Microsfere rosso-fluo flusso 3um RCY3UM-630 0,5%

Microsfere a flusso rosso-fluo da 3 µm per citometria a flusso

Le microsfere a flusso rosso-fluo SHBC RCY3UM-630 sono microsfere fluorescenti di colore rosso lontano da 3 µm sviluppate per la ricerca sulla citometria a flusso laser rosso, la valutazione del canale di fluorescenza, lo sviluppo di metodi strumentali, la ricerca di test basati su sfere e la produzione di reagenti in massa.

Le microsfere sono progettate per l'eccitazione a circa 630 nm e forniscono un ampio intervallo di emissione nel rosso lontano di 665–720 nm. Questo profilo spettrale è adatto per citometri a flusso dotati di laser rossi compatibili e rilevatori di fluorescenza del rosso lontano.

RCY3UM-630 viene fornito come sospensione di solidi allo 0,5% ed è disponibile per la valutazione di laboratorio, lo sviluppo su scala pilota, la produzione ripetuta e la fornitura in grandi quantità.

Risposta rapida sul prodotto

RCY3UM-630 è una sospensione di microsfere fluorescenti di colore rosso lontano da 3 µm con lo 0,5% di solidi, circa 630 nm di eccitazione ed 665–720 nm di emissione. È destinato alla ricerca sulla citometria a flusso, al rilevamento della fluorescenza con laser rosso, agli studi sull'impostazione degli strumenti, allo sviluppo di metodi basati su microsfere e alla produzione di reagenti di ricerca.

Caratteristiche salienti del prodotto

• Nome del prodotto: Microsfere Flow Rosso-Fluo

• Numero di catalogo: RCY3UM-630

• Diametro nominale delle particelle: 3 µm

• Lunghezza d'onda di eccitazione: 630 nm

• Lunghezza d'onda di emissione: 665–720 nm

• Regione di fluorescenza: rosso lontano

• Contenuto di solidi: 0,5%

• Applicazione primaria: ricerca sulla citometria a flusso

• Capacità di fornitura: produzione di campioni, pilota e di massa

• Destinazione d'uso: Solo per uso di ricerca

Panoramica del prodotto RCY3UM-630

RCY3UM-630 è costituito da microsfere fluorescenti da 3 µm che generano un segnale di fluorescenza rosso lontano sotto eccitazione laser rossa compatibile.

Il diametro delle particelle di 3 µm fornisce una popolazione di microsfere chiaramente definita per molte piattaforme di citometria a flusso convenzionali. Rispetto alle particelle submicroniche, le microsfere da 3 µm generalmente producono una dispersione ottica più forte e possono essere più facili da separare dal rumore elettronico e dal fondo particellare.

Ciò rende RCY3UM-630 adatto a gruppi di ricerca che sviluppano o valutano:

• Rilevazione della fluorescenza con laser rosso

• Impostazioni del rilevatore di rosso lontano

• Gating di diffusione e fluorescenza

• Impostazione del metodo con citometro a flusso

• Tracciamento di particelle fluorescenti

• Piattaforme di test basate su microsfere

• Ottimizzazione della concentrazione delle particelle

• Flussi di lavoro per lo sviluppo dei reagenti

• Confronto delle prestazioni degli strumenti

• Valutazione della fluorescenza lotto per lotto

Il prodotto può essere utilizzato da aziende biotecnologiche, laboratori di citometria a flusso, sviluppatori di strumenti, produttori di test, università, istituti di ricerca e organizzazioni di sviluppo di reagenti diagnostici.

RCY3UM-630 viene fornito per ricerca e sviluppo. Qualsiasi utilizzo come materiale di calibrazione formale, standard di conteggio assoluto, standard quantitativo di fluorescenza o controllo diagnostico regolamentato richiede qualificazione e convalida aggiuntive.

Specifiche tecniche

Ulteriori informazioni specifiche sul lotto possono essere disponibili in base alle specifiche di produzione confermate.

La documentazione del progetto può includere, ove applicabile:

• Certificato di analisi

• Risultati dei test sulla dimensione delle particelle

• Risultati del test di fluorescenza

• Informazioni sul contenuto di solidi

• Istruzioni per la manipolazione del prodotto

• Scheda dati di sicurezza

• Consigli per la conservazione

• Informazioni su lotto e produzione

La composizione delle particelle, la chimica della superficie, il sistema conservante, il coefficiente di variazione della dimensione delle particelle, i limiti di intensità della fluorescenza, la configurazione dell'imballaggio e la durata di conservazione devono essere confermati utilizzando il preventivo, la scheda tecnica o il certificato di analisi specifico del lotto.

Fluorescenza del rosso lontano con eccitazione a 630 nm

Le microsfere RCY3UM-630 sono progettate per l'eccitazione vicino a 630 nm ed emettono fluorescenza nell'intervallo di lunghezze d'onda 665–720 nm.

Questo profilo di eccitazione ed emissione è adatto per i sistemi di citometria a flusso laser rosso che utilizzano un rilevatore far-red compatibile.

Le lunghezze d'onda del laser rosso potenzialmente compatibili possono includere:

• 630 nm

• 633 nm

• 635 nm

• 637nm

• 640 nm

La risposta alla fluorescenza ottenuta a ciascuna lunghezza d'onda del laser può differire. La compatibilità deve pertanto essere verificata utilizzando il citometro a flusso previsto.

L’ampia regione di emissione di 665–720 nm può sovrapporsi a diverse configurazioni di rilevatori del lontano rosso. A seconda dello strumento, i filtri ottici adatti possono includere filtri centrati all'interno di circa:

• 660–680 nm

• 665–695 nm

• 670–710 nm

• 680–720 nm

• 690–735 nm

Il segnale effettivo dipende da:

• Lunghezza d'onda del laser

• Potenza del laser

• Tipo di rilevatore

• Guadagno o tensione del rilevatore

• Filtro passa banda

• Configurazione a specchio dicroico

• Concentrazione di particelle

• Portata del campione

• Sfondo del buffer

• Allineamento ottico dello strumento

I ricercatori dovrebbero rivedere la configurazione ottica effettiva anziché fare affidamento solo sui nomi dei canali come APC, FL4, rosso lontano, fluorescenza rossa o canale R.

Perché scegliere le microsfere fluorescenti da 3 µm?

Rilevamento più semplice sui citometri a flusso convenzionali

Il diametro delle particelle di 3 µm è notevolmente più grande delle nanoparticelle e delle sfere submicroniche.

Su molti citometri a flusso convenzionali, le particelle da 3 µm possono generare segnali di diffusione diretta e laterale più forti rispetto alle particelle da 500 nm. Ciò può rendere più facile individuare e delimitare la popolazione di microsfere durante la configurazione iniziale dello strumento.

Le prestazioni dello strumento variano ancora e il rilevamento deve essere confermato sulla piattaforma prevista.

Adatto per la valutazione del canale laser rosso

RCY3UM-630 fornisce un segnale di fluorescenza rosso lontano sotto eccitazione del laser rosso.

Il prodotto può essere valutato quando i ricercatori devono confermare che un laser rosso e il rilevatore del rosso lontano associato possono identificare una popolazione consistente di particelle fluorescenti.

Utile per lo sviluppo del metodo

Una popolazione definita di microsfere fluorescenti può aiutare i ricercatori a stabilire:

• Impostazioni del guadagno del rilevatore

• Soglie di fluorescenza

• Cancelli sparsi

• Portate del campione

• Livelli di diluizione delle particelle

• Limiti del tasso di eventi

• Regole di esclusione dello sfondo

• Modelli di analisi

Adatto per la ricerca basata sulle perline

L'intervallo di dimensioni di 3 µm è comunemente considerato per la ricerca sulla citometria a flusso basata su microsfere perché le particelle possono essere rilevate individualmente fornendo al contempo una superficie fisica che può supportare future strategie di sviluppo dei test.

Quando è richiesto l'accoppiamento di biomolecole, è necessario selezionare e convalidare una superficie funzionale adeguata.

Adatto per lo sviluppo di reagenti in massa

RCY3UM-630 può essere valutato nella fase iniziale della ricerca e poi trasferito nella produzione pilota o in serie dopo che le specifiche tecniche richieste saranno state confermate.

Caratteristiche principali del prodotto

Diametro delle particelle di 3 µm

La dimensione nominale di 3 µm fornisce una popolazione di microsfere rilevabile per lo sviluppo di metodi di citometria a flusso, analisi di fluorescenza e ricerca basata su particelle.

Fluorescenza del rosso lontano

Le microsfere sono progettate per un'eccitazione di circa 630 nm e un'emissione di 665–720 nm.

Compatibilità laser rosso

RCY3UM-630 è destinato alla valutazione su citometri a flusso dotati di laser rossi compatibili.

Contenuto di solidi 0,5%.

La concentrazione fornita consente ai ricercatori di preparare diluizioni di lavoro in base alla frequenza degli eventi e all'applicazione richiesti.

Ampia emissione di rosso lontano

L'ampio intervallo di emissione offre flessibilità nella selezione di rilevatori e filtri che si sovrappongono allo spettro del rosso lontano.

Fornitura dalla ricerca alla produzione

Il prodotto può supportare l'analisi iniziale dei campioni, l'ottimizzazione del laboratorio, la produzione pilota e l'acquisto in grandi quantità.

Supporto per progetti personalizzati

Per progetti di sviluppo qualificati è possibile discutere di dimensioni delle particelle, concentrazioni, intensità di fluorescenza, caratteristiche chimiche delle superfici e formati di imballaggio alternativi.

Applicazioni di citometria a flusso

Rilevamento della fluorescenza con laser rosso

RCY3UM-630 può essere utilizzato per valutare se il laser rosso e il rilevatore far-red di un citometro a flusso possono rilevare una popolazione di particelle fluorescenti definita.

I ricercatori possono confrontare:

• Intensità della fluorescenza

• Risposta del rilevatore

• Separazione segnale-fondo

• Distribuzione degli eventi

• Larghezza dell'istogramma

• Stabilità della misurazione quotidiana

Ricerca sulla configurazione dello strumento

Le microsfere possono supportare lo sviluppo di procedure coerenti di configurazione dello strumento.

I possibili usi di ricerca includono:

• Individuazione della popolazione di particelle

• Regolazione del guadagno della diffusione in avanti

• Regolazione del guadagno della diffusione laterale

• Impostazione della tensione del rilevatore del rosso lontano

• Stabilire una soglia di fluorescenza

• Creazione di una porta di analisi standard

• Controllo della stabilità del flusso del campione

• Confronto di portate basse, medie e alte

RCY3UM-630 non deve essere automaticamente descritto come uno standard di calibrazione dello strumento certificato a meno che il prodotto fornito non sia stato specificamente testato e documentato a tale scopo.

Verifica del canale Far-Red

Le microsfere possono essere utilizzate per determinare se il filtro del rilevatore selezionato si sovrappone all'intervallo di emissione di 665–720 nm del prodotto.

L'utente potrà valutare:

• Sensibilità del rilevatore

• Compatibilità filtri

• Separazione dello sfondo

• Saturazione del segnale

• Ripetibilità dell'acquisizione

• Spillover da canale a canale

I controlli di compensazione formali normalmente richiedono controlli che corrispondano alle caratteristiche del fluoroforo e dell'etichettatura del test. RCY3UM-630 dovrebbe pertanto essere convalidato prima di essere utilizzato come controllo di compensazione.

Sviluppo del trigger di fluorescenza

In alcuni flussi di lavoro di ricerca, la fluorescenza può essere utilizzata come trigger di acquisizione invece che come dispersione.

RCY3UM-630 può essere valutato per:

• Acquisizione attivata dalla fluorescenza

• Ottimizzazione della soglia di trigger

• Discriminazione di fondo

• Esclusione di eventi a bassa fluorescenza

• Confronto tra l'attivazione della dispersione e della fluorescenza

Studi sulla diluizione delle particelle e sul tasso di eventi

La sospensione allo 0,5% può essere diluita per preparare un intervallo di concentrazioni di particelle.

Una serie di diluizioni può aiutare a identificare le condizioni che forniscono:

• Tassi di eventi stabili

• Coincidenza minima

• Chiara risoluzione delle particelle

• Fluorescenza riproducibile

• Tempo di acquisizione accettabile

• Basso consumo di campione

Valutazione del sistema fluidico

Le microsfere fluorescenti possono essere valutate quando si studia l'introduzione del campione e il movimento delle particelle attraverso un citometro a flusso o un sistema microfluidico.

Le potenziali osservazioni includono:

• Stabilità del tasso di eventi

• Riporto del campione

• Interruzione del flusso

• Recupero delle particelle

• Consistenza da tubo a tubo

• Efficacia della pulizia fluidica

Sviluppo di test basati su microsfere

Se fornite o sviluppate utilizzando una chimica di superficie appropriata, le microsfere fluorescenti da 3 µm possono supportare la ricerca sui test basati su microsfere.

Le potenziali indicazioni per lo sviluppo del test includono:

• Immobilizzazione degli anticorpi

• Immobilizzazione dell'antigene

• Studi sul legame con le proteine

• Ricerca sulla cattura degli acidi nucleici

• Studi di interazione ligando-recettore

• Codifica multiplex delle particelle

• Sviluppo di particelle portatrici fluorescenti

La chimica della superficie standard RCY3UM-630 deve essere confermata prima di pianificare una procedura di accoppiamento.

Microscopia a fluorescenza e tracciamento delle particelle

Oltre alla citometria a flusso, le microsfere possono essere valutate in studi compatibili di microscopia a fluorescenza, imaging, microfluidica, filtrazione e tracciamento delle particelle.

L'idoneità all'applicazione dipende dalla sorgente di eccitazione del microscopio, dal set di filtri, dalla sensibilità del rilevatore, dalla matrice del campione e dal comportamento delle particelle richiesto.

Laser compatibili e canali di rilevamento

Eccitazione consigliata

Si consiglia un laser rosso vicino alla lunghezza d'onda di eccitazione specificata di 630 nm.

Le potenziali linee laser includono:

RCY3UM-630 non è progettato principalmente per l'eccitazione con laser da 405 nm, 488 nm o 561 nm a meno che test spettrali separati non confermino un'eccitazione sufficiente.

Regione di rilevamento consigliata

Selezionare un rilevatore il cui filtro ottico si sovrappone all'intervallo di emissione di 665–720 nm.

Un filtro centrato vicino a 680 nm, 690 nm o 700 nm può essere adatto quando la sua larghezza di banda cattura una parte sufficiente dello spettro di emissione.

Non è possibile selezionare il rilevatore migliore utilizzando soltanto la lunghezza d'onda centrale. Dovrebbero essere considerate sia la lunghezza d'onda centrale che la larghezza del filtro.

Per esempio:

• Un filtro 670/30 raccoglie circa 655–685 nm.

• Un filtro 695/40 raccoglie circa 675–715 nm.

• Un filtro 710/50 raccoglie circa 685–735 nm.

Questi sono esempi di intervalli di filtri piuttosto che raccomandazioni garantite sugli strumenti.

Canali di rilevamento simili a APC

L'emissione nel rosso lontano del prodotto può sovrapporsi ai canali del rilevatore comunemente associati alla fluorescenza di tipo APC.

Tuttavia, RCY3UM-630 non deve essere descritto come chimicamente identico o spettralmente identico ad APC. La compatibilità dovrebbe basarsi sull'effettivo profilo di eccitazione ed emissione piuttosto che sul nome del canale del fluoroforo.

Flusso di lavoro suggerito per la citometria a flusso

Il seguente flusso di lavoro è un punto di partenza generale. Le impostazioni dello strumento e la preparazione del campione devono essere ottimizzate per l'applicazione prevista.

1. Preparare il citometro a flusso

Pulire e adescare lo strumento secondo le istruzioni del produttore.

Confermare che il sistema fluidico sia stabile e che siano disponibili il laser rosso e il rilevatore del rosso lontano.

2. Eseguire un buffer vuoto

Utilizzare lo stesso tampone che verrà utilizzato per diluire le microsfere.

Registra la frequenza degli eventi vuoti in:

• Dispersione in avanti

• Dispersione laterale

• Fluorescenza rosso lontano

• Eventuali altri canali monitorati

Un tampone bianco aiuta a identificare la contaminazione da particolato, il rumore elettronico, la fluorescenza del tampone e il carryover dai campioni precedenti.

3. Risospendere le microsfere

Prima del campionamento agitare delicatamente la fiala fino ad ottenere una sospensione omogenea.

I metodi iniziali adatti possono includere:

• Inversione delicata

• Vortex controllato

• Breve bagno di sonicazione delicato quando necessario

Evitare formazione di schiuma eccessiva, surriscaldamento, sonicazione prolungata o trattamenti meccanici aggressivi.

Non fare affidamento solo sull'aspetto visivo per confermare la completa dispersione.

4. Preparare una serie di diluizioni

Preparare più diluizioni di lavoro in provette pulite.

Ad esempio, uno studio preliminare può includere diverse diluizioni decuplicate o graduali.

La diluizione esatta dipende da:

• Concentrazione di solidi originale

• Frequenza di campionamento del citometro a flusso

• Tasso di eventi desiderato

• Tempo di acquisizione

• Applicazione

• Livello di fondo

Inizia con una concentrazione bassa e aumentala gradualmente quando necessario.

5. Utilizzare una portata del campione bassa

Durante l'ottimizzazione iniziale si consiglia una portata bassa perché può migliorare la risoluzione della popolazione e ridurre gli eventi coincidenti.

Dopo aver stabilito le condizioni adeguate, è possibile valutare le portate medie o elevate.

6. Individuare la popolazione di particelle

Iniziare con i grafici della fluorescenza a diffusione diretta, laterale e del rosso lontano.

Regolare gradualmente le impostazioni di dispersione e fluorescenza finché la popolazione di particelle non è chiaramente separata dallo sfondo del buffer.

7. Selezionare il rilevatore del rosso lontano

Scegliere un filtro rilevatore che si sovrapponga all'intervallo di emissione di 665–720 nm.

Aumentare la tensione o il guadagno del rilevatore con attenzione per evitare di saturare il segnale.

8. Stabilisci un cancello

Crea un cancello attorno alla popolazione principale della microsfera.

Escludere:

• Rumore del buffer

• Detriti

• Possibili aggregati

• Eventi coincidenti di altissima intensità

• Artefatti elettronici

9. Valutare la coincidenza

Eseguire almeno due o tre diluizioni delle particelle.

Se l'intensità apparente della fluorescenza, la posizione di dispersione o la distribuzione degli eventi cambiano in modo significativo quando il campione viene diluito, potrebbe verificarsi una coincidenza.

Continuare la diluizione fino a quando la misurazione diventa indipendente dalla concentrazione entro l'intervallo sperimentale richiesto.

10. Registra tutte le impostazioni

Per la riproducibilità, registrare:

• Modello dello strumento

• Lunghezza d'onda del laser

• Filtro del rilevatore

• Voltaggio o guadagno del rilevatore

• Impostazioni di dispersione

• Canale di attivazione

• Soglia di attivazione

• Portata del campione

• Fattore di diluizione

• Tempo di acquisizione

• Numero di eventi raccolti

• Composizione del tampone

Utilizzo di RCY3UM-630 nello sviluppo di test basati su microsfere

RCY3UM-630 può essere considerata una piattaforma di particelle fluorescenti durante la ricerca sulla citometria a flusso basata su perline.

Prima dello sviluppo del test, verificare se il prodotto ha una superficie semplice, carbossilica, amminica, streptavidina, epossidica o altra superficie funzionale.

Immobilizzazione di biomolecole

Se è disponibile una chimica di superficie appropriata, le microsfere possono essere valutate per l'immobilizzazione:

• Anticorpi

• Antigeni

• Proteine

• Peptidi

• Enzimi

• Oligonucleotidi

• Sonde per acidi nucleici

• Altri ligandi

Il metodo di accoppiamento deve essere selezionato in base al gruppo funzionale superficiale e alla biomolecola.

Fattori di sviluppo del test

I parametri importanti possono includere:

• Buffer di accoppiamento

• pH tampone

• Concentrazione di biomolecole

• Concentrazione del reagente di attivazione

• Tempo di accoppiamento

• Agente bloccante

• Procedura di lavaggio

• Buffer di archiviazione

• Concentrazione della microsfera

• Matrice del campione target

• Adsorbimento non specifico

• Ritenzione della fluorescenza

Ricerca sulla citometria a flusso multiplex

Diverse popolazioni di microsfere possono potenzialmente essere distinte utilizzando:

• Diametro delle particelle

• Colore fluorescente

• Intensità della fluorescenza

• Chimica delle superfici

• Strategia di codifica interna

Per un test multiplex, ciascuna popolazione deve rimanere chiaramente separata dopo l'accoppiamento, il blocco, la conservazione e l'incubazione del campione.

La fluorescenza del reporter deve essere separata anche dal segnale di identificazione rosso lontano RCY3UM-630.

RCY3UM-630 Rispetto alle microsfere fluorescenti da 500 nm

Sia le microsfere da 3 µm che quelle da 500 nm possono essere utilizzate nella ricerca sulla citometria a flusso, ma sono adatte a diverse priorità sperimentali.

Scegli RCY3UM-630 quando:

• È necessaria una popolazione di particelle di colore rosso lontano chiaramente rilevabili.

• Il progetto utilizza un citometro a flusso convenzionale.

• La ricerca si concentra sulla configurazione del rilevatore laser rosso.

• È preferibile una piattaforma di perline di dimensioni micron.

• Si sta prendendo in considerazione lo sviluppo di test basati su microsfere.

• Sono necessari sia il gating di dispersione che quello di fluorescenza.

Scegli le microsfere da 500 nm quando:

• Il progetto si concentra specificamente sulle particelle submicroniche.

• Si stanno studiando le prestazioni di rilevamento delle piccole particelle.

• Lo strumento ha un'adeguata capacità di rilevamento di nanoparticelle o vescicole extracellulari.

• L'acquisizione innescata dalla fluorescenza è uno dei principali obiettivi di ricerca.

Controllo di qualità e coerenza dei lotti

Per i progetti di sviluppo dei reagenti e di produzione in serie, le specifiche di qualità richieste devono essere concordate prima della produzione.

I potenziali parametri di controllo della qualità possono includere:

• Diametro nominale delle particelle

• Distribuzione granulometrica

• Coefficiente di variazione della dimensione delle particelle

• Aspetto della sospensione

• Contenuto di solidi

• Prestazioni di dispersione

• Livello aggregato

• Spettro di eccitazione

• Spettro di emissione

• Intensità relativa della fluorescenza

• Distribuzione della fluorescenza

• Istogramma della citometria a flusso

• Confronto della fluorescenza da lotto a lotto

• Controllo microbico

• Stabilità di stoccaggio

• Stabilità accelerata

• Integrità dell'imballaggio

Non tutti i parametri sono inclusi in tutte le specifiche di prodotto standard. I limiti richiesti dovrebbero essere discussi durante la valutazione tecnica.

Valutazione della citometria a flusso

Una procedura di controllo qualità della citometria a flusso può valutare:

• Posizione principale della popolazione

• Fluorescenza mediana o media

• Larghezza di distribuzione

• Percentuale di particelle delimitate

• Popolazione aggregata

• Separazione dello sfondo

• Ripetibilità da esecuzione a esecuzione

Le impostazioni dello strumento dovrebbero rimanere invariate quando si confrontano diversi lotti di produzione.

Calibrazione e tracciabilità

RCY3UM-630 non dovrebbe essere rappresentato automaticamente come:

• Uno standard di dimensione delle particelle tracciabile dal NIST

• Uno standard certificato di intensità di fluorescenza

• Uno standard assegnato dal MESF

• Uno standard assoluto per il conteggio delle particelle

• Un controllo diagnostico regolamentato

• Una perla di calibrazione del citometro a flusso certificata

Queste affermazioni richiedono test specifici, assegnazione di valore, documentazione e tracciabilità.

La qualificazione specifica del progetto può essere discussa quando è richiesta una domanda formale di materiale di riferimento.

Fornitura all'ingrosso e produzione personalizzata

SHBC supporta progetti di microsfere fluorescenti dalla valutazione di laboratorio alla produzione pilota e alla produzione in serie.

Campioni di ricerca

I campioni possono essere utilizzati per valutare:

• Compatibilità con laser rosso

• Compatibilità con rilevatore di rosso lontano

• Intensità della fluorescenza

• Dispersione delle particelle

• Gating della citometria a flusso

• Diluizione del campione

• Fattibilità del test

Produzione pilota

I lotti pilota possono supportare:

• Ottimizzazione del metodo

• Ricerca sulla stabilità

• Valutazione dell'imballaggio

• Confronto iniziale dei lotti

• Trasferimento del test

• Verifica del cliente

Produzione in serie

Dopo la conferma delle specifiche tecniche, è possibile organizzare la produzione in serie in base alla domanda prevista del cliente.

Le informazioni richieste per la valutazione collettiva possono includere:

• Quantità richiesta

• Previsioni annuali

• Dimensione del pacchetto target

• Programma di consegna

• Applicazione

• Configurazione del citometro a flusso

• Livello di fluorescenza richiesto

• Chimica delle superfici

• Requisiti di buffer

• Specifiche del controllo di qualità

• Requisiti di documentazione

Opzioni di produzione personalizzata

A seconda della fattibilità tecnica, la personalizzazione può includere:

• Diametri alternativi delle particelle

• Differenti lunghezze d'onda di eccitazione

• Diverse lunghezze d'onda di emissione

• Intensità di fluorescenza regolata

• Contenuti solidi alternativi

• Superfici piane di microsfere

• Superfici carbossi-funzionalizzate

• Superfici ammino-funzionalizzate

• Altre superfici funzionali

• Imballaggio specifico per il cliente

• Criteri QC specifici del cliente

• Etichettatura OEM

• Sviluppo prodotti ODM

La fattibilità finale dipende dai requisiti tecnici completi e dal volume dell'ordine.

Raccomandazioni per la manipolazione e lo stoccaggio

Per ottenere le migliori prestazioni, seguire l'etichetta specifica del prodotto, la scheda tecnica e il certificato di analisi.

Le raccomandazioni generali includono:

• Conservare al riparo dalla luce.

• In genere si consiglia la conservazione refrigerata a 2–8°C, se non diversamente specificato.

• Non congelare a meno che non sia stata confermata la stabilità al congelamento-scongelamento.

• Tenere la fiala ben chiusa.

• Conservare il contenitore in posizione verticale.

• Mescolare la sospensione prima dell'uso.

• Utilizzare puntali per pipette e provette per campioni puliti.

• Evitare di contaminare il contenitore originale.

• Ridurre al minimo l'esposizione prolungata alla luce forte.

• Evitare ripetuti sbalzi di temperatura non necessari.

• Non lasciare asciugare le microsfere.

• Non restituire il materiale diluito al contenitore originale.

Risospensione

Se durante lo stoccaggio si verifica un deposito:

1. Lasciare che la fiala raggiunga la temperatura di manipolazione consigliata.

2. Mescolare delicatamente per inversione.

3. Applicare il vortex controllato quando necessario.

4. Ispezionare la sospensione per eventuali aggregati visibili.

5. Valutare un piccolo campione mediante citometria a flusso prima di iniziare l'esperimento completo.

È possibile valutare una breve sonicazione con bagno delicato se la miscelazione ordinaria non fornisce una dispersione sufficiente.

Protezione dalla luce

Poiché il prodotto è fluorescente, è necessario ridurre al minimo l'esposizione non necessaria alla forte luce del laboratorio.

Le diluizioni di lavoro dovrebbero essere preparate poco prima dell'uso, quando possibile.

Congelamento

Il congelamento può causare aggregazione irreversibile delle particelle o cambiamenti nelle prestazioni della sospensione.

Non congelare il prodotto a meno che la documentazione fornita non consenta espressamente la conservazione congelata.

Domande frequenti

Cos'è l'RCY3UM-630?

RCY3UM-630 è una sospensione di microsfere fluorescenti di colore rosso lontano da 3 µm sviluppata per la ricerca sulla citometria a flusso. Ha circa 630 nm di eccitazione, 665-720 nm di emissione e 0,5% di solidi.

Qual è il diametro delle particelle?

Il diametro nominale delle particelle è 3 µm.

Le informazioni sulla dimensione delle particelle specifiche del lotto devono essere confermate utilizzando il documento tecnico corrispondente o il certificato di analisi.

Quale laser dovrebbe essere utilizzato?

Si consiglia un laser rosso vicino a 630 nm.

Possono essere adatti anche i citometri a flusso dotati di laser da 633, 635, 637 o 640 nm, ma la compatibilità deve essere confermata sperimentalmente.

Quale canale di fluorescenza dovrebbe essere utilizzato?

Utilizzare un rilevatore di rosso lontano il cui filtro ottico si sovrappone all'intervallo di emissione di 665–720 nm.

I nomi dei canali variano a seconda dello strumento, quindi è necessario verificare la lunghezza d'onda effettiva del filtro.

Può essere rilevato in un canale APC?

L'intervallo di emissione potrebbe sovrapporsi ad alcuni canali di rilevamento associati all'APC.

Tuttavia, RCY3UM-630 non è necessariamente identico spettralmente ad APC. La compatibilità deve essere determinata dalla configurazione del laser e del filtro dello strumento.

Un laser da 488 nm può eccitare RCY3UM-630?

Il prodotto è specificato per un'eccitazione di circa 630 nm.

Non si deve presumere che fornisca una fluorescenza sufficiente sotto eccitazione a 488 nm a meno che test spettrali separati non confermino questo comportamento.

RCY3UM-630 è adatto ai citometri a flusso convenzionali?

Il diametro di 3 µm è adatto per la valutazione su molti citometri a flusso convenzionali.

Il rilevamento effettivo dipende dall'ottica dello strumento, dal laser, dai rilevatori, dai filtri, dalla fluidica e dalle impostazioni.

Può essere utilizzato per l'allineamento dello strumento?

Può essere valutato durante la ricerca di impostazione degli strumenti e di allineamento comparativo.

Non deve essere venduto o descritto come standard di allineamento certificato a meno che non vengano fornite qualificazione, calibrazione e documentazione adeguate.

È una sfera di calibrazione della fluorescenza?

Non automaticamente.

Uno standard di fluorescenza certificato normalmente richiede valori di fluorescenza assegnati, incertezza definita, tracciabilità e documentazione di supporto.

RCY3UM-630 viene fornito principalmente come microsfera fluorescente da ricerca, se non diversamente specificato.

Può essere utilizzato per il conteggio assoluto?

Il conteggio assoluto richiede una concentrazione del numero di particelle verificata e un protocollo di conteggio appropriato.

Il solo valore dello 0,5% di solidi non è sufficiente per stabilire un numero assoluto di particelle per millilitro. Non utilizzare il prodotto come standard di conteggio assoluto a meno che non sia stato fornito un valore di conteggio delle particelle convalidato.

Può essere utilizzato per un risarcimento?

Il prodotto può essere valutato per la ricerca sui canali di fluorescenza, ma i controlli di compensazione formali devono corrispondere strettamente alle caratteristiche del fluoroforo e della colorazione del test.

L'utente deve convalidare RCY3UM-630 prima di utilizzarlo come controllo di compensazione.

È possibile accoppiare gli anticorpi alle microsfere?

L'accoppiamento degli anticorpi richiede una superficie funzionale adeguata.

Si prega di confermare se il prodotto richiesto deve avere carbossile, ammino, streptavidina, resina epossidica o un'altra chimica di superficie.

Può essere utilizzato nei test multiplex?

Sì, può essere valutata come una popolazione di particelle fluorescenti nella ricerca sulla citometria a flusso multiplex.

La popolazione di particelle deve rimanere distinguibile dalle altre popolazioni di sfere e dalla fluorescenza reporter.

Perché scegliere particelle da 3 µm anziché da 500 nm?

Le particelle da 3 µm sono generalmente più facili da risolvere mediante dispersione sui citometri a flusso convenzionali e sono adatte per analisi basate su microsfere e ricerche di impostazione degli strumenti.

Le particelle da 500 nm sono più adatte per il rilevamento di dimensioni submicroniche e per lo sviluppo di metodi per particelle piccole.

Quale concentrazione di solidi viene fornita?

RCY3UM-630 viene fornito allo 0,5% di solidi.

La concentrazione operativa appropriata deve essere determinata mediante diluizione in base al tasso di eventi richiesto.

Come deve essere miscelato il prodotto?

Miscelare delicatamente mediante inversione o vortex controllato prima del campionamento.

Se necessario, è possibile valutare una breve sonicazione con bagno delicato. Evitare l'eccessiva formazione di schiuma e il surriscaldamento.

Come dovrebbe essere conservato?

Conservare al riparo dalla luce e seguire le istruzioni di conservazione sulla documentazione del prodotto.

In genere si consiglia la conservazione refrigerata e il congelamento dovrebbe essere evitato se non diversamente specificato.

È disponibile la produzione in serie?

SÌ. RCY3UM-630 può essere fornito per la valutazione dei campioni, lo sviluppo pilota, gli ordini ripetuti e la produzione in serie.

È possibile personalizzare la concentrazione o il confezionamento?

Concentrazioni di solidi e formati di imballaggio alternativi possono essere discussi in base alla fattibilità tecnica, alla quantità dell'ordine e ai requisiti del progetto.

Quali informazioni sono necessarie per un preventivo?

Si prega di fornire:

• Numero di catalogo RCY3UM-630

• Quantità richiesta

• Domanda annua prevista

• Dimensione del pacchetto preferita

• Modello di citometro a flusso

• Lunghezza d'onda del laser rosso

• Filtro rivelatore del rosso lontano

• Applicazione prevista

• Chimica di superficie richiesta

• Intensità di fluorescenza richiesta

• Requisiti di controllo qualità

• Requisiti di documentazione

• Destinazione di consegna

Richiedi un campione o un preventivo in blocco

Le microsfere rosso-fluorescenti RCY3UM-630 a flusso da 3 µm forniscono una soluzione di particelle fluorescenti di colore rosso lontano per la ricerca sulla citometria a flusso laser rosso, studi sull'impostazione degli strumenti, valutazione del canale di fluorescenza, sviluppo di test basati su sfere e produzione di reagenti di ricerca.

Il prodotto combina:

• Diametro nominale delle particelle 3 µm

• Eccitazione di circa 630 nm

• Emissione di rosso lontano da 665–720 nm

• 0,5% di solidi

• Compatibilità con la ricerca sulla citometria a flusso

• Fornitura di campioni e pilota

• Capacità di produzione in serie

• Supporto per lo sviluppo personalizzato

Per la valutazione tecnica o il preventivo, fornire la configurazione prevista del citometro a flusso, l'applicazione, la quantità richiesta, i requisiti di imballaggio, la chimica della superficie e le specifiche del controllo di qualità.

Nome del prodotto: Microsfere rosso-fluorescenti a flusso da 3 µm
Numero di catalogo: RCY3UM-630
Diametro delle particelle: 3 µm
Lunghezza d'onda di eccitazione: 630 nm
Lunghezza d'onda di emissione: 665–720 nm
Contenuto di solidi: 0,5%
Applicazione primaria: Ricerca sulla citometria a flusso
Capacità di fornitura: Campioni, lotti pilota e produzione in serie
Uso previsto: Solo per uso di ricerca. Non per uso diagnostico o terapeutico.