Поточные красно-флуоресцентные микросферы 7 мкм RCY7UM-630 0,5 %

Проточные микросферы Red-Fluo размером 7 мкм для проточной цитометрии

Компания Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. поставляет проточные красные флуоресцентные микросферы RCY7UM-630 7 мкм для исследований с помощью проточной цитометрии с красным лазером, оценки каналов флуоресценции, разработки инструментальных методов, аналитических исследований на основе шариков и производства реагентов в больших объемах.

Микросферы RCY7UM-630 имеют номинальный диаметр частиц 7 мкм и рассчитаны на возбуждение при длине волны примерно 630 нм. Они обеспечивают широкий диапазон излучения флуоресценции в дальнем красном диапазоне 665–720 нм.

Продукт поставляется в виде суспензии с концентрацией твердых веществ 0,5% и может использоваться для лабораторной оценки, разработки проектов проточной цитометрии, пилотных испытаний, повторного производства и оптовых закупок.

Быстрый ответ о продукте

RCY7UM-630 представляет собой суспензию флуоресцентных микросфер дальнего красного цвета размером 7 мкм с содержанием твердых веществ 0,5%. Он предназначен для возбуждения примерно 630 нм и излучения 665–720 нм и может быть использован в исследованиях проточной цитометрии с красным лазером, исследованиях по обнаружению флуоресценции, разработке методов анализа на основе шариков, исследованиях по настройке приборов и производстве реагентов для флуоресцентных микросфер.

Основные характеристики продукта

• Название продукта: Красно-флуоресцентные микросферы с потоком 7 мкм.

• Номер по каталогу: RCY7UM-630

• Производитель: Шанхайская биотехнологическая компания SanYu, Ltd.

• Номинальный диаметр частиц: 7 мкм

• Длина волны возбуждения: 630 нм

• Длина волны излучения: 665–720 нм

• Область флуоресценции: Дальний красный

• Содержание твердых веществ: 0,5%

• Рекомендуемый метод обнаружения: проточная цитометрия.

• Рекомендуемый регион лазера: Красный лазер.

• Возможности поставок: образцы, пилотные партии и массовое производство.

• Использование по назначению: только для исследовательских целей.

Что такое проточные красно-флуоресцентные микросферы RCY7UM-630?

RCY7UM-630 состоит из флуоресцентных микросфер диаметром 7 мкм, которые производят сигнал флуоресценции дальнего красного цвета при возбуждении совместимым красным лазером.

Диаметр частиц 7 мкм находится в пределах микронного диапазона, который обычно оценивается в традиционных исследованиях проточной цитометрии. По сравнению с наночастицами и субмикронными шариками, микросферы размером 7 мкм могут генерировать более сильные сигналы прямого и бокового рассеяния, что упрощает обнаружение и контроль основной популяции частиц на многих проточных цитометрах.

Сочетание микронного размера частиц и дальней красной флуоресценции делает RCY7UM-630 подходящим для исследований, включающих:

• Обнаружение флуоресценции красного лазера

• Оценка дальнего красного детектора

• Оптимизация настроек проточного цитометра

• Развитие порога флуоресценции

• Рассеяние и стробирование флуоресценции

• Исследования разбавления частиц

• Оптимизация частоты событий

• Разработка метода проточной цитометрии

• Аналитическое исследование на основе шариков

• Отслеживание флуоресцентных частиц

• Сравнение инструментов

• Производство исследовательских реагентов

RCY7UM-630 может быть оценен биотехнологическими компаниями, лабораториями проточной цитометрии, университетами, исследовательскими институтами, производителями приборов, разработчиками реагентов и организациями, разрабатывающими аналитические методы на основе частиц.

Стандартный продукт поставляется для исследовательского использования. Его не следует автоматически представлять в качестве сертифицированного калибровочного материала, эталона абсолютного счета, стандарта MESF или регламентированного диагностического контроля, если специально не предусмотрена соответствующая квалификация и документация.

RCY7UM-630 Технические характеристики

Параметры конкретной партии должны быть подтверждены с использованием соответствующей спецификации продукта или сертификата анализа.

В зависимости от подтвержденной спецификации заказа вспомогательная информация может включать:

• Номинальный диаметр частиц

• Распределение частиц по размерам

• Содержание твердых веществ

• Внешний вид подвески

• Информация о возбуждении флуоресценции

• Информация об излучении флуоресценции

• Номер лота

• Дата производства

• Рекомендации по хранению

• Инструкции по обращению

• Сертификат анализа

• Паспорт безопасности

Матрица частиц, химия поверхности, система консервантов, коэффициент вариации размера частиц, диапазон интенсивности флуоресценции, срок годности, размер упаковки и буфер для хранения должны быть подтверждены перед публикацией, когда эти значения станут доступны.

Возбуждение 630 нм и дальнекрасное излучение 665–720 нм

RCY7UM-630 предназначен для возбуждения на длине волны около 630 нм и производит флуоресценцию в дальней красной области 665–720 нм.

Потенциально совместимые длины волн красного лазера могут включать:

• 630 нм

• 633 нм

• 635 нм

• 637 нм

• 640 нм

В спецификации продукта указана длина волны возбуждения 630 нм. Приборы, использующие близкие длины волн красного лазера, также могут подойти, но окончательный ответ флуоресценции должен быть подтвержден на предполагаемом проточном цитометре.

Диапазон излучения 665–720 нм может перекрывать несколько конфигураций детекторов дальнего красного цвета.

Потенциальные области фильтра детектора могут включать в себя:

• Примерно 660–680 нм

• Примерно 665–695 нм

• Примерно 670–710 нм

• Примерно 680–720 нм

• Примерно 690–735 нм

Эти диапазоны являются общими примерами совместимости, а не гарантированными настройками прибора.

На измеренный сигнал флуоресценции могут влиять:

• Длина волны лазера

• Мощность лазера

• Оптическое выравнивание

• Чувствительность детектора

• Напряжение детектора или коэффициент усиления

• Дихроичные зеркала

• Полосовые фильтры

• Концентрация образца

• Скорость потока

• Порог срабатывания

• Подвесной буфер

• Фон инструмента

• Агрегация частиц

Пользователям следует ознакомиться с фактическими характеристиками лазера и фильтра проточного цитометра, а не полагаться только на названия каналов, такие как APC, FL4, дальний красный, красная флуоресценция или канал красного лазера.

Почему стоит выбрать флуоресцентные микросферы размером 7 мкм?

Четко обнаруживаемая совокупность частиц микронного размера

Номинальный диаметр частиц 7 мкм может обеспечить четкую популяцию микросфер во многих обычных проточных цитометрах.

По сравнению с субмикронными частицами микросферы размером 7 мкм легче отделить от:

• Электронный шум

• Буферные частицы

• Мелкий мусор

• Фон инструмента

• Загрязнения с низким рассеянием

Фактическая производительность зависит от оптической и жидкостной конфигурации прибора.

Подходит для обычных проточных цитометров

Исследования с участием наночастиц или внеклеточных везикул могут потребовать специальных настроек обнаружения мелких частиц.

Напротив, популяцию флуоресцентных микросфер размером 7 мкм обычно можно оценить с использованием более традиционных графиков прямого, бокового рассеяния и флуоресценции.

Это делает RCY7UM-630 подходящим для первоначальной разработки методов проточной цитометрии и проектов лабораторного обучения.

Возбуждение красным лазером

RCY7UM-630 обеспечивает сигнал флуоресценции дальнего красного цвета при возбуждении примерно 630 нм.

Его можно использовать, когда исследователям нужна популяция флуоресцентных частиц, которую можно обнаружить с помощью красного лазера и совместимого детектора дальнего красного цвета.

Модель исследования диапазона размеров ячеек

Размер частиц размером 7 мкм попадает в широкий диапазон размеров многих биологических клеток и клеточноподобных частиц.

Таким образом, микросферы могут быть оценены, когда исследователям требуется синтетическая популяция микронного размера для исследований по настройке инструментов или обращению с частицами.

RCY7UM-630 не воспроизводит деформируемость, показатель преломления, плотность, структуру поверхности, распределение флуоресценции или биологическое поведение определенного типа клеток. Пригодность в качестве заменителя клеток должна быть установлена ​​для каждого применения.

Подходит для исследований на основе шариков

Размер частиц микронного масштаба может стать практической платформой для исследований, включающих обнаружение на основе шариков, кодирование частиц, иммобилизацию биомолекул и мультиплексную проточную цитометрию.

Подходящая функциональная поверхность требуется, когда антитела, антигены, белки или нуклеиновые кислоты необходимо связать с частицами.

Поддерживает научно-производственное развитие

RCY7UM-630 может быть оценен в небольших количествах на ранней стадии исследований и впоследствии передан в пилотное или массовое производство после подтверждения необходимой технической спецификации.

Ключевые особенности и преимущества

Номинальный диаметр частиц 7 мкм

Размер частиц микронного масштаба подходит для обнаружения методом проточной цитометрии, гейтирования, отслеживания частиц и разработки методов на основе шариков.

Дальнекрасная флуоресценция

Продукт предназначен для возбуждения примерно 630 нм и излучения 665–720 нм.

Совместимость с красным лазером

RCY7UM-630 можно оценивать на проточных цитометрах, оснащенных совместимым красным лазером возбуждения.

Широкий диапазон выбросов

Широкая дальняя красная область излучения обеспечивает гибкость при выборе совместимых фильтров детектора.

0,5% суспензия твердых веществ

Поставляемая концентрация позволяет пользователям готовить рабочие разведения в соответствии с требуемой частотой событий, временем сбора данных и планом эксперимента.

Видимое отделение от мелкого мусора

Популяцию микронного размера легче отличить от субмикронных фоновых частиц, чем от флуоресцентных микросфер меньшего размера.

Подходит для нескольких исследовательских рабочих процессов

RCY7UM-630 может быть оценен в проточной цитометрии, флуоресцентной микроскопии, микрофлюидике, отслеживании частиц, разработке методов анализа и приборных исследованиях.

От выборки к оптовой поставке

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. поддерживает оценку лабораторных образцов, пилотные разработки, повторные заказы и массовое производство.

Поддержка индивидуальной разработки

Альтернативные размеры, концентрации, интенсивность флуоресценции, химический состав поверхности, форматы упаковки и требования к контролю качества могут обсуждаться в зависимости от осуществимости проекта.

Применение в исследованиях проточной цитометрии

Красный лазерный флуоресцентный детектор

RCY7UM-630 можно использовать для оценки возбуждения красного лазера и обнаружения флуоресценции в дальнем красном диапазоне.

Исследователи могут изучить:

• Интенсивность флуоресценции частиц

• Разделение сигнала и фона

• Чувствительность детектора

• Напряжение детектора или коэффициент усиления

• Положение гистограммы флуоресценции

• Ширина распределения флуоресценции

• Стабильность во время работы

• Повседневная вариация инструментов

Исследование установки проточного цитометра

Микросферы могут помочь в исследованиях, требующих последовательной настройки инструментов.

Возможные процедуры включают в себя:

• Обнаружение популяции микросфер

• Настройка параметров прямого рассеяния

• Настройка параметров бокового рассеяния

• Выбор дальнего красного детектора

• Установление порога флуоресценции

• Настройка триггера сбора данных

• Создание ворот частиц

• Сравнение различных скоростей потока

• Оценка стабильности частоты событий

• Проверка переноса пробы

Стандартный продукт не следует описывать как сертифицированный юстировочный или калибровочный шарик, если не были выполнены соответствующие присвоение значения и квалификация.

Рассеяние и стробирование флуоресценции

RCY7UM-630 можно оценить, используя несколько комбинаций графиков:

• Прямое рассеяние против бокового рассеяния

• Прямое рассеяние против дальнекрасной флуоресценции

• Боковое рассеяние и дальнекрасная флуоресценция

• Гистограмма дальнекрасной флуоресценции

• Площадь импульса в зависимости от высоты импульса

• Площадь импульса в зависимости от ширины импульса

Эти графики могут помочь отличить:

• Одиночные микросферы

• Возможные агрегаты

• Фоновые события

• Совпадающие события

• Аномально яркие частицы

• Частицы с низкой флуоресценцией

Развитие порога флуоресценции

Триггер флуоресценции может быть полезен, когда исследователи хотят регистрировать только события, которые производят сигнал флуоресценции в дальнем красном диапазоне.

RCY7UM-630 может поддерживать исследования, включающие:

• Сбор данных, запускаемый флуоресценцией

• Выбор порога срабатывания

• Исключение фоновых событий

• Сравнение разброса-триггера

• Оценка чувствительности обнаружения

• Дискриминация событий низкой интенсивности

Исследования разбавления частиц

Перед проведением проточной цитометрии суспензию с концентрацией твердых веществ 0,5% обычно следует разбавить.

Серия разбавлений может помочь определить рабочую концентрацию, которая обеспечивает:

• Стабильные цены на мероприятия

• Минимальное совпадение

• Четкое разделение населения

• Воспроизводимая флуоресценция

• Подходящее время приобретения

• Низкий расход образца

• Приемлемый фон

Соответствующий коэффициент разбавления зависит от прибора, скорости потока, объема пробы, применения и желаемого количества зарегистрированных событий.

Оценка частоты событий и совпадений

Когда слишком много микросфер одновременно проходят через область лазерного опроса, две или более частицы могут быть зарегистрированы как одно событие.

Возможные признаки совпадения включают в себя:

• Повышенная кажущаяся интенсивность флуоресценции

• Увеличена интенсивность разброса

• Широкое распределение частиц

• Неожиданные популяции дублетов

• Изменения сигнала в зависимости от концентрации

• Нестабильная частота событий

Тестирование нескольких разведений может помочь определить подходящий рабочий диапазон.

Исследование жидкостных систем

Флуоресцентные микросферы также могут использоваться в исследованиях движения образцов через проточный цитометр или микрофлюидную систему.

Возможные наблюдения включают в себя:

• Образец введения

• Стабильность потока

• Стабильность частоты событий

• Восстановление частиц

• Пример переноса

• Воспроизводимость от пробирки к пробирке

• Эффективность очистки

• Блокировка или прерывание

• Потеря частиц на пути прохождения жидкости

Флуоресцентная микроскопия

RCY7UM-630 можно оценить с помощью флуоресцентных микроскопов, оснащенных совместимым источником возбуждения красного цвета и фильтром дальнего красного излучения.

Возможные применения микроскопии включают:

• Локализация частиц

• Исследования распределения частиц

• Микрофлюидная визуализация

• Фильтрационные исследования

• Исследование взаимодействия с поверхностью

• Эксперименты по поглощению частиц

• Наблюдения за стабильностью флуоресценции

Совместимость следует подтвердить с использованием фактического набора фильтров микроскопа.

Совместимые красные лазеры и каналы обнаружения

Рекомендуемая область возбуждения

Рекомендуется красный лазер с длиной волны около 630 нм.

RCY7UM-630 изначально не предназначен для возбуждения лазерами с длиной волны 405, 488 или 561 нм.

Не следует предполагать наличие сигнала с альтернативными длинами волн возбуждения, если это не подтверждено спектральными испытаниями.

Рекомендуемое обнаружение выбросов

Выберите фильтр детектора, который перекрывает диапазон излучения 665–720 нм.

Фильтр следует оценивать по обоим критериям:

• Центральная длина волны

• Пропускная способность

Например:

• Фильтр 670/30 собирает примерно 655–685 нм.

• Фильтр 680/30 собирает примерно 665–695 нм.

• Фильтр 695/40 собирает примерно 675–715 нм.

• Фильтр 710/50 собирает примерно 685–735 нм.

Эти примеры описывают только покрытие длин волн. Они не гарантируют одинаковую интенсивность флуоресценции на всех приборах.

Каналы, связанные с APC

Диапазон излучения RCY7UM-630 может перекрывать некоторые каналы детектора, обычно используемые для APC-подобных флуорофоров.

Однако микросферы не следует описывать как маркированные APC, если APC фактически не используется в продукте.

Совместимость следует определять с использованием фактического спектра возбуждения и излучения продукта.

Спектральная проточная цитометрия

RCY7UM-630 также можно оценивать на совместимых спектральных проточных цитометрах.

Для рабочих процессов со спектрами пользователи должны собрать полную характеристику флуоресценции при предполагаемых настройках прибора и построить соответствующий эталонный спектр.

Продукт следует протестировать независимо, прежде чем использовать его для контроля спектрального несмешивания.

Настройка прибора для проточной цитометрии и разработка метода

RCY7UM-630 может способствовать созданию воспроизводимых процедур проточной цитометрии.

Начальная конфигурация прибора

Убедитесь, что проточный цитометр включает в себя:

• Совместимый красный лазер

• Детектор, перекрывающий 665–720 нм.

• Регулируемое усиление флуоресценции или напряжение

• Регулируемые настройки разброса

• Подходящее программное обеспечение для сбора данных

• Чистая и стабильная струйная система

Создание ворот частиц

Предварительные ворота могут быть созданы с использованием прямого и бокового рассеяния.

Затем сигнал дальней красной флуоресценции можно использовать для подтверждения идентичности популяции микросфер.

Ворота должны исключать:

• Буферный фон

• Электронный шум

• Обломки

• Возможные агрегаты

• Совпадающие события

• Насыщенные события

Оптимизация усиления детектора

Начните с относительно низкой настройки детектора и постепенно увеличивайте усиление или напряжение.

Основная популяция должна располагаться в пределах измеряемого диапазона, не достигая насыщения детектора.

Запишите окончательные настройки для будущего тестирования.

Мониторинг ширины распределения

Узкое распределение флуоресценции может указывать на относительно однородную измеренную популяцию, тогда как широкое распределение может быть результатом:

• Агрегация частиц

• Совпадающие события

• Нестабильность прибора

• Неполное смешивание

• Чрезмерно высокая концентрация пробы

• Насыщение детектора

• Вариации в популяции микросфер

Прежде чем приписывать ширину распространения одной причине, необходимы дальнейшие исследования.

Сравнение инструментов

Одну и ту же партию микросфер можно оценивать на разных проточных цитометрах.

Для осмысленного сравнения запишите:

• Модель прибора

• Длина волны лазера

• Мощность лазера

• Фильтр детектора

• Настройка детектора

• Триггерный канал

• Порог

• Скорость потока пробы

• Разбавление

• Буфер

• Время приобретения

• Количество собранных событий

Результаты различных приборов не могут быть напрямую сопоставлены без соответствующего метода стандартизации.

Разработка анализа проточной цитометрии на основе шариков

RCY7UM-630 можно рассматривать как платформу для флуоресцентных частиц для исследований проточной цитометрии на основе шариков.

Прежде чем разрабатывать процедуру сочетания, подтвердите фактический химический состав поверхности частиц.

Возможные варианты поверхности для индивидуальных проектов могут включать:

• Ровная поверхность

• Поверхность с карбоксильными группами

• Аминофункционализированная поверхность

• Поверхность, покрытая стрептавидином

• Поверхность, покрытая белком

• Другие функциональные группы, специфичные для проекта

Наличие зависит от технической возможности.

Потенциальные биомолекулы

При наличии соответствующей функциональной поверхности флуоресцентные микросферы можно оценить на предмет иммобилизации:

• Антитела

• Антигены

• Белки

• Пептиды

• Ферменты

• Олигонуклеотиды

• ДНК-зонды

• РНК-зонды

• Рецепторы

• Лиганды

Параметры разработки муфты

Важными факторами могут быть:

• Поверхностная функциональная группа

• Активационная химия

• Связывающе-буферная композиция

• Буфер pH

• Концентрация биомолекул

• Концентрация микросфер

• Время активации

• Время соединения

• Метод смешивания

• Блокирующий реагент

• Условия стирки

• Буфер хранения

• консервант

• Матрица целевой выборки

• Неспецифическая адсорбция

• Сохранение флуоресценции

Процесс сочетания должен быть оптимизирован с использованием реальной биомолекулы и приложения.

Разработка мультиплексного анализа

Несколько популяций шариков потенциально можно выделить, используя:

• Размер частиц

• Цвет флуоресценции

• Интенсивность флуоресценции

• Код внутренней флуоресценции

• Химия поверхности

• Репортерная флуоресценция

Для мультиплексного анализа каждая популяция шариков должна оставаться различимой после:

• Соединение биомолекул

• Блокировка

• Стирка

• Хранилище

• Образец инкубации

• Маркировка репортера

• Получение проточной цитометрии

Репортерный канал также должен быть достаточно отделен от сигнала дальней красной флуоресценции RCY7UM-630.

Иммуноанализные исследования

Функционализированные микросферы размером 7 мкм потенциально могут быть оценены при разработке иммуноанализа на основе шариков.

Типичный рабочий процесс исследования может включать в себя:

1. Активация микросфер или покрытие.

2. Захват иммобилизации биомолекул.

3. Блокировка непрореагировавших поверхностей.

4. Инкубация с целевым образцом.

5. Добавление реагента для обнаружения.

6. Стирка.

7. Получение проточной цитометрии.

8. Анализ данных.

Не следует считать, что стандартный продукт RCY7UM-630 содержит поверхность, готовую к соединению, если специально не подтверждена функциональная группа.

Сравнение с флуоресцентными микросферами размером 3 мкм и 500 нм

RCY7UM-630, RCY3UM-630 и проточные красно-флуоресцентные микросферы с длиной волны 500 нм могут служить различным приоритетам исследований в области проточной цитометрии.

Выбирайте 7 мкм RCY7UM-630, когда:

• Предпочтительна более крупная флуоресцентная популяция микронного размера.

• Важна сильная видимость рассеяния.

• Требуется синтетическая частица с размером ячейки.

• Проект предполагает установку детектора красного лазера.

• В настоящее время разрабатывается платформа для анализа на основе шариков.

• Желательно более легкое отделение от мелких частиц.

• Для индивидуального проекта соединения предпочтительна большая поверхность частиц.

Выбирайте 3 мкм RCY3UM-630 Когда:

• Предпочтителен шарик меньшего микронного размера.

• Проект требует баланса между обнаружением рассеяния и меньшим размером частиц.

• Рассматривается компактная платформа проточной цитометрии на основе шариков.

• Предпочтительна более низкая осаждаемость, чем у более крупных шариков.

Выбирайте микросферы 500 нм, когда:

• Проект сосредоточен на обнаружении субмикронных частиц.

• Основной целью является проточная цитометрия малых частиц.

• В настоящее время разрабатывается метод сбора данных, запускаемый флуоресценцией.

• Прибор имеет подходящую субмикронную способность обнаружения.

• Проводятся исследования внеклеточно-везикулярным методом.

Окончательный размер частиц следует выбирать в соответствии с возможностями прибора, дизайном анализа, желаемой площадью поверхности, поведением суспензии и целевым применением.

Рекомендуемый процесс подготовки и тестирования

Следующий рабочий процесс является общей отправной точкой и должен быть оптимизирован для предполагаемого проточного цитометра и исследовательского приложения.

1. Подготовьте инструмент

Очистите и заправьте проточный цитометр в соответствии с инструкциями производителя.

Подтвердите это:

• Жидкостная система стабильна.

• Красный лазер работает.

• Имеется дальний красный детектор.

• Системы слива и оболочки готовы.

• Линия отбора проб не содержит остатков.

2. Подготовьте буферную заготовку.

Используйте тот же буфер, который будет использоваться для разбавления RCY7UM-630.

Запустите бланк буфера перед микросферами и запишите:

• Фон прямого рассеяния

• Фон бокового рассеяния

• Дальнекрасный флуоресцентный фон

• Общая частота событий

• Любая аномальная популяция твердых частиц

3. Ресуспендируйте RCY7UM-630.

Микросферы микронного размера могут осесть во время хранения.

Перед отбором проб:

1. Дайте флакону достичь рекомендуемой температуры обращения.

2. Аккуратно переверните емкость несколько раз.

3. При необходимости применяйте контролируемое вортексирование.

4. Убедитесь, что суспензия выглядит однородной.

5. Избегайте образования чрезмерной пены.

Кратковременную легкую обработку ультразвуком в ванне можно оценить, если это разрешено документацией на продукт и обычное смешивание не обеспечивает достаточного редиспергирования.

4. Подготовьте рабочие растворы.

Не начинайте с неразбавленной 0,5% суспензии.

Приготовьте несколько рабочих разведений, используя чистый и совместимый буфер.

Серия пошаговых или десятикратных разведений может помочь определить подходящий диапазон частоты событий.

5. Начните с низкой скорости потока

Во время первоначального испытания используйте низкую скорость потока пробы.

Более низкая скорость потока может улучшить разрешение совокупности и уменьшить совпадение.

Более высокие скорости потока можно оценить после того, как будут установлены подходящие настройки.

6. Найдите популяцию микросфер

Используйте прямое и боковое рассеяние, чтобы обнаружить популяцию частиц микронного размера.

Подтвердите идентичность частиц, используя дальний красный канал флуоресценции.

7. Оптимизация дальнего красного детектора

Выберите детектор, перекрывающий диапазон 665–720 нм.

Отрегулируйте коэффициент усиления или напряжение детектора так, чтобы совокупность:

• Четко отделен от пробела

• Остается в пределах измеряемого диапазона

• Не достигает насыщения

• Может быть постоянно закрытым

8. Исключите агрегаты и дублеты

Оцените геометрию импульса, используя соответствующие параметры, такие как:

• Область

• Высота

• Ширина

Возможные агрегаты могут демонстрировать повышенный разброс, флуоресценцию или ширину импульса.

9. Оценка нескольких разведений

Сравните распределения флуоресценции и рассеяния нескольких разведений.

Подходящее рабочее разведение должно давать стабильные измерения без чрезмерных совпадений.

10. Запишите полный метод

Для воспроизводимости запишите:

• Каталожный номер продукта

• Номер партии продукта

• Модель проточного цитометра

• Длина волны лазера

• Фильтр детектора

• Напряжение детектора или коэффициент усиления

• Настройки разброса

• Триггерный канал

• Порог

• Скорость потока пробы

• Коэффициент разбавления

• Буферный состав

• Процедура смешивания

• Время приобретения

• Количество собранных событий

• Ворота анализа

Контроль качества и постоянство от партии к партии

Исследовательские организации, закупающие флуоресцентные микросферы оптом, обычно требуют определенных и повторяемых характеристик продукции.

Потенциальные параметры контроля качества могут включать:

• Номинальный диаметр частиц

• Распределение частиц по размерам

• Коэффициент вариации размера частиц

• Внешний вид подвески

• Содержание твердых веществ

• Дисперсионные характеристики

• Совокупный уровень

• Характеристики возбуждения

• Характеристики выбросов

• Относительная интенсивность флуоресценции

• Распределение флуоресценции

• Положение гистограммы проточной цитометрии

• Сравнение лотов

• Стабильность хранения

• Целостность упаковки

• Микробный контроль

Не каждый параметр обязательно включен в стандартную спецификацию продукта.

Необходимые тесты на выпуск и пределы приемки должны быть согласованы до начала пилотного или массового производства.

Оценка эффективности проточной цитометрии

Метод контроля качества проточной цитометрии может оценить:

• Положение основной популяции микросфер

• Медиана или средняя интенсивность флуоресценции

• Ширина распределения флуоресценции

• Процент событий у главных ворот

• Разброс распределения

• Совокупное население

• Пустое разделение

• Повторяемость между запусками

При сравнении производственных партий следует использовать одни и те же настройки прибора и сбора данных.

Стабильность от партии к партии

При повторном производстве клиенты могут запросить контроль:

• Диаметр частиц

• Распределение частиц по размерам

• Интенсивность флуоресценции

• Распределение флуоресценции

• Содержание твердых веществ

• Буферный состав

• Устойчивость подвески

• Конфигурация упаковки

Компания Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. может обсудить требования к качеству для конкретного проекта перед производством.

Заявления о калибровке и сертификации

Стандарт RCY7UM-630 не должен автоматически представляться как:

• Стандарт размера, отслеживаемый NIST.

• Сертифицированный стандарт флуоресценции

• Шарик, присвоенный MESF

• Справочный материал, присвоенный ERF.

• Абсолютная счетная бусина

• Сертифицированные калибровочные шарики для проточного цитометра.

• Регламентированный диагностический контроль

Эти приложения требуют специального присвоения значений, тестирования, анализа неопределенностей, прослеживаемости и подтверждающей документации.

Массовое производство и настройка

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. поддерживает проекты по производству флуоресцентных микросфер, от лабораторной оценки до массового производства.

Оценка выборки исследования

Небольшие количества могут быть оценены по:

• Совместимость с красным лазером

• Совместимость с детекторами дальнего красного диапазона

• Дисперсия частиц

• Обнаружение рассеяния

• Интенсивность флуоресценции

• Оптимизация частоты событий

• Осуществимость анализа

• Совместимость инструментов

Опытно-промышленное производство

Пилотные пакеты могут поддерживать:

• Оптимизация метода

• Первоначальные исследования стабильности

• Оценка упаковки

• Разработка контроля качества

• Возможность соединения

• Проверка клиента

• Передача процесса

Массовое производство

После подтверждения технической спецификации массовое производство может быть организовано в соответствии с планом закупок и годовым прогнозом клиента.

Информация о проекте должна включать:

• Требуемое количество

• Ожидаемый годовой спрос

• Предпочтительный размер упаковки

• Предполагаемое применение

• Конфигурация проточного цитометра

• Требуемый уровень флуоресценции

• Химия поверхности

• Требования к буферу

• Характеристики качества

• Требования к документации

• График доставки

• Место доставки

Пользовательский размер частиц

Альтернативные диаметры флуоресцентных микросфер могут обсуждаться для соответствующих проектов.

Возможные направления развития:

• Частицы нанометрового размера

• Субмикронные частицы

• Мелкие бусины микронного размера.

• Микросферы разного размера клеток

• Более крупные флуоресцентные микросферы

Пользовательская флуоресценция

В зависимости от осуществимости настройка может включать в себя:

• Альтернативные длины волн возбуждения

• Альтернативные длины волн излучения

• Различные цвета флуоресценции

• Скорректированная интенсивность флуоресценции

• Несколько уровней интенсивности флуоресценции

• Несколько флуоресцентных кодов

Пользовательский химический состав поверхности

Возможные варианты поверхности для конкретного проекта могут включать:

• Обычные микросферы

• Карбоксильные микросферы

• Аминомикросферы

• Микросферы, покрытые стрептавидином

• Микросферы, покрытые белком

• Другие функциональные поверхности

Индивидуальная концентрация и упаковка

Альтернативные концентрации твердых веществ и форматы упаковки могут обсуждаться в зависимости от количества заказа и технической возможности.

Доступные варианты могут включать в себя:

• Упаковка лабораторных образцов

• Пилотная упаковка

• Контейнеры для массовых грузов

• Объемы заполнения по индивидуальному заказу

• OEM-маркировка

• Коды продуктов, специфичные для клиента

Рекомендации по обращению и хранению

Следуйте этикетке продукта, техническим характеристикам и сертификату анализа, прилагаемым к заказу.

Общие рекомендации по обращению включают в себя:

• Хранить в защищенном от света месте.

• Обычно рекомендуется хранить в холодильнике при температуре 2–8°C, если не указано иное.

• Не замораживайте, если не подтверждена стабильность при замораживании-оттаивании.

• Держите контейнер плотно закрытым.

• Храните флакон в вертикальном положении.

• Перед отбором проб тщательно перемешайте.

• Используйте чистые наконечники пипеток и пробирки для проб.

• Избегайте загрязнения исходной суспензии.

• Сведите к минимуму длительное воздействие яркого света.

• Избегайте повторных ненужных изменений температуры.

• Не допускайте высыхания микросфер.

• Не возвращайте разбавленный материал в оригинальную бутылку.

Расселение и ресуспендирование

Поскольку RCY7UM-630 содержит частицы размером 7 мкм, во время хранения может произойти осаждение.

Само по себе урегулирование не обязательно указывает на неисправность продукта.

Перед использованием:

1. Аккуратно переверните контейнер.

2. При необходимости применяйте контролируемое вортексирование.

3. Убедитесь, что суспензия однородна.

4. Проверьте наличие необратимых агрегатов.

5. Перед полным экспериментом протестируйте небольшое рабочее разведение.

Как избежать агрегации

На агрегацию могут влиять:

• Несовместимые буферы

• Высокая концентрация соли

• Экстремальный pH

• Многократное замораживание и оттаивание

• Сушка

• Микробное загрязнение

• Длительное хранение после разведения

• Несовместимые белки или добавки

Оцените совместимость буферов при разработке нового приложения.

Световая защита

Берегите оригинальный продукт и рабочие разведения от ненужного воздействия света.

По возможности приготовьте рабочие разведения незадолго до использования.

Часто задаваемые вопросы

Что такое RCY7UM-630?

RCY7UM-630 представляет собой суспензию флуоресцентных микросфер дальнего красного цвета размером 7 мкм, разработанную для исследований проточной цитометрии. Он имеет возбуждение примерно 630 нм, излучение 665–720 нм и содержание твердых веществ 0,5%.

Кто производит RCY7UM-630?

RCY7UM-630 поставляется компанией Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.

Каков номинальный диаметр частиц?

Номинальный диаметр частиц составляет 7 мкм.

Информация о размере конкретной партии должна быть подтверждена с использованием соответствующей спецификации продукта или сертификата анализа.

Какова длина волны возбуждения?

Указанная длина волны возбуждения составляет 630 нм.

Какова длина волны излучения?

Указанный диапазон излучения флуоресценции составляет 665–720 нм.

Какой лазер для проточной цитометрии следует использовать?

Рекомендуется совместимый красный лазер с длиной волны около 630 нм.

Красные лазеры с длиной волны 633, 635, 637 или 640 нм также могут быть оценены, но реакция флуоресценции должна быть подтверждена экспериментально.

Какой детектор выбрать?

Выберите детектор дальнего красного цвета, оптический фильтр которого перекрывает диапазон излучения 665–720 нм.

Проверьте фактический полосовой фильтр, а не полагайтесь только на имя канала детектора.

Можно ли его обнаружить по каналу APC?

Диапазон излучения может перекрываться с некоторыми конфигурациями детекторов, связанными с APC.

Однако RCY7UM-630 не следует описывать как маркированный APC, если только APC не используется в изделии.

Можно ли возбудить его лазером с длиной волны 488 нм?

RCY7UM-630 рассчитан на возбуждение примерно 630 нм.

Не следует предполагать адекватное возбуждение на длине волны 488 нм без подтверждения спектральных данных.

Подходит ли продукт для обычных проточных цитометров?

Диаметр частиц 7 мкм можно оценить на многих обычных проточных цитометрах с совместимым возбуждением красным лазером и обнаружением в дальнем красном диапазоне.

Фактическая производительность зависит от конфигурации прибора.

Зачем использовать микросферы размером 7 мкм?

Частицы более крупного микронного размера могут обеспечивать более сильные сигналы рассеяния и более легкое отделение от мелких фоновых частиц, чем субмикронные микросферы.

Они также могут быть пригодны для исследования частиц в диапазоне размеров клеток и разработки методов анализа на основе шариков.

Эквивалентны ли микросферы биологическим клеткам?

Нет.

Хотя диаметр частиц может находиться в широком диапазоне размеров некоторых клеток, синтетические микросферы не воспроизводят все физические и биологические свойства клеток.

Можно ли использовать RCY7UM-630 для выравнивания проточного цитометра?

Его можно оценить при настройке приборов и сравнительном исследовании выравнивания.

Его не следует представлять в качестве сертифицированного стандарта центровки без необходимой квалификации и документации.

Является ли RCY7UM-630 калибровочным шариком?

Стандартный продукт — исследовательская флуоресцентная микросфера.

Официальные приложения калибровки требуют соответствующего присвоения значений, прослеживаемости, пределов приемлемости и подтверждающей документации.

Можно ли использовать его для абсолютного подсчета?

Значение содержания твердых веществ 0,5% не определяет проверенное количество частиц на миллилитр.

Не используйте RCY7UM-630 в качестве эталона абсолютного счета, если не предоставлена ​​подтвержденная концентрация частиц.

Можно ли использовать микросферы в качестве компенсации?

Продукт можно оценить во время исследования канала флуоресценции.

Формальные компенсационные контроли должны максимально точно соответствовать характеристикам флуорофора и окрашивания анализа. Пригодность должна быть подтверждена экспериментально.

Могут ли антитела связываться с частицами?

Для связывания антител требуется соответствующая функциональная поверхность.

Подтвердите, требуется ли карбоксильная, амино, стрептавидиновая или другая соединительная поверхность.

Можно ли использовать RCY7UM-630 для иммуноанализа на основе шариков?

Подходяще функционализированная версия может быть оценена для иммунологического исследования на основе шариков.

Химия поверхности, метод связывания, условия блокирования, репортерный канал и матрица анализа должны быть оптимизированы.

Можно ли использовать его в мультиплексной проточной цитометрии?

Да, RCY7UM-630 можно оценить как одну популяцию частиц в мультиплексной исследовательской системе.

Дальний красный идентификационный сигнал должен оставаться отличимым от других популяций микросфер и репортерной флуоресценции.

Каково содержание твердых веществ в поставке?

RCY7UM-630 поставляется с содержанием твердых частиц 0,5%.

Следует ли разводить продукт перед проточной цитометрией?

Да. Рабочее разведение обычно следует готовить перед приобретением.

Рекомендуется протестировать несколько разведений, чтобы определить подходящую частоту событий и свести к минимуму совпадения.

Почему частицы оседают?

Частицы микронного размера могут оседать во время хранения из-за их размера и плотности.

Перед отбором проб тщательно перемешайте суспензию.

Как следует смешивать продукты?

Для повторного диспергирования микросфер можно использовать осторожное переворачивание с последующим контролируемым встряхиванием.

Избегайте чрезмерного пенообразования и длительного жесткого обращения.

Можно ли заморозить продукт?

Замораживание, как правило, не рекомендуется, если в прилагаемой документации конкретно не подтверждена стабильность при замораживании-оттаивании.

Как следует хранить RCY7UM-630?

Храните в защищенном от света месте и соблюдайте инструкции по хранению конкретного продукта.

Обычно рекомендуется хранить в холодильнике, если не указано иное.

Возможно ли массовое производство?

Да. Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. поддерживает оценку образцов, пилотное производство, повторные заказы и массовое производство.

Можно ли настроить концентрацию?

Альтернативные концентрации могут обсуждаться в соответствии с требованиями проекта, технической осуществимостью и объемом заказа.

Можно ли настроить интенсивность флуоресценции?

Различные уровни интенсивности флуоресценции могут обсуждаться для соответствующих проектов развития.

Можно ли настроить поверхность частиц?

Гладкие, карбоксильные, амино-, покрытые стрептавидином или другие функциональные поверхности могут обсуждаться в зависимости от применения и технической осуществимости.

Какая информация необходима для коммерческого предложения?

Пожалуйста, предоставьте:

• Каталожный номер продукта

• Требуемое количество

• Ожидаемый годовой спрос

• Предпочтительный размер упаковки

• Модель проточного цитометра

• Длина волны красного лазера

• Фильтр детектора дальнего красного цвета

• Предполагаемое применение

• Требуемая химия поверхности

• Требуемая интенсивность флуоресценции

• Требования к контролю качества

• Требования к документации

• Место доставки

Запросить образец или оптовое предложение

RCY7UM-630 7-микронные проточные красные флуоресцентные микросферы представляют собой раствор флуоресцентных частиц дальнего красного цвета микронного размера для исследований с помощью проточной цитометрии с красным лазером, исследований по настройке приборов, оценки каналов флуоресценции, разработки методов анализа на основе шариков, отслеживания частиц и производства исследовательских реагентов.

Продукт обеспечивает:

• Номинальный диаметр частиц 7 мкм

• Возбуждение около 630 нм

• Дальнее красное излучение 665–720 нм

• 0,5% твердых веществ

• Оценка совместимости с проточными цитометрами с красным лазером

• Образец и пилотная поставка

• Возможность массового производства

• Поддержка индивидуальной разработки

Для оценки образцов или оптовых закупок укажите предполагаемое применение, конфигурацию проточного цитометра, необходимое количество, химический состав поверхности, формат упаковки и требования к контролю качества.

Название продукта: Поточные микросферы Red-Fluo, 7 мкм
Номер по каталогу: RCY7UM-630
Производитель: Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.
Номинальный диаметр частиц: 7 мкм
Длина волны возбуждения: 630 нм
Длина волны излучения: 665–720 нм
Содержание твердых веществ: 0,5 %
Основное применение: исследования в области проточной цитометрии
Возможности поставок: образцы, пилотные партии и массовое производство
Использование по назначению: только для исследовательских целей. Не для диагностического или терапевтического использования.