Microesferas de flujo rojo fluo de 7 um RCY7UM-630 0,5 %

Microesferas de flujo rojo fluo de 7 µm para citometría de flujo

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. suministra microesferas de flujo rojo fluo RCY7UM-630 de 7 µm para la investigación de citometría de flujo con láser rojo, evaluación de canales de fluorescencia, desarrollo de métodos de instrumentos, investigación de ensayos basados ​​en perlas y producción de reactivos a granel.

Las microesferas RCY7UM-630 tienen un diámetro de partícula nominal de 7 µm y están diseñadas para excitación a aproximadamente 630 nm. Proporcionan un amplio rango de emisión de fluorescencia del rojo lejano de 665 a 720 nm.

El producto se suministra como una suspensión de sólidos al 0,5 % y puede respaldar la evaluación de laboratorio, el desarrollo de proyectos de citometría de flujo, pruebas a escala piloto, producción repetida y compras al por mayor.

Respuesta rápida del producto

RCY7UM-630 es una suspensión de microesferas fluorescentes de color rojo lejano de 7 µm con 0,5 % de sólidos. Está diseñado para una excitación de aproximadamente 630 nm y una emisión de 665 a 720 nm y puede evaluarse en investigaciones de citometría de flujo con láser rojo, estudios de detección de fluorescencia, desarrollo de ensayos basados ​​en perlas, investigación de configuración de instrumentos y producción de reactivos de microesferas fluorescentes.

Productos destacados

• Nombre del producto: Microesferas de flujo rojo fluo de 7 µm

• Número de catálogo: RCY7UM-630

• Fabricante: Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.

• Diámetro nominal de partícula: 7 µm

• Longitud de onda de excitación: 630 nm

• Longitud de onda de emisión: 665–720 nm

• Región de fluorescencia: rojo lejano

• Contenido de sólidos: 0,5%

• Método de detección recomendado: citometría de flujo

• Región láser recomendada: láser rojo

• Capacidad de suministro: muestras, lotes piloto y producción a granel.

• Uso previsto: uso exclusivo en investigación

¿Qué son las microesferas de flujo rojo fluo RCY7UM-630?

RCY7UM-630 consta de microesferas fluorescentes de 7 µm que producen una señal de fluorescencia de color rojo lejano cuando se excitan con un láser rojo compatible.

El diámetro de partícula de 7 µm está dentro del rango de tamaño de micras comúnmente evaluado en la investigación de citometría de flujo convencional. En comparación con las nanopartículas y las perlas submicrónicas, las microesferas de 7 µm pueden producir señales de dispersión frontal y lateral más fuertes, lo que hace que la población de partículas principal sea más fácil de localizar y controlar en muchos citómetros de flujo.

La combinación del tamaño de partículas a escala micrométrica y la fluorescencia del rojo lejano hace que el RCY7UM-630 sea adecuado para investigaciones que involucren:

• Detección de fluorescencia por láser rojo

• Evaluación del detector de rojo lejano

• Optimización de la configuración del citómetro de flujo

• Desarrollo del umbral de fluorescencia.

• Control de dispersión y fluorescencia

• Estudios de dilución de partículas.

• Optimización de la tasa de eventos

• Desarrollo del método de citometría de flujo.

• Investigación de ensayos basados ​​en perlas

• Seguimiento de partículas fluorescentes

• Comparación de instrumentos

• Fabricación de reactivos de investigación.

RCY7UM-630 puede ser evaluado por empresas de biotecnología, laboratorios de citometría de flujo, universidades, institutos de investigación, fabricantes de instrumentos, desarrolladores de reactivos y organizaciones que desarrollan métodos analíticos basados ​​en partículas.

El producto estándar se suministra para uso en investigación. No debe representarse automáticamente como un material de calibración certificado, un estándar de conteo absoluto, un estándar MESF o un control de diagnóstico regulado a menos que se proporcionen específicamente la calificación y la documentación pertinentes.

RCY7UM-630 Especificaciones técnicas

Los parámetros específicos del lote deben confirmarse mediante la especificación del producto correspondiente o el Certificado de análisis.

Dependiendo de la especificación del pedido confirmado, la información de respaldo puede incluir:

• Diámetro nominal de partículas

• Distribución del tamaño de partículas

• Contenido de sólidos

• Aspecto de la suspensión

• Información de excitación de fluorescencia.

• Información sobre emisiones de fluorescencia

• Número de lote

• fecha de producción

• Recomendaciones de almacenamiento

• Instrucciones de manejo

• Certificado de Análisis

• Ficha de datos de seguridad

La matriz de las partículas, la química de la superficie, el sistema conservante, el coeficiente de variación del tamaño de las partículas, el rango de intensidad de fluorescencia, la vida útil, el tamaño del embalaje y el tampón de almacenamiento deben confirmarse antes de la publicación cuando estos valores estén disponibles.

Excitación de 630 nm y emisión de rojo lejano de 665 a 720 nm

RCY7UM-630 está diseñado para excitación cerca de 630 nm y produce fluorescencia en la región del rojo lejano de 665 a 720 nm.

Las longitudes de onda del láser rojo potencialmente compatibles pueden incluir:

• 630 nm

• 633 nm

• 635 nm

• 637nm

• 640 nm

La especificación del producto identifica 630 nm como longitud de onda de excitación. También pueden ser adecuados instrumentos que utilicen longitudes de onda de láser rojo cercanas, pero la respuesta de fluorescencia final debe confirmarse en el citómetro de flujo previsto.

El rango de emisión de 665 a 720 nm puede superponerse a varias configuraciones de detectores de rojo lejano.

Las posibles regiones de filtro del detector pueden incluir:

• Aproximadamente 660–680 nm

• Aproximadamente 665–695 nm

• Aproximadamente 670–710 nm

• Aproximadamente 680–720 nm

• Aproximadamente 690–735 nm

Estos rangos son ejemplos de compatibilidad general en lugar de configuraciones de instrumento garantizadas.

La señal de fluorescencia medida puede verse afectada por:

• Longitud de onda láser

• potencia del láser

• Alineación óptica

• Sensibilidad del detector

• Tensión o ganancia del detector

• espejos dicroicos

• Filtros de paso de banda

• Concentración de muestra

• Caudal

• Umbral de activación

• Tampón de suspensión

• Fondo del instrumento

• Agregación de partículas

Los usuarios deben revisar las especificaciones reales del láser y del filtro del citómetro de flujo en lugar de confiar únicamente en nombres de canales como APC, FL4, rojo lejano, fluorescencia roja o canal de láser rojo.

¿Por qué elegir microesferas fluorescentes de 7 µm?

Población de partículas de tamaño micrométrico claramente detectable

El diámetro nominal de partícula de 7 µm puede proporcionar una población de microesferas distinta en muchos citómetros de flujo convencionales.

En comparación con las partículas submicrónicas, las microesferas de 7 µm pueden ser más fáciles de separar de:

• Ruido electrónico

• Partículas tampón

• Pequeños escombros

• Fondo del instrumento

• Contaminantes de baja dispersión

El rendimiento real depende de la configuración óptica y fluídica del instrumento.

Adecuado para citómetros de flujo convencionales

La investigación que involucra nanopartículas o vesículas extracelulares puede requerir configuraciones especializadas de detección de partículas pequeñas.

Por el contrario, una población de microesferas fluorescentes de 7 µm generalmente se puede evaluar utilizando gráficos de fluorescencia, dispersión lateral y dispersión directa más convencionales.

Esto hace que el RCY7UM-630 sea adecuado para el desarrollo inicial de métodos de citometría de flujo y proyectos de capacitación en laboratorio.

Excitación con láser rojo

RCY7UM-630 proporciona una señal de fluorescencia de color rojo lejano con una excitación de aproximadamente 630 nm.

Puede usarse cuando los investigadores necesitan una población de partículas fluorescentes que pueda detectarse utilizando un láser rojo y un detector de rojo lejano compatible.

Modelo de investigación de rango de tamaño celular

El tamaño de partícula de 7 µm se encuentra dentro del amplio rango de tamaño de muchas células biológicas y partículas similares a células.

Por lo tanto, las microesferas pueden evaluarse cuando los investigadores requieran una población sintética del tamaño de una micra para estudios de configuración de instrumentos o manejo de partículas.

RCY7UM-630 no reproduce la deformabilidad, el índice de refracción, la densidad, la estructura de la superficie, la distribución de fluorescencia o el comportamiento biológico de un tipo de célula específico. Se debe establecer la idoneidad como sustituto celular para cada solicitud.

Adecuado para investigaciones basadas en cuentas

El tamaño de partícula a escala micrométrica puede proporcionar una plataforma práctica para la investigación que involucra detección basada en perlas, codificación de partículas, inmovilización de biomoléculas y citometría de flujo múltiple.

Se requiere una superficie funcional adecuada cuando es necesario acoplar anticuerpos, antígenos, proteínas o ácidos nucleicos a las partículas.

Apoya el desarrollo de la investigación a la producción

RCY7UM-630 se puede evaluar en pequeñas cantidades durante la etapa inicial de investigación y posteriormente transferirse a fabricación piloto o a granel una vez que se haya confirmado la especificación técnica requerida.

Características y beneficios clave

Diámetro nominal de partícula de 7 µm

El tamaño de partícula a escala micrométrica es adecuado para la detección por citometría de flujo, estudios de activación, seguimiento de partículas y desarrollo de métodos basados ​​en perlas.

Fluorescencia del rojo lejano

El producto está diseñado para una excitación de aproximadamente 630 nm y una emisión de 665 a 720 nm.

Compatibilidad con láser rojo

RCY7UM-630 se puede evaluar en citómetros de flujo equipados con excitación de láser rojo compatible.

Amplio rango de emisiones

La amplia región de emisión del rojo lejano proporciona flexibilidad a la hora de seleccionar filtros detectores compatibles.

Suspensión de sólidos al 0,5%

La concentración suministrada permite a los usuarios preparar diluciones de trabajo de acuerdo con la tasa de eventos requerida, el tiempo de adquisición y el diseño experimental.

Separación visible de desechos pequeños

La población de tamaño micrométrico puede ser más fácil de distinguir de las partículas de fondo submicrónicas que las microesferas fluorescentes más pequeñas.

Adecuado para múltiples flujos de trabajo de investigación

RCY7UM-630 se puede evaluar en citometría de flujo, microscopía de fluorescencia, microfluidos, seguimiento de partículas, desarrollo de ensayos e investigación de instrumentos.

Suministro de muestra a granel

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. respalda la evaluación de muestras de laboratorio, el desarrollo a escala piloto, los pedidos repetidos y la fabricación a granel.

Soporte de desarrollo personalizado

Se pueden discutir tamaños, concentraciones, intensidades de fluorescencia, químicas de superficie, formatos de empaque y requisitos de control de calidad alternativos de acuerdo con la viabilidad del proyecto.

Aplicaciones en la investigación de citometría de flujo

Detección de fluorescencia por láser rojo

RCY7UM-630 se puede utilizar para evaluar la excitación del láser rojo y la detección de fluorescencia del rojo lejano.

Los investigadores pueden estudiar:

• Intensidad de fluorescencia de partículas

• Separación de señal a fondo

• Sensibilidad del detector

• Tensión o ganancia del detector

• Posición del histograma de fluorescencia

• Ancho de distribución de fluorescencia

• Estabilidad carrera a carrera

• Variación del instrumento día a día

Investigación sobre la configuración del citómetro de flujo

Las microesferas pueden respaldar investigaciones que impliquen una configuración consistente de instrumentos.

Los posibles procedimientos incluyen:

• Localización de la población de microesferas.

• Ajustar la configuración de dispersión hacia adelante

• Ajustar la configuración de dispersión lateral

• Seleccionar el detector de rojo lejano

• Establecer un umbral de fluorescencia

• Establecer un activador de adquisición

• Creando una puerta de partículas

• Comparación de diferentes caudales

• Evaluación de la estabilidad de la tasa de eventos

• Comprobación del arrastre de muestra

El producto estándar no debe describirse como un cordón de calibración o alineación certificado a menos que se hayan completado la asignación de valor y la calificación adecuadas.

Puerta de dispersión y fluorescencia

RCY7UM-630 se puede evaluar utilizando varias combinaciones de gráficos:

• Dispersión hacia adelante versus dispersión lateral

• Dispersión directa versus fluorescencia del rojo lejano

• Dispersión lateral versus fluorescencia del rojo lejano

• Histograma de fluorescencia de rojo lejano

• Área del pulso versus altura del pulso

• Área de pulso versus ancho de pulso

Estos gráficos pueden ayudar a distinguir:

• Microesferas individuales

• Posibles agregados

• Eventos de fondo

• Eventos coincidentes

• Partículas anormalmente brillantes

• Partículas de baja fluorescencia

Desarrollo del umbral de fluorescencia

Un activador de fluorescencia puede resultar útil cuando los investigadores desean adquirir únicamente eventos que produzcan una señal de fluorescencia de color rojo lejano.

RCY7UM-630 puede respaldar estudios que involucren:

• Adquisición activada por fluorescencia

• Selección de umbral de disparo

• Exclusión de eventos en segundo plano

• Comparación de disparador de dispersión

• Evaluación de la sensibilidad de detección

• Discriminación de eventos de baja intensidad

Estudios de dilución de partículas

Normalmente, la suspensión de sólidos al 0,5 % debe diluirse antes de la prueba de citometría de flujo.

Una serie de diluciones puede ayudar a determinar una concentración de trabajo que proporcione:

• Tasas de eventos estables

• Mínima coincidencia

• Clara separación de la población

• Fluorescencia reproducible

• Tiempo de adquisición adecuado

• Bajo consumo de muestra

• Antecedentes aceptables

El factor de dilución apropiado depende del instrumento, el caudal, el volumen de muestra, la aplicación y la cantidad deseada de eventos registrados.

Evaluación de tasa de eventos y coincidencia

Cuando demasiadas microesferas pasan a través de la región de interrogación del láser al mismo tiempo, se pueden registrar dos o más partículas como un solo evento.

Los posibles indicios de coincidencia incluyen:

• Mayor intensidad de fluorescencia aparente.

• Mayor intensidad de dispersión

• Distribuciones amplias de partículas.

• Poblaciones de dobletes inesperadas

• Cambios de señal dependientes de la concentración

• Tasas de eventos inestables

Probar varias diluciones puede ayudar a identificar un rango de trabajo adecuado.

Investigación de sistemas fluídicos

Las microesferas fluorescentes también pueden respaldar estudios del movimiento de muestras a través de un citómetro de flujo o un sistema de microfluidos.

Las posibles observaciones incluyen:

• Introducción de muestra

• Estabilidad del flujo

• Consistencia de la tasa de eventos

• Recuperación de partículas

• Transferencia de muestra

• Reproducibilidad tubo a tubo

• Efectividad de limpieza

• Bloqueo o interrupción

• Pérdida de partículas dentro del camino fluídico.

Microscopía de fluorescencia

RCY7UM-630 se puede evaluar utilizando microscopios de fluorescencia equipados con una fuente de excitación roja compatible y un filtro de emisión de rojo lejano.

Las posibles aplicaciones de microscopía incluyen:

• Localización de partículas

• Estudios de distribución de partículas.

• Imágenes de microfluidos

• Estudios de filtración

• Investigación de interacción de superficies.

• Experimentos de absorción de partículas.

• Observaciones de estabilidad de fluorescencia.

La compatibilidad debe confirmarse utilizando el juego de filtros del microscopio real.

Láseres rojos compatibles y canales de detección

Región de excitación recomendada

Se recomienda un láser rojo cercano a 630 nm.

RCY7UM-630 no está diseñado principalmente para excitación con láseres de 405 nm, 488 nm o 561 nm.

No se debe asumir la señal bajo longitudes de onda de excitación alternativas a menos que esté respaldada por pruebas espectrales.

Detección de emisiones recomendada

Seleccione un filtro detector que se superponga al rango de emisión de 665 a 720 nm.

El filtro debe evaluarse según ambos:

• Longitud de onda central

• Ancho de banda

Por ejemplo:

• Un filtro 670/30 recoge aproximadamente entre 655 y 685 nm.

• Un filtro 680/30 recoge aproximadamente entre 665 y 695 nm.

• Un filtro 695/40 recoge aproximadamente entre 675 y 715 nm.

• Un filtro 710/50 recoge aproximadamente entre 685 y 735 nm.

Estos ejemplos describen únicamente la cobertura de longitud de onda. No garantizan la misma intensidad de fluorescencia en todos los instrumentos.

Canales asociados a APC

El rango de emisión del RCY7UM-630 puede superponerse a ciertos canales del detector comúnmente utilizados para fluoróforos tipo APC.

Sin embargo, las microesferas no deben describirse como etiquetadas con APC a menos que realmente se utilice APC en el producto.

La compatibilidad debe determinarse utilizando el espectro de excitación y emisión real del producto.

Citometría de flujo espectral

RCY7UM-630 también se puede evaluar en citómetros de flujo espectral compatibles.

Para los flujos de trabajo espectrales, los usuarios deben recopilar la firma de fluorescencia completa en la configuración prevista del instrumento y crear un espectro de referencia adecuado.

El producto debe probarse de forma independiente antes de usarse para controles de desmezcla espectral.

Configuración de instrumentos de citometría de flujo y desarrollo de métodos

RCY7UM-630 puede respaldar el establecimiento de procedimientos de citometría de flujo reproducibles.

Configuración inicial del instrumento

Confirme que el citómetro de flujo incluya:

• Un láser rojo compatible

• Un detector que se superpone entre 665 y 720 nm

• Ganancia o voltaje de fluorescencia ajustable

• Configuraciones de dispersión ajustables

• Software de adquisición adecuado

• Fluidos limpios y estables

Estableciendo una puerta de partículas

Se puede crear una puerta preliminar utilizando dispersión frontal y dispersión lateral.

A continuación, se puede utilizar la señal de fluorescencia del rojo lejano para confirmar la identidad de la población de microesferas.

La puerta debe excluir:

• Fondo del búfer

• Ruido electrónico

• Escombros

• Posibles agregados

• Eventos coincidentes

• Eventos saturados

Optimización de la ganancia del detector

Comience con una configuración del detector relativamente baja y aumente la ganancia o el voltaje gradualmente.

La población principal debe ubicarse dentro del rango medible sin alcanzar la saturación del detector.

Registre la configuración final para pruebas futuras.

Ancho de distribución de monitoreo

Una distribución de fluorescencia estrecha puede indicar una población medida relativamente uniforme, mientras que una distribución amplia puede resultar de:

• Agregación de partículas

• Eventos coincidentes

• inestabilidad del instrumento

• Mezcla incompleta

• Concentración de muestra excesivamente alta

• Saturación del detector

• Variación dentro de la población de microesferas.

Se requiere más investigación antes de atribuir el ancho de distribución a una sola causa.

Comparación de instrumentos

El mismo lote de microesferas puede evaluarse en diferentes citómetros de flujo.

Para una comparación significativa, registre:

• Modelo de instrumento

• Longitud de onda láser

• potencia del láser

• Filtro detector

• Configuración del detector

• Canal de disparo

• Límite

• Caudal de muestra

• Dilución

• Buffer

• tiempo de adquisición

• Número de eventos recopilados

Es posible que los resultados de diferentes instrumentos no sean directamente comparables sin un método de estandarización adecuado.

Desarrollo de ensayos de citometría de flujo basados ​​en perlas

RCY7UM-630 puede considerarse una plataforma de partículas fluorescentes para la investigación de citometría de flujo basada en perlas.

Antes de desarrollar un procedimiento de acoplamiento, confirme la química real de la superficie de las partículas.

Las posibles opciones de superficie para proyectos personalizados pueden incluir:

• superficie lisa

• Superficie funcionalizada con carboxilo

• Superficie aminofuncionalizada

• Superficie recubierta de estreptavidina

• Superficie recubierta de proteínas

• Otros grupos funcionales específicos del proyecto

La disponibilidad depende de la viabilidad técnica.

Biomoléculas potenciales

Con una superficie funcional adecuada, se puede evaluar la inmovilización de microesferas fluorescentes:

• Anticuerpos

• Antígenos

• Proteínas

• Péptidos

• enzimas

• Oligonucleótidos

• sondas de ADN

• sondas de ARN

• Receptores

• Ligandos

Parámetros de desarrollo del acoplamiento

Los factores importantes pueden incluir:

• Grupo funcional de superficie

• química de activación

• Composición del amortiguador de acoplamiento

• pH del tampón

• Concentración de biomoléculas

• Concentración de microesferas

• tiempo de activación

• tiempo de acoplamiento

• Método de mezcla

• reactivo de bloqueo

• Condiciones de lavado

• Búfer de almacenamiento

• Preservativo

• Matriz de muestra objetivo

• Adsorción no específica

• Retención de fluorescencia

El proceso de acoplamiento debe optimizarse utilizando la biomolécula y la aplicación reales.

Desarrollo de ensayos multiplex

Es posible distinguir varias poblaciones de cuentas utilizando:

• Tamaño de partícula

• color fluorescente

• Intensidad de fluorescencia

• Código de fluorescencia interna

• Química de superficies

• Fluorescencia reportera

Para la investigación con ensayos múltiples, cada población de cuentas debe permanecer distinguible después de:

• Acoplamiento de biomoléculas

• Bloqueo

• Lavado

• Almacenamiento

• Incubación de muestras

• Etiquetado de reportero

• Adquisición de citometría de flujo.

El canal informador también debe estar suficientemente separado de la señal de fluorescencia del rojo lejano RCY7UM-630.

Investigación de inmunoensayos

Es posible que se puedan evaluar microesferas funcionalizadas de 7 µm en el desarrollo de inmunoensayos basados ​​en perlas.

Un flujo de trabajo de investigación típico puede incluir:

1. Activación o recubrimiento de microesferas.

2. Captura de inmovilización de biomoléculas.

3. Bloqueo de superficies no reaccionadas.

4. Incubación con la muestra objetivo.

5. Adición de un reactivo de detección.

6. Lavado.

7. Adquisición de citometría de flujo.

8. Análisis de datos.

No se debe asumir que el producto estándar RCY7UM-630 contiene una superficie lista para acoplarse a menos que se confirme específicamente el grupo funcional.

Comparación con microesferas fluorescentes de 3 µm y 500 nm

Las microesferas RCY7UM-630, RCY3UM-630 y Flow Red-Fluo de 500 nm pueden servir a diferentes prioridades de investigación de citometría de flujo.

Elija RCY7UM-630 de 7 µm cuando:

• Se prefiere una población fluorescente de mayor tamaño en micras.

• Es importante una fuerte visibilidad de dispersión.

• Se requiere una partícula sintética de tamaño celular.

• El proyecto implica la instalación de un detector de láser rojo.

• Se está desarrollando una plataforma de ensayo basada en perlas.

• Se desea una separación más fácil del fondo de partículas pequeñas.

• Se prefiere una superficie de partículas más grande para un proyecto de acoplamiento personalizado.

Elija RCY3UM-630 de 3 µm cuando:

• Se prefiere una perla de tamaño más pequeño en micras.

• El proyecto requiere un equilibrio entre la detección de dispersión y el tamaño de partículas más pequeño.

• Se está considerando una plataforma compacta de citometría de flujo basada en perlas.

• Se prefiere un menor comportamiento de sedimentación que las perlas más grandes.

Elija microesferas de 500 nm cuando:

• El proyecto se centra en la detección de partículas submicrónicas.

• La citometría de flujo de partículas pequeñas es el objetivo principal.

• Se está desarrollando la adquisición activada por fluorescencia.

• El instrumento tiene una capacidad de detección submicrónica adecuada.

• Se están realizando investigaciones sobre el método relacionado con las vesículas extracelulares.

El tamaño de partícula final debe seleccionarse según la capacidad del instrumento, el diseño del ensayo, el área superficial deseada, el comportamiento de la suspensión y la aplicación objetivo.

Flujo de trabajo de preparación y pruebas recomendado

El siguiente flujo de trabajo es un punto de partida general y debe optimizarse para el citómetro de flujo y la aplicación de investigación previstos.

1. Prepare el instrumento

Limpie y cebe el citómetro de flujo según las instrucciones del fabricante.

Confirma que:

• El sistema fluídico es estable.

• El láser rojo está funcionando.

• El detector de rojo lejano está disponible.

• Los sistemas de desagüe y funda están listos.

• La línea de muestra está libre de remanentes.

2. Prepare un tampón en blanco

Utilice el mismo tampón que se utilizará para diluir RCY7UM-630.

Ejecute el tampón en blanco antes de las microesferas y registre:

• Fondo de dispersión hacia adelante

• Fondo de dispersión lateral

• Fondo de fluorescencia de color rojo lejano

• Tasa total de eventos

• Cualquier población de partículas anormal

3. Resuspender RCY7UM-630

Las microesferas del tamaño de una micra pueden sedimentarse durante el almacenamiento.

Antes del muestreo:

1. Deje que el vial alcance la temperatura de manipulación recomendada.

2. Invierta suavemente el recipiente varias veces.

3. Aplique agitación controlada cuando sea necesario.

4. Confirmar que la suspensión parece homogénea.

5. Evite producir demasiada espuma.

Se puede evaluar una breve y suave sonicación en baño si la documentación del producto lo permite y la mezcla ordinaria no proporciona suficiente redispersión.

4. Prepare diluciones de trabajo

No comience con la suspensión al 0,5% sin diluir.

Prepare varias diluciones de trabajo utilizando un tampón limpio y compatible.

Una serie de diluciones escalonadas o diez veces pueden ayudar a determinar el rango de tasa de eventos adecuado.

5. Comience con un caudal bajo

Utilice un caudal de muestra bajo durante la prueba inicial.

Un caudal más bajo puede mejorar la resolución de la población y reducir la coincidencia.

Se pueden evaluar caudales más altos después de que se hayan establecido los ajustes adecuados.

6. Localice la población de microesferas

Utilice dispersión directa y dispersión lateral para localizar la población de partículas del tamaño de una micra.

Confirme la identidad de las partículas utilizando el canal de fluorescencia de color rojo lejano.

7. Optimice el detector de rojo lejano

Seleccione un detector que se superponga entre 665 y 720 nm.

Ajuste la ganancia o el voltaje del detector para que la población:

• Está claramente separado del espacio en blanco.

• Permanece dentro del rango mensurable

• No llega a la saturación

• Se puede cerrar constantemente

8. Excluir agregados y dobletes

Evalúe la geometría del pulso utilizando parámetros apropiados como:

• Área

• Altura

• Ancho

Los posibles agregados pueden mostrar una mayor dispersión, fluorescencia o amplitud de pulso.

9. Evaluar múltiples diluciones

Compare las distribuciones de fluorescencia y dispersión de varias diluciones.

Una dilución de trabajo adecuada debería producir mediciones estables sin excesiva coincidencia.

10. Registre el método completo

Para reproducibilidad, registre:

• Número de catálogo del producto

• Número de lote del producto

• Modelo de citómetro de flujo

• Longitud de onda láser

• Filtro detector

• Tensión o ganancia del detector

• Configuración de dispersión

• Canal de disparo

• Límite

• Caudal de muestra

• factor de dilución

• Composición del búfer

• Procedimiento de mezcla

• tiempo de adquisición

• Número de eventos recopilados

• Puerta de análisis

Control de calidad y coherencia entre lotes

Las organizaciones de investigación que compran microesferas fluorescentes al por mayor suelen exigir especificaciones de producto definidas y repetibles.

Los posibles parámetros de control de calidad pueden incluir:

• Diámetro nominal de partículas

• Distribución del tamaño de partículas

• Coeficiente de variación del tamaño de partícula.

• Aspecto de la suspensión

• Contenido de sólidos

• Rendimiento de dispersión

• Nivel agregado

• Características de excitación

• Características de emisión

• Intensidad relativa de fluorescencia

• Distribución de fluorescencia

• Posición del histograma de citometría de flujo

• Comparación de lote a lote

• Estabilidad de almacenamiento

• Integridad del embalaje

• control microbiano

No todos los parámetros están necesariamente incluidos en una especificación de producto estándar.

Las pruebas de liberación requeridas y los límites de aceptación deben acordarse antes de la producción piloto o en masa.

Evaluación del rendimiento de la citometría de flujo

Un método de control de calidad por citometría de flujo puede evaluar:

• Posición de la población principal de microesferas.

• Intensidad de fluorescencia mediana o media

• Ancho de distribución de fluorescencia

• Porcentaje de eventos dentro de la puerta principal

• Distribución de dispersión

• Población agregada

• Separación en blanco

• Repetibilidad entre ejecuciones

Se deben utilizar los mismos instrumentos y configuraciones de adquisición al comparar lotes de producción.

Consistencia entre lotes

Para producción repetida, los clientes podrán solicitar el control de:

• Diámetro de partícula

• Distribución del tamaño de partículas

• Intensidad de fluorescencia

• Distribución de fluorescencia

• Contenido de sólidos

• Composición del búfer

• Estabilidad de la suspensión

• Configuración de embalaje

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. puede analizar los requisitos de calidad específicos del proyecto antes de la fabricación.

Reclamaciones de calibración y certificación

El estándar RCY7UM-630 no debería representarse automáticamente como:

• Un estándar de tamaño rastreable por NIST

• Un estándar de fluorescencia certificado

• Una cuenta asignada por MESF

• Un material de referencia asignado por el ERF

• Una cuenta de conteo absoluta

• Una perla de calibración de citómetro de flujo certificada

• Un control de diagnóstico regulado

Estas aplicaciones requieren asignación de valor específica, pruebas, análisis de incertidumbre, trazabilidad y documentación de respaldo.

Fabricación a granel y personalización

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. apoya proyectos de microesferas fluorescentes desde la evaluación de laboratorio hasta la producción a granel.

Evaluación de muestras de investigación

Se podrán evaluar pequeñas cantidades para:

• Compatibilidad con láser rojo

• Compatibilidad con detectores de rojo lejano

• Dispersión de partículas

• Detección de dispersión

• Intensidad de fluorescencia

• Optimización de la tasa de eventos

• Viabilidad del ensayo

• Compatibilidad de instrumentos

Producción a escala piloto

Los lotes piloto pueden soportar:

• Optimización del método

• Estudios iniciales de estabilidad.

• Evaluación de embalaje

• Desarrollo de control de calidad

• Viabilidad del acoplamiento

• Verificación del cliente

• Transferencia de proceso

Producción a granel

Una vez confirmadas las especificaciones técnicas, se puede organizar la producción a granel de acuerdo con el plan de compras y el pronóstico anual del cliente.

La información del proyecto debe incluir:

• Cantidad requerida

• Demanda anual esperada

• Tamaño de paquete preferido

• Aplicación prevista

• Configuración del citómetro de flujo

• Nivel de fluorescencia requerido

• Química de superficies

• Requisitos de búfer

• Especificaciones de calidad

• Requisitos de documentación

• Calendario de entrega

• Destino de entrega

Tamaño de partícula personalizado

Se pueden discutir diámetros de microesferas fluorescentes alternativos para proyectos calificados.

Las posibles direcciones de desarrollo incluyen:

• Partículas a escala nanométrica

• Partículas submicrónicas

• Pequeñas cuentas del tamaño de una micra

• Microesferas de rango de tamaño celular.

• Microesferas fluorescentes más grandes

Fluorescencia personalizada

Según la viabilidad, la personalización puede incluir:

• Longitudes de onda de excitación alternativas

• Longitudes de onda de emisión alternativas

• Diferentes colores de fluorescencia

• Intensidad de fluorescencia ajustada

• Múltiples niveles de intensidad de fluorescencia

• Múltiples códigos fluorescentes

Química de superficies personalizada

Las posibles opciones de superficie específicas del proyecto pueden incluir:

• microesferas simples

• Microesferas de carboxilo

• Aminomicroesferas

• Microesferas recubiertas de estreptavidina

• Microesferas recubiertas de proteínas.

• Otras superficies funcionales

Concentración y embalaje personalizados

Se pueden discutir concentraciones de sólidos y formatos de embalaje alternativos según la cantidad del pedido y la viabilidad técnica.

Las opciones disponibles pueden incluir:

• Embalaje de muestras de laboratorio

• Embalaje a escala piloto

• Contenedores a granel

• Volúmenes de llenado específicos del cliente

• Etiquetado OEM

• Códigos de producto específicos del cliente

Recomendaciones de manipulación y almacenamiento

Siga la etiqueta del producto, la ficha técnica y el Certificado de análisis suministrados con el pedido.

Las recomendaciones generales de manejo incluyen:

• Conservar protegido de la luz.

• Generalmente se recomienda el almacenamiento refrigerado a una temperatura de 2 a 8 °C, a menos que se especifique lo contrario.

• No congelar a menos que se haya confirmado la estabilidad de congelación y descongelación.

• Mantener el recipiente bien cerrado.

• Guarde el vial en posición vertical.

• Mezclar bien antes de tomar la muestra.

• Utilice puntas de pipeta y tubos de muestra limpios.

• Evite contaminar la suspensión original.

• Minimizar la exposición prolongada a la luz intensa.

• Evite repetidos cambios de temperatura innecesarios.

• No permita que las microesferas se sequen.

• No devuelva el material diluido a la botella original.

Asentamiento y Resuspensión

Debido a que RCY7UM-630 contiene partículas de 7 µm, puede ocurrir sedimentación durante el almacenamiento.

El asentamiento por sí solo no indica necesariamente una falla del producto.

Antes de usar:

1. Invierta suavemente el recipiente.

2. Aplique agitación controlada cuando sea necesario.

3. Confirmar que la suspensión sea homogénea.

4. Inspeccione si hay agregados irreversibles.

5. Pruebe una pequeña dilución de trabajo antes del experimento completo.

Evitar la agregación

La agregación puede verse afectada por:

• Búfers incompatibles

• Altas concentraciones de sal

• pH extremo

• Congelación y descongelación repetidas

• El secado

• Contaminación microbiana

• Almacenamiento prolongado después de la dilución.

• Proteínas o aditivos incompatibles.

Evalúe la compatibilidad del buffer al desarrollar una nueva aplicación.

Protección de la luz

Mantenga el producto original y las diluciones de trabajo protegidos de la exposición innecesaria a la luz.

Prepare diluciones de trabajo poco antes de su uso cuando sea posible.

Preguntas frecuentes

¿Qué es RCY7UM-630?

RCY7UM-630 es una suspensión de microesferas fluorescentes de color rojo lejano de 7 µm desarrollada para la investigación de citometría de flujo. Tiene aproximadamente 630 nm de excitación, 665 a 720 nm de emisión y 0,5% de sólidos.

¿Quién fabrica RCY7UM-630?

RCY7UM-630 es suministrado por Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.

¿Cuál es el diámetro nominal de partícula?

El diámetro nominal de las partículas es de 7 µm.

La información sobre el tamaño específico del lote debe confirmarse utilizando la especificación del producto correspondiente o el Certificado de análisis.

¿Cuál es la longitud de onda de excitación?

La longitud de onda de excitación especificada es 630 nm.

¿Cuál es la longitud de onda de emisión?

El rango de emisión de fluorescencia especificado es de 665 a 720 nm.

¿Qué láser de citometría de flujo se debe utilizar?

Se recomienda un láser rojo compatible de cerca de 630 nm.

También se pueden evaluar láseres rojos a 633, 635, 637 o 640 nm, pero la respuesta de fluorescencia debe confirmarse experimentalmente.

¿Qué detector se debe seleccionar?

Seleccione un detector de rojo lejano cuyo filtro óptico se superponga al rango de emisión de 665 a 720 nm.

Revise el filtro de paso de banda real en lugar de confiar únicamente en el nombre del canal del detector.

¿Se puede detectar usando un canal APC?

El rango de emisión puede superponerse a ciertas configuraciones de detectores asociados a APC.

Sin embargo, RCY7UM-630 no debe describirse como etiquetado como APC a menos que realmente se utilice APC en el producto.

¿Se puede excitar con un láser de 488 nm?

RCY7UM-630 está especificado para una excitación de aproximadamente 630 nm.

No se debe asumir una excitación adecuada a 488 nm sin datos espectrales de respaldo.

¿El producto es adecuado para citómetros de flujo convencionales?

El diámetro de partícula de 7 µm se puede evaluar en muchos citómetros de flujo convencionales con excitación por láser rojo y detección de rojo lejano compatibles.

El rendimiento real depende de la configuración del instrumento.

¿Por qué utilizar microesferas de 7 µm?

Las partículas más grandes, de tamaño micrométrico, pueden proporcionar señales de dispersión más fuertes y una separación más fácil de las pequeñas partículas de fondo que las microesferas submicrónicas.

También pueden ser adecuados para estudios de partículas de rangos de tamaño celular y desarrollo de ensayos basados ​​en perlas.

¿Son las microesferas equivalentes a las células biológicas?

No.

Aunque el diámetro de las partículas puede estar dentro del amplio rango de tamaño de algunas células, las microesferas sintéticas no reproducen todas las propiedades físicas y biológicas de las células.

¿Se puede utilizar RCY7UM-630 para la alineación del citómetro de flujo?

Puede evaluarse en la investigación de ajuste de instrumentos y alineación comparativa.

No debe representarse como un estándar de alineación certificado sin la calificación y documentación requeridas.

¿RCY7UM-630 es una perla de calibración?

El producto estándar es una microesfera fluorescente de investigación.

Las aplicaciones de calibración formal requieren una asignación de valor, trazabilidad, límites de aceptación y documentación de respaldo adecuados.

¿Se puede utilizar para conteo absoluto?

El valor de 0,5% de sólidos no establece un número verificado de partículas por mililitro.

No utilice RCY7UM-630 como estándar de recuento absoluto a menos que se haya suministrado una concentración de número de partículas validada.

¿Se pueden utilizar las microesferas como compensación?

El producto puede evaluarse durante la investigación de canales de fluorescencia.

Los controles de compensación formales deben coincidir lo más posible con las características del fluoróforo y de la tinción del ensayo. La idoneidad debe validarse experimentalmente.

¿Se pueden acoplar anticuerpos a las partículas?

El acoplamiento de anticuerpos requiere una superficie funcional adecuada.

Confirme si se requiere una superficie de acoplamiento carboxilo, amino, estreptavidina u otra.

¿Se puede utilizar RCY7UM-630 para inmunoensayos basados ​​en perlas?

Se puede evaluar una versión adecuadamente funcionalizada para la investigación de inmunoensayos basados ​​en perlas.

Se deben optimizar la química de la superficie, el método de acoplamiento, las condiciones de bloqueo, el canal informador y la matriz de ensayo.

¿Se puede utilizar en citometría de flujo multiplex?

Sí, RCY7UM-630 puede evaluarse como una población de partículas en un sistema de investigación múltiplex.

La señal de identificación del rojo lejano debe permanecer distinguible de las otras poblaciones de microesferas y de la fluorescencia informadora.

¿Cuál es el contenido de sólidos suministrado?

RCY7UM-630 se suministra con 0,5% de sólidos.

¿Se debe diluir el producto antes de la citometría de flujo?

Sí. Normalmente se debe preparar una dilución de trabajo antes de la adquisición.

Se recomienda probar varias diluciones para determinar una tasa de eventos adecuada y minimizar la coincidencia.

¿Por qué se depositan las partículas?

Las partículas del tamaño de una micra pueden sedimentarse durante el almacenamiento debido a su tamaño y densidad.

Mezcle bien la suspensión antes de tomar la muestra.

¿Cómo se debe mezclar el producto?

Se puede utilizar una inversión suave seguida de un vórtice controlado para redispersar las microesferas.

Evite la formación excesiva de espuma y tratamientos severos prolongados.

¿Se puede congelar el producto?

Por lo general, no se recomienda la congelación a menos que la documentación proporcionada confirme específicamente la estabilidad de congelación y descongelación.

¿Cómo se debe almacenar el RCY7UM-630?

Conservar protegido de la luz y seguir las instrucciones de conservación específicas del producto.

Generalmente se recomienda el almacenamiento refrigerado a menos que se especifique lo contrario.

¿Está disponible la producción a granel?

Sí. Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. respalda la evaluación de muestras, la producción piloto, la repetición de pedidos y la fabricación a granel.

¿Se puede personalizar la concentración?

Se pueden discutir concentraciones alternativas según los requisitos del proyecto, la viabilidad técnica y la cantidad del pedido.

¿Se puede personalizar la intensidad de la fluorescencia?

Se pueden discutir diferentes niveles de intensidad de fluorescencia para proyectos de desarrollo calificados.

¿Se puede personalizar la superficie de las partículas?

Se pueden analizar superficies lisas, carboxílicas, amino, recubiertas de estreptavidina u otras superficies funcionales según la aplicación y la viabilidad técnica.

¿Qué información se requiere para una cotización?

Por favor proporcione:

• Número de catálogo del producto

• Cantidad requerida

• Demanda anual esperada

• Tamaño de paquete preferido

• Modelo de citómetro de flujo

• Longitud de onda del láser rojo

• Filtro detector de rojo lejano

• Aplicación prevista

• Química de superficie requerida

• Intensidad de fluorescencia requerida

• Requisitos de control de calidad

• Requisitos de documentación

• Destino de entrega

Solicite una muestra o una cotización al por mayor

Las microesferas de flujo rojo fluo RCY7UM-630 de 7 µm proporcionan una solución de partículas fluorescentes de color rojo lejano de tamaño micrométrico para la investigación de citometría de flujo con láser rojo, estudios de configuración de instrumentos, evaluación de canales de fluorescencia, desarrollo de ensayos basados ​​en perlas, seguimiento de partículas y fabricación de reactivos de investigación.

El producto proporciona:

• Diámetro nominal de partícula de 7 µm

• Aproximadamente 630 nm de excitación

• Emisión de rojo lejano de 665 a 720 nm

• 0,5% sólidos

• Evaluación de compatibilidad con citómetros de flujo de láser rojo.

• Suministro de muestras y piloto.

• Capacidad de producción a granel

• Soporte de desarrollo personalizado

Para la evaluación de muestras o la compra al por mayor, proporcione la aplicación prevista, la configuración del citómetro de flujo, la cantidad requerida, la química de la superficie, el formato de embalaje y los requisitos de control de calidad.

Nombre del producto: Microesferas de flujo rojo fluo de 7 µm
Número de catálogo: RCY7UM-630
Fabricante: Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.
Diámetro nominal de partícula: 7 µm
Longitud de onda de excitación: 630 nm
Longitud de onda de emisión: 665–720 nm
Contenido de sólidos: 0,5 %
Aplicación principal: Citometría de flujo
Capacidad de suministro para investigación: Muestras, lotes piloto y producción a granel
Uso previsto: Solo para uso en investigación. No para uso diagnóstico o terapéutico.