCY3UM-630 ne doit pas automatiquement être décrit comme un étalon d'étalonnage d'instrument certifié à moins que le produit fourni n'ait été spécifiquement testé et documenté à cet effet.

Vérification du canal rouge lointain

Les microsphères peuvent être utilisées pour déterminer si le filtre du détecteur sélectionné chevauche la plage d'émission de 665 à 720 nm du produit.

L'utilisateur peut évaluer :

• Sensibilité du détecteur

• Compatibilité des filtres

• Séparation d'arrière-plan

• Saturation des signaux

• Répétabilité de l'acquisition

• Débordement de canal à canal

Les contrôles de compensation formels nécessitent normalement des contrôles qui correspondent aux caractéristiques du fluorophore et du marquage du test. RCY3UM-630 doit donc être validé avant d'être utilisé comme contrôle de compensation.

Développement de déclencheurs de fluorescence

Dans certains flux de travail de recherche, la fluorescence peut être utilisée comme déclencheur d’acquisition au lieu de diffusion.

RCY3UM-630 peut être évalué pour :

• Acquisition déclenchée par fluorescence

• Optimisation du seuil de déclenchement

• Discrimination fondée sur le fond

• Exclusion des événements de faible fluorescence

• Comparaison du déclenchement par diffusion et par fluorescence

Études sur la dilution des particules et le taux d'événements

La suspension à 0,5 % peut être diluée pour préparer une gamme de concentrations de particules.

Une série de dilutions peut aider à identifier les conditions qui fournissent :

• Tarifs d'événements stables

• Coïncidence minime

• Résolution claire des particules

• Fluorescence reproductible

• Temps d'acquisition acceptable

• Faible consommation d'échantillons

Évaluation du système fluidique

Les microsphères fluorescentes peuvent être évaluées lors de l'étude de l'introduction d'échantillons et du mouvement des particules à travers un cytomètre en flux ou un système microfluidique.

Les observations potentielles comprennent :

• Stabilité du taux d'événements

• Transfert d'échantillon

• Interruption du flux

• Récupération de particules

• Consistance tube à tube

• Efficacité du nettoyage fluidique

Développement de tests à base de billes

Lorsqu’elles sont fournies ou développées à l’aide d’une chimie de surface appropriée, les microsphères fluorescentes de 3 µm peuvent prendre en charge la recherche par dosage à base de billes.

Les orientations potentielles pour le développement des tests comprennent :

• Immobilisation d'anticorps

• Immobilisation de l'antigène

• Études de liaison aux protéines

• Recherche sur la capture des acides nucléiques

• Études d'interaction ligand-récepteur

• Codage de particules multiplex

• Développement de particules porteuses fluorescentes

La chimie de surface standard RCY3UM-630 doit être confirmée avant de planifier une procédure de couplage.

Microscopie à fluorescence et suivi des particules

En plus de la cytométrie en flux, les microsphères peuvent être évaluées dans le cadre d'études compatibles de microscopie à fluorescence, d'imagerie, de microfluidique, de filtration et de suivi de particules.

L’adéquation de l’application dépend de la source d’excitation du microscope, du jeu de filtres, de la sensibilité du détecteur, de la matrice d’échantillon et du comportement requis des particules.

Lasers et canaux de détection compatibles

Excitation recommandée

Un laser rouge proche de la longueur d'onde d'excitation spécifiée de 630 nm est recommandé.

Les lignes laser potentielles comprennent :

Le RCY3UM-630 n'est pas principalement conçu pour l'excitation avec des lasers 405 nm, 488 nm ou 561 nm, à moins que des tests spectraux séparés ne confirment une excitation suffisante.

Région de détection recommandée

Sélectionnez un détecteur dont le filtre optique chevauche la plage d'émission de 665 à 720 nm.

Un filtre centré vers 680 nm, 690 nm ou 700 nm peut convenir lorsque sa bande passante capte une partie suffisante du spectre d'émission.

Le meilleur détecteur ne peut pas être sélectionné en utilisant uniquement la longueur d’onde centrale. La longueur d'onde centrale et la largeur du filtre doivent être prises en compte.

Par exemple:

• Un filtre 670/30 collecte environ 655 à 685 nm.

• Un filtre 695/40 collecte environ 675 à 715 nm.

• Un filtre 710/50 collecte environ 685 à 735 nm.

Il s’agit d’exemples de plages de filtres plutôt que de recommandations d’instruments garanties.

Canaux de détection de type APC

L'émission rouge lointain du produit peut chevaucher les canaux du détecteur généralement associés à une fluorescence de type APC.

Cependant, RCY3UM-630 ne doit pas être décrit comme chimiquement identique ou spectralement identique à l'APC. La compatibilité doit être basée sur le profil réel d’excitation et d’émission plutôt que sur le nom du canal fluorophore.

Flux de travail suggéré pour la cytométrie en flux

Le flux de travail suivant est un point de départ général. Les paramètres de l’instrument et la préparation des échantillons doivent être optimisés pour l’application prévue.

1. Préparez le cytomètre en flux

Nettoyez et amorcez l'instrument conformément aux instructions du fabricant.

Confirmez que le système fluidique est stable et que le laser rouge et le détecteur rouge lointain sont disponibles.

2. Exécutez un vide de tampon

Utilisez le même tampon qui sera utilisé pour diluer les microsphères.

Enregistrez le taux d'événements vierges dans :

• Diffusion vers l'avant

• Dispersion latérale

• Fluorescence rouge lointain

• Tout autre canal surveillé

Un blanc tampon permet d’identifier la contamination particulaire, le bruit électronique, la fluorescence du tampon et les résidus d’échantillons précédents.

3. Remettre en suspension les microsphères

Avant le prélèvement, mélanger délicatement le flacon jusqu'à ce que la suspension soit homogène.

Les méthodes initiales appropriées peuvent inclure :

• Inversion douce

• Vortex contrôlé

• Brève sonication douce dans le bain si nécessaire

Évitez la formation de mousse excessive, la surchauffe, la sonication prolongée ou les traitements mécaniques agressifs.

Ne vous fiez pas uniquement à l’apparence visuelle pour confirmer une dispersion complète.

4. Préparez une série de dilutions

Préparez plusieurs dilutions de travail dans des tubes propres.

Par exemple, une étude préliminaire peut comprendre plusieurs dilutions au dixième ou par étapes.

La dilution exacte dépend :

• Concentration originale de solides

• Taux d'échantillonnage du cytomètre en flux

• Taux d'événement souhaité

• Temps d'acquisition

• Application

• Niveau de fond

Commencez par une faible concentration et augmentez-la progressivement si nécessaire.

5. Utilisez un faible débit d’échantillon

Un faible débit est recommandé lors de l’optimisation initiale car il peut améliorer la résolution de la population et réduire les événements coïncidents.

Une fois les conditions appropriées établies, des débits moyens ou élevés peuvent être évalués.

6. Localisez la population de particules

Commencez par des tracés de diffusion vers l’avant, de diffusion latérale et de fluorescence rouge lointain.

Ajustez progressivement les paramètres de diffusion et de fluorescence jusqu’à ce que la population de particules soit clairement séparée du fond tampon.

7. Sélectionnez le détecteur rouge lointain

Choisissez un filtre de détecteur qui chevauche la plage d'émission de 665 à 720 nm.

Augmentez la tension du détecteur ou gagnez avec précaution pour éviter de saturer le signal.

8. Établir une porte

Créez une porte autour de la population principale de microsphères.

Exclure:

• Bruit tampon

• Débris

• Agrégats possibles

• Des événements coïncidents de très haute intensité

• Artefacts électroniques

9. Évaluer la coïncidence

Effectuez au moins deux ou trois dilutions de particules.

Si l’intensité apparente de la fluorescence, la position de diffusion ou la distribution des événements changent de manière significative à mesure que l’échantillon est dilué, une coïncidence peut être présente.

Continuer la dilution jusqu'à ce que la mesure devienne indépendante de la concentration dans la plage expérimentale requise.

10. Enregistrez tous les paramètres

Pour des raisons de reproductibilité, enregistrer :

• Modèle d'instrument

• Longueur d'onde du laser

• Filtre du détecteur

• Tension ou gain du détecteur

• Paramètres de dispersion

• Canal de déclenchement

• Seuil de déclenchement

• Débit d'échantillon

• Facteur de dilution

• Temps d'acquisition

• Nombre d'événements collectés

• Composition du tampon

Utilisation du RCY3UM-630 dans le développement de tests à base de billes

RCY3UM-630 peut être considéré comme une plate-forme de particules fluorescentes lors de recherches sur la cytométrie en flux à base de billes.

Avant le développement du test, vérifiez si le produit a une surface lisse, carboxyle, amino, streptavidine, époxy ou autre.

Immobilisation de biomolécules

Si une chimie de surface appropriée est disponible, les microsphères peuvent être évaluées pour l'immobilisation :

• Anticorps

• Antigènes

• Protéines

• Peptides

• Enzymes

• Oligonucléotides

• Sondes d'acide nucléique

• Autres ligands

La méthode de couplage doit être choisie en fonction du groupe fonctionnel de surface et de la biomolécule.

Facteurs de développement des tests

Les paramètres importants peuvent inclure :

• Tampon de couplage

• pH tampon

• Concentration de biomolécules

• Concentration du réactif d'activation

• Temps de couplage

• Agent bloquant

• Procédure de lavage

• Tampon de stockage

• Concentration de microsphères

• Matrice d'échantillon cible

• Adsorption non spécifique

• Rétention de fluorescence

Recherche sur la cytométrie en flux multiplex

Différentes populations de microsphères peuvent potentiellement être distinguées en utilisant :

• Diamètre des particules

• Couleur fluorescente

• Intensité de fluorescence

• Chimie des surfaces

• Stratégie de codage interne

Pour un test multiplex, chaque population doit rester clairement séparée après le couplage, le blocage, le stockage et l’incubation de l’échantillon.

La fluorescence du rapporteur doit également être séparée du signal d’identification rouge lointain RCY3UM-630.

RCY3UM-630 comparé aux microsphères fluorescentes de 500 nm

Les microsphères de 3 µm et de 500 nm peuvent être utilisées dans la recherche en cytométrie en flux, mais elles conviennent à différentes priorités expérimentales.

Choisissez RCY3UM-630 lorsque :

• Une population de particules rouge lointain clairement détectable est requise.

• Le projet utilise un cytomètre en flux conventionnel.

• La recherche se concentre sur la configuration du détecteur laser rouge.

• Une plateforme de billes de la taille d’un micron est préférable.

• Le développement d’essais à base de billes est à l’étude.

• Le déclenchement de diffusion et de fluorescence est tous deux nécessaires.

Choisissez des microsphères de 500 nm lorsque :

• Le projet se concentre spécifiquement sur les particules submicroniques.

• Les performances de détection des petites particules sont étudiées.

• L'instrument possède une capacité appropriée de détection de nanoparticules ou de vésicules extracellulaires.

• L’acquisition déclenchée par fluorescence est un objectif de recherche majeur.

Contrôle qualité et cohérence des lots

Pour les projets de développement de réactifs et de production en vrac, les spécifications de qualité requises doivent être convenues avant la fabrication.

Les paramètres potentiels de contrôle de qualité peuvent inclure :

• Diamètre nominal des particules

• Distribution granulométrique

• Coefficient de variation granulométrique

• Apparence des suspensions

• Teneur en solides

• Performances de dispersion

• Niveau global

• Spectre d'excitation

• Spectre d'émission

• Intensité relative de fluorescence

• Répartition des fluorescences

• Histogramme de cytométrie en flux

• Comparaison de fluorescence lot à lot

• Contrôle microbien

• Stabilité de stockage

• Stabilité accélérée

• Intégrité de l'emballage

Tous les paramètres ne sont pas inclus dans chaque spécification de produit standard. Les limites requises doivent être discutées lors de l’évaluation technique.

Évaluation par cytométrie en flux

Une procédure de CQ par cytométrie en flux peut évaluer :

• Situation de la population principale

• Médiane ou moyenne de fluorescence

• Largeur de distribution

• Pourcentage de particules fermées

• Population globale

• Séparation d'arrière-plan

• Répétabilité d'une séquence à l'autre

Les paramètres de l’instrument doivent rester inchangés lors de la comparaison de différents lots de production.

Calibrage et traçabilité

RCY3UM-630 ne doit pas automatiquement être représenté comme :

• Une norme de taille de particule traçable par le NIST

• Un étalon d'intensité de fluorescence certifié

• Une norme assignée par le MESF

• Une norme absolue de comptage de particules

• Un contrôle diagnostique régulé

• Une perle d'étalonnage certifiée pour le cytomètre en flux

Ces réclamations nécessitent des tests spécifiques, une attribution de valeur, une documentation et une traçabilité.

Une qualification spécifique au projet peut être discutée lorsqu'une demande formelle de matériel de référence est requise.

Approvisionnement en vrac et fabrication sur mesure

SHBC soutient les projets de microsphères fluorescentes depuis l'évaluation en laboratoire jusqu'à la production pilote et la fabrication en vrac.

Échantillons de recherche

Des échantillons peuvent être utilisés pour évaluer :

• Compatibilité laser rouge

• Compatibilité du détecteur rouge lointain

• Intensité de fluorescence

• Dispersion des particules

• Contrôle par cytométrie en flux

• Dilution de l'échantillon

• Faisabilité du test

Production pilote

Les lots pilotes peuvent prendre en charge :

• Optimisation de la méthode

• Recherche de stabilité

• Évaluation des emballages

• Comparaison initiale des lots

• Transfert d'analyse

• Vérification du client

Production en vrac

Une fois les spécifications techniques confirmées, la fabrication en vrac peut être organisée en fonction de la demande attendue du client.

Les informations requises pour une évaluation globale peuvent inclure :

• Quantité requise

• Prévisions annuelles

• Taille cible du paquet

• Calendrier de livraison

• Application

• Configuration du cytomètre en flux

• Niveau de fluorescence requis

• Chimie des surfaces

• Exigences en matière de tampon

• Spécifications CQ

• Exigences en matière de documentation

Options de fabrication personnalisées

Selon la faisabilité technique, la personnalisation peut inclure :

• Diamètres de particules alternatifs

• Différentes longueurs d'onde d'excitation

• Différentes longueurs d'onde d'émission

• Intensité de fluorescence ajustée

• Contenus solides alternatifs

• Surfaces de microsphères simples

• Surfaces fonctionnalisées carboxyle

• Surfaces amino-fonctionnalisées

• Autres surfaces fonctionnelles

• Emballage spécifique au client

• Critères de contrôle qualité spécifiques au client

• Étiquetage OEM

• Développement de produits ODM

La faisabilité finale dépend des exigences techniques complètes et du volume de la commande.

Recommandations de manipulation et de stockage

Pour de meilleures performances, suivez l’étiquette spécifique au produit, la fiche technique et le certificat d’analyse.

Les recommandations générales comprennent :

• Conserver à l'abri de la lumière.

• Un stockage réfrigéré entre 2 et 8 °C est généralement recommandé, sauf indication contraire.

• Ne pas congeler à moins que la stabilité gel-dégel ait été confirmée.

• Gardez le flacon bien fermé.

• Rangez le récipient à la verticale.

• Mélanger la suspension avant utilisation.

• Utilisez des pointes de pipettes et des tubes à échantillons propres.

• Évitez de contaminer le contenant d'origine.

• Minimisez l’exposition prolongée à une lumière forte.

• Évitez les changements de température inutiles et répétés.

• Ne laissez pas sécher les microsphères.

• Ne remettez pas le matériau dilué dans le récipient d'origine.

Remise en suspension

En cas de décantation pendant le stockage :

1. Laisser le flacon atteindre la température de manipulation recommandée.

2. Mélanger délicatement par retournement.

3. Appliquer un vortex contrôlé si nécessaire.

4. Inspectez la suspension pour détecter les agrégats visibles.

5. Évaluer un petit échantillon par cytométrie en flux avant de commencer l’expérience complète.

Une brève sonication douce dans le bain peut être évaluée si un mélange ordinaire ne fournit pas une dispersion suffisante.

Protection contre la lumière

Le produit étant fluorescent, une exposition inutile à une forte lumière de laboratoire doit être minimisée.

Les dilutions de travail doivent être préparées peu de temps avant utilisation lorsque cela est possible.

Gel

Le gel peut provoquer une agrégation irréversible des particules ou des modifications des performances de la suspension.

Ne congelez pas le produit à moins que la documentation fournie autorise spécifiquement le stockage congelé.

Foire aux questions

Qu'est-ce que le RCY3UM-630 ?

RCY3UM-630 est une suspension de microsphères fluorescentes rouge lointain de 3 µm développée pour la recherche en cytométrie en flux. Il a une excitation d’environ 630 nm, une émission de 665 à 720 nm et 0,5 % de solides.

Quel est le diamètre des particules ?

Le diamètre nominal des particules est de 3 µm.

Les informations granulométriques spécifiques au lot doivent être confirmées à l'aide du document technique correspondant ou du certificat d'analyse.

Quel laser utiliser ?

Un laser rouge proche de 630 nm est recommandé.

Les cytomètres en flux équipés de lasers 633, 635, 637 ou 640 nm peuvent également convenir, mais la compatibilité doit être confirmée expérimentalement.

Quel canal de fluorescence utiliser ?

Utilisez un détecteur rouge lointain dont le filtre optique chevauche la plage d'émission de 665 à 720 nm.

Les noms de canaux varient selon l'instrument, la longueur d'onde réelle du filtre doit donc être vérifiée.

Peut-il être détecté dans un canal APC ?

La plage d'émission peut chevaucher certains canaux de détection associés à l'APC.

Cependant, RCY3UM-630 n'est pas nécessairement identique spectralement à APC. La compatibilité doit être déterminée à partir de la configuration du laser et du filtre de l'instrument.

Un laser 488 nm peut-il exciter le RCY3UM-630 ?

Le produit est spécifié pour une excitation d’environ 630 nm.

Il ne faut pas supposer qu'il fournit une fluorescence suffisante sous une excitation de 488 nm, à moins que des tests spectraux distincts ne confirment ce comportement.

Le RCY3UM-630 est-il adapté aux cytomètres en flux conventionnels ?

Le diamètre de 3 µm convient à l’évaluation sur de nombreux cytomètres en flux conventionnels.

La détection réelle dépend de l'optique de l'instrument, du laser, des détecteurs, des filtres, de la fluidique et des paramètres.

Peut-il être utilisé pour l’alignement des instruments ?

Il peut être évalué lors de recherches sur le paramétrage des instruments et l’alignement comparatif.

Il ne doit pas être vendu ou décrit comme un étalon d'alignement certifié à moins qu'une qualification, un étalonnage et une documentation appropriés ne soient fournis.

Est-ce une perle d'étalonnage de fluorescence ?

Pas automatiquement.

Un étalon de fluorescence certifié nécessite normalement des valeurs de fluorescence attribuées, une incertitude définie, une traçabilité et une documentation à l'appui.

Le RCY3UM-630 est fourni principalement sous forme de microsphère fluorescente de recherche, sauf indication contraire.

Peut-il être utilisé pour un comptage absolu ?

Le comptage absolu nécessite une concentration en nombre de particules vérifiée et un protocole de comptage approprié.

La valeur de 0,5 % de solides à elle seule ne suffit pas à établir un nombre absolu de particules par millilitre. N'utilisez pas le produit comme étalon de comptage absolu à moins qu'une valeur de comptage de particules validée n'ait été fournie.

Peut-il être utilisé à titre d’indemnisation ?

Le produit peut être évalué pour la recherche sur les canaux de fluorescence, mais les contrôles de compensation formels doivent correspondre étroitement aux caractéristiques du fluorophore et de la coloration du test.

L'utilisateur doit valider le RCY3UM-630 avant de l'utiliser comme contrôle de compensation.

Les anticorps peuvent-ils être couplés aux microsphères ?

Le couplage d'anticorps nécessite une surface fonctionnelle appropriée.

Veuillez confirmer si le produit requis doit contenir des composés carboxyle, amino, streptavidine, époxy ou une autre chimie de surface.

Peut-il être utilisé dans des essais multiplex ?

Oui, il peut être évalué comme une population de particules fluorescentes dans la recherche en cytométrie en flux multiplex.

La population de particules doit rester distincte des autres populations de billes et de la fluorescence du rapporteur.

Pourquoi choisir des particules de 3 µm au lieu de 500 nm ?

Les particules de 3 µm sont généralement plus faciles à résoudre par diffusion sur les cytomètres en flux conventionnels et conviennent aux tests à base de billes et à la recherche sur la configuration des instruments.

Les particules de 500 nm sont plus adaptées à la détection submicronique et au développement de méthodes de petites particules.

Quelle concentration de solides est fournie ?

RCY3UM-630 est fourni à 0,5 % de solides.

La concentration de travail appropriée doit être déterminée par dilution en fonction du taux d'événements requis.

Comment mélanger le produit ?

Mélanger délicatement par inversion ou vortex contrôlé avant le prélèvement.

Une brève sonication douce dans le bain peut être évaluée si nécessaire. Évitez la formation excessive de mousse et la surchauffe.

Comment doit-il être stocké ?

Conserver à l'abri de la lumière et suivre les instructions de stockage figurant sur la documentation du produit.

Le stockage réfrigéré est généralement recommandé et la congélation doit être évitée, sauf indication contraire.

La production en vrac est-elle disponible ?

Oui. Le RCY3UM-630 peut être fourni pour l'évaluation d'échantillons, le développement pilote, les commandes répétées et la production en vrac.

La concentration ou le conditionnement peuvent-ils être personnalisés ?

Des concentrations de solides alternatives et des formats d'emballage peuvent être discutés en fonction de la faisabilité technique, de la quantité commandée et des exigences du projet.

Quelles informations sont nécessaires pour un devis ?

Veuillez fournir :

• Numéro de catalogue RCY3UM-630

• Quantité requise

• Demande annuelle attendue

• Taille de paquet préférée

• Modèle de cytomètre en flux

• Longueur d'onde du laser rouge

• Filtre détecteur rouge lointain

• Application prévue

• Chimie de surface requise

• Intensité de fluorescence requise

• Exigences de contrôle qualité

• Exigences en matière de documentation

• Lieu de livraison

Demander un échantillon ou un devis groupé

Les microsphères Flow Red-Fluo RCY3UM-630 de 3 µm fournissent une solution de particules fluorescentes rouge lointain pour la recherche en cytométrie en flux laser rouge, les études de réglage des instruments, l'évaluation des canaux de fluorescence, le développement de tests à base de billes et la fabrication de réactifs de recherche.

Le produit combine :

• Diamètre nominal des particules de 3 µm

• Excitation d'environ 630 nm

• Émission rouge lointain de 665 à 720 nm

• 0,5% de solides

• Compatibilité de la recherche en cytométrie en flux

• Fourniture d'échantillons et de pilotes

• Capacité de fabrication en vrac

• Prise en charge du développement personnalisé

Pour une évaluation technique ou un devis, fournissez la configuration prévue du cytomètre en flux, l'application, la quantité requise, les exigences d'emballage, la chimie de surface et les spécifications de contrôle qualité.

Nom du produit : Microsphères Red-Fluo à flux de 3 µm
Numéro de catalogue : RCY3UM-630
Diamètre des particules : 3 µm
Longueur d'onde d'excitation : 630 nm
Longueur d'onde d'émission : 665-720 nm
Teneur en solides : 0,5 %
Application principale : Recherche en cytométrie en flux
Capacité d'approvisionnement : Échantillons, lots pilotes et production en vrac
Utilisation prévue : Utilisation pour la recherche uniquement. Pas pour un usage diagnostique ou thérapeutique.