Microsphères rouge-fluo à débit 7um RCY7UM-630 0,5 %

Microsphères Flow Red-Fluo de 7 µm pour la cytométrie en flux

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. fournit des microsphères Flow Red-Fluo RCY7UM-630 de 7 µm pour la recherche en cytométrie en flux laser rouge, l'évaluation des canaux de fluorescence, le développement de méthodes d'instruments, la recherche de tests à base de billes et la production de réactifs en vrac.

Les microsphères RCY7UM-630 ont un diamètre nominal de particule de 7 µm et sont conçues pour une excitation à environ 630 nm. Ils offrent une large plage d’émission de fluorescence dans le rouge lointain, comprise entre 665 et 720 nm.

Le produit est fourni sous forme de suspension à 0,5 % de solides et peut prendre en charge l'évaluation en laboratoire, le développement de projets de cytométrie en flux, les tests à l'échelle pilote, la production répétée et les achats en gros.

Réponse rapide au produit

RCY7UM-630 est une suspension de microsphères fluorescentes rouge lointain de 7 µm avec 0,5 % de solides. Il est conçu pour une excitation d'environ 630 nm et une émission de 665 à 720 nm et peut être évalué dans la recherche sur la cytométrie en flux laser rouge, les études de détection de fluorescence, le développement de tests à base de billes, la recherche sur la configuration d'instruments et la production de réactifs à microsphères fluorescentes.

Points forts du produit

• Nom du produit : Microsphères Flow Red-Fluo de 7 µm

• Numéro de catalogue : RCY7UM-630

• Fabricant : Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.

• Diamètre nominal des particules : 7µm

• Longueur d'onde d'excitation : 630 nm

• Longueur d'onde d'émission : 665–720 nm

• Région de fluorescence : Rouge lointain

• Teneur en matières solides : 0,5 %

• Méthode de détection recommandée : Cytométrie en flux

• Région laser recommandée : Laser rouge

• Capacité d’approvisionnement : échantillons, lots pilotes et production en vrac

• Utilisation prévue : Utilisation pour la recherche uniquement

Que sont les microsphères Flow Red-Fluo RCY7UM-630 ?

Le RCY7UM-630 se compose de microsphères fluorescentes de 7 µm qui produisent un signal de fluorescence rouge lointain lorsqu'elles sont excitées par un laser rouge compatible.

Le diamètre des particules de 7 µm se situe dans la plage de taille du micron couramment évaluée dans la recherche conventionnelle en cytométrie en flux. Par rapport aux nanoparticules et aux billes submicroniques, les microsphères de 7 µm peuvent produire des signaux de diffusion directe et latérale plus forts, ce qui rend la population de particules principale plus facile à localiser et à détecter sur de nombreux cytomètres en flux.

La combinaison de la taille des particules à l'échelle micronique et de la fluorescence rouge lointain rend le RCY7UM-630 adapté à la recherche impliquant :

• Détection de fluorescence laser rouge

• Évaluation du détecteur rouge lointain

• Optimisation des paramètres du cytomètre en flux

• Développement du seuil de fluorescence

• Contrôle de diffusion et de fluorescence

• Études de dilution des particules

• Optimisation du taux d'événements

• Développement de méthodes de cytométrie en flux

• Recherche sur les tests à base de billes

• Suivi des particules fluorescentes

• Comparaison des instruments

• Fabrication de réactifs de recherche

Le RCY7UM-630 peut être évalué par des sociétés de biotechnologie, des laboratoires de cytométrie en flux, des universités, des instituts de recherche, des fabricants d'instruments, des développeurs de réactifs et des organisations développant des méthodes analytiques basées sur les particules.

Le produit standard est fourni à des fins de recherche. Il ne doit pas être automatiquement représenté comme un matériau d'étalonnage certifié, un étalon de comptage absolu, un étalon MESF ou un contrôle de diagnostic réglementé, à moins que la qualification et la documentation pertinentes ne soient spécifiquement fournies.

RCY7UM-630 Spécifications techniques

Les paramètres spécifiques au lot doivent être confirmés à l'aide des spécifications du produit correspondant ou du certificat d'analyse.

En fonction des spécifications de la commande confirmée, les informations complémentaires peuvent inclure :

• Diamètre nominal des particules

• Distribution granulométrique

• Teneur en solides

• Apparence des suspensions

• Informations sur l'excitation de la fluorescence

• Informations sur l'émission de fluorescence

• Numéro de lot

• Date de fabrication

• Recommandations de stockage

• Instructions de manipulation

• Certificat d'analyse

• Fiche de données de sécurité

La matrice des particules, la chimie de la surface, le système de conservation, le coefficient de variation de la taille des particules, la plage d'intensité de fluorescence, la durée de conservation, la taille de l'emballage et le tampon de stockage doivent être confirmés avant la publication lorsque ces valeurs sont disponibles.

Excitation de 630 nm et émission rouge lointain de 665 à 720 nm

Le RCY7UM-630 est conçu pour une excitation proche de 630 nm et produit une fluorescence dans la région rouge lointain de 665 à 720 nm.

Les longueurs d'onde du laser rouge potentiellement compatibles peuvent inclure :

• 630 nm

• 633 nm

• 635 nm

• 637 nm

• 640 nm

Les spécifications du produit identifient 630 nm comme longueur d'onde d'excitation. Les instruments utilisant des longueurs d’onde laser rouges proches peuvent également convenir, mais la réponse finale de fluorescence doit être confirmée sur le cytomètre en flux prévu.

La plage d'émission de 665 à 720 nm peut chevaucher plusieurs configurations de détecteurs de rouge lointain.

Les régions potentielles de filtre de détecteur peuvent inclure :

• Environ 660 à 680 nm

• Environ 665 à 695 nm

• Environ 670 à 710 nm

• Environ 680 à 720 nm

• Environ 690 à 735 nm

Ces plages sont des exemples de compatibilité générale plutôt que des paramètres d'instrument garantis.

Le signal de fluorescence mesuré peut être affecté par :

• Longueur d'onde du laser

• Puissance laser

• Alignement optique

• Sensibilité du détecteur

• Tension ou gain du détecteur

• Miroirs dichroïques

• Filtres passe-bande

• Concentration de l'échantillon

• Débit

• Seuil de déclenchement

• Tampon de suspension

• Contexte des instruments

• Agrégation de particules

Les utilisateurs doivent examiner les spécifications réelles du laser et du filtre du cytomètre en flux plutôt que de se fier uniquement aux noms de canaux tels que APC, FL4, rouge lointain, fluorescence rouge ou canal laser rouge.

Pourquoi choisir des microsphères fluorescentes de 7 µm ?

Population de particules de taille micronique clairement détectable

Le diamètre nominal des particules de 7 µm peut fournir une population de microsphères distincte sur de nombreux cytomètres en flux conventionnels.

Par rapport aux particules submicroniques, les microsphères de 7 µm peuvent être plus faciles à séparer :

• Bruit électronique

• Particules tampons

• Petits débris

• Contexte des instruments

• Contaminants à faible diffusion

Les performances réelles dépendent de la configuration optique et fluidique de l'instrument.

Convient aux cytomètres en flux conventionnels

La recherche impliquant des nanoparticules ou des vésicules extracellulaires peut nécessiter des paramètres spécialisés de détection de petites particules.

En revanche, une population de microsphères fluorescentes de 7 µm peut généralement être évaluée à l’aide de tracés de diffusion avant, de diffusion latérale et de fluorescence plus conventionnels.

Cela rend le RCY7UM-630 adapté au développement initial de méthodes de cytométrie en flux et aux projets de formation en laboratoire.

Excitation du laser rouge

RCY7UM-630 fournit un signal de fluorescence rouge lointain sous une excitation d'environ 630 nm.

Il peut être utilisé lorsque les chercheurs ont besoin d’une population de particules fluorescentes pouvant être détectées à l’aide d’un laser rouge et d’un détecteur rouge lointain compatible.

Modèle de recherche sur la taille des cellules

La taille des particules de 7 µm se situe dans la large gamme de tailles de nombreuses cellules biologiques et particules de type cellulaire.

Les microsphères peuvent donc être évaluées lorsque les chercheurs ont besoin d'une population synthétique de la taille d'un micron pour des études de réglage d'instruments ou de manipulation de particules.

Le RCY7UM-630 ne reproduit pas la déformabilité, l'indice de réfraction, la densité, la structure de surface, la distribution de fluorescence ou le comportement biologique d'un type cellulaire spécifique. L’adéquation en tant que substitut de cellule doit être établie pour chaque application.

Convient à la recherche basée sur les perles

La taille des particules à l’échelle micronique peut constituer une plate-forme pratique pour la recherche impliquant la détection basée sur les billes, le codage des particules, l’immobilisation de biomolécules et la cytométrie en flux multiplex.

Une surface fonctionnelle appropriée est requise lorsque des anticorps, des antigènes, des protéines ou des acides nucléiques doivent être couplés aux particules.

Soutient le développement de la recherche à la production

Le RCY7UM-630 peut être évalué en petites quantités au cours des premières étapes de recherche, puis transféré en phase pilote ou en fabrication en vrac une fois que les spécifications techniques requises ont été confirmées.

Principales caractéristiques et avantages

Diamètre nominal des particules de 7 µm

La taille des particules à l'échelle micronique convient à la détection par cytométrie en flux, aux études de déclenchement, au suivi des particules et au développement de méthodes basées sur les billes.

Fluorescence rouge lointain

Le produit est conçu pour une excitation d’environ 630 nm et une émission de 665 à 720 nm.

Compatibilité laser rouge

Le RCY7UM-630 peut être évalué sur des cytomètres en flux équipés d’une excitation laser rouge compatible.

Large plage d'émission

La large région d'émission du rouge lointain offre une flexibilité lors de la sélection de filtres de détecteur compatibles.

Suspension de solides à 0,5 %

La concentration fournie permet aux utilisateurs de préparer des dilutions de travail en fonction du taux d'événements requis, du temps d'acquisition et de la conception expérimentale.

Séparation visible des petits débris

La population de taille micronique peut être plus facile à distinguer des particules de fond submicroniques que des microsphères fluorescentes plus petites.

Convient à plusieurs flux de travail de recherche

Le RCY7UM-630 peut être évalué en cytométrie en flux, en microscopie à fluorescence, en microfluidique, en suivi de particules, en développement de tests et en recherche d'instruments.

Approvisionnement en échantillon en vrac

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. prend en charge l'évaluation d'échantillons en laboratoire, le développement à l'échelle pilote, les commandes répétées et la fabrication en vrac.

Prise en charge du développement personnalisé

D'autres tailles, concentrations, intensités de fluorescence, compositions chimiques de surface, formats d'emballage et exigences de contrôle qualité peuvent être discutées en fonction de la faisabilité du projet.

Applications dans la recherche sur la cytométrie en flux

Détection de fluorescence laser rouge

Le RCY7UM-630 peut être utilisé pour évaluer l’excitation du laser rouge et la détection de la fluorescence du rouge lointain.

Les chercheurs peuvent étudier :

• Intensité de fluorescence des particules

• Séparation signal-arrière-plan

• Sensibilité du détecteur

• Tension ou gain du détecteur

• Position de l'histogramme de fluorescence

• Largeur de distribution de fluorescence

• Stabilité d'une exécution à l'autre

• Variation des instruments au jour le jour

Recherche sur la configuration du cytomètre en flux

Les microsphères peuvent prendre en charge la recherche impliquant une configuration cohérente des instruments.

Les procédures potentielles comprennent :

• Localisation de la population de microsphères

• Ajustement des paramètres de diffusion vers l'avant

• Ajustement des paramètres de diffusion latérale

• Sélection du détecteur rouge lointain

• Établir un seuil de fluorescence

• Définir un déclencheur d'acquisition

• Création d'une porte de particules

• Comparer différents débits

• Évaluation de la stabilité du taux d'événements

• Vérification du transfert d'échantillon

Le produit standard ne doit pas être décrit comme une perle d’alignement ou d’étalonnage certifiée à moins que l’attribution de valeur et la qualification appropriées n’aient été effectuées.

Contrôle de diffusion et de fluorescence

RCY7UM-630 peut être évalué à l'aide de plusieurs combinaisons de tracés :

• Diffusion vers l'avant versus diffusion latérale

• Diffusion vers l'avant versus fluorescence rouge lointain

• Diffusion latérale versus fluorescence rouge lointain

• Histogramme de fluorescence rouge lointain

• Zone d'impulsion par rapport à la hauteur d'impulsion

• Surface d'impulsion par rapport à la largeur d'impulsion

Ces graphiques peuvent aider à distinguer :

• Microsphères simples

• Agrégats possibles

• Événements en arrière-plan

• Événements coïncidents

• Particules anormalement brillantes

• Particules à faible fluorescence

Développement du seuil de fluorescence

Un déclencheur de fluorescence peut être utile lorsque les chercheurs souhaitent acquérir uniquement les événements produisant un signal de fluorescence rouge lointain.

RCY7UM-630 peut prendre en charge des études impliquant :

• Acquisition déclenchée par fluorescence

• Sélection du seuil de déclenchement

• Exclusion d'événements en arrière-plan

• Comparaison de déclenchement de diffusion

• Évaluation de la sensibilité de la détection

• Discrimination d'événements de faible intensité

Études de dilution des particules

La suspension à 0,5 % de solides doit normalement être diluée avant le test de cytométrie en flux.

Une série de dilutions peut aider à déterminer une concentration de travail qui fournit :

• Tarifs d'événements stables

• Coïncidence minime

• Séparation claire de la population

• Fluorescence reproductible

• Temps d'acquisition approprié

• Faible consommation d'échantillons

• Contexte acceptable

Le facteur de dilution approprié dépend de l'instrument, du débit, du volume de l'échantillon, de l'application et du nombre souhaité d'événements enregistrés.

Évaluation du taux d'événements et des coïncidences

Lorsque trop de microsphères traversent la région d'interrogation laser en même temps, deux particules ou plus peuvent être enregistrées comme un seul événement.

Les indications possibles de coïncidence comprennent :

• Intensité apparente de fluorescence accrue

• Intensité de diffusion accrue

• Larges distributions de particules

• Populations doublets inattendues

• Modifications du signal en fonction de la concentration

• Taux d'événements instables

Tester plusieurs dilutions peut aider à identifier une plage de travail appropriée.

Recherche sur les systèmes fluidiques

Les microsphères fluorescentes peuvent également prendre en charge les études du mouvement des échantillons via un cytomètre en flux ou un système microfluidique.

Les observations potentielles comprennent :

• Exemple d'introduction

• Stabilité du débit

• Cohérence du taux d'événements

• Récupération de particules

• Transfert d'échantillon

• Reproductibilité tube à tube

• Efficacité du nettoyage

• Blocage ou interruption

• Perte de particules dans le chemin fluidique

Microscopie à fluorescence

Le RCY7UM-630 peut être évalué à l’aide de microscopes à fluorescence équipés d’une source d’excitation rouge compatible et d’un filtre d’émission rouge lointain.

Les applications possibles en microscopie comprennent :

• Localisation des particules

• Etudes de distribution de particules

• Imagerie microfluidique

• Etudes de filtration

• Recherche sur les interactions de surface

• Expériences d'absorption de particules

• Observations de stabilité de fluorescence

La compatibilité doit être confirmée à l’aide du jeu de filtres du microscope lui-même.

Lasers rouges et canaux de détection compatibles

Région d'excitation recommandée

Un laser rouge proche de 630 nm est recommandé.

Le RCY7UM-630 n'est pas principalement conçu pour l'excitation avec des lasers 405 nm, 488 nm ou 561 nm.

Le signal sous des longueurs d'onde d'excitation alternatives ne doit pas être supposé à moins d'être étayé par des tests spectraux.

Détection des émissions recommandée

Sélectionnez un filtre de détecteur qui chevauche la plage d'émission de 665 à 720 nm.

Le filtre doit être évalué selon :

• Longueur d'onde centrale

• Bande passante

Par exemple:

• Un filtre 670/30 collecte environ 655 à 685 nm.

• Un filtre 680/30 collecte environ 665 à 695 nm.

• Un filtre 695/40 collecte environ 675 à 715 nm.

• Un filtre 710/50 collecte environ 685 à 735 nm.

Ces exemples décrivent uniquement la couverture de longueur d'onde. Ils ne garantissent pas une intensité de fluorescence égale sur chaque instrument.

Canaux associés à APC

La plage d'émission du RCY7UM-630 peut chevaucher certains canaux de détection couramment utilisés pour les fluorophores de type APC.

Cependant, les microsphères ne doivent pas être décrites comme étant étiquetées APC à moins que l'APC ne soit réellement utilisée dans le produit.

La compatibilité doit être déterminée en utilisant le spectre d'excitation et d'émission réel du produit.

Cytométrie en flux spectral

RCY7UM-630 peut également être évalué sur des cytomètres en flux spectraux compatibles.

Pour les flux de travail spectraux, les utilisateurs doivent collecter la signature de fluorescence complète sous les paramètres de l'instrument prévus et créer un spectre de référence approprié.

Le produit doit être testé indépendamment avant d’être utilisé pour des contrôles de démélange spectral.

Configuration des instruments de cytométrie en flux et développement de méthodes

RCY7UM-630 peut prendre en charge la mise en place de procédures de cytométrie en flux reproductibles.

Configuration initiale des instruments

Confirmez que le cytomètre en flux comprend :

• Un laser rouge compatible

• Un détecteur chevauchant 665-720 nm

• Gain ou tension de fluorescence réglable

• Paramètres de dispersion réglables

• Logiciel d'acquisition adapté

• Fluidique propre et stable

Établir une porte de particules

Une porte préliminaire peut être créée en utilisant la diffusion vers l'avant et la diffusion latérale.

Le signal de fluorescence rouge lointain peut ensuite être utilisé pour confirmer l’identité de la population de microsphères.

Le portail doit exclure :

• Arrière-plan du tampon

• Bruit électronique

• Débris

• Agrégats possibles

• Événements coïncidents

• Des événements saturés

Optimisation du gain du détecteur

Commencez avec un réglage du détecteur relativement bas et augmentez progressivement le gain ou la tension.

La population principale doit être positionnée dans la plage mesurable sans atteindre la saturation du détecteur.

Enregistrez les paramètres finaux pour les tests futurs.

Surveillance de la largeur de distribution

Une distribution étroite de fluorescence peut indiquer une population mesurée relativement uniforme, tandis qu'une distribution large peut résulter de :

• Agrégation de particules

• Événements coïncidents

• Instabilité des instruments

• Mélange incomplet

• Concentration d'échantillon trop élevée

• Saturation du détecteur

• Variation au sein de la population de microsphères

Des recherches plus approfondies sont nécessaires avant d'attribuer l'ampleur de la distribution à une seule cause.

Comparaison d'instruments

Le même lot de microsphères peut être évalué sur différents cytomètres en flux.

Pour une comparaison significative, enregistrez :

• Modèle d'instrument

• Longueur d'onde du laser

• Puissance laser

• Filtre du détecteur

• Paramétrage du détecteur

• Canal de déclenchement

• Seuil

• Débit d'échantillon

• Dilution

• Tampon

• Temps d'acquisition

• Nombre d'événements collectés

Les résultats de différents instruments peuvent ne pas être directement comparables sans une méthode de standardisation appropriée.

Développement de tests de cytométrie en flux à base de billes

RCY7UM-630 peut être considéré comme une plate-forme de particules fluorescentes pour la recherche en cytométrie en flux à base de billes.

Avant de développer une procédure de couplage, confirmez la chimie réelle de la surface des particules.

Les options de surface possibles pour des projets personnalisés peuvent inclure :

• Surface lisse

• Surface fonctionnalisée carboxyle

• Surface amino-fonctionnalisée

• Surface enduite de streptavidine

• Surface recouverte de protéines

• Autres groupes fonctionnels spécifiques au projet

La disponibilité dépend de la faisabilité technique.

Biomolécules potentielles

Avec une surface fonctionnelle appropriée, les microsphères fluorescentes peuvent être évaluées pour immobiliser :

• Anticorps

• Antigènes

• Protéines

• Peptides

• Enzymes

• Oligonucléotides

• sondes ADN

• Sondes d'ARN

• Récepteurs

• Ligands

Paramètres de développement du couplage

Les facteurs importants peuvent inclure :

• Groupe fonctionnel de surface

• Chimie d'activation

• Composition du tampon de couplage

• pH tampon

• Concentration de biomolécules

• Concentration de microsphères

• Temps d'activation

• Temps de couplage

• Méthode de mélange

• Réactif bloquant

• Conditions de lavage

• Tampon de stockage

• Conservateur

• Matrice d'échantillon cible

• Adsorption non spécifique

• Rétention de fluorescence

Le processus de couplage doit être optimisé en utilisant la biomolécule et l’application réelles.

Développement de tests multiplex

Plusieurs populations de billes peuvent potentiellement être distinguées grâce à :

• Taille des particules

• Couleur fluorescente

• Intensité de fluorescence

• Code de fluorescence interne

• Chimie des surfaces

• Fluorescence du journaliste

Pour la recherche par dosage multiplex, chaque population de billes doit rester identifiable après :

• Couplage de biomolécules

• Blocage

• Lavage

• Stockage

• Incubation d'échantillons

• Étiquetage du journaliste

• Acquisition par cytométrie en flux

Le canal rapporteur doit également être suffisamment séparé du signal de fluorescence rouge lointain RCY7UM-630.

Recherche sur les immunoessais

Les microsphères fonctionnalisées de 7 µm peuvent potentiellement être évaluées dans le développement de tests immunologiques à base de billes.

Un flux de travail de recherche typique peut inclure :

1. Activation ou revêtement de microsphères.

2. Capturez l’immobilisation des biomolécules.

3. Blocage des surfaces n'ayant pas réagi.

4. Incubation avec l'échantillon cible.

5. Ajout d'un réactif de détection.

6. Lavage.

7. Acquisition par cytométrie en flux.

8. Analyse des données.

Le produit standard RCY7UM-630 ne doit pas être supposé contenir une surface prête à être couplée à moins que le groupe fonctionnel ne soit spécifiquement confirmé.

Comparaison avec des microsphères fluorescentes de 3 µm et 500 nm

Les microsphères RCY7UM-630, RCY3UM-630 et 500 nm Flow Red-Fluo peuvent répondre à différentes priorités de recherche en cytométrie en flux.

Choisissez 7 µm RCY7UM-630 lorsque :

• Une population fluorescente de plus grande taille d’un micron est préférée.

• Une forte visibilité dispersée est importante.

• Une particule synthétique de taille cellulaire est requise.

• Le projet implique la configuration d'un détecteur laser rouge.

• Une plateforme d’analyse à base de billes est en cours de développement.

• Une séparation plus facile du fond de petites particules est souhaitée.

• Une plus grande surface de particules est préférable pour un projet de couplage personnalisé.

Choisissez 3 µm RCY3UM-630 lorsque :

• Une perle plus petite, de la taille d’un micron, est préférable.

• Le projet nécessite un équilibre entre la détection de diffusion et une taille de particule plus petite.

• Une plateforme compacte de cytométrie en flux basée sur des billes est à l’étude.

• Un comportement de sédimentation plus faible que celui des billes plus grosses est préféré.

Choisissez des microsphères de 500 nm lorsque :

• Le projet se concentre sur la détection de particules submicroniques.

• La cytométrie en flux de petites particules est l'objectif principal.

• L'acquisition déclenchée par fluorescence est en cours de développement.

• L'instrument dispose d'une capacité de détection submicronique appropriée.

• Des recherches sur les méthodes liées aux vésicules extracellulaires sont en cours.

La taille finale des particules doit être sélectionnée en fonction de la capacité de l'instrument, de la conception du test, de la surface souhaitée, du comportement de la suspension et de l'application cible.

Flux de travail recommandé pour la préparation et les tests

Le flux de travail suivant constitue un point de départ général et doit être optimisé pour le cytomètre en flux et l’application de recherche prévus.

1. Préparez l'instrument

Nettoyer et amorcer le cytomètre en flux conformément aux instructions du fabricant.

Confirmez que :

• Le système fluidique est stable.

• Le laser rouge fonctionne.

• Le détecteur rouge lointain est disponible.

• Les systèmes de déchets et de gaines sont prêts.

• La ligne d’échantillonnage est exempte de résidus.

2. Préparez un blanc tampon

Utilisez le même tampon qui sera utilisé pour diluer le RCY7UM-630.

Exécutez le tampon vierge avant les microsphères et enregistrez :

• Fond de diffusion vers l'avant

• Fond de diffusion latérale

• Fond de fluorescence rouge lointain

• Taux total d'événements

• Toute population particulaire anormale

3. Remettre en suspension le RCY7UM-630

Des microsphères de la taille d'un micron peuvent se déposer pendant le stockage.

Avant le prélèvement :

1. Laisser le flacon atteindre la température de manipulation recommandée.

2. Retournez doucement le récipient plusieurs fois.

3. Appliquer un vortex contrôlé si nécessaire.

4. Confirmez que la suspension semble homogène.

5. Évitez de produire trop de mousse.

Une brève sonication douce en bain peut être évaluée si la documentation du produit le permet et si un mélange ordinaire ne permet pas une redispersion suffisante.

4. Préparer les dilutions de travail

Ne commencez pas avec la suspension non diluée à 0,5%.

Préparer plusieurs dilutions de travail en utilisant un tampon propre et compatible.

Une série de dilutions par étapes ou par dix peut aider à déterminer la plage de taux d'événements appropriée.

5. Commencez avec un faible débit

Utilisez un faible débit d’échantillon lors du test initial.

Un débit plus faible peut améliorer la résolution de la population et réduire les coïncidences.

Des débits plus élevés peuvent être évalués une fois que les réglages appropriés ont été établis.

6. Localisez la population de microsphères

Utilisez la diffusion vers l’avant et la diffusion latérale pour localiser la population de particules de la taille d’un micron.

Confirmez l’identité des particules à l’aide du canal de fluorescence rouge lointain.

7. Optimiser le détecteur de rouge lointain

Sélectionnez un détecteur qui chevauche 665 à 720 nm.

Ajustez le gain ou la tension du détecteur afin que la population :

• Est clairement séparé du blanc

• Reste dans la plage mesurable

• N'atteint pas la saturation

• Peut être systématiquement fermé

8. Exclure les agrégats et les doublets

Évaluez la géométrie des impulsions à l’aide de paramètres appropriés tels que :

• Zone

• Hauteur

• Largeur

Les agrégats possibles peuvent présenter une diffusion, une fluorescence ou une largeur d'impulsion accrue.

9. Évaluer plusieurs dilutions

Comparez les distributions de fluorescence et de diffusion de plusieurs dilutions.

Une dilution de travail appropriée doit produire des mesures stables sans coïncidence excessive.

10. Enregistrez la méthode complète

Pour des raisons de reproductibilité, enregistrer :

• Numéro de catalogue du produit

• Numéro de lot du produit

• Modèle de cytomètre en flux

• Longueur d'onde du laser

• Filtre du détecteur

• Tension ou gain du détecteur

• Paramètres de dispersion

• Canal de déclenchement

• Seuil

• Débit d'échantillon

• Facteur de dilution

• Composition du tampon

• Procédure de mélange

• Temps d'acquisition

• Nombre d'événements collectés

• Porte d'analyse

Contrôle qualité et cohérence d’un lot à l’autre

Les organismes de recherche achetant des microsphères fluorescentes en gros exigent généralement des spécifications de produit définies et reproductibles.

Les paramètres potentiels de contrôle de qualité peuvent inclure :

• Diamètre nominal des particules

• Distribution granulométrique

• Coefficient de variation granulométrique

• Apparence des suspensions

• Teneur en solides

• Performances de dispersion

• Niveau global

• Caractéristiques d'excitation

• Caractéristiques d'émission

• Intensité relative de fluorescence

• Répartition des fluorescences

• Position de l'histogramme de cytométrie en flux

• Comparaison lot à lot

• Stabilité de stockage

• Intégrité de l'emballage

• Contrôle microbien

Tous les paramètres ne sont pas nécessairement inclus dans une spécification de produit standard.

Les tests de libération requis et les limites d'acceptation doivent être convenus avant la production pilote ou en vrac.

Évaluation des performances de la cytométrie en flux

Une méthode de contrôle qualité par cytométrie en flux peut évaluer :

• Position de la principale population de microsphères

• Intensité de fluorescence médiane ou moyenne

• Largeur de distribution de fluorescence

• Pourcentage d'événements à l'intérieur de la porte principale

• Distribution de dispersion

• Population globale

• Séparation vide

• Répétabilité entre les analyses

Les mêmes paramètres d’instrument et d’acquisition doivent être utilisés lors de la comparaison des lots de production.

Cohérence d'un lot à l'autre

Pour une production répétée, les clients peuvent demander le contrôle de :

• Diamètre des particules

• Distribution granulométrique

• Intensité de fluorescence

• Répartition des fluorescences

• Teneur en solides

• Composition du tampon

• Stabilité des suspensions

• Configuration de l'emballage

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. peut discuter des exigences de qualité spécifiques au projet avant la fabrication.

Réclamations d’étalonnage et de certification

La norme RCY7UM-630 ne doit pas automatiquement être représentée comme :

• Une norme de taille traçable par le NIST

• Un étalon de fluorescence certifié

• Une perle assignée au MESF

• Un matériau de référence attribué par l'ERF

• Une perle de comptage absolue

• Une perle d'étalonnage certifiée pour le cytomètre en flux

• Un contrôle diagnostique régulé

Ces applications nécessitent une attribution de valeur spécifique, des tests, une analyse d'incertitude, une traçabilité et une documentation à l'appui.

Fabrication en vrac et personnalisation

Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. soutient des projets de microsphères fluorescentes, depuis l'évaluation en laboratoire jusqu'à la production en vrac.

Évaluation des échantillons de recherche

De petites quantités peuvent être évaluées pour :

• Compatibilité laser rouge

• Compatibilité du détecteur rouge lointain

• Dispersion des particules

• Détection de diffusion

• Intensité de fluorescence

• Optimisation du taux d'événements

• Faisabilité du test

• Compatibilité des instruments

Production à l’échelle pilote

Les lots pilotes peuvent prendre en charge :

• Optimisation de la méthode

• Etudes de stabilité initiales

• Évaluation des emballages

• Développement du contrôle qualité

• Faisabilité du couplage

• Vérification du client

• Transfert de processus

Production en vrac

Une fois les spécifications techniques confirmées, la production en vrac peut être organisée selon le plan d'achat et les prévisions annuelles du client.

Les informations sur le projet doivent inclure :

• Quantité requise

• Demande annuelle attendue

• Taille de paquet préférée

• Application prévue

• Configuration du cytomètre en flux

• Niveau de fluorescence requis

• Chimie des surfaces

• Exigences en matière de tampon

• Spécifications de qualité

• Exigences en matière de documentation

• Calendrier de livraison

• Lieu de livraison

Taille de particule personnalisée

D’autres diamètres de microsphères fluorescentes peuvent être discutés pour les projets qualifiés.

Les orientations de développement possibles comprennent :

• Particules à l'échelle nanométrique

• Particules submicroniques

• Petites perles de la taille d'un micron

• Microsphères de taille cellulaire

• Microsphères fluorescentes plus grosses

Fluorescence personnalisée

Selon la faisabilité, la personnalisation peut inclure :

• Longueurs d'onde d'excitation alternatives

• Longueurs d'onde d'émission alternatives

• Différentes couleurs de fluorescence

• Intensité de fluorescence ajustée

• Plusieurs niveaux d'intensité de fluorescence

• Plusieurs codes fluorescents

Chimie de surface personnalisée

Les options de surface possibles spécifiques au projet peuvent inclure :

• Microsphères simples

• Microsphères carboxyliques

• Microsphères aminés

• Microsphères enrobées de streptavidine

• Microsphères enrobées de protéines

• Autres surfaces fonctionnelles

Concentration et emballage personnalisés

D’autres concentrations de solides et formats d’emballage peuvent être discutés en fonction de la quantité commandée et de la faisabilité technique.

Les options disponibles peuvent inclure :

• Emballage d'échantillons de laboratoire

• Emballage à l'échelle pilote

• Conteneurs pour vrac

• Volumes de remplissage spécifiques au client

• Étiquetage OEM

• Codes produits spécifiques au client

Recommandations de manipulation et de stockage

Suivez l'étiquette du produit, la fiche technique et le certificat d'analyse fournis avec la commande.

Les recommandations générales de manipulation comprennent :

• Conserver à l'abri de la lumière.

• Un stockage réfrigéré entre 2 et 8 °C est généralement recommandé, sauf indication contraire.

• Ne pas congeler à moins que la stabilité gel-dégel ait été confirmée.

• Gardez le récipient bien fermé.

• Conservez le flacon à la verticale.

• Bien mélanger avant de prélever.

• Utilisez des pointes de pipettes et des tubes à échantillons propres.

• Évitez de contaminer la suspension d'origine.

• Minimisez l’exposition prolongée à une lumière forte.

• Évitez les changements de température inutiles et répétés.

• Ne laissez pas sécher les microsphères.

• Ne remettez pas le produit dilué dans le flacon d'origine.

Règlement et remise en suspension

Étant donné que le RCY7UM-630 contient des particules de 7 µm, une sédimentation peut se produire pendant le stockage.

Un règlement seul n’indique pas nécessairement une défaillance du produit.

Avant utilisation :

1. Retournez doucement le récipient.

2. Appliquer un vortex contrôlé si nécessaire.

3. Confirmez que la suspension est homogène.

4. Inspectez les agrégats irréversibles.

5. Testez une petite dilution de travail avant l’expérience complète.

Éviter l'agrégation

L'agrégation peut être affectée par :

• Tampons incompatibles

• Concentrations élevées de sel

• pH extrême

• Congélation et décongélation répétées

• Séchage

• Contamination microbienne

• Conservation prolongée après dilution

• Protéines ou additifs incompatibles

Évaluez la compatibilité des tampons lors du développement d’une nouvelle application.

Protection contre la lumière

Conservez le produit d’origine et les dilutions de travail à l’abri d’une exposition inutile à la lumière.

Préparer les dilutions de travail peu de temps avant utilisation lorsque cela est possible.

Foire aux questions

Qu'est-ce que le RCY7UM-630 ?

RCY7UM-630 est une suspension de microsphères fluorescentes rouge lointain de 7 µm développée pour la recherche en cytométrie en flux. Il a une excitation d’environ 630 nm, une émission de 665 à 720 nm et 0,5 % de solides.

Qui fabrique le RCY7UM-630 ?

RCY7UM-630 est fourni par Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.

Quel est le diamètre nominal des particules ?

Le diamètre nominal des particules est de 7 µm.

Les informations sur la taille spécifique au lot doivent être confirmées à l'aide des spécifications du produit ou du certificat d'analyse pertinent.

Quelle est la longueur d'onde d'excitation ?

La longueur d'onde d'excitation spécifiée est de 630 nm.

Quelle est la longueur d'onde d'émission ?

La plage d'émission de fluorescence spécifiée est de 665 à 720 nm.

Quel laser de cytométrie en flux faut-il utiliser ?

Un laser rouge compatible proche de 630 nm est recommandé.

Les lasers rouges à 633, 635, 637 ou 640 nm peuvent également être évalués, mais la réponse de fluorescence doit être confirmée expérimentalement.

Quel détecteur choisir ?

Sélectionnez un détecteur rouge lointain dont le filtre optique chevauche la plage d’émission de 665 à 720 nm.

Vérifiez le filtre passe-bande réel plutôt que de vous fier uniquement au nom du canal du détecteur.

Peut-il être détecté à l'aide d'un canal APC ?

La plage d'émission peut chevaucher certaines configurations de détecteurs associés à l'APC.

Cependant, le RCY7UM-630 ne doit pas être décrit comme étant étiqueté APC à moins que l'APC ne soit réellement utilisé dans le produit.

Peut-il être excité par un laser 488 nm ?

RCY7UM-630 est spécifié pour une excitation d'environ 630 nm.

Une excitation adéquate à 488 nm ne doit pas être supposée sans données spectrales à l’appui.

Le produit est-il adapté aux cytomètres en flux conventionnels ?

Le diamètre des particules de 7 µm peut être évalué sur de nombreux cytomètres en flux conventionnels avec une excitation laser rouge et une détection rouge lointain compatibles.

Les performances réelles dépendent de la configuration de l'instrument.

Pourquoi utiliser des microsphères de 7µm ?

Les particules de plus grande taille du micron peuvent fournir des signaux de diffusion plus forts et une séparation plus facile des petites particules de fond que les microsphères submicroniques.

Ils peuvent également convenir aux études de particules de taille cellulaire et au développement de tests basés sur des billes.

Les microsphères sont-elles équivalentes à des cellules biologiques ?

Non.

Bien que le diamètre des particules puisse se situer dans la large gamme de tailles de certaines cellules, les microsphères synthétiques ne reproduisent pas toutes les propriétés physiques et biologiques des cellules.

Le RCY7UM-630 peut-il être utilisé pour l’alignement du cytomètre en flux ?

Il peut être évalué dans le cadre de recherches sur la configuration des instruments et l’alignement comparatif.

Il ne doit pas être présenté comme une norme d'alignement certifiée sans la qualification et la documentation requises.

Le RCY7UM-630 est-il une perle d'étalonnage ?

Le produit standard est une microsphère fluorescente de recherche.

Les applications d'étalonnage formelles nécessitent une attribution de valeur, une traçabilité, des limites d'acceptation et une documentation à l'appui appropriées.

Peut-il être utilisé pour un comptage absolu ?

La valeur de 0,5 % de solides n’établit pas un nombre vérifié de particules par millilitre.

N'utilisez pas le RCY7UM-630 comme étalon de comptage absolu à moins qu'une concentration validée en nombre de particules n'ait été fournie.

Les microsphères peuvent-elles être utilisées à titre de compensation ?

Le produit peut être évalué lors de recherches sur les canaux de fluorescence.

Les contrôles de compensation formels doivent correspondre le plus fidèlement possible aux caractéristiques du fluorophore et de la coloration du test. L'adéquation doit être validée expérimentalement.

Les anticorps peuvent-ils être couplés aux particules ?

Le couplage d’anticorps nécessite une surface fonctionnelle appropriée.

Confirmez si une surface de couplage carboxyle, amino, streptavidine ou autre est requise.

Le RCY7UM-630 peut-il être utilisé pour les tests immunologiques à base de billes ?

Une version convenablement fonctionnalisée peut être évaluée pour la recherche par immunoessais à base de billes.

La chimie de surface, la méthode de couplage, les conditions de blocage, le canal rapporteur et la matrice de test doivent être optimisés.

Peut-il être utilisé en cytométrie en flux multiplex ?

Oui, RCY7UM-630 peut être évalué comme une population de particules dans un système de recherche multiplex.

Le signal d’identification rouge lointain doit rester distinct des autres populations de microsphères et de la fluorescence du rapporteur.

Quelle est la teneur en matières solides fournie ?

RCY7UM-630 est fourni à 0,5 % de solides.

Le produit doit-il être dilué avant la cytométrie en flux ?

Oui. Une dilution de travail doit normalement être préparée avant l'acquisition.

Il est recommandé de tester plusieurs dilutions pour déterminer un taux d'événements approprié et minimiser les coïncidences.

Pourquoi les particules se déposent-elles ?

Des particules de taille micrométrique peuvent se déposer pendant le stockage en raison de leur taille et de leur densité.

Mélangez soigneusement la suspension avant de prélever des échantillons.

Comment mélanger le produit ?

Une inversion douce suivie d'un vortex contrôlé peut être utilisée pour redisperser les microsphères.

Évitez la formation de mousse excessive et les traitements agressifs prolongés.

Le produit peut-il être congelé ?

La congélation n’est généralement pas recommandée à moins que la documentation fournie ne confirme spécifiquement la stabilité gel-dégel.

Comment le RCY7UM-630 doit-il être stocké ?

Conserver à l’abri de la lumière et suivre les instructions de stockage spécifiques au produit.

Le stockage réfrigéré est généralement recommandé, sauf indication contraire.

La production en vrac est-elle disponible ?

Oui. Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd. prend en charge l'évaluation des échantillons, la production pilote, les commandes répétées et la fabrication en vrac.

La concentration peut-elle être personnalisée ?

Des concentrations alternatives peuvent être discutées en fonction des exigences du projet, de la faisabilité technique et de la quantité commandée.

L'intensité de la fluorescence peut-elle être personnalisée ?

Différents niveaux d'intensité de fluorescence peuvent être discutés pour des projets de développement qualifiés.

La surface des particules peut-elle être personnalisée ?

Les surfaces lisses, carboxyliques, aminées, streptavidines ou autres surfaces fonctionnelles peuvent être discutées en fonction de l'application et de la faisabilité technique.

Quelles informations sont nécessaires pour un devis ?

Veuillez fournir :

• Numéro de catalogue du produit

• Quantité requise

• Demande annuelle attendue

• Taille de paquet préférée

• Modèle de cytomètre en flux

• Longueur d'onde du laser rouge

• Filtre détecteur rouge lointain

• Application prévue

• Chimie de surface requise

• Intensité de fluorescence requise

• Exigences de contrôle de qualité

• Exigences en matière de documentation

• Lieu de livraison

Demander un échantillon ou un devis groupé

Les microsphères Flow Red-Fluo RCY7UM-630 de 7 µm fournissent une solution de particules fluorescentes rouge lointain de la taille d'un micron pour la recherche en cytométrie en flux laser rouge, les études de réglage des instruments, l'évaluation des canaux de fluorescence, le développement de tests à base de billes, le suivi des particules et la fabrication de réactifs de recherche.

Le produit fournit :

• Diamètre nominal des particules de 7 µm

• Excitation d'environ 630 nm

• Émission rouge lointain de 665 à 720 nm

• 0,5% de solides

• Évaluation de la compatibilité avec les cytomètres en flux laser rouge

• Fourniture d'échantillons et de pilotes

• Capacité de production en vrac

• Prise en charge du développement personnalisé

Pour l’évaluation d’échantillons ou l’achat en gros, fournissez l’application prévue, la configuration du cytomètre en flux, la quantité requise, la chimie de surface, le format d’emballage et les exigences de contrôle qualité.

Nom du produit : Microsphères Red-Fluo à flux de 7 µm
Numéro de catalogue : RCY7UM-630
Fabricant : Shanghai SanYu Biotechnology Co., Ltd.
Diamètre nominal des particules : 7 µm
Longueur d'onde d'excitation : 630 nm
Longueur d'onde d'émission : 665-720 nm
Contenu en solides : 0,5 %
Application principale : Recherche en cytométrie en flux
Capacité d'approvisionnement : Échantillons, lots pilotes et production en vrac
Utilisation prévue : Utilisation pour la recherche uniquement. Pas pour un usage diagnostique ou thérapeutique.