Microesferas Red-Fluo de fluxo 3um RCY3UM-630 0,5%

Microesferas Red-Fluo de Fluxo de 3µm para Citometria de Fluxo

As microesferas SHBC RCY3UM-630 Flow Red-Fluo são microesferas fluorescentes de vermelho extremo de 3 µm desenvolvidas para pesquisa de citometria de fluxo com laser vermelho, avaliação de canais de fluorescência, desenvolvimento de métodos de instrumentos, pesquisa de ensaios baseados em esferas e produção de reagentes em massa.

As microesferas são projetadas para excitação em aproximadamente 630 nm e fornecem uma ampla faixa de emissão no vermelho extremo de 665–720 nm. Este perfil espectral é adequado para citômetros de fluxo equipados com lasers vermelhos compatíveis e detectores de fluorescência de vermelho extremo.

RCY3UM-630 é fornecido como uma suspensão de 0,5% de sólidos e está disponível para avaliação laboratorial, desenvolvimento em escala piloto, produção repetida e fornecimento a granel.

Resposta rápida do produto

RCY3UM-630 é uma suspensão de microesferas fluorescentes de vermelho extremo de 3 µm com 0,5% de sólidos, excitação de aproximadamente 630 nm e emissão de 665–720 nm. Destina-se à pesquisa de citometria de fluxo, detecção de fluorescência com laser vermelho, estudos de configuração de instrumentos, desenvolvimento de métodos baseados em esferas e fabricação de reagentes de pesquisa.

Destaques do produto

• Nome do produto: Microesferas Flow Red-Fluo

• Número de catálogo: RCY3UM-630

• Diâmetro nominal da partícula: 3µm

• Comprimento de onda de excitação: 630nm

• Comprimento de onda de emissão: 665–720 nm

• Região de fluorescência: Vermelho distante

• Conteúdo de sólidos: 0,5%

• Aplicação primária: pesquisa por citometria de fluxo

• Capacidade de fornecimento: amostra, piloto e produção em massa

• Uso pretendido: Somente para uso em pesquisa

Visão geral do produto RCY3UM-630

RCY3UM-630 consiste em microesferas fluorescentes de 3 µm que geram um sinal de fluorescência vermelho distante sob excitação de laser vermelho compatível.

O diâmetro de partícula de 3 µm fornece uma população de microesferas claramente definida para muitas plataformas convencionais de citometria de fluxo. Em comparação com partículas submicrométricas, as microesferas de 3 µm geralmente produzem uma dispersão óptica mais forte e podem ser mais fáceis de separar do ruído eletrônico e do fundo particulado.

Isto torna o RCY3UM-630 adequado para equipes de pesquisa que desenvolvem ou avaliam:

• Detecção de fluorescência com laser vermelho

• Configurações do detector vermelho distante

• Controle de dispersão e fluorescência

• Configuração do método de citômetro de fluxo

• Rastreamento de partículas fluorescentes

• Plataformas de ensaio baseadas em esferas

• Otimização da concentração de partículas

• Fluxos de trabalho de desenvolvimento de reagentes

• Comparação de desempenho do instrumento

• Avaliação de fluorescência lote a lote

O produto pode ser usado por empresas de biotecnologia, laboratórios de citometria de fluxo, desenvolvedores de instrumentos, fabricantes de ensaios, universidades, institutos de pesquisa e organizações de desenvolvimento de reagentes de diagnóstico.

RCY3UM-630 é fornecido para pesquisa e desenvolvimento. Qualquer uso como material de calibração formal, padrão de contagem absoluta, padrão de fluorescência quantitativa ou controle de diagnóstico regulamentado requer qualificação e validação adicionais.

Especificações Técnicas

Informações adicionais específicas do lote podem estar disponíveis de acordo com a especificação de produção confirmada.

A documentação do projeto pode incluir, quando aplicável:

• Certificado de Análise

• Resultados do teste de tamanho de partícula

• Resultados do teste de fluorescência

• Informações sobre conteúdo de sólidos

• Instruções de manuseio do produto

• Ficha de dados de segurança

• Recomendações de armazenamento

• Informações sobre lote e produção

A composição das partículas, a química da superfície, o sistema conservante, o coeficiente de variação do tamanho das partículas, os limites de intensidade de fluorescência, a configuração da embalagem e o prazo de validade devem ser confirmados usando a cotação, a ficha técnica ou o Certificado de Análise específico do lote.

Fluorescência Vermelha Extrema com Excitação de 630nm

As microesferas RCY3UM-630 são projetadas para excitação próxima a 630 nm e emitem fluorescência na faixa de comprimento de onda de 665–720 nm.

Este perfil de excitação e emissão é adequado para sistemas de citometria de fluxo com laser vermelho usando um detector de vermelho distante compatível.

Comprimentos de onda de laser vermelho potencialmente compatíveis podem incluir:

• 630 nm

• 633 nm

• 635 nm

• 637 nm

• 640 nm

A resposta de fluorescência obtida em cada comprimento de onda do laser pode ser diferente. A compatibilidade deve, portanto, ser verificada utilizando o citómetro de fluxo pretendido.

A ampla região de emissão de 665–720 nm pode se sobrepor a várias configurações de detectores de vermelho extremo. Dependendo do instrumento, filtros ópticos adequados podem incluir filtros centrados aproximadamente em:

• 660–680nm

• 665–695nm

• 670–710nm

• 680–720nm

• 690–735nm

O sinal real depende de:

• Comprimento de onda do laser

• Potência laser

• Tipo de detector

• Ganho ou tensão do detector

• Filtro passa-banda

• Configuração de espelho dicróico

• Concentração de partículas

• Taxa de fluxo de amostra

• Fundo do buffer

• Alinhamento óptico do instrumento

Os pesquisadores devem revisar a configuração óptica real em vez de confiar apenas em nomes de canais como APC, FL4, vermelho distante, fluorescência vermelha ou canal R.

Por que escolher microesferas fluorescentes de 3µm?

Detecção mais fácil em citômetros de fluxo convencionais

O diâmetro da partícula de 3 µm é consideravelmente maior do que as nanopartículas e esferas submicrométricas.

Em muitos citômetros de fluxo convencionais, partículas de 3 µm podem gerar sinais de dispersão direta e lateral mais fortes do que partículas de 500 nm. Isto pode tornar a população de microesferas mais fácil de localizar e bloquear durante a configuração inicial do instrumento.

O desempenho do instrumento ainda varia e a detecção deve ser confirmada na plataforma pretendida.

Adequado para avaliação de canais de laser vermelho

RCY3UM-630 fornece um sinal de fluorescência vermelho extremo sob excitação com laser vermelho.

O produto pode ser avaliado quando os pesquisadores precisarem confirmar que um laser vermelho e o detector de vermelho extremo associado podem identificar uma população consistente de partículas fluorescentes.

Útil para desenvolvimento de métodos

Uma população definida de microesferas fluorescentes pode ajudar os pesquisadores a estabelecer:

• Configurações de ganho do detector

• Limiares de fluorescência

• Portões de dispersão

• Taxas de fluxo de amostra

• Níveis de diluição de partículas

• Limites de taxa de eventos

• Regras de exclusão em segundo plano

• Modelos de análise

Adequado para pesquisas baseadas em contas

A faixa de tamanho de 3 µm é comumente considerada para pesquisas de citometria de fluxo baseada em esferas porque as partículas podem ser detectadas individualmente, ao mesmo tempo que fornecem uma superfície física que pode apoiar futuras estratégias de desenvolvimento de ensaios.

Quando o acoplamento de biomoléculas é necessário, uma superfície funcional apropriada deve ser selecionada e validada.

Apropriado para desenvolvimento de reagentes a granel

O RCY3UM-630 pode ser avaliado em pesquisas em estágio inicial e depois transferido para produção piloto ou em massa após a confirmação das especificações técnicas exigidas.

Principais recursos do produto

Diâmetro de partícula de 3µm

O tamanho nominal de 3 µm fornece uma população de microesferas detectável para desenvolvimento de métodos de citometria de fluxo, análise de fluorescência e pesquisa baseada em partículas.

Fluorescência Vermelha Extrema

As microesferas são projetadas para excitação de aproximadamente 630 nm e emissão de 665–720 nm.

Compatibilidade com Laser Vermelho

O RCY3UM-630 destina-se à avaliação em citômetros de fluxo equipados com lasers vermelhos compatíveis.

0,5% de conteúdo de sólidos

A concentração fornecida permite aos pesquisadores preparar diluições de trabalho de acordo com a taxa de eventos e aplicação exigidas.

Emissão Ampla do Vermelho Extremo

A ampla faixa de emissão oferece flexibilidade na seleção de detectores e filtros que se sobrepõem ao espectro do vermelho extremo.

Fornecimento de pesquisa para produção

O produto pode suportar testes iniciais de amostras, otimização de laboratório, produção piloto e compras em massa.

Suporte a projetos personalizados

Tamanhos de partículas, concentrações, intensidades de fluorescência, químicas de superfície e formatos de embalagem alternativos podem ser discutidos para projetos de desenvolvimento qualificados.

Aplicações de citometria de fluxo

Detecção de fluorescência com laser vermelho

O RCY3UM-630 pode ser usado para avaliar se o laser vermelho e o detector de vermelho extremo de um citômetro de fluxo podem detectar uma população definida de partículas fluorescentes.

Os pesquisadores podem comparar:

• Intensidade de fluorescência

• Resposta do detector

• Separação sinal-fundo

• Distribuição de eventos

• Largura do histograma

• Estabilidade de medição no dia a dia

Pesquisa de configuração de instrumentos

As microesferas podem apoiar o desenvolvimento de procedimentos consistentes de configuração de instrumentos.

Possíveis usos de pesquisa incluem:

• Localizando a população de partículas

• Ajustando o ganho de dispersão direta

• Ajustando o ganho de dispersão lateral

• Configurando a tensão do detector vermelho extremo

• Estabelecendo um limite de fluorescência

• Criando uma porta de análise padrão

• Verificando a estabilidade do fluxo de amostra

• Comparando taxas de fluxo baixas, médias e altas

O RCY3UM-630 não deve ser automaticamente descrito como um padrão certificado de calibração de instrumento, a menos que o produto fornecido tenha sido especificamente testado e documentado para esse fim.

Verificação do canal Far-Red

As microesferas podem ser usadas para determinar se o filtro detector selecionado se sobrepõe à faixa de emissão de 665–720 nm do produto.

O usuário poderá avaliar:

• Sensibilidade do detector

• Compatibilidade de filtro

• Separação de fundo

• Saturação de sinal

• Repetibilidade de aquisição

• Repercussões de canal para canal

Os controlos formais de compensação normalmente requerem controlos que correspondam às características do fluoróforo e da rotulagem do ensaio. O RCY3UM-630 deve, portanto, ser validado antes de ser usado como controle de compensação.

Desenvolvimento de gatilho de fluorescência

Em alguns fluxos de trabalho de pesquisa, a fluorescência pode ser usada como gatilho de aquisição em vez de dispersão.

RCY3UM-630 pode ser avaliado para:

• Aquisição desencadeada por fluorescência

• Otimização do limite de gatilho

• Discriminação de fundo

• Exclusão de eventos de baixa fluorescência

• Comparação de dispersão e disparo de fluorescência

Estudos de diluição de partículas e taxa de eventos

A suspensão a 0,5% pode ser diluída para preparar uma gama de concentrações de partículas.

Uma série de diluições pode ajudar a identificar condições que proporcionam:

• Taxas de eventos estáveis

• Coincidência mínima

• Resolução clara de partículas

• Fluorescência reproduzível

• Tempo de aquisição aceitável

• Baixo consumo de amostra

Avaliação do Sistema Fluídico

Microesferas fluorescentes podem ser avaliadas ao estudar a introdução de amostras e o movimento de partículas através de um citômetro de fluxo ou sistema microfluídico.

As observações potenciais incluem:

• Estabilidade da taxa de eventos

• Transferência de amostra

• Interrupção de fluxo

• Recuperação de partículas

• Consistência tubo a tubo

• Eficácia da limpeza fluídica

Desenvolvimento de ensaio baseado em esferas

Quando fornecidas ou desenvolvidas usando uma química de superfície apropriada, as microesferas fluorescentes de 3 µm podem apoiar a pesquisa de ensaios baseados em esferas.

As possíveis direções de desenvolvimento de ensaios incluem:

• Imobilização de anticorpos

• Imobilização de antígeno

• Estudos de ligação a proteínas

• Pesquisa de captura de ácido nucleico

• Estudos de interação ligante-receptor

• Codificação multiplex de partículas

• Desenvolvimento de partículas transportadoras fluorescentes

A química da superfície padrão RCY3UM-630 deve ser confirmada antes de planejar um procedimento de acoplamento.

Microscopia de Fluorescência e Rastreamento de Partículas

Além da citometria de fluxo, as microesferas podem ser avaliadas em estudos compatíveis de microscopia de fluorescência, imagem, microfluídica, filtração e rastreamento de partículas.

A adequação da aplicação depende da fonte de excitação do microscópio, do conjunto de filtros, da sensibilidade do detector, da matriz da amostra e do comportamento necessário das partículas.

Lasers e canais de detecção compatíveis

Excitação recomendada

Recomenda-se um laser vermelho próximo ao comprimento de onda de excitação especificado de 630 nm.

Linhas de laser potenciais incluem:

O RCY3UM-630 não foi projetado principalmente para excitação com lasers de 405 nm, 488 nm ou 561 nm, a menos que testes espectrais separados confirmem excitação suficiente.

Região de detecção recomendada

Selecione um detector cujo filtro óptico se sobreponha à faixa de emissão de 665–720 nm.

Um filtro centrado próximo a 680 nm, 690 nm ou 700 nm pode ser adequado quando sua largura de banda captura uma parte suficiente do espectro de emissão.

O melhor detector não pode ser selecionado usando apenas o comprimento de onda central. Tanto o comprimento de onda central quanto a largura do filtro devem ser considerados.

Por exemplo:

• Um filtro 670/30 coleta aproximadamente 655–685 nm.

• Um filtro 695/40 coleta aproximadamente 675–715 nm.

• Um filtro 710/50 coleta aproximadamente 685–735 nm.

Estes são exemplos de faixas de filtros, e não recomendações garantidas de instrumentos.

Canais de detecção semelhantes aos da APC

A emissão vermelha extrema do produto pode sobrepor os canais do detector comumente associados à fluorescência do tipo APC.

No entanto, o RCY3UM-630 não deve ser descrito como quimicamente idêntico ou espectralmente idêntico ao APC. A compatibilidade deve ser baseada no perfil real de excitação e emissão, e não no nome do canal do fluoróforo.

Fluxo de trabalho sugerido de citometria de fluxo

O fluxo de trabalho a seguir é um ponto de partida geral. As configurações do instrumento e a preparação de amostras devem ser otimizadas para a aplicação pretendida.

1. Prepare o citômetro de fluxo

Limpe e prepare o instrumento de acordo com as instruções do fabricante.

Confirme se o sistema fluídico está estável e se o laser vermelho e o detector de vermelho extremo estão disponíveis.

2. Execute um buffer em branco

Use o mesmo tampão que será usado para diluir as microesferas.

Registre a taxa de eventos em branco em:

• Dispersão para frente

• Dispersão lateral

• Fluorescência vermelha distante

• Quaisquer outros canais monitorados

Um tampão em branco ajuda a identificar contaminação por partículas, ruído eletrônico, fluorescência do tampão e transferência de amostras anteriores.

3. Ressuspender as microesferas

Antes da amostragem, misture suavemente o frasco até a suspensão ficar homogênea.

Os métodos iniciais adequados podem incluir:

• Inversão suave

• Vórtice controlado

• Breve sonicação suave do banho quando necessário

Evite formação excessiva de espuma, superaquecimento, sonicação prolongada ou tratamento mecânico severo.

Não confie apenas na aparência visual para confirmar a dispersão completa.

4. Prepare uma série de diluições

Prepare múltiplas diluições de trabalho em tubos limpos.

Por exemplo, um estudo preliminar pode incluir várias diluições de dez vezes ou em etapas.

A diluição exata depende de:

• Concentração original de sólidos

• Taxa de amostragem do citômetro de fluxo

• Taxa de eventos desejada

• Tempo de aquisição

• Aplicativo

• Nível de fundo

Comece com uma concentração baixa e aumente gradualmente quando necessário.

5. Use uma taxa de fluxo de amostra baixa

Uma taxa de fluxo baixa é recomendada durante a otimização inicial porque pode melhorar a resolução da população e reduzir eventos coincidentes.

Depois que as condições adequadas forem estabelecidas, as vazões médias ou altas podem ser avaliadas.

6. Localize a população de partículas

Comece com gráficos de dispersão frontal, dispersão lateral e fluorescência vermelha distante.

Ajuste as configurações de dispersão e fluorescência gradualmente até que a população de partículas esteja claramente separada do fundo do buffer.

7. Selecione o Detector Far-Red

Escolha um filtro detector que se sobreponha à faixa de emissão de 665–720 nm.

Aumente a tensão ou o ganho do detector com cuidado para evitar a saturação do sinal.

8. Estabeleça um portão

Crie um portão em torno da população principal de microesferas.

Excluir:

• Ruído de buffer

• Destroços

• Possíveis agregados

• Eventos coincidentes de intensidade muito alta

• Artefatos eletrônicos

9. Avalie a coincidência

Execute pelo menos duas ou três diluições de partículas.

Se a intensidade aparente da fluorescência, a posição da dispersão ou a distribuição do evento mudarem significativamente à medida que a amostra é diluída, pode haver coincidência.

Continue a diluição até que a medição se torne independente da concentração dentro da faixa experimental necessária.

10. Grave todas as configurações

Para reprodutibilidade, registre:

• Modelo de instrumento

• Comprimento de onda do laser

• Filtro detector

• Tensão ou ganho do detector

• Configurações de dispersão

• Canal de gatilho

• Limite de disparo

• Taxa de fluxo de amostra

• Fator de diluição

• Tempo de aquisição

• Número de eventos coletados

• Composição do buffer

Usando RCY3UM-630 no desenvolvimento de ensaios baseados em esferas

O RCY3UM-630 pode ser considerado uma plataforma de partículas fluorescentes durante a pesquisa de citometria de fluxo baseada em esferas.

Antes do desenvolvimento do ensaio, confirme se o produto possui superfície simples, carboxila, amino, estreptavidina, epóxi ou outra superfície funcional.

Imobilização de Biomoléculas

Se uma química de superfície apropriada estiver disponível, as microesferas poderão ser avaliadas quanto à imobilização:

• Anticorpos

• Antígenos

• Proteínas

• Peptídeos

• Enzimas

• Oligonucleotídeos

• Sondas de ácido nucleico

• Outros ligantes

O método de acoplamento deve ser selecionado de acordo com o grupo funcional da superfície e da biomolécula.

Fatores de desenvolvimento de ensaio

Parâmetros importantes podem incluir:

• Buffer de acoplamento

• PH tampão

• Concentração de biomoléculas

• Concentração do reagente de ativação

• Tempo de acoplamento

• Agente bloqueador

• Procedimento de lavagem

• Buffer de armazenamento

• Concentração de microesferas

• Matriz de amostra alvo

• Adsorção inespecífica

• Retenção de fluorescência

Pesquisa de citometria de fluxo multiplex

Diferentes populações de microesferas podem ser potencialmente distinguidas usando:

• Diâmetro da partícula

• Cor de fluorescência

• Intensidade de fluorescência

• Química de superfície

• Estratégia de codificação interna

Para um ensaio multiplex, cada população deve permanecer claramente separada após o acoplamento, bloqueio, armazenamento e incubação da amostra.

A fluorescência do repórter também deve ser separada do sinal de identificação vermelho distante RCY3UM-630.

RCY3UM-630 em comparação com microesferas fluorescentes de 500 nm

Ambas as microesferas de 3µm e 500nm podem ser usadas em pesquisas de citometria de fluxo, mas são adequadas para diferentes prioridades experimentais.

Escolha RCY3UM-630 quando:

• É necessária uma população de partículas vermelhas claramente detectável.

• O projeto utiliza um citômetro de fluxo convencional.

• A pesquisa se concentra na configuração do detector de laser vermelho.

• É preferida uma plataforma de contas de tamanho micrométrico.

• O desenvolvimento de ensaios baseados em esferas está sendo considerado.

• O controle de dispersão e de fluorescência são necessários.

Escolha microesferas de 500 nm quando:

• O projeto concentra-se especificamente em partículas submicrométricas.

• O desempenho da detecção de pequenas partículas está sendo estudado.

• O instrumento possui capacidade adequada de detecção de nanopartículas ou vesículas extracelulares.

• A aquisição desencadeada por fluorescência é um importante objetivo de pesquisa.

Controle de qualidade e consistência de lote

Para projetos de desenvolvimento de reagentes e produção em massa, as especificações de qualidade exigidas devem ser acordadas antes da fabricação.

Os parâmetros potenciais de controle de qualidade podem incluir:

• Diâmetro nominal das partículas

• Distribuição de tamanho de partícula

• Coeficiente de variação do tamanho das partículas

• Aparência de suspensão

• Conteúdo de sólidos

• Desempenho de dispersão

• Nível agregado

• Espectro de excitação

• Espectro de emissão

• Intensidade relativa de fluorescência

• Distribuição de fluorescência

• Histograma de citometria de fluxo

• Comparação de fluorescência lote a lote

• Controle microbiano

• Estabilidade de armazenamento

• Estabilidade acelerada

• Integridade da embalagem

Nem todos os parâmetros estão incluídos em todas as especificações padrão do produto. Os limites exigidos devem ser discutidos durante a avaliação técnica.

Avaliação por Citometria de Fluxo

Um procedimento de CQ de citometria de fluxo pode avaliar:

• Posição principal da população

• Mediana ou média de fluorescência

• Largura de distribuição

• Porcentagem de partículas bloqueadas

• População agregada

• Separação de fundo

• Repetibilidade corrida a corrida

As configurações do instrumento devem permanecer inalteradas ao comparar diferentes lotes de produção.

Calibração e Rastreabilidade

RCY3UM-630 não deve ser automaticamente representado como:

• Um padrão de tamanho de partícula rastreável pelo NIST

• Um padrão certificado de intensidade de fluorescência

• Um padrão atribuído pelo MESF

• Um padrão absoluto de contagem de partículas

• Um controle de diagnóstico regulamentado

• Uma esfera de calibração de citômetro de fluxo certificada

Essas afirmações exigem testes específicos, atribuição de valor, documentação e rastreabilidade.

A qualificação específica do projeto pode ser discutida quando uma solicitação formal de material de referência for necessária.

Fornecimento a granel e fabricação personalizada

SHBC apoia projetos de microesferas fluorescentes desde a avaliação laboratorial até a produção piloto e fabricação em massa.

Amostras de pesquisa

Amostras podem ser usadas para avaliar:

• Compatibilidade com laser vermelho

• Compatibilidade do detector vermelho distante

• Intensidade de fluorescência

• Dispersão de partículas

• Controle de citometria de fluxo

• Diluição da amostra

• Viabilidade do ensaio

Produção Piloto

Os lotes piloto podem suportar:

• Otimização de método

• Pesquisa de estabilidade

• Avaliação de embalagens

• Comparação inicial do lote

• Transferência de ensaio

• Verificação do cliente

Produção em massa

Após a confirmação das especificações técnicas, a fabricação em massa pode ser organizada de acordo com a demanda esperada do cliente.

As informações necessárias para avaliação em massa podem incluir:

• Quantidade necessária

• Previsão anual

• Tamanho do pacote alvo

• Cronograma de entrega

• Aplicativo

• Configuração do citômetro de fluxo

• Nível de fluorescência necessário

• Química de superfície

• Requisitos de buffer

• Especificações de controle de qualidade

• Requisitos de documentação

Opções de fabricação personalizada

Dependendo da viabilidade técnica, a customização pode incluir:

• Diâmetros de partículas alternativos

• Diferentes comprimentos de onda de excitação

• Diferentes comprimentos de onda de emissão

• Intensidade de fluorescência ajustada

• Conteúdos alternativos de sólidos

• Superfícies planas de microesferas

• Superfícies funcionalizadas com carboxila

• Superfícies amino-funcionalizadas

• Outras superfícies funcionais

• Embalagem específica do cliente

• Critérios de CQ específicos do cliente

• Rotulagem OEM

• Desenvolvimento de produtos ODM

A viabilidade final depende da exigência técnica completa e do volume do pedido.

Recomendações de manuseio e armazenamento

Para melhor desempenho, siga a etiqueta específica do produto, ficha técnica e Certificado de Análise.

As recomendações gerais incluem:

• Armazenar protegido da luz.

• O armazenamento refrigerado entre 2 e 8°C é geralmente recomendado, salvo especificação em contrário.

• Não congele a menos que a estabilidade do congelamento-descongelamento tenha sido confirmada.

• Mantenha o frasco bem fechado.

• Armazene o recipiente na vertical.

• Misture a suspensão antes de usar.

• Use pontas de pipeta e tubos de amostra limpos.

• Evite contaminar o recipiente original.

• Minimize a exposição prolongada à luz forte.

• Evite mudanças repetidas e desnecessárias de temperatura.

• Não deixe as microesferas secarem.

• Não devolva o material diluído ao recipiente original.

Resuspensão

Se ocorrer sedimentação durante o armazenamento:

1. Deixe o frasco atingir a temperatura de manuseio recomendada.

2. Misture delicadamente por inversão.

3. Aplique vórtice controlado quando necessário.

4. Inspecione a suspensão quanto a agregados visíveis.

5. Avalie uma pequena amostra por citometria de fluxo antes de iniciar o experimento completo.

A sonicação breve e suave do banho pode ser avaliada se a mistura comum não fornecer dispersão suficiente.

Proteção contra luz

Como o produto é fluorescente, a exposição desnecessária à luz forte do laboratório deve ser minimizada.

As diluições de trabalho devem ser preparadas pouco antes do uso, quando possível.

Congelando

O congelamento pode causar agregação irreversível de partículas ou alterações no desempenho da suspensão.

Não congele o produto, a menos que a documentação fornecida permita especificamente o armazenamento congelado.

Perguntas frequentes

O que é RCY3UM-630?

RCY3UM-630 é uma suspensão de microesferas fluorescentes de vermelho extremo de 3 µm desenvolvida para pesquisas em citometria de fluxo. Possui excitação de aproximadamente 630 nm, emissão de 665–720 nm e 0,5% de sólidos.

Qual é o diâmetro da partícula?

O diâmetro nominal da partícula é de 3 µm.

As informações granulométricas específicas do lote deverão ser confirmadas por meio do documento técnico ou Certificado de Análise correspondente.

Qual laser deve ser usado?

Recomenda-se um laser vermelho próximo a 630nm.

Citômetros de fluxo equipados com lasers de 633, 635, 637 ou 640 nm também podem ser adequados, mas a compatibilidade deve ser confirmada experimentalmente.

Qual canal de fluorescência deve ser usado?

Use um detector vermelho extremo cujo filtro óptico se sobreponha à faixa de emissão de 665–720 nm.

Os nomes dos canais variam de acordo com o instrumento, portanto o comprimento de onda real do filtro deve ser verificado.

Pode ser detectado em um canal APC?

A faixa de emissão pode se sobrepor a alguns canais de detecção associados ao APC.

No entanto, o RCY3UM-630 não é necessariamente espectralmente idêntico ao APC. A compatibilidade deve ser determinada a partir da configuração do laser e do filtro do instrumento.

Um laser de 488 nm pode excitar o RCY3UM-630?

O produto é especificado para excitação de aproximadamente 630 nm.

Não deve ser assumido que forneça fluorescência suficiente sob excitação de 488 nm, a menos que testes espectrais separados confirmem este comportamento.

O RCY3UM-630 é adequado para citômetros de fluxo convencionais?

O diâmetro de 3 µm é adequado para avaliação em muitos citômetros de fluxo convencionais.

A detecção real depende da óptica do instrumento, laser, detectores, filtros, fluidos e configurações.

Pode ser usado para alinhamento de instrumentos?

Pode ser avaliado durante a configuração do instrumento e pesquisa comparativa de alinhamento.

Não deve ser vendido ou descrito como um padrão de alinhamento certificado, a menos que sejam fornecidas qualificação, calibração e documentação apropriadas.

É uma esfera de calibração de fluorescência?

Não automaticamente.

Um padrão de fluorescência certificado normalmente requer valores de fluorescência atribuídos, incerteza definida, rastreabilidade e documentação de apoio.

RCY3UM-630 é fornecido principalmente como uma microesfera fluorescente para pesquisa, salvo especificação em contrário.

Pode ser usado para contagem absoluta?

A contagem absoluta requer uma concentração verificada do número de partículas e um protocolo de contagem apropriado.

O valor de 0,5% de sólidos por si só não é suficiente para estabelecer um número absoluto de partículas por mililitro. Não utilize o produto como padrão de contagem absoluta, a menos que um valor de contagem de partículas validado tenha sido fornecido.

Pode ser usado para compensação?

O produto pode ser avaliado para pesquisa de canais de fluorescência, mas os controles formais de compensação devem corresponder estreitamente ao fluoróforo do ensaio e às características de coloração.

O usuário deve validar o RCY3UM-630 antes de utilizá-lo como controle de compensação.

Os anticorpos podem ser acoplados às microesferas?

O acoplamento de anticorpos requer uma superfície funcional adequada.

Confirme se o produto necessário deve conter carboxila, amino, estreptavidina, epóxi ou outra química de superfície.

Pode ser usado em ensaios multiplex?

Sim, pode ser avaliado como uma população de partículas fluorescentes em pesquisas de citometria de fluxo multiplex.

A população de partículas deve permanecer distinguível de outras populações de esferas e da fluorescência repórter.

Por que escolher partículas de 3µm em vez de partículas de 500nm?

As partículas de 3 µm são geralmente mais fáceis de resolver por dispersão em citômetros de fluxo convencionais e são adequadas para ensaios baseados em esferas e pesquisas de configuração de instrumentos.

As partículas de 500 nm são mais adequadas para detecção submícron e desenvolvimento de métodos de partículas pequenas.

Qual concentração de sólidos é fornecida?

RCY3UM-630 é fornecido com 0,5% de sólidos.

A concentração de trabalho apropriada deve ser determinada por diluição de acordo com a taxa de eventos necessária.

Como o produto deve ser misturado?

Misture suavemente por inversão ou vórtex controlado antes da amostragem.

A sonicação breve e suave do banho pode ser avaliada, se necessário. Evite formação excessiva de espuma e superaquecimento.

Como deve ser armazenado?

Armazenar protegido da luz e seguir as instruções de armazenamento contidas na documentação do produto.

O armazenamento refrigerado é geralmente recomendado e o congelamento deve ser evitado, a menos que seja especificado de outra forma.

A produção em massa está disponível?

Sim. O RCY3UM-630 pode ser fornecido para avaliação de amostras, desenvolvimento piloto, pedidos repetidos e produção em massa.

A concentração ou embalagem podem ser personalizadas?

Concentrações alternativas de sólidos e formatos de embalagem podem ser discutidos de acordo com a viabilidade técnica, quantidade do pedido e requisitos do projeto.

Quais informações são necessárias para uma cotação?

Forneça:

• Número de catálogo RCY3UM-630

• Quantidade necessária

• Demanda anual esperada

• Tamanho de pacote preferido

• Modelo de citômetro de fluxo

• Comprimento de onda do laser vermelho

• Filtro detector vermelho distante

• Aplicação pretendida

• Química de superfície necessária

• Intensidade de fluorescência necessária

• Requisitos de controle de qualidade

• Requisitos de documentação

• Destino de entrega

Solicite uma amostra ou cotação em massa

As microesferas Red-Fluo de fluxo de 3 µm RCY3UM-630 fornecem uma solução de partículas fluorescentes de vermelho distante para pesquisa de citometria de fluxo com laser vermelho, estudos de configuração de instrumentos, avaliação de canais de fluorescência, desenvolvimento de ensaios baseados em esferas e fabricação de reagentes de pesquisa.

O produto combina:

• Diâmetro nominal de partícula de 3µm

• Excitação de aproximadamente 630 nm

• Emissão vermelha distante de 665–720 nm

• 0,5% de sólidos

• Compatibilidade da pesquisa por citometria de fluxo

• Fornecimento de amostra e piloto

• Capacidade de fabricação em massa

• Suporte ao desenvolvimento personalizado

Para avaliação técnica ou cotação, forneça a configuração pretendida do citômetro de fluxo, a aplicação, a quantidade necessária, os requisitos de embalagem, a química da superfície e as especificações de controle de qualidade.

Nome do produto: Microesferas Red-Fluo de fluxo de 3µm
Número de catálogo: RCY3UM-630
Diâmetro da partícula: 3µm
Comprimento de onda de excitação: 630nm
Comprimento de onda de emissão: 665–720nm
Conteúdo de sólidos: 0,5%
Aplicação primária: Citometria de fluxo
Capacidade de fornecimento de pesquisa: Amostras, lotes piloto e produção em massa
Uso pretendido: somente para uso em pesquisa. Não para uso diagnóstico ou terapêutico.